全 文 ：不同商品等级牛膝饮片酒炙前后
齐墩果酸含量的比较
张振凌 1 ,石延帮 1 ,陈 红2 ,王一硕 1 ,吴国学 1
(1.河南中医学院药学院 ,河南郑州 450003;2.福建中医学院 ,福建福州 350000)
摘要 目的:比较不同商品规格牛膝饮片酒炙前后齐墩果酸含量。方法:高效液相色谱法。 结果:不同商品规
格牛膝齐墩果酸含量不同 ,一等牛膝含量最高 , 二等 、三等次之 , 质量比较差的四等齐墩果酸含量没有测出;酒炙后
含量均有所增加。结论:牛膝商品分为不同规格有一定道理 , 炮制对牛膝中齐墩果酸的含量有一定影响。
关键词 牛膝;炮制;齐墩果酸;高效液相色谱法
中图分类号:R283 文献标识码:A 文章编号:1001-4454(2008)05-0650-02
基金项目:国家十一五科技支撑项目课题(2006BA109B06)作者简介:张振凌(1957-),女,教授 ,从事中药炮制学教学与研究;Tel:0371-65680970, E-mail:zhangzl6758@ 163.com。
牛膝为常用中药 ,具有补肝肾 、强筋骨 、逐瘀通
血 、引血下行功效 ,常用于腰膝酸痛 、筋骨无力 、经闭
癥瘕 、肝阳眩晕等症。目前认为牛膝中所含的蜕皮
甾酮 、牛膝多糖 、皂苷及其水解后生成的皂苷元齐墩
果酸为其主要活性成分 ,具有免疫调节 、抗衰老 、抗
病毒 、抗肿瘤 、抗炎镇痛及抗生育等药理作用 〔1〕。
临床常用其生品及酒炙品 ,有报道用薄层扫描法测
定齐墩果酸含量〔2〕 ,但用 HPLC法测定含量报道较
少 〔3〕。本文即采用 HPLC法测定牛膝中齐墩果酸的
含量 ,比较炮制对不同商品规格和不同炮炙方法牛
膝饮片中齐墩果酸含量的影响 ,为研究牛膝中齐墩
果酸含量的变化提供实验依据 。
1 材料和仪器
1.1 药材及饮片 怀牛膝药材购自河南省武陟县
大丰乡驾步村 ,经河南中医学院生药教研室陈随清
鉴定为苋科植物牛膝 AchyranthesbidentataBL.的干
燥根。不同商品规格牛膝:一等(头肥):长 50 cm
以上 ,中部直径 0.6 cm左右 ,根条均匀 ,无冻条 、油
条 、破条 、杂条 、虫蛀 、霉变;二等(二肥):长 35 cm
以上 ,中部直径 0.4 cm以上 ,根条均匀 ,无冻条 、油
条 、破条 、杂条 、虫蛀 、霉变;三等 (平条):中部直径
0.4cm以下 ,但不小于 0.2 cm,长短不分 ,间有冻
条 、油条 、破条;杂条:凡不符合平条规定的细小碎
条 、枝叉 、尖梢部分〔2〕。
牛膝饮片:取净制过的牛膝药材抢水洗 ,润软 ,
切成 3 mm的厚片 ,干燥后包装即为牛膝生品饮片;
取牛膝饮片加黄酒拌匀 ,闷润 ,置炒药锅内炒至牛膝
表面显黄色 ,出锅 ,晾干 ,迅速密闭包装待用 ,即为酒
炙牛膝饮片 。
以上样品均经 50℃干燥 48 h后粉碎过筛 ,备
用 。
1.2 试剂 齐墩果酸对照品购自中国药品生物制
品检定所(批号 0709-9803)供含量测定用;甲醇为
色谱醇 ,其它化学试剂均为分析纯 。
1.3 仪器 日本岛津 LC-2010AHT高效液相色谱
仪。
2 方法与结果
2.1 色谱条件 ODS色谱柱(250mm×4.6 mm, 5
μm),流动相:甲醇 -水(95∶5),流速 1.2 ml/min,检
测波长 207 nm,柱温:室温 ,分离度大于 1.5。
2.2 标准曲线的绘制 取齐墩果酸对照品 1 mg,
精密称定 ,置 2ml容量瓶内 ,加甲醇至刻度 ,摇匀 ,作
为对照品溶液。精密吸取上述对照品溶液 2、4、6、
8、10、12、14μl,注入液相色谱仪 ,测定其峰面积积分
值。以进样量为横坐标 ,以峰面积积分值为纵坐标 ,
绘制标准曲线 ,所得回归方程为:Y=274164X-
14664 , r=0.9999。
