全 文 ：南京中医药大学学报! ” 5年第! ! 卷第2 期 73
表2 磨香定喘. 对豚鼠肺滋流最的影响
组别 动物数 (只 ,
给药
途径
剂量
( m s / k g )
月市溢流量 父士 s D
空白对照组
康香定喘膏小剂量组
察香定喘膏大 .hJ 量组
舒喘宁组
与空 白对照组比较 , ,
外敷
外敷
2
.
! 5
4
.
3 0
正常
6
,
4 士 1 . 8
6
.
4 士 8 . 9
6
.
3 士 0 . 9
6 吸入 0 . [ m g / 只 7 . 0 士 8 . 7
给组胺后 增加谊 增加百分率 ( % )
8
.
1士 0 . 7 1 . 7土 0 . 3 2 6 . 6土 1 0 . 8
7
.
2 士 0 . 6 0 . 8 士 0 . 2应公 12 . 5 士 7 . 8
.7 2 士 .0 5 .0 9 士 .0 1艺应 ! ` 2土 .7 9
7
.
5 士 .0 3 0 . 5 士 0 . 2 “ ` 7 . ! 土 4 . 3
P < 0
.
01 与舒喘宁组 比较△ △ P < 0 . 01
2
.
3 扁香定喘膏对豚鼠离体气管平滑肌的影响
表 3 肠香定喘对离体豚鼠支气管平滑肌的影响
制 . 支气管平淆 叭 张力
〔 n一 / K . ) X 士 5 。 ( m l ,一 )
1 5
. 林 3 士 l 勺1
2
.
1 5 ,
. 川 )士 0 . 臼竺之 `
1 3 0 2 .弓O t 1 3 5 “
t、一 l一、胜 / 只 一 9 3 生 t ] . ` 一 `
胺 反应性降低 . 支气管收缩 上升幅度明显降低 (P < .0
0 1 )
. 提 示寮香定喘膏有 明显的扩张支气管平滑肌作
用 。 与舒喘宁组 比较 , 大剂量组无明显 差异 . 但小剂量
组作 J}J较弱 ( p < 0 . 0 1 , 。
3 讨论
本文实验结 果表明 晰香定喘膏 贴敷豚 鼠可明显 延
长山 乙酞胆 碱— 组胺引起豚 鼠哮 喘 的潜伏期 ;降低豚队支气管平滑肌 对组胺 的反 应性 . 明 显减少豚鼠的
肺溢流量 , 提 示解香定喘 膏具有扩张支气管平滑肌的
作用 . 这与临床结果相一致 。
银据临床 和实验室 研究证实解香定喘膏采用传统
医学 内病外治之法治疗哮喘 . 具有较好的平喘效果 , 起
效快且无明 显毒副 反应 。
参考文献
l 畴香定喘膏成果鉴定会资料 l , 9 4 8
2 徐叔云 .等 . 药理实验方法学 . 人民卫生出版社 10 8 5 :
药径ǔ效傲,.给途,吸刘外件之弊
空 白对 明沮 6
醉香定 喃街 小制 . 组 6
口香定确奋 大制 t 组 6
舒端宁组 `
与空白对照组 比较 “ p < 。· 0 1
与舒喘 灵组 比较 A △ P < 。 · 01
按 文献 , ” 方法分离出气管 . 自甲状软骨下全部将其
取下一端固定在麦氏浴槽中加 入 T h or a t o n 溶液 . 持续
通 以 9 5环。 : 和 5环c o 。 . 37 士 0 . S C恒温 。 待气管条稳定
! 小时后 , 打开记录仪描 记正常曲线 . 然后 加入 0 . 01 环
磷酸组织胺 0 . Zm l 至 2 。, ln 营养液中 (终浓度 为 10 75 `
m l) 描记支气管平 滑肌对组胺反应曲线 . 结 果见表 3 。 实
验结果表明 . 解香定喘膏组的豚 鼠支气管平滑肌对组
小鼠皮肤创面外用红升丹及其制剂对肾脏的毒性和机理初探
陈荣明 指导 许芝银 (南京中医药大学中医系中医外科教研室 2 10 29 )
