全 文 ：〔3〕　汪向东 ,王希林 ,马弘.心理卫生评定量表手册 [ M] .增订版.北
京:中国心理卫生杂志社 , 1999:235-238.
〔4〕　田丽丽 ,刘旺.多维学生生活满意度量表中文版的初步测试报
告 [ J] .中国心理卫生杂志 , 2005, 19(5):301-303.
〔5〕　罗艳丰 ,何朝阳 ,杨福 , 等.焦虑自评量表对医学硕士研究生的
测量结果及因素分析 [ J] .现代预防医学 , 2006, 33(16):2304-
2306.
〔6〕　BrayI, GunnelD.Suiciderates, lifesatisfactionandhappinessas
markersforpopulationmentalhealth[ J].SocialPhychiatryand
PsychiatricEpidemiology, 2006, 41(5):333-337.
〔7〕　阙敏 ,陶芳标 ,何春燕 ,等.初中生抑郁焦虑与生活满意度及自
我意识的相关性 [ J] .中国学校卫生 , 2007, 28(7):611-615.
〔8〕　贾存显 ,李士保 ,赵腾 , 等.生活满意度与自杀未遂关系 [ J] .中
国公共卫生 , 2008, 24(6):700-702.
收稿日期:2008-10-20 (郑新编校)
＊基金项目:广西科学基金项目(桂科基 0731066);广西科学研究与
技术开发计划项目(桂科攻 0322024-5E)
　作者单位:广西医科大学药理学教研室 ,南宁 530021
　作者简介:张士军(1974-),男 ,安徽望江人 ,副教授 ,博士 ,主要从
事抗肝炎药研究。
　通讯作者:黄仁彬
文章编号:1001-0580(2009)05-0543-02　　中图分类号:R285.5　　文献标志码:A 【论　　著】
六月青乙醇提取物对鸭乙型肝炎病毒抑制作用＊
张士军 ,陈兆霓 ,李勇文 ,黄春喜 ,黄仁彬
　　摘　要:目的　观察六月青乙醇提取物(EELYQ)对鸭乙型肝炎病毒乙型肝炎表面抗原(DHBsAg)和乙型肝炎 E
抗原(DHBeAg)的抑制作用。方法　采用 1日龄雏鸭接种广西麻鸭乙型肝炎病毒(DHBV)强阳性血清 , 13 d后用 PCR
法筛选出 DHBV强阳性鸭。随机分成 5组:EELYQ高剂量组 、中剂量组 、低剂量组 、模型组和阳性对照组 ,每组 10只 ,
各组雏鸭均灌胃给药 14d。于用药前(T0)、用药 7 d(T7)、14d(T14)及停药后 3d(P3)分别采血 , 采用 ELISA法测定上
清液 DHBsAg和 DHBeAg的滴度。结果　EELYQ中 、高剂量组给药后血清 DHBsAg和 DHBeAg的滴度显著降低(P<
0.01), 停药 3 d后 , EELYO高剂量组血清 DHBsAg和 DHBeAg滴度无反跳现象。 EELYQ高剂量组给药 14 d(T14)和停
药 3 d(P3)后 , DHBsAg抑制率分别达到 51.85%和 59.04%。 EELYQ高剂量组给药 14 d(T14)和停药 3d(P3)后 , DH-BeAg抑制率分别达到 34.27%和 39.96%。 EELYQ抑制 DHBsAg和 DHBeAg作用有明显的量效和时效反应关系。 结
论　EELYQ可有效抑制 DHBsAg和 DHBeAg的表达。
关键词:六月青乙醇提取物;鸭乙型肝炎病毒;鸭乙型肝炎表面抗原;鸭乙型肝炎 E抗原
InhibitoryeffectofethanolextractofLiuyueqingonheoatitisBvirusinduck　ZHANGShi-jun, CHENZhao-ni, LI
Yong-wen, etal.DepartmentofPharmacology, GuangxiMedicalUniversity(Nanning530021, China)
Abstract:Objective　TostudytheinhibitoryeffectofethanolextractofLiuyueqing(EELYQ)onduckhepatitisB
surfaceantigen(DHBsAg)andhepatitisBe-antigen(DHBeAg).Methods　One-dayoldGuangxibrownspottedducksin-
fectedwithDHBVwereusedasthehepatitisBvirusinfectionanimalmodel.DHBsAgandhepatitisBpositiveduckswere
detectedbyPCRat13dayafterstoppingtheinfectionofDHBV, andwererandomlydividedintofivegroups:thehigh, mid-
dleandlowdoseEELYQgroups, modelgroup, positivecontrolgroup.Eachgrouphad10ducks.EELYQwasgiveni.g.for
14 days, andthecontentsofDHBsAgandDHBeAginserumweremeasuredbyELISA.Results　TheserumDHBsAgand
DHBeAgcontentsweredecreasedsignificantlybythetreatmentofEELYQ.ThehighandmiddledoseofEELYQcouldsig-
nificantlysuppressDHBsAgandDHBeAgexpressionsinvivo(P<0.01).DHBsAgandDHBeAgcontentsinserumofhigh
dosegroupdidnotreturnsignificantly3 daysafterstoppingtreatment.TheDHBsAginhibitionratewas51.85% and
59.04%, respectivelyat14daystreatmentand3 daysafterstoppingthetreatmentinhighEELYQdosegroupandforDH-
BeAg, theinhibitionratewas34.27% and39.96%, respectively.TheinhibitoryeffectofEELYQwasdose-andtime-de-
pendent.Conclusion　EELYQcansignificantlyinhibittheexpressionsofDHBsAgandDHBeAg.
