全 文 ：* 丽水市科技局项目 2012CXTD09 －05(畲医药传承与开发利用研究重点科技创新团队 2012CXTD09);丽水市科技局项目 2012CXTD11 － 03
(丽水市中药材科技创新团队 2012CXTD11)
＊＊ 通信作者 Tel:(0578)2155989;E － mail:lsf6789@ 126． com
第一作者 Tel:(0578)2183956;E － mail:onlyying0508@ gmail． com
畲药山里黄根的质量标准研究*
王伟影，毛菊华，陈张金，余华丽，余乐，李水福＊＊
(丽水市食品药品检验所，丽水 323000)
摘要 目的:研究山里黄根的质量标准，为制定合理的质控方法提供科学依据。方法:运用薄层色谱法、高效液相色谱法分别
对齐墩果酸、竹节参皂苷Ⅳa进行定性、定量测定;参照中国药典 2010 年版附录相关方法对山里黄根的醇溶性浸出物、水分和
总灰分进行测定。结果:山里黄根薄层色谱鉴别特征性明显;竹节参皂苷Ⅳa质量浓度在 12. 61 ～ 252. 2 μg·mL －1范围内呈线
性，回归方程为 Y = 2. 016X + 1. 372(r = 1. 000)，平均回收率为 98. 4%(ＲSD = 1. 3%)。18 批山里黄根样品的测定结果表明，竹
节参皂苷Ⅳa的含量为 0. 013% ～0. 086%，醇溶性浸出物的结果为 7. 7% ～ 13. 6%，水分为 4. 1% ～ 9. 7%，总灰分为 1. 3% ～
4. 6%。结论:研究所得方法简便、准确、重现性好，可用于山里黄根的质量控制。
关键词:畲药;栀子;山里黄根;齐墩果酸;竹节参皂苷Ⅳa;质量标准;薄层色谱;高效液相色谱
中图分类号:Ｒ 917 文献标识码:A 文章编号:0254－1793(2015)06－1105－05
doi:10. 16155 / j. 0254－1793. 2015. 06. 29
Study on quality standard of traditional She medicine —Gardeniae Ｒadix*
WANG Wei－ying，MAO Ju－hua，CHEN Zhang－jin，YU Hua－li，YU Le，LI Shui－fu＊＊
(Lishui Institute for Food and Drug Control，Lishui 323000，China)
Abstract Objective:To study the quality standard of Gardeniae Ｒadix，and to provide the scientific basis for establishing a reasonable
method of quality control． Methods:The method of thin－laver chromatography and high performance liquid chromatography was used
for qualitative and quantitative determination of oleanolic acid and cikusetsu saponin Ⅳa． The ethanol soluble extractives，the water
content，and the total ash of Gardeniae Ｒadix were determined according to the method in the appendix of Chinese pharmacopoeia． Ｒe-
sults:Characteristics of thin layer chromatography of Gardeniae Ｒadix were obvious． A good linearity of chikusetsu saponin Ⅳa was
shown in ranges of 12. 61－252. 2 μg·mL －1，and the calibration curve was Y = 2. 016X + 1. 372，r = 1. 000． The average recovery rate
was 98. 40% (ＲSD = 1. 3%)． The content of chikusetsu saponin Ⅳa was 0. 013% －0. 086%，and the result of ethanol－soluble extrac-
