全 文 ：收稿日期:2010-11-26; 修订日期:2011-05-09
基金项目:广西壮族自治区教育厅自然科学基金(No． 200911MS28)
作者简介:黄权芳(1973-) ，女(壮族) ，广西南宁人，现任广西中医学院第
一附属医院中药师，主要从事中药鉴定及开发研究工作．
* 通讯作者简介:林 兴(1975-) ，男(壮族) ，广西南宁人，现任广西医科
大学讲师，硕士学位，主要从事生化药理学、心血管药理学研究工作．
山芝麻对鸭乙型肝炎动物模型体内
血清超氧化物歧化酶等 3 项指标的影响
黄权芳1，韦 刚2，林 兴3* ，张士军3，黄仁彬3，陈兆霓3
(1．广西中医学院第一附属医院，广西 南宁 530023; 2．广西分析测试研究中心，广西 南宁 530022;
3．广西医科大学，广西 南宁 530021)
摘要:目的 研究山芝麻水提物(Helicteres angustifolia)在鸭乙型肝炎病毒(DHBV)持续性感染模型中对血清超氧化物歧
化酶(SOD)、一氧化氮(NO)及过氧化脂质类(LPO)的影响。方法 将 DHBV － DNA 阳性麻鸭随机分为山芝麻高、中、低
剂量组、拉米夫定组和模型组，分别给予相应药物进行干预，并于用药前、用药第 7，14 天，及停药第 7 天取静脉血，检测血
清中 SOD活性及 NO、LPO的含量。结果 与模型组比较，山芝麻高、中剂量组和拉米夫定组用药后 7 ～ 14 d，血清 SOD活
性明显升高(P ＜ 0． 05 或 P ＜ 0． 01) ，而 NO和 LPO含量显著下降(P ＜ 0． 05 或 P ＜ 0． 01)。停药后 7 d，拉米夫定组即有反
跳现象，山芝麻高、中剂量组仍能显示出持续有效，没有出现反跳现象。山芝麻低剂量组血清 SOD、NO 和 LPO 含量没有
明显变化。结论 山芝麻具有抗脂质过氧化及护肝作用。
关键词:山芝麻; 鸭乙型肝炎病毒; 一氧化氮; 超氧化物歧化酶; 过氧化脂质类
DOI标识:doi:10． 3969 / j． issn． 1008-0805． 2011． 11． 049
中图分类号:R285． 5 文献标识码:A 文章编号:1008-0805(2011)11-2683-02
Effect of the Water Extract from Helicteres angustifolia on Activity of SOD and Contents
of NO，LPO in Duck Model for Chronic Hepatitis B Virus Infection
HUANG Quan-fang1，WEI Gang2，LIN Xing3* ，ZHANG Shi-jun3，HUANG Ren-bin3，CHEN Zhao-ni3
(1． The First Affiliated Hospital of Guangxi Traditional Chinese Medical University，Naning 530023，China;
2． Guangxi Research Center of Analysis and Testing，Nanning 530022，China;3． Guangxi Medical University，
Nanning 530021，China)
Abstract:Objective To study the effects of the water extract from Helicteres angustifolia on activity of SOD and contents of NO，
LPO in experimental DHBV infected animal model．Methods Ducks with congenital infection of DHBV were randomly divided into
five groups:high，medium，low － dose Helicteres angustifolia － treated group，lamivudine － treated group and untreated group． The
