全 文 ：HPLC法测定木芙蓉叶中芦丁的含量
孟会宁 1 ,罗国平2
(1.陕西中医学院 , 陕西 咸阳　712000;2. 西安医学院 ,陕西 西安　710021)
摘要:目的　建立木芙蓉叶中芦丁的含量测定方法。方法　用 HPLC法 , 分析色谱柱为 ODS(150 mm ×4. 6 mm , 5 μm),流动相
为甲醇-水-冰醋酸(30∶70∶2. 5);检测波长 254 nm。结果　精密度试验(n =5)RSD为 1. 40%, 重现性实验 (n =5)RSD为 0.
85%;平均回收率(n =6)为:103. 57%, RSD=1. 27%。三批木芙蓉叶药材中芦丁的含量为 0. 335 ～ 0. 446%。结论　该法简单 ,
可靠 , 可用来测定木芙蓉叶中芦丁的含量。
关键词:HPLC法;木芙蓉叶;芦丁
Determ ination of rutin in the leaf of h ib iscusmutab ilisL. by HPLC
MENG Hui-ning1 , LUO Guo-ping2
(1. Shanxi University of Ch ineseMedicine, X ianyang, Shanxi Province, 712000;2. X ianMedica lCollege, X ian, Shanx i Prov ince, 710021)
Abstrac t:A im　To estab lish am e thod fo r the determ ina tion o f ru tin in the lea f of hibiscusm utabilisL. Methods　The chrom a tographic
system consisted o fODS co lum n and m obile phase ofm e thy l a lcoho l-wa ter-ace tic acid(30∶70∶2. 5), and the de tec tivew ave leng th was at
254 nm. Resu lts　The m e thod was prec isew ith RSD of 1. 40% fo rw ithin-day varia tion(n=5) and o f 0. 85% reproducib ility(n=5).
A ve rage re covery for chlorogeric ac id w as 103. 57% w ith RSD of 1. 27%(n=6). 3 sam ples we re ana lyzed and the conten ts o f ch lo rogeric
acid w ere from 0. 335% to 0. 446%. C onclusion　Thism e thod is proved to be simp le and re liab le and can be used fo r the determ ination
o f rutin in the leaf o fH ib iscus m utab ilisL.
K ey words:HPLC;the leaf of H ibiscus mu tabilisL. ;rutin
　　中药材木芙蓉叶为锦葵科(ma lvaceae)植物木芙蓉 H ibis-
cusm utabilisL. 的干燥叶。 夏秋两季采收 , 晒干。气微 , 味微
辛。具有清肺凉血 、散热解毒 、消肿排脓的功效 ,用于肺热咳
嗽 , 瘰疬 ,肠痈 , 外用还可治疗痈疖脓肿 , 脓耳 ,无名肿毒 , 烧 、
烫伤等。木芙蓉叶主要含芸香苷 、山奈酚-3-O-β-芸香糖苷 、
山奈酚-3-O-β-刺槐双糖苷等黄酮苷 ,还含有酚类 、氨基酸 、还
原糖等成分 [ 1] , 其中黄酮苷为主要活性成分。据文献报道 ,
其叶的煎剂对金黄色葡萄球菌 、伤寒杆菌等均有抑制作用 , 还
具有明显的抗炎活性 [ 2] 。芦丁是黄酮苷类化合物的代表物
质 , 因此我们采用 HPLC法测定了三批木芙蓉叶中芦丁的含
量 , 试验结果表明 ,该方法简便快速 ,稳定可靠。
1　材料与仪器
　　仪器:高效液相色谱仪 , 日本岛津 LC-2010A /2010C高效
液相色谱仪;SPD-10A紫外检测器;KQ-250型超声波处理器。
试剂:芦丁对照品 (供含量测定), 中国药品生物制品检定所
提供;甲醇为色谱纯 ,冰醋酸为分析纯 , 西安化学试剂厂;水为
三蒸水;三批木芙蓉叶(陕西省药材公司)。
2　方法与结果
2. 1　色谱条件及系统适用性试验　用十八烷基键合硅胶为
填充剂;甲醇-水-冰醋酸 (30∶70∶2. 5)为流动相;检测波长为
254 nm;柱温:30℃;流速:1 m l m in- 1;在此条件下木芙蓉叶
供试品溶液的芦丁峰与相邻峰能达到基线分离 , 其保留时间
为 17. 436 m in, 色谱柱理论板数按芦丁峰计算为 2 866, 对照
品与供试品的色谱图分别见图 1和图 2。
2. 2　对照品溶液的制备与线性关系的考察
2. 2. 1　对照品溶液的配制　精密称取芦丁对照品(80℃干燥
1 h)2 mg于 25 m l量瓶中 ,用甲醇溶解并稀释至刻度 , 摇匀即
得。
2. 2. 2　线性关系的考察　取对照品溶液适量 ,用甲醇分别稀
图 1　芦丁的 HPLC图谱　　　　图 2　木芙蓉叶的 HPLC图谱
释配制成不同浓度的对照品溶液 , 进样量分别为 0. 04、0. 12、
0. 20、 0. 28、 0. 36、 0. 44 μg, 测定峰面积分别为 58001. 5、
180769、306315. 5、 425497、 544356、 676656, 以进样量(M S)对
峰面积进行线性回归 , 得回归方程:A =1536862. 5MS - 3581.