内容提要 通过测定肾脏汞 含量 及丙二醛 ( M D A ) 含量 、 光镜和 电镜下观察肾脏的病理变化 、 (L M )法特染
切片等乎段 , 观察外用红升丹 及其不同制剂对小鼠肾脏 的毒性 . 发现 外用实验 .KJ 量的九一 丹对小鼠肾脏的病理损
害不明显 . 而实验剂量的五五丹 及红 升 丹对 小鼠肾脏产生了明 撇的病理拟害 . 从 而 为红 升丹 及其制剂的临床合理
运 用提供了依据 。 使用红升丹 及其制剂后 . 肾脏中 M D 八 的 含量增 加 . 说明红升丹 毒性的 机理 可能与引起肾脏脂质
过氧化作用增强有关 。
主题词 红 升丹 毒理 学
红升丹是中医 外科临床的 常用 药 , 其土要 )kJ 分是
氧化汞 ( ” . 根据临床需要常以锻石膏为赋形剂配制成含
红升丹不同浓度的丹药 , 如 五五丹 、 九 一 丹等 。 通 过皮
肤创面 外 用红升 丹对 小鼠主要脏 器毒性的 研究 . 发现
外用红升丹毒性作用的主要靶 器官是肾脏 。 在此从 础
上 . 经 皮肤创面 较 长时问外用红升丹 及其不同制剂进
行实验 . 以进一 步了解红升丹 及其不 同制剂对小鼠肾
脏的毒性 . 从而探索出安全用药剂量 . 为临床合理 用药
提供依据 。
l 材料与方法
1
.
1 药物 红 升丹是国营镇江中药 厂产品 ; 五五丹为
缎 石膏与红 升丹等重配制 ; 九一 丹为锻石 膏与红升丹
按 , : ! 重量 比配制 。 后二 者均由江苏省中医院制剂部
用镇江中药厂生产的红升丹配制而 成 。
DOI : 10. 14148 /j . i ssn. 1672 -0482. 1995. 02. 041
南京中医药大学学报 1 5 9 9年第 日 卷第 2期
!
.
2动物及处理 Ic R小鼠 初 只 , 雌雄各半 ,体重为
3 1
.
9 士 2 . 8 9 . 按随机区组设计分成五组 , 每组 8 只 . 雌雄
各半 。 各组每只小鼠于第一夭在胸背部剪去一直径为
!
.
cI m 的圆形皮肤 (约占体表面积的 ! 荡 》 . 第二天起每
天换药一次 ,对照组 用凡士林纱布换药 , 九一丹组 用量
为 5 . 刁m s . 五五丹 l 组每次用量 2 . 7m g , 五五丹 I 组每
次用量 5 . 礴m g ,红升丹组每次用量 2 . 7 m g 。 每次换药后
用小鼠皮肤创面 固定带包扎固定 ,松紧适宜 。 连续换药
15 天后 , 小鼠称重处死 。 解剖出肾脏并称重 , 进行病理
取材 . 制作 5 %的肾脏组织匀浆备用 。
1
.
3 观察指标及其方法 肾脏汞含量用 硫酸一高锰
酸钾氧化标本 . 原子吸 收光潜法测定 } : l( 所用仪器 为上
海华光仪器厂生 产的 F 一 7 3 2 G 测汞仪 ) 。 肾脏 M D A 含
量据硫代巴比妥酸反应法 } ’ }用南京市建成生物工 程公
司生产的试剂盒测定 。 肾脏病理切 片中 , 苏木素伊红染
色切片及电镜切 片按常规方法制作 ;显 示汞的硫化物
一银法特染切片 l` (j 据 iT m m 的方法加 以改进 ) . 标本用
含硫化按的 70 %的 乙醇固定 . 切片脱蜡后用 显影剂 (原
组成中的阿拉伯树胶改为 2 写的明胶 . 余 相同 》显影 . 苏
木素复染 , 组织中的汞显棕黑色 , 核显 蓝色 。
1
. 门 统计方一法 : 随机区组设计的方差分析均用 “ 医用
统计程序集 (P o M s 一 2 . 0 ) ” (上海科学技术出版社出
版 ) 处理 。
2 结果与分析
2
.