ducks in the lamivudine － treated group were fed lamivudine with a dose of 50mg /kg once． Ducks in the three － dose Helicteres an-
gustifolia － treated groups were treated with different doses of Helicteres angustifolia for 14 days，respectively． The activity of SOD
and the contents of NO，LPO were determined before and on the 7th，14th day of the treatment，and the 7th day after the treatment．
Results SOD activity increased significantly and NO，LPO contents were decreased significantly(P ＜ 0． 05 or P ＜ 0． 01)in high，
medium － dose Helicteres angustifolia － treated groups and lamivudine － treated group compared with control group on the 7th and
14th days． The SOD activity and NO，LPO contents in serum in high，middle － dose groups did not return significantly 7 days after
stopping treatment． The serum levels of SOD，NO and LPO in low － dose group showed no statistical significance as compared with
that in the untreated group． Conclusion Helicteres angustifolia has anti － lipidperoxidation and protecting liver effects．
Key words:Helicteres angustifolia; Duck hepatitis B virus; SOD; NO; LPO
山芝麻系梧桐科植物山芝麻 Helicteres angustifolia L．的根，能
清热解毒，主要用于感冒发热、肺热咳嗽、咽喉肿痛、麻疹等。至
今，对山芝麻公开报道的研究主要集中在其化学成分的分离、鉴
定方面，其药效学研究很少。本研究以鸭乙型肝炎病毒动物模
型，探讨山芝麻对乙型肝炎病毒的影响，首次评价山芝麻对血清
中超氧化物歧化酶(SOD)、一氧化氮(NO)及过氧化脂质类
(LPO)的影响。
1 材料
1． 1 药物 山芝麻，经广西中医学院第一附属医院药学部黄权芳
中药师鉴定为梧桐科植物山芝麻 H． angustifolia L．的根，其水提
物由广西医学科学实验中心和广西分析测试研究中心自行提取。
拉米夫定，中国苏州葛兰素史克制药有限公司产品，批号:
07090016。NO、SOD、MDA试剂盒，南京建成生物工程研究所产
品，批号均为:20100505。
1． 2 动物 1 日龄广西麻鸭，雌雄不拘，体质量 40 ～ 50 g，购自广
西畜牧良种养殖场。
2 方法
2． 1 山芝麻水提物［1］ 山芝麻饮片 1 000 g，加 10 倍量水提取 2
次，1． 5 h /次，合并提取液，浓缩至 500 ml(即相当于生药 2 g·
ml －1)作为备用液 4℃保存。
2． 2 给药方法 每次使用时分别取 5，2． 5，1． 25 ml 备用液，加蒸
馏水稀释至 10 ml，得山芝麻 3 个剂量组给药浓度，即按生药计算
的药液浓度高剂量组 1 g·ml －1，中剂量组 0． 5 g·ml －1，低剂量
组 0． 25 g·ml －1，各组灌胃给药容积 10 ml·kg －1。也就是说山
芝麻 3 个给药剂量分别为高剂量 10g·kg －1，中剂量 5 g·kg －1，