17, r=0. 999 9。结果表明 , 芦丁在 0. 04 ～ 0. 44 μg之间呈良
好线性关系。
2. 3　供试品溶液的制备　取木芙蓉叶约 100 mg,精密称定 ,
置 25m l的量瓶内 , 加甲醇适量 , 超声处理(功率 250 W ,频率
20 kHZ)使溶解 ,加甲醇至刻度 ,摇匀 , 用微孔滤膜(0. 45 μm)
滤过 , 取续滤液 ,即得。
2. 4　稳定性实验　取木芙蓉叶 , 依法制备供试品溶液 ,室温
放置 , 在 0、2、4、6、8 h分别进样 10μl, 测得芦丁峰面积的 RSD
为 1. 96%,试验结果表明:样品溶液在 8 h内基本稳定。
2. 5　精密度试验　取同一供试品溶液 , 重复进样 5次 ,每次
10 μl, 测得芦丁峰面积的 RSD为 1. 40%。
2. 6　重现性试验　取样品适量 ,精密称取 5份 ,分别按 “供试
品溶液的制备”项下的方法操作 ,进样 10 μl, 测定芦丁含量 ,
测定结果:RSD为 0. 85%。
2. 7　回收率试验　精密称取已知含量的样品(批号:070216-
1, 芦丁含量:0. 455%)6份 , 分别精密加入一定量的芦丁对照
705 安 徽 医 药　AnhuiMed ical and Pharmaceutica l Journa l　2007 Aug;11(8)
RP-HPLC法测定复方十一烯酸锌曲安奈德软膏中醋酸曲安奈德含量
堵伟锋 ,李　磊
(安徽省药品检验所化学室 , 安徽 合肥　230051)
摘要:目的　建立测定中复方十一烯酸锌曲安奈德软膏中醋酸曲安奈德含量的方法。 方法　采用 C18柱(4. 6 mm ×250 mm , 5
μm),以甲醇-水-乙醚(68∶32∶1)为流动相 , 检测波长 240 nm ,流速为 1. 0 m l m in- 1。结果　醋酸曲安奈德在 0. 08936 ～ 0. 8936
μg范内呈良好线性关系 , r=0. 9996, 回收率分别为 99. 3%, 99. 2%, 98. 8%, RSD分别为 0. 56%, 0. 23%, 0. 48%。 结论　该方
法准确 , 可靠 ,可用于复方十一烯酸锌曲安奈德软膏的质量控制。
关键词:醋酸曲安奈德;高效液相色谱法;含量测定
Determ ination of triamcinolone acetonide acetate in compound
zinc undecylenate and triamcinolone acetonide ointment by RP-HPLC
DUW ei-feng, LI Lei
(Anhui Institute for Drug Control, Hefei 230051)
Abstrac t:A im　To estab lish a me thod fo r de term ination o f triam cino lone ace tonide ace ta te in com pound zinc undecy lenate and triam ain-
o lone acetonide o in tm en t by RP-HPLC.M ethods　C18 co lumn(4. 6 mm ×250 mm , 5 μm)w as used, me thano l-wa ter-ethe r(68∶32∶1) as
m ob ile phase, w ith a flow rate o f 1. 0 m l m in- 1 , w ave leng th o f de tec to r a t 240 nm. Resu lts　 The linea r range o f g liqu idone w as 0.