! 肾脏重量占体重的百分比 九一丹组 小鼠肾脏
重量占体重的百分比与对照组肾脏重量占体重的百分
比无显著性差异 (P > 0 . 05 ) , 五五丹 l 、 五五丹 l 、 红 升
丹组小鼠肾脏重量占体重的百分 比与对照 组小鼠肾脏
占体重的百分 比均有 显著性差异 (P < 0 . 0 5 . 或 P < .0
0 1 )
。 见表 I 。
表 l 外用红升丹 及其不 同制剂对小鼠肾脏的影响 (又士 s D )
组别 例数 肾脏重量 占体小
( 只 )重的百 分比 ( % )
汞 含量 么
( 、一g / g )
M n A 含量
( 了、 1 犷1 、 0 1 / l )
对照组 8 1 . 4 8士 0 . 1 3 1 . 2 4士 0 . 2 6 19 . 2 8士 1 . 8 5
九一丹 8 1 . 6 0士 0 . 2 0 2 8 . 5 4 士 1 0 . 6 4 2 2 . 7 5士 6 . 0 5
五五丹 1 8 1 . 7 5士 0 . 2 1 1 0 7 . 8 2士 2 0 . 8 6 2 5 . 14 士 3 . 5 3
五五丹 1 8 1 . 7 5士 0 . 2 2 1 34 . 07 士 32 . 86 2 7 . 05 士 3 . 浏
红 升丹 8 1 . 8 1士 0 . 2 0 1 4 1 . , ` )士 2 5 . 3 5 2 7 . 1 3士 4 4 3
注 : ① Q 检验 五五丹 I 、 五五丹 万 、 红 升丹与对 照组
相 比 P < 0 . 0 1
② Q 检 验 五五丹 l 与 红升丹 比 P > 0 . 05 其余每
组间的 比较均为 P < 0 . 肠 一 0 . 01 。
③ Q 检验 九一丹 组与对照 比较 P > 0 05 . 五五丹
I
、 五五丹 I 、 红升丹组与对照组 比较均为 P < 0 . 05 。
2
.
2 肾脏汞含量除五五丹 I 组小鼠肾脏的汞 含量与
红升丹组小鼠肾脏的汞 含量相 比无显著性差异 (P > 住
0 5 )
,其余每两组间 小鼠肾脏汞 含量的 比较均有显 著性
差异 (P < 0 . 01 . 或 P < 0 . 05 ) , 见表 l 。 说明小鼠皮肤创
面外用红升丹 及其不同制剂后 , 肾脏的汞含量均高于
对 照组 , 并随所用制剂中所含红 升丹 量的增大而升高 ,
五五丹 I 组小鼠肾脏汞的含量与红升丹组 小鼠肾脏的
汞 含量 无显 著性差异 . 说明赋形剂锻石膏对外用红 升
丹的吸 收影 响不大 . 吸 收进入机体汞 的多少主要取决
于 外用制剂中所含红升丹的量 。
2
.
3 肾脏 M D A 含量 九一丹组小鼠肾脏 M D A 含量
与对照组肾脏 M D A 含量无显著性差异 ,其余三组与对
照组有差异 , 说明外用九一丹后肾脏脂质过氧化作用
无 明显增 强 , 而 外用实验剂量的五五丹及红升丹后肾
脏脂质过氧化作用均明显增强 。
2
. 刁 肾脏病理变 化 ’
( 1) H E 染 色切片 : 各组小鼠肾小球未见 明显结构
异常 ; 九一丹组偶见肾小管轻度肿胀 , 五五丹 l 组部分
肾小管肿胀 、 变性 、偶 见肾小管管 型 , 其余两组部分 肾
小管坏死 。 各组小鼠肾小管的损伤 以远曲小管为著 。
( 2 ) L M 特染切 片 : 对照 组 、 九一丹组 小鼠肾脏的
肾小管未 见明显 汞沉积征象 . 五五丹 l 组肾脏 之 肾小
管有少量 的汞沉积 征象 . 五五丹 . 、 红升丹组有中等量
汞沉积征 象 , 相应肾小管的损害程 度与汞沉积量成正
L匕。
( 3 ) 电子显微镜 :选取九一丹组和红升丹组小鼠的
肾脏作电镜切片观察外用红升丹制剂后肾脏超微结构
的 改 变 。 九一丹组 小鼠肾脏 的微绒毛 清晰 , 细胞 器存
在 . 胞核 核膜清楚 , 染 色质正常 。 红升丹组小鼠肾脏的
肾小管坏死 . 以远 曲小管最明显 , 自肾小球至享利氏祥
均呈坏 死状 , 然 而肾小球脏层上皮较轻 , 曲管上皮微绒
毛脱落呈空泡状 , 上皮的细胞器完全消失 ,仅见基质中
出现大小不等的囊腔 、 溶酶体 及细小不整形的致密物 ,
胞核染色质松解 . 中心部凝聚成块 . 边缘有丝缕状纤维
向核腔放射 . 松解透 明区可见 大小不等的圆形致密颗
粒 。
肾脏 重 占体 重的百 分 比 、 ’肾脏 的 汞 含 量 、 ’肾脏
M D A 含量三者之间均呈直线相关 ( 相关系数均介于 0 .
