全 文 ：中 ,天麻素的量最高 ,因此确定 10%乙醇作为洗脱液。
在栀子的鉴别中发现用 70%乙醇洗脱时 ,栀子苷的量
最高 ,因此确定 70%乙醇作为洗脱液。
3. 2　展开剂的选择
舒天宁颗粒中天麻的定性鉴别曾参考《中国药
典》2005年版“天麻”药材的方法 ,以醋酸乙酯 -甲醇 -
水 ( 9∶ 1∶ 0. 1)为展开剂 ,结果供试品斑点重叠比较
严重 ,分离度差 ,且阴性对照有干扰 ; 改用三氯甲
烷 -醋酸乙酯 -甲醇 -甲酸 ( 8∶ 1∶ 3∶ 0. 1)为展开剂
后 ,发现色谱图中天麻素斑点清晰 ,无干扰。
3. 3　检测波长的选择
经紫外扫描 ,天麻素对照品在 220、 270 nm波长
处有最大吸收 ,从天麻素对照光谱图可见 220 nm检
测的灵敏远高于 270 nm;分析两个波长的峰面积 ,
220 nm检测的峰面积为 270 nm的 10倍 ,所以选择
220 nm作为测定波长。
参考文献
[1 ]　中国药典 [ S] .一部 . 2005.
[2 ]　李怀斌 ,侯建平 ,邵可众 ,等 .复方天麻首乌酒中天麻素的鉴别
[ J] .安徽中医学院学报 , 2002, 21( 6): 3.
[3 ]　朱　浩 ,毛声俊 .大孔树脂吸附纯化不同中药有效部位特性研
究 [ J] .中国中药杂志 , 1998, 23( 10): 607.
(收稿日期 2008-10-21)
HPLC法测定短柱肖菝葜中芒果苷
秦文杰 1, 2 ,易剑平 1 ,周大成 1 ,王钢力 2 ,林瑞超 2
( 1.中药复方新药开发国家工程研究中心 ,北京　 100075; 2.中国药品生物制品检定所 ,北京　 100050)
摘　要: 目的　建立 HPLC法测定短柱肖菝葜药材中芒果苷的方法。 方法　采用 C18色谱柱 ,乙腈 -0. 5%冰醋酸溶
液 ( 10∶ 90)为流动相 ;体积流量 1 mL /min;柱温 25℃ ;检测波长 316 nm。结果　芒果苷在 6. 26～ 50. 08μg与峰面
积积分值呈良好的线性关系。平均回收率为 101. 31% ; RSD为 1. 79%。 结论　该法简便、准确 ,可作为短柱肖菝葜
药材的测定方法。
关键词: 短柱肖菝葜 ; HPLC法 ;芒果苷
中图分类号: R284. 1　　　文献标识码: A　　　文章编号: 1674- 5515( 2009) 02- 0108- 02
　　短柱肖菝葜 Heterosm ilax yunnanensis Gagnep.
为百合科肖菝葜属植物 ,具有清热、除湿、解毒之功
效。用于湿热淋浊、带下、痈肿、瘰疬、梅毒及汞中毒
所致的肢体拘挛、筋骨疼痛。 短柱肖菝葜的化学成
分、质量控制等研究未见报道。 笔者从化学成分、药
理活性和质量控制等方面对其进行了较为深入的研
究 [1-2 ]。化学成分提取、分离结果表明 ,短柱肖菝葜中
含有许多黄酮类成分 ,种类多 ,但量低 ,其中芒果苷
的量相对比较大 ,且单体化合物体外抗肿瘤细胞筛
选结果表明 ,包括芒果苷在内的 酮苷类化合物有
较好的抑制人肺癌细胞 ( A-549)和人结肠癌细胞
( HCT-8)的作用 ,因此选择芒果苷作为指标成分 ,采
用 HPLC法对其进行了定量分析。
1　仪器与试药
高效液相色谱仪 (日本岛津 CLASS— V P
10AV P) , Hydro-RP80A C18色谱柱 ( 250 mm× 4. 6
mm , 4μm, Phenomenex公司 ) ;乙腈 (色谱纯 ) ,其
他试剂均为分析纯 ,纯净水 (自制 )。
对照品:芒果苷 (批号 111607-200402,中国药品
生物制品检定所提供 )。短柱肖菝葜药材分别于 2005
年 6月、 2005年 7月、 2006年 8月、 2006年 10月采集
于贵州遵义金顶山镇莲花池片区黄中村印山 (按采
集时间先后 ,批号分别为 0506、 0507、 0608、 0610) ,经
张继副主任药师鉴定为短柱肖菝葜 H. yunnanensis
Gagnep.的干燥根茎 ;标本存于中国药品生物制品
检定所标本馆。
2　方法与结果
2. 1　检测波长的选择
精密称取芒果苷对照品 6. 26 mg ,置 50 mL量
瓶中 ,加甲醇适量 ,超声使溶解 ,加甲醇至刻度 ,摇
108 现代药物与临床　　Modern Pharmacy and Clinic　　 2009年第 24卷第 2期
基金项目　北京市科技计划项目 ( D0206001043491)
　作者简介　秦文杰 ( 1971— ) ,女 ,博士 ,主要研究方向:中药化学成分及质量控制。 Tel: ( 010) 87632624, E-mail: zzw en jieqin@ yahoo. com. cn
* 通讯作者　林瑞超 ,男 ,教授 ,博士生导师 , Tel: ( 010) 67095307, E-mail: Linrch 307@ sina. com