2.3 供试品溶液的制备 分别取不同炮制品牛膝
粉末(40目)2g,精密称定 ,置圆底烧瓶中 ,分别加入
2mol/L盐酸 30ml浸泡 12h,回流提取 4h,冷却 ,过
滤得滤渣 ,用蒸馏水洗至中性 , 60℃烘干 ,于 100 ml
索氏提取器中分别加入 60 ml氯仿 ,提取至无色 ,于
水浴锅上挥干 ,残渣用甲醇转溶至 10 ml容量瓶中 ,
甲醇定容 ,摇匀 ,得各供试品溶液 。
2.4 精密度试验 精密吸取上述对照品溶液
10μl,注入液相色谱仪 ,重复进样 5次 ,计算得 RSD
=0.63%,精密度良好。
2.5 稳定性试验 取同一样品试液 ,分别于 2、4、
6、8、10h进行测定 ,得齐墩果酸的 RSD=1.11%,表
明齐墩果酸在 10 min内稳定 。
2.6 重复性试验 取同一样品 5份 ,每份各 1g,精
密称定 ,照 2.3项下方法制备 ,分别精密吸取此供试
·650· 中药材 JournalofChineseMedicinalMaterials 第 31卷第 5期 2008年 5月
DOI :10.13863/j.issn1001-4454.2008.05.012
品溶液 10μl,注入液相色谱仪 ,测定峰面积积分值 ,
计算 RSD=1.24%,表明重现性良好。
2.7 加样回收率试验 取已知含量的牛膝粉末
(40目 , 50℃干燥 48h)约 1g共 7份 ,精密称定 ,分别
置于圆底烧瓶中 ,其中 1份不加齐墩果酸对照品作
为随行对照 ,其余 6份分别加入 4.91mg/ml齐墩果
酸对照品溶液 3ml,然后加入 2mol/L盐酸 30ml,浸
泡 12h,其余照 2.3项下同法操作 ,得各供试品溶
液 。分别精密吸取空白对照和各加样回收供试品溶
液 10μl,注入液相色谱仪测定含量 。结果齐墩果酸
的平均回收率为 98.68%, RSD=4.60%。
2.8 含量测定 按上述测定条件测定 ,每次进样
10 μl,测得峰面积积分值用外标法计算 ,求得样品
中齐墩果酸含量 ,结果见表 1。齐墩果酸对照品 、生
牛膝饮片及酒炙牛膝饮片的色谱图见图 1。
表 1 牛膝饮片中齐墩果酸的含量(n=3)
样品产地 生品含量(%) 平均含量(%) 酒炙品含量(%) 平均含量(%)
武陟一等 2.33 2.46
2.36 2.33 2.49 2.46
2.30 2.43
武陟二等 2.14 2.20
2.11 2.11 2.23 2.23
2.08 2.26
武陟三等 2.15 2.20
2.19 2.14 2.14 2.19
2.08 2.23
武陟四等 没有测出 没有测出
图 1 牛膝饮片中齐墩果酸高效液相图
A.对照品 B.生品 C.酒炙品
3 讨论
3.1 用高效液相色谱法对不同商品规格及不同炮
制方法牛膝饮片中的齐墩果酸含量进行比较测定 ,
发现不同等级药材所制得的牛膝饮片中齐墩果酸含
量有所不同 ,一等牛膝含量最高 ,二等 、三等次之 ,质
量比较差的四等齐墩果酸含量没有测出 ,说明牛膝
商品分为不同规格 ,是有一定道理的。也提示在制
定牛膝药材和饮片质量标准时应予考虑牛膝商品规
格的区别。
3.2 牛膝酒炙后齐墩果酸含量有所升高 ,这与用
薄层扫描法所测得的结果趋势基本一致〔2〕。牛膝
酒炙后齐墩果酸含量升高 ,分析其原因 ,可能是酒炙
加热炮制 ,促进了有效成分的溶出 ,或者是有利于牛
膝皂苷的水解和向齐墩果酸的转化。
参 考 文 献
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(2007-11-19收稿)
《中药材 》杂志为美国 IM/Medline收录期刊 。
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