tives，the moisture content，and the total ash were 7. 7% －13. 6%，4. 1% －9. 7%，and 1. 3% －4. 6% in 18 batches of Gardeniae Ｒadix，
respectively． Conclusion:This method is simple，accurate and reproducible，which can be used for the quality control of Gardeniae Ｒa-
dix．
Keywords:traditional She medicine;Gardenia jasminoides;Gardeniae Ｒadix;oleanolic acid;chikusetsu saponin Ⅳa;quality stand-
ard;TLC;HPLC
畲药山里黄根为茜草科植物栀子 Gardenia jasmi-
noides Ellis的干燥根。畲药处方中使用山里黄根的
处方有数十个，几乎与传统常用中药栀子使用率等
同，畲医主要用其治疗感冒高热、黄疸型肝炎、吐血、
鼻衄、菌痢、淋病、肾炎水肿、疮痈肿毒等病症［1］。浙
江省中药炮制规范(2005 年版)新增收栀子根，注明
为畲药“山里黄根”，但仅收载品种无具体检验项
目［2］。因此，有必要建立更为完善的山里黄根的标
准，对药材及其成方制剂质量有效监控。关于山里黄
根质量分析方面的报道较少，仅有文献［3－6］报道了栀
子根中齐墩果酸的含量测定方法与生药学研究。本
研究从鉴别(薄层色谱)、检查(水分、总灰分)、浸出
物、含量测定(高效液相色谱)等方面较系统的研究山
里黄根的质控方法，完善其质量标准，以期收入新版
—5011—药物分析杂志 Chin J Pharm Anal 2015，35(6)
浙江省中药炮制规范，成为新的地方标准。
1 材料
半自动点样仪及成像文件系统(Linomat 5 瑞士
CAMAG公司);硅胶 G 薄层色谱预制板(Merck);
Agilent 1260 高效液相色谱仪(美国安捷伦公司);
DAD检测器;Memmert UNE400 自然对流烘箱(德国
Memmert有限公司);恒温水浴锅(上海梅香仪器有
限公司);电热恒温干燥箱(DHG－9031A 型，上海精
宏实验设备公司);程控箱式电炉(SXL－1008 上海
精宏实验设备有限公司);恒温水浴锅(上海梅香仪
器有限公司);电子天平(XS105DU，瑞士梅特勒公
司);智能超声波清洗器(DL－360D，上海之信仪器
有限公司)。
齐墩果酸对照品(批号 110709 －200505，含量
100%)、竹节参皂苷Ⅳa对照品(批号111861－201001，
含量 81. 2%，使用前无需干燥)，均购自中国食品药
品检定研究院。山里黄根药材，为茜草科植物栀子
Gardenia jasminoides Ellis的干燥根，自行采挖或市场
购入，每批次不少于 500 g，经丽水市食品药品检验所
中药专家李水福主任中药师鉴定(见表 1)。将药材
分别粉碎，过 2 号筛，供试验项目用。乙醇、盐酸、甲
苯、乙酸乙酯、冰醋酸均为分析纯，购自杭州高晶精细
化工有限公司;甲醇、乙腈为色谱纯(Merck)，磷酸为
色谱纯(科密欧)，水为娃哈哈纯净水。
表 1 山里黄根药材一览
Tab． 1 The source of Ｒadix Gardeniae samples
样品编号
(sample No．)
保存标本号
(specimen storage No．)
来源
(source)
采收时间(collecting date)/
批号(lot No．)
1 SLHG－LLS－01 浙江省云和县(Yunhe county，Zhejiang)Ⅰ 2013. 11
2 SLHG－LLS－02 浙江省云和县(Yunhe county，Zhejiang)Ⅱ 2013. 11
3 SLHG－LLS－03 亳州宏宇中药饮片有限公司(Bozhou Hongyu TCM Decoction Pieces Co． Ltd．) 120731
4 SLHG－LLS－04 浙江省丽水市莲都区(Liandu region，Lishui，Zhejiang) 2012. 7