Keywords:ethanolextractofLiuyueqing(EELYQ);duckhepatitisBvirus(DHBV);DHBsAg, DHBeAg
　　乙型肝炎是由乙型肝炎病毒(HBV)引起的 、以肝脏炎性
病变为主的一种传染性疾病。尽管已有干扰素及核苷类等各
种抗病毒药物 , 但其疗效均不理想。目前中草药抗病毒已成
为国内外的研究热点。六月青系爵床科(Acanthaceae)肖鸡
笼属植物肖鸡笼 (顶花马兰)Taraphochlamysaffinis(Giff)
Bremekhu的干燥地上部分 〔1〕 , 为广西民间草药。在《本草拾
遗》中记载 ,其能活血 、凉血 、舒肝泻湿 、消肿止痛 , 主要用于
急慢性肝炎 、黄疸等 〔2〕。本文以广西麻鸭为研究对象 , 研究
六月青乙醇提取物(EELYQ)对鸭乙型肝炎病毒 DHBsAg和
DHBeAg的抑制作用 ,为开发六月青乙醇提取物应用于乙型
肝炎治疗提供基础依据。
1　材料与方法
1.1　材料　(1)广西麻鸭:1日龄 ,雌雄不拘 , 体重(50±6)g
(广西畜牧良种养殖场)。 (2)EELYQ的制备:六月青地上部
分采于广西灵山县 , 经广西中医药研究所鉴定室鉴定 ,六月青
用 60%乙醇提取 , 过滤 ,得滤液经旋转蒸发回收乙醇 , 浓缩成
1ml含有 10 g生药备用。 (3)药品与试剂:阿昔洛韦(ACV)
(湖南迪诺制药有限公司医药工业研究所);HBsAg和 HBeAg
酶联免疫检测试剂盒(上海荣盛生物技术有限公司);(4)主
要仪器:自动酶标仪(美国 Bio-Rad公司)。
543中国公共卫生 2009年 5月第 25卷第 5期　　ChinJPublicHealthMay2009 Vol.25 No.5
1.2　方法
1.2.1　广西麻鸭乙肝动物模型的建立　采用健康成年的广
西麻鸭产的蛋孵化的 1日龄雏鸭 , 经腹腔注射 0.2 mlDHBV
DNA强阳性病毒血清。 接种 1周后 , 分别从胫静脉采血约
0.2 ～ 0.3ml, 装入一次性 Eppendof管中 , 整个过程注意不要
交叉污染。 4000 r/min离心 5 min, 取血清。 -20 ℃保存备
用。采用 PCR法检测筛选出感染阳性鸭。
1.2.2　实验分组及用药　经 PCR法检测筛选出感染阳性
鸭 , 饲养至 13日龄作为实验动物进行药物治疗试验。将 50
只鸭随机分为 5组 , 每组 10只。 (1)模型组:等量 生理盐水;
(2)阳性对照组:ACV 0.1 mg/kg;(3)EELYQ高剂量组:
5 g/kg;(4)EELYQ中剂量组:2.5 g/kg;(5)EELYQ低剂量
组:1.25g/kg。各组全部鸭在同样条件下饲养 ,均以每日 1次
空腹灌胃给药 14 d。于用药前当天(T0)、用药 7 d(T7)、用药
14 d(T
14
)、停药 3d(P
3
)时 , 分别从各组全部鸭胫静脉采血 ,
每只 0.5ml左右 ,分离血清 , 于 -20℃保存备用 。
1.2.3　定量检测 DHBsAg与 DHBeAg　将 -20 ℃保存的血
清同时同批试剂盒采用 ELISA法检测 DHBsAg和 DHBeAg,
结果以抑制率表示 , 药物对抗原的抑制百分率 =[ 1-实验孔
抗原 A值 /对照孔抗原 A值 ] ×100%
1.3　统计分析　采用 SPSS13.0统计软件进行分析 , 给药前
后比较采用配对资料 t检验 , 组间比较采用方差分析 , 各均数
两两比较。
2　结　果
2.1　EELYQ对 DHBsAg的抑制作用(表 1)　EELYQ体内抗
DHBVDNA的作用强于阳性对照药物 ACV,其中 EELYQH组
抑制效果最佳 , EELYQH组用药 14d(T14)和停药 3d(P3)后 ,
抑制率分别达到 51.85%和 59.04%。
表 1　EELYQ对鸭血清 DHBsAg表达的抑制作用( x±s, n=10)
组　别
T0
A
T7
A 抑制率(%)
T14
A 抑制率(%)
P3
A 抑制率(%)
模型组 0.193±0.019 0.201±0.020 — 0.197±0.019 — 0.212±0.018 —