08936 ～ 0. 8936μg. The recoveries w ere 99. 3%(RSD=0. 56%), 99. 2%(RSD =0. 23%), and 98. 8%(RSD=0. 48%), respec tive-
ly. Conc lu sion　This me thod w as proved to be simp le and re liab le, and can be used for the qua lity contro l of com pound zinc unde-
cy lenate and triam ainolone ace tonide o intm en.t
K ey words:triam c ino lone ace tonide ace tate;HPLC;de te rm ina tion
　　复方十一烯酸锌曲安奈德软膏是由十一烯酸锌 、十一烯
酸及醋酸曲安奈德等组成的外用抗病毒抗真菌药 ,用于手足
癣 、体癣及股癣的治疗 , 对其他皮肤瘙痒症也有一定的作用。
原为国家药品标准新药转正标准第十一册收载品种 ,其有效
品 , 制备供试品溶液 ,测定芦丁含量 , 计算回收率 , 测定结果见
表 1, 结果表明:芦丁加样回收试验的平均回收率为 103.
57%, RSD为 1. 27%。
表 1　回收率试验结果 /m g
编号 芦丁已知量 对照品加入量 实测芦丁量 回收率 /%
1 0. 228 0. 189 0. 421 102. 12
2 0. 228 0. 189 0. 423 103. 17
3 0. 229 0. 236 0. 475 105. 72
4 0. 229 0. 236 0. 470 103. 56
5 0. 229 0. 283 0. 516 102. 49
6 0. 229 0. 283 0. 521 104. 37
2. 8　超声时间的考查　取木芙蓉叶 (批号:070216-1)0. 1 g,
精密称定 , 置于 25 m l量瓶中 , 共 3份 ,加入甲醇 20 m l, 分别超
声处理 15、30、 45 m in,放冷 , 加甲醇至刻度 , 摇匀 , 滤过 , 取续
滤液 , 即得。按上述色谱条件 ,分别进样 10μl,测定峰面积积
分值 , 结果见表 2。结果表明:样品用超声提取 30 m in后 , 芦
丁即可提取完全 , 故采用超声提取 30 m in制备供试品溶液。
表 2　超声提取时间的考察结果
提取时间(m in) 15 30 45
称样量(g) 0. 1015 0. 1015 0. 1010
进样量(μl) 10 10 10
积分值 277833 279432 278630
测出量(μg) 457. 77 460. 37 459. 07
2. 9　木芙蓉叶中芦丁的含量测定　取三批药材 (批号分别
为:070216-1、070216-2、070214), 制备供试品溶液 , 分别精密
吸取 10 μl注入液相色谱仪 ,测定峰面积 , 计算芦丁含量分别
为 0. 446%、0. 335%、0. 387%。 结果表明:三批样品中 , 芦丁
含量最高为 0. 446%, 最低为 0. 335%, 平均值为 0. 386%。
3　小结与讨论
　　木芙蓉叶又称拒霜叶 , 《中国药典》2005年版未收载此
药 ,其主要活性成分为黄酮类化合物。通过查阅相关文献 , 有
报道采用紫外分光光度法来测定木芙蓉叶中总黄酮的含量;
本实验采用 HPLC法测定了木芙蓉叶中的一种黄酮类化合
物—芦丁的含量 , 该法操作简单迅速 、分离度好;如何将这两
种方法结合起来以控制木芙蓉叶的质量 , 此问题尚待进一步
研究探索。造成精密度试验 RSD值比重现性试验的 RSD值
大的原因:可能是进行精密度试验操作时每次进样的量不是
很稳定。
参考文献:
[ 1] 　姚莉韵 , 陆阳 , 陈泽乃. 木芙蓉叶化学成分研究 [ J] . 中草药 ,
2003, 34(3):201 - 3.
[ 2] 　姚莉韵 ,王国艳 , 王丽平.木芙蓉叶提取工艺研究 [ J] .中成药 ,
2000, 22(12):827 - 9.
(收稿日期:2007 - 04 - 16)
706 安 徽 医 药　AnhuiMed ical and Pharmaceutica l Journa l　2007 Aug;11(8)