全 文 ：遗 传 学 报 s ( 3 ) : 2 0 3一 2 1 1 , 1 9 8 1
A
e t o G
一 n e it e a iS n i e a
蓖麻蚕核糖体核糖核酸基因的
限制性内切酶酶切图谱` ’
郑仲承 钱肖贞 储美瑾 张爱宝 李载平
(中国科学院上海生物化学研究所 )
用 s ou th e 。 转移和分子杂交法研究了蓖麻蚕 (水 tac “ : “ i瓜 ) 核糖体核塘核酸 ( r R N A )
豹基因 ( r D N A ) 的限制性内切酶酶切图谱 。 发现该 rD N A 是由分子量大约为 7 . 0 x 1 0’ 道尔
顿的重复单位所组成 。 sP lt 可以切出完整的重复单位 。 cE oR I、 ` 二 IH 和 gB l 在重复单位
内部都有切 口 。 这与家蚕 ( oB 二 `厂 。 口厅 ) 的 rD N A 是不同的 。
核糖体核糖核酸 (r R N A ) 是核糖核蛋 白体的主要组成部分 。 它在蛋白质生物合成
和基因表达中均起重要作用 。 在许多真核生物中 , 比如酵母即 ] 、 果蝇 4[ , , , , 、 爪蟾 , 、海胆 l71t
和家蚕图的 rR N A 基因 ( r D N A ) 都是有中度重复顺序的基因 。 每一单倍体基因组中有
1 40一 2 60 个基 因拷贝 。 这些重复基 因是由线性串联的转录单位构成的 。 每一重复单位
中都含有一个 5 . 85 、 18 5 和 2 85 r R N A 的基因 。 有的生物如酵母 的 rD N A 还 编 码 s5
rR N tA lJ
。 不 同生物的 : D N A 组成略有不同 。 如爪蟾 r D N A 中所有的重复单位十分相
似 , 仅在间隙区长度上有不同阴 。 但是果蝇的 rD N A 却因为在它的 2 85 rR N A 基因中的
插入顺序的长度不同而可分成两类「15] 。 这些插人顺序在转录中的作用尚不明白 。 因此对
rD N A 的研究无疑有助于认识基因表达的调节控制 。
我们以蓖麻蚕后部丝腺为材料 , 无性繁殖其 : D N A山 。 为此 , 首先要对蓖寐蚕 : D N A
的基本结构有一个初步的认识 。
M an in gn 等田曾报道家蚕 r D N A 是 由分子量为 6 . 9 x 1 0 `道尔顿的重复基因所组成 ,
并研究了这一 rD N A 的酶切图谱 。
我们用 s ou ht e rn 杂交法研究表明蓖麻蚕 r D N A 是由分子量大约 7 . 0 x l。` 道尔顿的
重复单位所组成 。 它的限制酶酶切图谱与家蚕的有明显不同。
材 料 与 方 法
(一 ) 蓖麻蚕 选用实验室培育的印白黄种蓖麻蚕 ( A lt ac “ , 厅 ic in ) 。 取五龄期第
3一斗天幼蚕的后部丝腺体制备 D N A 和 rR N A 。
(二 ) 家蚕 中国自交种 , B 口m b” 。 ior , 苏 3 x 苏 4 。 取五龄期第 4一 5 天幼蚕的
后部丝腺制备 D N A 。
本文于 1 9 81 年 3 月 21 日收到 .
1) 李敏棠曾参加部分工作 , 朱绳祖 、吴雪和孔玉英提供工具酶 ,戴培桦等帮助摄影 ,一并志谢 。
遗 传 学 报 8 卷
蓖麻蚕和家蚕均来 自中国农业科学院蚕业研究所 (镇江 )和广西蚕业指导所 (南宁 ) 。
(三 ) O NA 蓖麻蚕和家蚕 D N A 都用苯酚法制备 7[1 。 经经基磷灰石柱层 析 纯
化 。 电泳鉴定纯 。 ·分子量在 105 道尔顿左右 。
(四 ) r R NA 用稍加改变的 Ki rb y 法 7[J 制备 。 纯化的 rR N A 的 A , : A` 是 2 .。 ,
A ` : A Z二 是 2 . “ 。 电泳鉴定纯。 rR N 人 电泳缓冲液是 8 9 m M irT 卜H Q , p H S . 3 , 89 m M -
硼酸 , 2 . s m M E D T A o
(五 ) 限制性内切酶 cE o R I 、 召口们 IH 、 尸“ 1 和 刀g爪 均由本室工具酶组提供 。
(六 ) D NA 的限制酶酶解和转移 D N A 用各种限制性内切酶 单 独 酶 解 或 双 酶
解 。 酶解条件和温度参照文献 [ 1 0 1。 为保证 D N A 完全酶解 ,每微克 D N A 用 3 单位的
酶 。 反应终止后 , 酶解过的 D N A 在 0 . 7拓琼脂糖凝胶中电泳展开 。 电泳缓冲液是 4 o m M
T ir 二H C I , PH s
.