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LISHIZHEN MEDICINE AND MATERIA MEDICA RESEARCH 2011 VOL． 22 NO． 11 时珍国医国药 2011 年第 22 卷第 11 期
低剂量 2． 5 g·kg －1。
2． 3 广西麻鸭乙肝动物模型的建立［2］ 采用健康成年的广西麻鸭产的蛋
孵化的 1 日龄雏鸭，经腹腔注射 0． 2 ml DHBV － DNA 强阳性病毒血清。接
种 7 d后，分别从胫静脉采血约 0． 2 ～ 0． 3 ml左右，装入一次性 Eppendoff管
中，整个过程注意不要交叉污染。4 000 r /min 离心 5 min，取血清。 － 20℃
保存备用。采用 PCR法检测筛选出感染阳性鸭。
2． 4 实验分组及给药［2］ 经 PCR 法检测筛选出感染阳性鸭，饲养至 13 日
龄作为实验动物进行药物治疗试验。将 50 只鸭随机分为 5 组，每组 10 只。
①模型对照组:等量的生理盐水;②拉米夫定组:灌胃给予拉米夫定 50 ×
10 －3 g·kg －1·d －1;③山芝麻高剂量组:灌胃给予山芝麻 10 g·kg －1·d －1;
④山芝麻中剂量组:5 g·kg －1·d －1;⑤山芝麻低剂量组:2． 5 g·kg －1·
d －1。各组每天早上 8:00 ～ 9:00 灌胃给药，1 次 /d，连续 14 d，实验期间动物
自由取食和饮水。并于用药前 0 d(T0)、用药 7 d(T7)、用药 14 d(T14)、停
药 7 d(P7)时，分别从胫静脉采血，每只 2 ml左右，2 000 r /min离心 30 min，
分离血清，于 － 20℃保存备用。
2． 5 血清学指标检测 按照试剂盒提供的测定说明，NO 含量和 SOD 活性
的测定采用分光光度计法;血清中 LPO 含量的测定用硫代巴比妥酸比色
法。
2． 6 统计学处理 数据以 珋x ± s表示，统计学采用 SPSS 软件，进行 t 检验分
析。
3 结果
与模型组比较，山芝麻高、中剂量组和拉米夫定组用药后 7 ～ 14 d，血清
SOD活性明显升高(P ＜ 0． 05 或 P ＜ 0． 01) ，而 NO 和 LPO 含量显著下降(P
＜ 0． 05 或 P ＜ 0． 01)。停药后 7 d，拉米夫定组即有反跳现象，山芝麻高、中
剂量组仍能显示出持续有效。山芝麻低剂量组血清 SOD、NO 和 LPO 含量
没有明显变化。结果见表 1 ～ 3。
表 1 治疗前后鸭血清 SOD活性变化情况(珋x ± s)
组别
剂量
C /g·kg － 1·d － 1
SOD /U·L －1
T0 T7 T14 P7
模型对照 － 227． 8 ± 74． 5 217． 8 ± 80． 2 220． 6 ± 69． 4 218． 6 ± 79． 7
拉米夫定 50 × 10 － 3 218． 9 ± 55． 6 301． 4 ± 76． 9* 340． 7 ± 83． 2＊＊ 243． 9 ± 66． 3
山芝麻低剂量 2． 5 234． 1 ± 92． 5 261． 5 ± 72． 8 287． 3 ± 81． 8 280． 6 ± 91． 3
山芝麻中剂量 5 216． 5 ± 85． 3 326． 7 ± 93． 3* 366． 7 ± 72． 9＊＊ 342． 2 ± 80． 8＊＊
山芝麻高剂量 10 225． 7 ± 84． 7 339． 5 ± 83． 6＊＊387． 1 ± 94． 2＊＊ 373． 5 ± 91． 0＊＊
与模型组比较，* P ＜0． 05，＊＊P ＜0． 01;n =10
表 2 治疗前后鸭血清 NO含量变化情况(珋x ± s)
组别
剂量
C /g·kg － 1·d － 1
NO /μmol·L －1
T0 T7 T14 P7
模型对照 － 46． 3 ± 10． 1 44． 5 ± 9． 5 50． 2 ± 10． 6 48． 2 ± 9． 9
拉米夫定 50 × 10 － 3 47． 5 ± 9． 7 31． 9 ± 8． 4＊＊ 26． 8 ± 7． 7＊＊ 39． 1 ± 9． 4
山芝麻低剂量 2． 5 44． 5 ± 8． 6 37． 1 ± 8． 2 38． 9 ± 10． 8* 39． 7 ± 10． 2
山芝麻中剂量 5 43． 6 ± 10． 3 35． 9 ± 8． 9 27． 8 ± 7． 9＊＊ 33． 8 ± 8． 7＊＊