5 SLHG－LLS－05 浙江省缙云县(Jinyun county，Zhejiang) 2012. 8
6 SLHG－LLS－06 杭州桐君堂医药药材有限公司(Hangzhou Jun Tong Materia Medica Co．，Ltd．)Ⅰ 140331
7 SLHG－LLS－07 杭州桐君堂医药药材有限公司(Hangzhou Jun Tong Materia Medica Co．，Ltd．)Ⅱ 20111013
8 SLHG－LLS－08 浙江省仙居县(Xianju county，Zhejiang) 2013. 10
9 SLHG－LLS－09 浙江省景宁县(Jingning county，Zhejiang) 2013. 11
10 SLHG－LLS－10 浙江省武义县(Wuyi county，Zhejiang) 2013. 10
11 SLHG－LLS－11 浙江省松阳县(Songyang county，Zhejiang)Ⅰ 2013. 9
12 SLHG－LLS－12 浙江省松阳县(Songyang county，Zhejiang)Ⅱ 2013. 9
13 SLHG－LLS－13 浙江省永康市(Yongkang，Zhejiang) 2013. 10
14 SLHG－LLS－14 浙江省泰顺县(Taishun county，Zhejiang) 2013. 11
15 SLHG－LLS－15 福建省松溪县(Songxi county，Fujian) 2013. 11
16 SLHG－LLS－16 福建省政和县(Zhenghe county，Fujian) 2013. 11
17 SLHG－LLS－17 浙江省遂昌县(Suichang county，Zhejiang) 2012. 12
18 SLHG－LLS－18 浙江中强医药有限公司(Zhejiang Zhongqiang Medicine Co．，Ltd．) 20100501
2 方法与结果
2. 1 薄层色谱鉴别
2. 1. 1 供试品溶液的制备 取山里黄根过 2 号筛
粉末 1 g，加乙醇 25 mL、盐酸 2 mL，回流 1. 5 h;滤
过，滤液蒸干，加水 25 mL 溶解，用乙酸乙酯萃取 2
次，每次 25 mL，合并乙酸乙酯，溶液蒸干，残渣加乙
酸乙酯 2 mL使溶解，即得。
2. 1. 2 对照品溶液的制备 取齐墩果酸对照品，加
甲醇制成 1 mg·mL －1的溶液，即得。
2. 1. 3 薄层板的制备 取硅胶 G预制板，于110 ℃活
化 30 min，备用。
2. 1. 4 薄层色谱的展开 照薄层色谱法(中国药
典 2010 年版附录ⅥB)试验，分别吸取供试品溶液、
对照品溶液各 5 μL，点于同一硅胶 G 薄层板上，以
甲苯－乙酸乙酯－冰醋酸(14 ∶ 5 ∶ 0. 3)为展开剂，展
开，取出，晾干。
2. 1. 5 显色 喷以 10%硫酸乙醇液，110 ℃烘至斑
点显色清晰，日光下检视;供试品色谱在与对照品色
谱相应的位置上，显相同的紫红色的斑点。
2. 1. 6 薄层色谱 按上述条件对 18 批山里黄
根进行薄层色谱鉴别，结果见图 1。由图 1 可
见，上述条件能较好地将各斑点分离，显色清
晰，并且 18 批山里黄根的薄层色谱鉴别结果一
致性较好。
2. 2 检查
2. 2. 1 水分的测定 取各批次山里黄根 2 ～ 4 g，平
行 2 份，精密称定，照中国药典 2010 年版一部附录
ⅨH水分测定第一法进行测定。结果见表 2。
—6011— 药物分析杂志 Chin J Pharm Anal 2015，35(6)
图 1 山里黄根药材薄层色谱图
Fig． 1 TLC of Gardeniae Ｒadix
S．齐墩果酸对照品(oleanolic acid reference substance) 1 ～ 18． SLHG－LLS－01 ～ SLHG－LLS－18 号山里黄根药材(Gardeniae Ｒadix，sample No． SLHG－LLS－01 ～ SL-
HG－LLS－18)
表 2 山里黄根水分、总灰分、浸出物及竹节参皂苷Ⅳa含量测定(%，n =2)
Tab． 2 Ｒesults of moisture，total ash，extractive and mass fraction of chikusetsu saponin Ⅳa of Gardeniae Ｒadix
编号(No．) 水分(moisture) 总灰分(total ash) 浸出物(extractive) 竹节参皂苷Ⅳa(chikusetsu saponin Ⅳa)