o , Z o m M N a A c
, Z o l nM N a e l
, Z l n M E o T A
。 电泳后按照 oS u het r n 的方法 ”` ,
将 D N A 从凝胶上转移到硝酸纤维素膜上 。
(七 ) r R N A 的映一12 5标记 参照 G etz 等人 t,] 的方法 , 有些改变 。 所得的 125 卜
rR N A 的放射性比度为 l一 2 x l护 c mP 加 g r RN A 。
(八 ) 膜上分子杂交 按 G a ge 等人的方法 15t] 略有变动。
(九 ) 醉切片段的大小 以 几噬菌体 D N A 的 cE o IR 酶解片段为分子量标准 , 用
作图法求出 D N A 各酶切片段的大小 。
结 果 与 讨 论
(一 ) 分子杂交用的探针
本工作中所用的探针都是 竹一标记的蓖麻蚕 rR N A o
文献报道【14 鳞翅 目和双翅 目昆虫的 rR N A 与别的生物不同 , 它们的 28 5 rR N A 是
由两个半分子构成 , 中间以氢键相连。 在这里形成了一个隐藏的破坏区 。 在加热或变性
剂作用下 , 氢键被打断 , 28 5 rR N A 就断裂成两个 1 85 左右大小的片段 。 所 以 蓖麻蚕
rR N A 必须用冷酚法抽提并妥善保存。 我们用改变了的 iK br y 法制得的 rR N A 基本上
是纯的 (图 l ) 。
2 8 5 18 5
图 l
F ig
·
蓖麻蚕 r R N A 电泳图
E l e e t r o P h e r e s i s o f
A t才口` t’ ` 厅 c i月万 o n
在 2 . 2% 聚丙烯酸胺凝胶中电泳。
r i b o s o m a l R N A f r o m t h e s i lk w o r m
2
·
2% P
o l y a e r y l a m id e g e l
·
3 期 郑仲承等 : 蓖麻蚕核塘体核糖核酸基因的限制性内切酶酶切图谱
用 叭一标记 rR N A 时反应在 07 ℃ 进行 。 此时 28 5 rR N A 全部变性 。 所以 叭一 R N A
的电泳图谱只呈现出一条放射 自显影区带 (图 z) 。 此外 , 在 70 ℃ 之下 , 2 8 5 rR N A 还会
馨翼
魏麟羹薰
图 2 ’ ” I一标记的蓖麻蚕 rR N A 在 3% 聚丙烯酸胺凝胶中电泳后的放射自显影图
F i g
.
2 A u t o r a d i o g r a m o f t h e
’ 2 , I一 la b e l e d r R N A o f t l飞e s i lk w o r m A t多a c t’ `
ir c i , 1 a f t e r e l e e t r o p h e r e s i s o n 3% p
o ly a e r y la m i d e g e l
释放出 5 . 85 rR N A 。 但我们在碘标记后用的是回收大分子 rR N A 方法 , 5 . 85 rR N A 不能
回收 , 所以在电泳后的放射自显影中不能见到 5 . 85 rR N A 。
(二 ) 限制性内切酶酶切图谱
蚕的全 D N A 用限制性内切酶消化后 , 在凝胶电泳中可以看到一条连续分布的区带
(图 3 ) 。 用 so ut hc rn 法将它转移到硝酸纤维素膜上 , 与放射性同位素标记的探针 ( rR N A )
杂交 , 并作放射自显影 , 就能检测到 r D N A 。
图 3
F i g
.
蚕的全 D N A 经限制性内切酶消化后在 0 . 7弧 琼脂塘凝胶 中电泳展开
最下面一行是用 E co IR 酶解的 又噬菌沐 D N A 作为分子量标准。
E l e e t r o p h o r e
s
i s o f 石c o R 1 d ig e s t e d w h o l e g e n o m e D N A o f s i lk w o r m
A t t a c u : r i c i二 1 o n 0
.
7%
a g a r o s e g e l
.