匀 ;精密吸取 1 mL至 50 mL量瓶中 ,加甲醇稀释至
刻度 ,摇匀 ,以甲醇为空白 ,照紫外 -可见分光光度法
(《中国药典》 2005年版一部附录Ⅴ A) ,在 200～ 400
nm波长进行光谱扫描 ,根据扫描结果确定本品测
定波长为 316 nm。
2. 2　色谱条件
Hydro-RP80A C18色谱柱 ( 250 mm× 4. 6 mm , 4
μm);以乙腈 -0. 5%冰醋酸溶液 ( 10∶ 90)为流动相 ;
检测波长: 316 nm;体积流量: 1. 0 mL /min;柱温:
25℃ ;进样量 10μL。 理论板数按芒果苷计算 ,应不
低于 3 000。色谱图见图 1。
图 1　芒果苷对照品 (A)和短柱肖菝葜样品 (B)的 HPLC图
2. 3　对照品溶液的制备
精密称取芒果苷对照品适量 ,加甲醇制成 30
μg /mL的对照品溶液 ,即得。
2. 4　供试品溶液的制备
取短柱肖菝葜药材粉末 4 g ,精密称定 ,置索氏
提取器中 ,加甲醇适量 ,加热回流至提取液无色 ,用
甲醇少量洗涤容器 ,洗液并入提取液 ,蒸发浓缩并转
移至 10 mL量瓶中 ,即得。
2. 5　线性关系考察
精密称取芒果苷对照品适量 ,加甲醇溶解 ,制成
125. 2μg /mL的对照品溶液 ,分别精密吸取 0. 5、 1、
2、 3、 4 mL至 10 mL量瓶中 ,加甲醇稀释至刻度 ,摇
匀 ,得质量浓度分别为 6. 26、 12. 52、 25. 04、 37. 56、
50. 08μg /mL的对照品溶液。分别进样 10μL,按上
述色谱条件 ,测定芒果苷峰面积积分值 ,结果表明 ,
在 6. 26～ 50. 08μg /mL,芒果苷的质量浓度与峰面
积积分值呈良好的线性关系 ,回归方程为Y= 14 267
X+ 118 753, r= 0. 999 2。
2. 6　稳定性试验
照上述色谱条件 ,取同一供试品溶液 (批号
0506) ,每隔 2 h时进样一次 ,进样 20μL,记录峰面
积 ,结果表明 ,供试品溶液在 8 h内基本稳定 ,峰面
积积分值 RSD为 1. 68%。
2. 7　精密度试验
照上述色谱条件 ,取同一供试品溶液 (批号
0506) ,重复测定 5次 ,峰面积积分值 RSD为 1. 45% 。
2. 8　重现性试验
取同一批样品 (批号 0506) ,按 2. 4方法平行制
备 5份供试液 ,按照上述色谱条件 ,分别进样 20μL,
进行量的测定 ,结果 RSD为 2. 11% 。
2. 9　加样回收试验
精密称取批号 0506样品 2 g ,共 6份 ,分别精密
加入 125. 2μg /mL芒果苷对照品溶液 1 mL,制备供
试品溶液 ,进样 20μL,测定 ,计算回收率。结果芒果
苷的平均回收率为 101. 31% , RSD为 1. 79% 。
2. 10　样品测定
取本品 4批 ,每批样品取 3份 ,制备供试品溶液 ,
取供试品溶液和对照品溶液分别进样 ,测定 4批样
品中芒果苷的量 ,测定结果见表 1。
表 1　样品中芒果苷的测定结果 (n= 3)
批号 芒果苷 / (μg· g- 1)
0506 48. 28
0507 44. 28
0608 28. 53
0610 68. 63
3　讨论
　　肖菝葜属植物民间习称“白土苓” ,收载于贵州、
湖南和四川省中药材标准 [ 3-5 ]。相关文献中 ,有关肖
菝葜属植物的研究非常少 ,仅见《中国植物志》和《常
用中药材品种整理和质量研究》中有其生药学方面
的研究 ,未见有关其质量控制方面的其他报道。笔者
首次报道了肖菝葜属植物短柱肖菝葜中芒果苷的测
定 ,为建立短柱肖菝葜及其同属的其他种药材的质
量控制方法奠定了较好的基础。
　　由于目前仅测定了从贵州遵义一个产地采集的
4批药材 ,样品的代表性不够 ,其他产地的药材有待
进一步收集 ,待测定足够量的样品后再拟订合理的
限度。本实验所进行的工作只是对该药材质量控制
方法的初步探讨 ,今后随着样本量的扩大 ,还需进一
步完善 ,使其更具有针对性和代表性。
参考文献
[1 ]　秦文杰 ,王钢力 ,林瑞超 .短柱肖菝葜化学成分的研究 [ J ].中药
材 , 2007, 30( 8): 959-961.
[2 ]　秦文杰 ,王钢力 ,林瑞超 .短柱肖菝葜化学成分研究Ⅱ [ J ].中草
药 , 2007, 38( 10): 1466-1468.
[3 ]　四川省卫生厅 .四川省中药材标准 [S ]. 1987.
[4 ]　贵州省药品监督管理局 .贵州省中药材、民族药材质量标准
[ S ]. 1988.
[5 ]　湖南省卫生厅 .湖南省中药材标准 [S ]. 1993.
(收稿日期 2008-12-01)
109现代药物与临床　　Modern Pharmacy and Clinic　　 2009年第 24卷第 2期