ACV组 0.194±0.025 0.118±0.027＊＊ 41.52 0.094±0.028＊＊ 52.46 0.134±0.027＊＊ 37.15
EELYQH 0.205±0.031 0.124±0.030＊＊ 38.39 0.095±0.030＊＊ 51.85 0.087±0.030＊＊ 59.04
EELYQM 0.202±0.027 0.134±0.027＊＊ 33.37 0.114±0.026＊＊ 42.36 0.151±0.026＊＊ 29.10
EELYQL 0.197±0.032 0.177±0.032 12.03 0.168±0.041 14.87 0.189±0.032 11.16
　　注:与模型组比较 , ＊ P<0.05, ＊＊ P<0.01。
2.2　EELYQ对 DHBeAg的抑制作用(表 2)　结果显示 , EE-
LYQH组抑制效果最佳 , EELYQH组用药 14 d(T14)和停药 3 d
(P3)后 , 抑制率分别达到 34.27%和 39.96%。
表 2　EELYQ对鸭血清 DHBeAg表达的抑制作用( x±s, n=10)
组　别
T0
A
T7
A 抑制率(%)
T14
A 抑制率(%)
P3
A 抑制率(%)
模型组 0.133±0.029 0.139±0.028 — 0.128±0.023 — 0.134±0.024 —
ACV组 0.151±0.035 0.089±0.034＊＊ 35.98 0.078±0.027＊＊ 39.06 0.109±0.031 19.05
EELYQH 0.147±0.025 0.097±0.024＊＊ 30.28 0.084±0.024＊＊ 34.27 0.081±0.023＊＊ 39.96
EELYQM 0.140±0.027 0.110±0.024＊ 20.69 0.099±0.024＊ 22.20 0.116±0.020 13.99
EELYQL 0.133±0.023 0.116±0.024 16.29 0.105±0.026 18.04 0.128±0.025 4.69
　　注:与模型组比较 , ＊ P<0.05, ＊＊ P<0.01。
3　讨　论
乙型肝炎抗病毒药物的开发和评价中的重要环节之一就
是建立一种方便有效的体内病毒感染模型。乙型肝炎病毒
(HBV)是比较严格的嗜肝 DNA病毒 , 其感染的宿主范围狭
窄 , 具有明显的种属特异性 ,很难在普通实验动物中建立疾病
模型。鸭乙型肝炎病毒(DHBV)与人类乙型肝炎病毒(HBV)
同属嗜肝 DNA病毒科 ,它们在形态结构 、基因序列 、病毒复制
及致病机制等方面均较为相似 〔3〕。由于麻鸭易于孵育 、饲
养 , 故易使麻鸭的雏鸭在实验中感染 DHBV并维持感染状
态 , 从而较易建立一个与 HBV感染相近似的体内实验系统。
因此 , 鸭乙型肝炎病毒实验动物模型已被作为 HBV感染的模
型用于实验研究 〔4〕。
本研究结果表明 , EELYQ能够有效抑制 DHBsAg和 DH-
BeAg的分泌 ,说明 EELYQ在体内有抗乙肝病毒作用 ,且抗病
毒效果与药物剂量呈正相关。结果提示 , EELYQ可有效抑制
DHBsAg和 DHBeAg的分泌 , 这可能是其治疗乙型肝炎的作
用。
参考文献
〔1〕　林兴 ,黄权芳 ,黄仁彬 ,等.广西民间药六月青的性状与显微鉴
定 [ J] .中药材 , 2005, 28(7):541-543.
〔2〕　徐国钧 ,徐珞珊 ,金蓉鸾, 等.中国药材学 [ M].北京:中国医药
科技出版社 , 1996:16.
〔3〕　胡权 ,张正茂 ,张小勇 ,等.鸭乙型肝炎病毒全基因重组质粒构
建及表达 [ J] .中国公共卫生, 2007, 23(5):562-564.
〔4〕　李晖 ,田德英 ,许东.肝康栓抗鸭乙型肝炎病毒的作用 [ J].中华
肝脏病杂志 , 2007, 15(4):307-308.
收稿日期:2008-09-13 (蔡天德编辑　郑新校对)
544 中国公共卫生 2009年 5月第 25卷第 5期　　ChinJPublicHealthMay2009 Vol.25 No.5