T h e l o w e r g e l 15 t h e
E c o R 1 d i g e s t
e
d 又D N A a s m a r k e r o f t h e 一n o l e c u l a r w e ig h t
1
. 与家蚕的比较 家蚕全 D N A 经 cE oR I 消化 , oS u ht e rn 转移后 , 与 ’勺一蓖麻蚕
rR N A 杂交 , 只产生一条放射自显影区带 (图 4 ) 。 说明 cE oR I 可以切出完整的 rD N A 重
复单位 。 其分子量大小约为 .6 9 x l沪道尔顿 。 一家蚕全 D N A 用 B a m H I 消化 , 同样杂
交后 , 得到 .6 夕和 .0 2 x lo `道尔顿两个片段 (图劝 (小片段看不清楚 ) 。 这些 结 果 与
M
a n n in g 图 报告是一致的。
但是 , 蓖麻蚕 rD N A 的酶切图谱与家蚕有明显不同 。 首先 , cE o R I 水解蓖麻蚕全
D N A 经 so ut he rn 转移和杂交得到两个片段 , 其分子量分别为 , . 0 x l护和 .2 0 x l。` 道
尔顿 (图 4 、 5 , 表 l) 。 这说明 & 。 R l 在蓖麻蚕 rD N A 的重复单位内部有切 口 , 而家蚕
rR N A 基因单位中是没有的 ; 其次 , 肠 m H I 消化蓖麻蚕 创。 N A 可以得到两个杂交片段
2 0 6 遗 传 学 报 8 卷
.一. 甲 ,
图 4 家蚕与蓖麻蚕 r D N A 的酶切图谱比较 家番与蓖麻蚕全 D N A 分别用
及口 R l 和 B , H I酶解 , 孙 u 比。 n 转移后 与 ` s,I 一范麻番 rR N人 杂 交 ,作放射自显影。
1
.家蚕 D N A 及 o R I 酶解 ; 2 .蓖麻蚕 D N A E c o R I 醉解 ;
3
.家蚕 D N A B a o H I 酶解 : 4 . 范麻蚕 D N A B 。 , H z 酶解 。
F ig
.
4 e o m p a r i s o n o f r e s t r i ct i o n p a t t e r n s o f D N ^ for m s获kI w o r m B o阴吞夕 x
. 0厅 a ft e r oS u t b e r n t r a n s f e r a dn 衍 b r id i二 a t沁 n w i th 盆孟, I一 RN ^ o f
汉 t 口c “ 了 对` 1. 1。
1
.
B o协占” 优 o ir D N A d i g e s t e d b y cE 破 I ,
2
. 刁 t 配“ J 对e`月` D N A d ieB s t e d b , E c oR I;
3
.
B o沉吞” 功 。万 D N A d i g e s t e d b y B a叨 H l ,
4
· 通” ac’ , 爪` , 1 D N ^ d i昨 s t e d 妙 B ` 们 H 1.
t 于什f 牛
. 口 . . . . 川. J
图 5 蓖麻蚕全 D N A 经 cE o R I ( l ) , B a . H I ( 2) , p , t l ( 3) 和 B g l 11 ( 4 )
分别酶解后 , 电泳展开 , oS u ht 盯 , 转移与 J;,1 - r R N A 杂交的放射自显影图。 说
明不同的酶在 r D N A 重复单位上切点的不同 。 图中箭头是 人D N A 经 cE o R【
酶解后各片段的位置。
F i g
·
5 T h e r es tr i c it o n ,
t t e r n s 讨 艰 N A fr o m 5 1业 w盯 m 才” aC塑` 对` 耐
T h e w ob l
e 砂 n o m e D N A d i g e s t e s b y E c oR I ( 1) . B a . H I ( 2 ), p t l ( 3 ) a n d
习` 1 11(勺 r e叩 e e t i , e ly a ft e r s o u t h e r n t r a n s f e r a n d h y b r i d i az t i o n w认h i 考, I -
r R N A
。
T h e OP
s i t io n s o f E c o R 1 r e s t r i e t e d f r a g m e n st o f 又D N A M . W .
ma
r k e r w e r e i n d i e a t e d b y a r ot w s
.
