作 者 :刘姗;胡洪利;陈惠;
期 刊 :中成药 2013年 05期 页码:1006-1010
关键词:金龙胆草;基因组DNA;均匀设计;RAPD;
摘 要 :目的探索金龙胆草DNA的提取并利用均匀设计方法对其RAPD反应体系进行优化。方法比较改良SDS法和试剂盒提取法提取的DNA效果,通过电泳、紫外分光光度仪检测及RAPD扩增效果确立适合实验操作的最佳方法;利用两次均匀设计实验确立最佳PCR反应体系,并考察退火温度对扩增效果的影响。结果改良SDS法较适合金龙胆草基因组DNA提取,25μL体系中内含10xTaq reaction Buffer 2μL、Mg2+2.5 mmol/L,dNTPs 4.5 mmol/L,Primer3.5μmol/L,DNA模板60 ng,Taq酶1.5 U,退火温度为38.9℃。结论改良SDS法及金龙胆草的RAPD反应体...