1 4. 1 1. 5 13. 3 0. 082
2 7. 8 4. 6 11. 9 0. 046
3 4. 7 1. 5 7. 7 0. 023
4 8. 9 2. 5 10. 5 0. 034
5 9. 2 2. 4 9. 9 0. 055
6 9. 7 1. 3 9. 4 0. 013
7 5. 3 1. 3 8. 7 0. 026
8 4. 1 1. 5 8. 4 0. 067
9 2. 3 2. 3 11. 9 0. 015
10 4. 9 1. 8 9. 4 0. 018
11 4. 4 1. 9 8. 9 0. 028
12 4. 8 2. 1 12. 9 0. 048
13 3. 9 2. 0 9. 0 0. 086
14 6. 4 2. 9 11. 7 0. 073
15 8. 8 2. 8 10. 3 0. 031
16 7. 8 2. 8 10. 5 0. 064
17 8. 6 3. 8 13. 6 0. 075
18 7. 5 2. 7 11. 0 0. 047
2. 2. 2 总灰分的测定 取各批次山里黄根 2 g，平
行 2 份，精密称定，照中国药典 2010 年版一部附录
ⅨK总灰分测定法进行测定。结果见表 2。
2. 3 浸出物的测定
取各批次山里黄根 2 ～ 4 g，平行 2 份，精密称
定，以 50%乙醇为溶剂，照中国药典 2010 年版一部
附录ⅨA 醇溶性浸出物测定法项下的热浸法测定。
结果见表 2。
2. 4 含量测定
2. 4. 1 色谱条件和系统适用性试验 采用 Agi-
lent Zorbax SB－C18(4. 6 mm × 250 mm，5 μm)色
谱柱，以乙腈 － 0. 1% 磷酸溶液(33 ∶ 67)为流动
相，流速 1. 0 mL·min － 1，柱温 30 ℃，检测波长为
203 nm，进样量:5 μL;理论板数按竹节参皂苷Ⅳ
a 计不低于 5 000，对照品溶液和供试品溶液的色
谱图见图 2。由图 2 可见，在该色谱条件下，竹节
参皂苷Ⅳa 与其他成分可达到基线分离，分离度
大于 1. 5，理论塔板数均在 10 000 以上，具有良
好的分离效果。
—7011—药物分析杂志 Chin J Pharm Anal 2015，35(6)
图 2 竹节参皂苷Ⅳa对照品(A)和 SLHG－LLS－01 号山里黄根药材(B)高效液相色谱图
Fig． 2 HPLC of chikusetsu saponin Ⅳa reference substance (A)and sample of No． SLHG－LLS－01 Gardeniae Ｒadix (B)
1．竹节参皂苷Ⅳa(chikusetsu saponin Ⅳa)
2. 4. 2 对照品溶液的制备 精密称取竹节参皂苷
Ⅳa对照品适量，加 60%乙醇制成 252. 2 μg·mL －1
的溶液，作为对照品储备液。精密吸取储备液制成
126. 1 μg·mL －1的溶液，作为对照品溶液。
2. 4. 3 供试品溶液的制备 取本品粉末约 2 g，精
密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入 60% 乙醇
25 mL，密塞，称量，超声(功率 240 W，频率 45 kHz)
处理 40 min，放冷至室温，再称量，用 60%乙醇补足
减失的量，摇匀，用 0. 45 μm 的微孔滤膜过滤，滤液
即为供试品溶液。
2. 4. 4 线性关系考察 精密吸取对照品储备液适
量，分别稀释成竹节参皂苷Ⅳa 质量浓度为 12. 61、
25. 22、75. 66、126. 1、176. 54、252. 2 μg·mL －1的对
照品溶液，按上述色谱条件进行测定，分别以峰面积
Y对对照品的质量浓度 X 进行回归分析，得竹节参
皂苷Ⅳa回归方程:
Y = 2. 016X + 1. 372 r = 1. 000
结果表明:竹节参皂苷Ⅳ a 质量浓度在 12. 61 ～
252. 2 μg·mL －1范围内呈良好的线性关系。
2. 4. 5 精密度试验 取对照品溶液，按“2. 4. 1”项下
色谱条件连续进样 5 次，计算竹节参皂苷Ⅳa 峰面积
的 ＲSD为 0. 49%(n =5)，结果显示精密度良好。
2. 4. 6 重复性试验 取同一批山里黄根(样品编
号 1)，共 5 份，照“2. 4. 3”项下方法制备供试品溶