( 图 4 、 5 , 表 l ) 。 但其片段大小与家蚕的不同 , 说明酶切点位置是不一样的 ;第三 , 乃 , I可
以完整地切出蓖麻蚕 rD N A 的 .7 0 x l。`道尔顿大小的重复顺序 (图 5 , 表 l ) , 而家蚕未
见报道 ;第四 , 刀g J l l 在蓖麻蚕 幻。N人 重复单位内部也有切口 ,而家蚕也未见报道 ;最后 ,
用 月万初 n l 酶解家蚕全 D N A , 杂交后只有一条显影带 , 说明 iH dn m 可 以切 出 完整
划。 N A 重复单位 , 与文献一致切。 而蓖麻蚕 rD N A 没有 iH耐 nI 切 口 (数据未列出 ) 。
3 期 郑仲承等 : 蓖麻蚕核塘体核塘核酸基因的限制性内切酶酶切图谱 2 0 7
裹 1
T a b l
e l
与 ’ ” I~ r R N人 杂交的 , 麻 . O N A 限翻性内切曲咬解片段
T h e s i z e o f r e s t r i e t i o n f r a g m e n t s o f r D N A o f A咨 t a c t’ , ir c i” i
h y b r i d i z e d ot
l , , I一 r R N A f r o m s i lk w o r m A t t a c t’ s 汀 c `n 了
限制性内切酶 D N A 片段大小 火 10 6 道尔顿
R e s t r i e 亡i o n e n z y m e s S i z e o f D N A f r a g m e n t s 火 1 0 6d .
E c o R I A 5
.
0 0
B 2
.
0 0
B a沉 H l A 4 . 4 0
B 2
.
6 0
P ` t l 7
.
0 0
B g l 11 A 3
.
30
B 2
.
9 0
C 0
.
50
D 0
.
20
E c o R I 十 B a叨 H l A 2 . 6 0
B 2
.
1 0
C 2
.
0 0
D 0
.
3 0
E c o R I 十 P s t l A 4 . 4 0
B 2
.
0 0
C 0
.
6 0
B a阴 H l + B g l 11 A 2 . 4 0
B 2
.
3 0
C 0
.
9 0
D 0
.
6 0
E 0
.
5 0
F 0
.
3 0
B a阴 H l + P` t l A 4 。 4 0
B Z
。
3 0
C 0
.
3 0
B a阴 H l + B g l 11 A 2 . 7 0
B 2
.
1 0
C l
。
2 0
D 0
.
5 0
E 0
.
3 0
F 0 2 0
P : t l + gB l 11 A Z
。
9 0
B I
。
8 0
C 1
.
5 0
D 0
.
5 0
E 0
.
3 0
.
. 这些结果说明这两种蚕的 rD NA 的酶切图谱是不一样的 。 我们知道 ,家蚕与蓖麻蚕虽然都是同一纲 、 目的生物 , 但是分属于不同的科 。 以上所述它们的 rD N A 的不同 , 有助
遗 传 学 报 8急
于从分子水平上了解不同种属的蚕在进化方面的联系与分歧。 1
2
, 蓖麻蚕 rD N A 的酶切图谱的剖析 为了进一步阐明 蓖麻蚕 rD N A 的酶切 图
谱。 我们除了用 及` R l 、 召召脚H l 、 P,t l、 刀砂 I 和 Hi耐 1 等限制性内切酶单独酶解全
DN A 外 (图 , , iH记 m 数据未列上 ) , 还用这些酶作双酶解 分析 (图 6 , 表 l ) 。 根据
一今 峪林曰
. . . , . .
图 6 衡麻蚕 r D N A 的双酶解图谱
蓖麻蚕全 D N A 经 E co R I 和 B a , H l ( 1) , E c o R I 和 p “ I ( 2 ) ,
E亡o R I 和 B宫1 11 ( 3 ) , B a o H I 和 p : t l ( 4 ) , B a o H I 和 B g l 11
少) : 以及乃月 和 刀g碑l r ( 6 ) 双酶解后 , 电泳展开 so u比 c协 转
移 , 与 ’ ” 卜 r R N A 杂交的放射自显影图 。 图中箭头是 又D N A 经
E` 。 R l 酶解后各片段的位置 。
F ig
.