% 至 0 . 91 之间 ) . 三者与肾脏 的病理损害也具有一致
性 。 外用九一丹肾脏的汞 含量虽有显 著性升高 ,而肾脏
重占体重的百分 比 、 肾脏 M D A 含量均无显著性增高 ,
病理损害亦不 明显 ; 外用实验剂量的五五丹和红升丹 ,
肾脏的汞 含量 、 ’肾脏重占体重 的百分 比 、 肾脏的 M D A
含量均有显著性升高 .亦产生了不同程度病理损害 。 所
产生病理损害程度随 所用制剂中含红升丹量的增高而
南京中医药大学学报 !95 9 年第 日 卷第 2期75
加重 。
3 讨论
3
.
1 红升丹毒性作用机理的探讨 生物膜中多不 饱
和脂肪酸 ( PF vA )在自由基 (FR )的攻击下发生脂质过
氧化作用 ( LP),形成脂质过氧化物 ,终末产物为 M D A 。
肾脏组织的细胞膜系统中有丰富的脂类物质 , 故测定
肾脏中 M D A 的含量可反映肾脏损伤的轻重 } ` I 。 小鼠使
用红升丹及其制剂后肾脏 M D A 明显增加 . 说明肾脏的
脂质过氧化作用增强 。 因此外用红升丹对肾脏损伤的
可能性是肾脏 中蓄积的汞诱发自由基的 产生 . 肾小管
细胞膜上多不饱和脂肪酸在自由基作用下 , 脂质过氧
化作用增强 , 引起细胞功能障碍 . 使细 胞发生肿胀变
性 . 最终导致肾小管坏死 。 一般认为二价汞离子与蛋白
质 中的琉基 (一 s 一H )有特殊的亲和力 . H g 一 s 反 应是
产生毒作用的基础 。 外用红升丹后引起肾脏脂质过氧
化作用增强是对这一毒理的进一步补充 。
3
.
2 外用红升丹制剂对肾脏损伤部位有报道认为 . 汞
对肾脏的毒性主要是对近曲小管的损伤 } ’ } 。 而 本实验
中在光镜和 电子显 微镜下观察病理变化均表明红升丹
制剂对肾脏的损害以远 曲小管为明显 . 近 曲小管次之 .
肾小球的损伤较轻 。
3
.
3 实验用药剂量与临床 用药剂量 的关 系 人体 面
积为 13 火 13 e m ” 的皮肤创面 ( 相当于 6 0 K g 重成人体表
面积的 l% } R ’ )上 . 均匀撒上一 薄层红升丹及其不 同制
剂所需药量约 为 ! g , 按 人和小鼠体表面积 比进行用药
量换算 { , ’ , 占 32 9 重小鼠体表面积 l %的皮肤创面外用
红 升丹及 其制剂用药量 应为 5 . 魂m s , 小鼠皮肤创面每
外 用 5 . 刁m s 九一丹 (含红升丹 。 . 5月m s ) . 连续换药 15
天 . 肾脏的病理损害不 明显 ; 实验剂量的五 五丹 及红升
丹均引起肾脏 不同程度的损害 。 由此可 以推断 . 成 人较
长时间连续外用九一丹 , 每次 ! g( 含红升丹 0 . 19 )可能
是比较安全的 。 由于 红升丹制剂中的赋形剂锻石膏 对
外 用红升丹的吸收 影响不大 , 故可进一步推 断 , 如 果成
人较长时间外用红升丹制剂 , 每次外用制剂中红 升丹
的含量不超过 0 . 19 . 即九一丹 . 五五丹 、 红升丹每次外
用剂量分别不超过 19 、 。 . 25 、 0 . ! s( 红升丹的其它制剂
类推 ) . 也可能是比较安全的 。 本实验动物为非感染性
创面 . 外用红升丹制剂 后汞 的吸 收速度比感染性创面
可能要快一些 ;窦道和凄管的管壁为瘫 痕组织 . 外用红
升丹制剂时汞的吸收速度更慢 , 吸收量更少 . 故外用红
升丹及其制剂的剂量可适当放宽 , 但也不能用 得太多 .