山芝麻高剂量 10 47． 0 ± 9． 8 33． 6 ± 9． 3* 25． 2 ± 7． 5＊＊ 31． 7 ± 7． 8＊＊
与模型组比较，* P ＜0． 05，＊＊P ＜0． 01;n =10
表 3 治疗前后鸭血清 LPO水平变化情况(珋x ± s)
组别
剂量
C /g·kg － 1·d － 1
LPO /μmol·L －1
T0 T7 T14 P7
模型对照 55． 0 ± 12． 3 54． 9 ± 11． 2 57． 8 ± 13． 2 54． 1 ± 12． 9
拉米夫定 50 × 10 － 3 54． 1 ± 10． 8 33． 4 ± 9． 5＊＊ 25． 0 ± 8． 7＊＊ 43． 4 ± 10． 7
山芝麻低剂量 2． 5 50． 5 ± 9． 2 46． 3 ± 10． 0 40． 7 ± 11． 8* 45． 4 ± 10． 6
山芝麻中剂量 5 52． 2 ± 10． 1 44． 5 ± 10． 3* 35． 2 ± 10． 3＊＊ 38． 2 ± 12． 3*
山芝麻高剂量 10 54． 4 ± 12． 5 36． 9 ± 8． 9＊＊ 29． 8 ± 9． 6＊＊ 32． 5 ± 8． 3＊＊
与模型组比较，* P ＜0． 05;＊＊P ＜0． 01;n =10
4 讨论
乙型肝炎是感染乙型肝炎病毒(HBV)引起的一
种常见传染病和多发病，易转化为慢性，甚至发展为肝
硬化、肝癌［3，4］。本课题组多年来一直致力于发掘广
西特色中草药用于抗乙型肝炎的研究，我们首次成功
建立了广西麻鸭乙肝动物模型，实验证实该品种麻鸭
易感染，其病程较规律，病毒血症持续时间较长且较稳
定，无明显的自然转阴现象，具有很好的稳定性和可靠
性，并先后利用该模型开展了大量的抗乙肝中药的筛
查研究工作［2，5，6］。山芝麻即是我们目前系列研究的
民族药之一，前期实验发现山芝麻能保护 CCl4 所致小
鼠肝损伤，具有显著的抗脂质过氧化作用［1］，为进一
步研究其是否具有抗乙肝病毒作用奠定了前期研究基
础。
本实验采用鸭乙肝动物模型，研究山芝麻水提物
在鸭乙型肝炎病毒(DHBV)持续慢性感染过程中不同
时期对鸭血清 SOD、NO及 LPO的影响。实验发现，一
定剂量的山芝麻能显著地提高鸭血清 SOD活性、降低
NO及 LPO的含量，改善肝组织受损程度，起到很好的
保肝降酶作用，并且呈一定的时间依赖性和剂量依赖
性，停药后也无“反跳”现象。实验结果与我们的前期
研究相一致［1］。本实验是我们系列研究的前期探索，
下一步将采用广西麻鸭感染 DHBV和 HepG2． 2． 15 细
胞模型，利用 FQ － PCR 法检测血清 DHBV DNA 的含
量，ELISA法测定血清 HBsAg、HBeAg 的滴度，流式细
胞术测定 CD3
+、CD4
+、CD8
+的表达，同时检测血清转
氨酶及肝组织病理变化，以期较全面地了解山芝麻抗
HBV作用及其机制。
参考文献:
［1］ 林 兴，黄权芳，张士军，等． 山芝麻对 CCl4 诱导小鼠
肝损伤的脂质过氧化反应的影响［J］．中国实验方剂学
杂志，2010，16(10) :147．
［2］ 黄仁彬，黄权芳，张士军，等．六月青总皂苷抗鸭乙型肝
炎病毒作用研究［J］． 中药药理与临床，2010，26(1) :
37．
［3］ 张晓双，郭 洁．肝康乐颗粒抗鸭乙型肝炎病毒的实验
研究［J］．现代中医药，2006，26(2) :46．
［4］ 张喜德，朱钰叶，张恩户．桑蒂复肝胶囊抗鸭乙型肝炎
病毒的实验研究［J］．中国中医基础医学杂志，2008，14
(12) :915．
［5］ 张士军，焦 杨，林 兴，等．复方六月雪对鸭乙型肝炎
病毒的抑制作用研究［J］． 中国药房，2008，19(33) :
2563．
［6］ 张士军，陈兆霓，李勇文，等．六月青乙醇提取物对鸭乙
型肝炎病毒抑制作用［J］． 中国公共卫生，2009，25
(5) :543．
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时珍国医国药 2011 年第 22 卷第 11 期 LISHIZHEN MEDICINE AND MATERIA MEDICA RESEARCH 2011 VOL． 22 NO． 11