液，按“2. 4. 1”项下色谱条件测定，按干燥品计算竹
节参皂苷Ⅳ a 的含量为 0. 082%，ＲSD 为 1. 37%
(n = 5)。
2. 4. 7 稳定性试验 取“2. 4. 6”项下供试品溶液，
分别在 0、2、4、8、12、24h进样测定，结果竹节参皂苷
Ⅳa 峰面积的 ＲSD 为 0. 51%，表明供试品溶液在
24 h内稳定性良好。
2. 4. 8 加样回收率试验 取已知含量的山里黄根
(样品编号 1)，共 6 份，各约 1 g，精密称定，置具塞
锥形瓶中，分别精密加入 252. 2 μg·mL －1竹节参皂
苷Ⅳa对照品溶液 3 mL，再分别精密加入 60%乙醇
22 mL，按“2. 4. 3”项下方法制备供试溶液，按
“2. 4. 1”项下色谱条件测定，计算竹节参皂苷Ⅳa 的
含量，计算回收率为 98. 4%，ＲSD为 1. 3%。
2. 4. 9 样品含量测定 取不同编号的山里黄根，平
行 2 份，按“2. 4. 3”项下方法制备供试品溶液，按
“2. 4. 1”项下色谱条件测定，按干燥品计算竹节参
皂苷Ⅳa的含量，结果见表 2。
3 讨论
3. 1 薄层色谱鉴别
本实验参考大枣、女贞子标准［7］及湖南省中药
材标准(2009 年版)［8］方法，考察了甲苯 －乙酸乙
酯－冰醋酸(14 ∶ 4 ∶ 0. 5)、三氯甲烷 －甲醇 －甲酸
(40∶ 1∶ 1)、环己烷－丙酮－乙酸乙酯(8∶ 1∶ 5)，结果以
甲苯－乙酸乙酯－冰醋酸(14∶ 5∶ 0. 3)为展开剂时各
斑点分离度理想，主斑点清晰。
3. 2 浸出物的测定
实验考察了浸出物的测定方法(热浸法与冷浸
—8011— 药物分析杂志 Chin J Pharm Anal 2015，35(6)
法)，结果热浸法含量较冷浸法高，故选择热浸法。
由于皂苷及环烯醚萜［9－11］是山里黄根中的主要成
分，根据皂苷、环烯醚萜的易溶于水、甲醇、乙醇等强
极性溶剂中，难溶或不溶于苯、氯仿等有机溶剂的理
化性质，考察了甲醇(纯甲醇、70% 甲醇、50% 甲
醇)、乙醇(纯乙醇、70%乙醇、50%乙醇)，根据结果
最终选择以 50%乙醇为溶剂。
3. 3 含量测定
湖南省中药材标准(2009 年版)［8］中选取齐墩
果酸为质控指标，利用水解的方法将其中的齐墩果
酸醋酸酯及齐墩果酸－3－O－β－D－吡喃葡萄糖醛酸苷
－6－O－甲酯等［10］转换成齐墩果酸，测定其含量，得到
的齐墩果酸含量实为几种物质之和。而齐墩果酸在
多数药材中大量存在，特征性不强。现有的研究表
明竹节参皂苷Ⅳa是山里黄根中大量存在的主要化
学成分之一［10］，皂苷在镇痛、镇静、抗炎、增强免疫
力、抗肿瘤等诸多方面表现出生理活性［12］，这与山
里黄根的畲药理论与应用相吻合。故本研究选取原
型存在且更加能反映山里黄根药物性质与质量情况
的竹节参皂苷Ⅳa为指标性成分测定其含量。本研
究在珠子参方法［7］的基础上，考察了乙腈与不同浓
度的磷酸溶液不同配比的流动相，结果发现以乙腈
－ 0. 1%磷酸溶液(33∶ 67)的分析效果较优，分离度
较高，故选此作为流动相。分别考察了提取溶剂甲
醇、乙醇的浓度(45%甲醇、60%甲醇、纯甲醇、45%
乙醇、60%乙醇、纯乙醇)、用量(20、25、30、40 mL)
以及超声时间对测定结果的影响，结果发现 60%乙
醇 25 mL提取效果最优;超声 40 min 时，提取完全。
因此，选用 25 mL 60%乙醇超声处理 40 min 为样品
的提取方法。
3. 4 限度标准制定建议
本研究收集不同产地山里黄根共 18 批，样品有
一定的代表性，水分、总灰分、浸出物、含量测定的结
果分别为 4. 1% ～ 9. 7%、1. 3% ～ 4. 6%、7. 7% ～
13. 6%与 0. 013% ～ 0. 086%。根据测定结果，结合
中国药典中已有的同类药材的标准、中国药典附录
药材和饮片检定通则及国家药品标准(中药)研究
制定技术要求，建议规定山里黄根的水分不得多于
12. 0%;总灰分不得多于 4. 0%;以干燥品计算醇溶
性浸出物不得少于 8. 0%;以干燥品计算竹节参皂
苷Ⅳa不得少于 0. 020%。
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(本文于 2014 年 7 月 30 日收到)
—9011—药物分析杂志 Chin J Pharm Anal 2015，35(6)