6 T h e r e s t r i e t i o n P a t t e r n s o f r R N A f r o m s i lk w o r一n A t君a c u , , i c i月 i
T b e , ho l
。 梦 , m二 D N A d i梦 set d b犷 E c o R [ p lu s B口二 H l七l ) ,
E c o R I p lu s p : t l ( 2)
, E c o R I p lu s B g l 11 ( 3 )
,
B a二H l p l u s p , ,
I ( 4 )
,
B a o H 1 p lu s gB J 11 ( 5)
, a o d p s tl p l u , gB l 11 ( 6 )
r o s p o ct
-
i v e l y a ft e r s o u t h e r n t r a n s f e r a n d h y b r i d i z a t i o n w i t h
1 2 ,卜 r R N A -
T be OP
s i t i o t o f E c oR I
r e s t r ie t e d f r a g e m e n t s o f 又D N A M 。 W .
m a r k e r w e r e i n d ica t e d b y a r r o w s
.
oS ut he rn 转移和杂交的放射自显影图 , _ .参照 几噬菌体 D N A硬汾吸 I 酶解片段的分子量袜
准就可以排列出蓖麻蚕 rD N A 的一些限制性内切酶酶解图谱 。 蓖麻蚕 rD N A 的酶切图
谱表明 , 它是由同方向串联的重复单位构成的 。 因为 乃 , I 能完整地切出单一的 rD N A 重
复单位 , 其大小是 7 .o x l护道尔顿 , 而且 , 其他三种酶 cE oR I 、 凡m H I 和 刀宫之I H , 在 J
rD N A 重复单位内部虽然都有数量不等的切口 ,但是在 山 N A 的不同位点上切开 rD N A
的四种酶 , 无论是单独酶解 , 还是双酶解所得的杂交片段的大小的总和都是 7 .0 x l护道
尔顿。 这些结果只能解释为草麻蚕 rD N A 是 由同方向串联排列的重复单位所构成。 这
与很多真核生物 rR N A 基因的组织结构是一致的 。 假若蓖麻蚕 r D N A 是象四膜虫大核
的 rR N A 基因一样 , 由反向重复单位串联组成 8t] , 则不可能给出这样的结果 。 此外 , 这些 `
结果还说明蓖麻蚕 r D N A 的重复顺序的长度是均一的 , 这与家蚕一样切 , 而与果蝇 15[J 、爪
蟾叫不同 。 这些结果反映真核生物 : D N A 的多样性 。
蓖麻蚕 rD N A 的酶切图谱可以推导如下 :
1
. 按上述 , 因为 即 I可以切出完整的 七D N A 重复单位 ,就可以据此按直线同向串联
画出 rR N A 墓因组 ,每单位为 .7 0 x l护道尔顿 (图 7 A )( 下列片段大小均指 义 1 0`道尔
顿 ) o
3 期 郑仲承等 : 蓖麻蚕核糖体核塘核酸基因的限制性内切酶酶切图谱 2 0 9
工钻’de,工恤ód.JY工灿s久
7
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口 口
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如 . 目 卜目卜 . 目 卜. 叫
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工国。亩土,
月ù工瓦ō2ù工灿ō
]国。必
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今0万今O·飞o乡 2 一 3
2
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4
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4
曰óó气工忿足
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l州。八阳工弱。内闺
`— 、 - 一一一护2 . 6
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骂二二 4 . 今 5 . 0 5 . 5 态念昌
图 7 蓖麻蚕 r D N A 的限制性内切酶酶切图谱 详细说明见正文。
图中片段大小 均为 火 10 ` 道尔顿 。
F i g
.
7 R e s t r i e t i o n
Jn a p s o f s i lk w o r
一n 左了了a c “ 了 r i c i刀 1 D N A
D
e t a i l s s e e t h e t e x t
.
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, t l 单切 ( d ig e s t e d b y p , t l )
Z p , t l
, B g l 11 双切 ( d ig e s t e d b y p , t 1 p l u s B g l 11 )
B g l 11 单切 ( d i g o s t e d b y B g l 11)
3 E e o R I
, p : t l 双切 ( d ig e s t e d b y E c o R I p lu s p , t l )
E c o R I 单切 ( d ig e s t e d b y E c o R I)
4 E
c o R I
,
B g l 11 双切 ( d ig e s t e d b y E c o R l p lu s B g l l l )
E c o R I 单切 ( d ig o s t o d b y E c o R I)
5 B a
,。 H l 单切 ( d ig e s t e d b y B a o Z H I)
2
. 由 乃 , I 与 B g l 11 双酶切图谱 , 可见 乃 , I切点在 B g l 11之 3 . 3 片段 (表 l刃 9 2 I I A )
中产生 1 . 8和 1 . 5 之 乃。 gB l n B 和 c 两个片段 。 这两个片段可以任意取向 (图 7 B ) 。
3
. 由 p ; , 1 和 E co R I 双酶切图谱可见 , 乃月 切点在 肠oR I 之 5 . 0 大片 段 中 , 产生
4
.