因临床上 已有每 日外用 含红 升丹 0 . 5 9 的药捻治疗窦
道 . 连续使用 10 天引起中毒的报道 { ’ 。 ’ 。
3
. 月 对 临床外用红升丹制剂的看法 尽管红 升丹有
一定的毒性 , 但只要我们能够掌握正确的使用方法 , 就
有可能减轻其毒副作用 。 对其使用方法提出如下建议 :
( )I 严格掌握适应症 . 避免滥用 对创面面积较大
的急慢性化脓性感染 , 如 有头疽 、 乳痈 、 下肢大面积的
溃疡等 , 应尽量少用 。 对一些顽固性痰管 、 窦道 、 骨结
核 、 淋巴结 核 、 慢性骨髓 炎等 , 因其创面小 , 用药量较
少 , 故可考虑使用 ,但对伴有 肾脏疾患 , 特别肾功能不
全的患者应视为禁用 。
( 2) 根据病情选择含红升丹不同浓度的制剂 开
始应先选用含红升丹浓 度较低的制剂 ,如九一丹 、 八二
舟等 , 如果不效可考虑选用含红升丹浓度较高的制剂 ,
如七三丹 、五五丹 、 乃至红升丹 。
( 3 ) 用药剂量要 小 每次外用红升丹制剂中所含
红升丹的量最好不要超过 0 . 19 。 一般药捻中含量均较
小 . 相对要安全一些 ; 应避免使用油膏纱布粘附大量的
红升丹制剂外 用 ;更不能将较大剂量的红 升丹制剂直
接撒于大面积的创面 。
( 们 用药时间要尽量缩短 外用红升丹制剂以 “ 腐
去即止 ” 为原 则 , 在外用红升丹制剂期间 , 应配合手术
治厅 . 如适当扩创引流 、 腐烂组织的修剪 、 死骨的清除
等 , 可缩短疗程 ,从 而缩短外用红升丹制剂的时间 。
( 5 ) 使用红升丹制剂时配 合使用保护肾脏的药物 ,
可减轻红升丹制剂对肾脏的毒性 。
参考文献
1 中华 人民共和国药典 (一 部 ) . 北京 . 人民卫生出版社 .
1毛) 0 0 : 1 2 8一 1 2 9 。
2 王袜兰 . 等 . 工业 毒理学 实验方 法 . 上海 , 上海 科学 技
术出版社 . 功 了妙: 3 17 一 3 18
3 齐风菊 . 等 . 血浆丙二醛 含量的测 定方法一改 良的八木
国夫法 . 第一军 医大学学报 10 8 6 ; 6 ( 2 〕 : 15 2
4 马仲魁 主译 . 组织化学 ( 卷二 ) . 北京 . 中国医学科技出
版社 . 1日9 0 : 6 2 5
5 金一 平 . 等 . 慢性 肾炎血 浆 中 L P o 含量 及红细 胞 内
s o D 活性 的观察 ; 中华肾脏病杂志 1 ,眨 . 8 (2 ) : 1 0
6 祁狄克 . 等 . 自由基抗氧 自由基系统在慢性肾功能 不全
发病机理 中的探 讨 . 中华 肾脏病 杂志 19 9 1 , 7 ( 6 ) : 3朽
7 王淑芬 . 汞 中毒临床研究进展 . 中国公共卫 生 1 9 9 0 . 6
( 1 1 ) : 5 09
8 施 新酞 . 医学动 物实验方 法 . 北京 : 人民卫生 出版社 ,
I U 8 3 : 1 4 8
9 陈奇 . 中药 药理 实验 . 贵 州 : 贵 州人 民卫 生 出版 社 .
19 8 9 : 2 29
10 沈 同戊 , 等 . 升药 (三仙丹 )外 用所 引起之 汞中毒 . 中医
杂 志 1乏, 6书 . ( 1 1 ) : 3 3