4 和 0 . 6 的 尸s t l一& o R I 片段 (表 l , 图 7 e ) , 其 0 . 6 片段必须在 尸, , I一刀9 1 11的 1 . 5片段
之中 , 这样才能产生 0 . 9和 2 . 4 的 B g l 11一cE o R I 片段 (图 7 e 、 D ) `
4
. 由 3 可见 B乡 n 和 cE 口 R l 双酶切产生的 .2 3 片段必须来自 cE o IR 单酶切之 5 . 0
片段远离 乃 , I 切 口端 (图 7 D ) , 因此 B岁 11一 B g l n 之 0 .3 小片段必须邻接于此 2 . 3 片段
(图 7 D ) 。
遗 传 学 报 8 卷
5
.
B g l 11 之 0 . , 小片段 , 只能位于 邻 接 0 . 9 B g l 11一cE o R I 片 段 (图 7 D ) 这 也符 合
B g l 11 之 3 . 3大片段可以产生 0 . 9 和 2 . 4 的 B g l 11一 cE o R I 片段 , 以及符合 B g l 11 2 . 9 片段
可产生 2 . 3 和 0 . 6 的 B g l 11一cE o R I 片段 (图 7 D ) 。
6
. 同此理 ,可以排出 aB o H I 的酶切位点 (图 7 E ) 。 因为 乃 , I 切在 aB o H I 的 2 . 6
片段上 , 它所产生的 2 . 3 片段必须在 尸、 I一cE 口 R l 的 4 . 4 片段内 (图 7 F ) 。 与它伴随的是
cE
o R I一B a , H l 之 2 . 1片段 (图 7 F ) 。
综上各点 , 就可以画出一个 sP , I 酶切的蓖麻蚕 rR N A 基因单位的酶切图谱 (图 7
G )
。 这一结果与吴祥甫等的无性繁殖的蓖麻蚕 r D N A 纯基因的酶切图谱是一致的 〔1〕。
目前我们正在分别用纯化的 1 85 和 2 85 rR N A 作探针进行基因的定位工作 , 并希图
阐明蓖麻蚕 rR N A 结构基因中是否有插人顺序存在的问题 。
参 考 文 献
吴祥甫 、郑仲承 、江福美 、 储美瑾 、 钱肖贞、 李载平 : (待发表 ) 。
B c l x
,
G
.
1
. ,
L
.
J
.
D e G e n n a r o
,
D
.
H
.
G e l f a n d
,
R
.
J
.
B i s h o p
,
P
.
V a l e n z u e l a a n d W
.
J
.
R u t et
r :
1 9 7 7
.
J
.
B 葱0 1 . C h e饥 . , 2 52 : 8 1 1 8一 81 2 5 .
C r a m e r
.
J
.
H
. ,
P
.
W F
a r r e l ly
,
J
.
T
.
B r a n i t z a n d R
.
H
.
R o w n d : 1 97 7
. 万 0 1 . 口 e儿 . G e 补 e蓄. , 1 5 1 :
2 2 9一2 4 4 .
G l o v e r
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H o g n e s s : 1 9 7 7
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S a u n d e r s : 19 7 2
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G a g e
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M a n n in g : 19 7 6
.
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. 卫 。 Z. B 艺0 2· , 1 0 1 : 3 2 7一 348 .
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: 1 9 68
.
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G a l l : 19 7 6
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. 皿 。乙 B 艺0 1. , 1 04 : 4 2 1一4 5 3 .
M a n n in g
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G昭 e : 1 9 7 8 . 口。 牡 e , 4 : 1 53一 1 6 6 .
M a n n in g
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G a g e : 1 9 7 8
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B落。乙. C h e饥二 2 5 3 : 2 0 4 4一 2 0 5 2 .
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S u l s ot n : 1 9 7 3
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: 1 97 2
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. 皿 o l . B 落。乙. , 7 0 : 6 37一 6 4 9 .
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: 19 7 5
.
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. 工 o l . B落0 1二 9 8 : 5 0 3一5 1 7 .
5 1一i n e , J . a n d L . D a lg a r n o : 1 9 7 3
.
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. 万。乙. 凡 0 2· , 7 5 : 5 7一 7 2 .
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D a w id : 1 9 7 7
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1 0 : 19 3一 2 12 .
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S t a f f o r d : 1 9 7 8
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C h r o 饥。吕。饥 a , 65 : 373一 3 8 1.
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3 期 郑仲承等 : 蓖麻蚕核糖体核塘核酸基因的限制性内切酶酶切图谱 2 1 1
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