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第 1 3 卷 第 3 期
2011 年 3 月
辽 宁 中 医 药 大 学 学 报
JOURNAL OF LIAONING UNIVERSITY OF TCM
Vol. 13 No. 3
Mar .，2011
药 材 知 母 为 百 合 科 多 年 生 草 本 植 物 知 母
Anemarrhena asphodeloides Bge. 的干燥根茎 [1]。河北
易县为其道地产区，被称作“西陵知母”。在野生药
材资源不能满足需求的情况下，当地已有大规模人
工栽培，栽培品已经成为道地“西陵知母”的重要组
成部分。为保证药材质量，正在进行规范化栽培研
究。
知母根茎主要含皂苷类成分 [1-2]，药理研究表明
具有抑制血小板的聚集、清除自由基、降血糖等众多
作用 [3-6]。知母含甾体皂苷种类较多，但水解后的苷
元主要是菝葜皂苷元（sarsasapogenin）。因此 2000
年和 2005 年版《中华人民共和国药典》以菝葜皂苷
元含量作为指标，反映总皂苷含量，作为知母药材基
本的质量控制方法。
曾有测定移栽至南方校园的知母在不同采集
期菝葜皂苷元含量的报道 [7]，对道地产区知母菝葜
皂苷元含量动态变化未有研究。为了解西陵知母中
菝葜皂苷元的积累变化规律，确定规范化种植西陵
知母的最佳采收期，本文采用高效液相法测定，研究
其变化动态，为西陵知母规范化的采收提供科学依
据。
1 仪器与试药
高效液相色谱仪：ESA 高效液相色谱，检测器：
ESA 蒸发光散射检测器（美国 ESA）；KQ-500DE 型
数控超声波清洗机（昆山市超声仪器有限公司）；
HH-6 型恒温水浴锅（江苏国华电器有限公司）。
菝葜皂苷元对照品购自中国药品生物制品检
定所（批号：110744-200306，供含量测定用），内标
栽培西陵知母中菝葜皂苷元含量动态研究
赵兵 1，陈千良 1，倪士峰 1，王文全 2，马长华 2，刘建勇 3
（1.西北大学生命科学学院西部资源生物与现代生物技术教育部重点实验室，陕西 西安 710069；
2.北京中医药大学中药学院，北京 100102；3.易县科技局，河北 易县 074200）
摘 要：目的：研究栽培西陵知母中菝葜皂苷元的积累变化规律。方法：采用高效液相蒸发光散射检测，测定不
同采集时间知母药材中菝葜皂苷元的含量。色谱柱：Kromasil C18 柱（250mm×4.6mm，5μm）。流动相：甲醇，流速
1mL·min-1。柱温为30℃。蒸发光散射检测器漂移管温度为50℃，蒸发温度为70℃，以氮气为雾化气，压力为1.03×
105Pa。采用胆固醇为内标物，内标法定量。结果：栽培西陵知母各月菝葜皂苷元含量变化较大，尤以6月为最高，7
月最低。春季各月含量总体平均高于6月份以后各月。结论：采收期对西陵知母药材质量有较大影响。栽培西陵
知母中菝葜皂苷元的含量春季相对较高，春季知母返青前采挖，药材质量较高。
关键词：西陵知母；菝葜皂苷元；HPLC-ELSD；含量动态
中图分类号：R284.2 文献标识码：A 文章编号：1673-842X (2011) 03- 0022- 03
收稿日期：2010-09-24
基金项目：“十五”国家重大科技专项项目（2001BBA701A62-13）；教育部博士点新教师基金项目（20096101120013）；陕西省中医药管理
局科研项目（zy56）；西北大学科研启动项目（okyqdf0159）
作者简介：赵兵（1986-），男，陕西渭南人，2006 级本科学生，研究方向：生物科学与技术应用。
通讯作者：陈千良（1977-），男，陕西西安人，讲师，博士，研究方向：中药资源及质量评价。E-mail：cql999999@126.com。
Study on Dynamic Variation of Sarsasapongenin Content
in Cultivated Xiling Zhimu from Yi County
ZHAO Bing1，CHEN Qian-liang1，NI Shi-feng1，WANG Wen-quan2，MA Chang-hua2，LIU Jian-yong3
（1. Key Laboratory of Resource Biology and Biotechnology in Western China of Ministry of
Education，College of Life Sciences，Northwest University，Xian 710069，Shanxi，China；
2. School of Chinese Pharmacy，Beijing University of Chinese Medicine，Beijing 100102，
China；3. Yi County Bureau of Science and Technology，Yixian 074200，Hebei，China）
Abstract：Objective：Study on dynamic variation of sarsasapongenin content in cultivated Xiling Zhimu
（Anemarrhena Rhizome）from Yi County to investigate its quality. Method：HPLC-ELSD method was
adopted to determine the content of sarsasapongenin. With cholesterol as internal standard，Kromasil C18
column（250mm×4.6mm，5μm）was used . Mobile phase was methanol with the flow rate of 1mL·min-1；
the temperature of the drift tube and evaporation was 50 ℃ and 70 ℃ respectively. The gas pressure was
1.03×105 Pa. Results：The sarsasapongenin content in samples collected in different month varied greatly.
Sample collected in June has the highest content，while sample collected in July has the lowest. Samples of
spring have a higher average content than those collected after June. Conclusion：The collection time has a
great effect on quality of crude drug. Contents of sarsasapongenin in cultivated Anemarrhena Rhizome from
Yi County are relative higher in spring. The best harvesting time is early spring.
Key words：Xiling Zhimu；Sarsasapongenin；HPLC-ELSD；content dynamic
· 基金项目纵览 ·
DOI：10.13194/j.jlunivtcm.2011.03.24.zhaob.055
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物胆固醇购自生工公司，HPLC 蒸发光检测，纯度大
于 99％。娃哈哈纯净水，色谱纯甲醇（FISHER），其
余试剂均为分析纯（北京化工厂）。
西陵知母药材样品来自易县坡仓乡知母规范
化种植科研基地，为多年生，处于半野生化种植状
态。所有样品均经北京中医药大学中药学院刘春
生教授鉴定，留样药材存于中药学院生药系标本
室。
2 方 法
2.1 药材样品及试验设计
试验以采集月份为因素采用单因素随机区组
设计，按月份采集样品分析，考察有效成分含量变化
动 态。 时 间 设 4 月、5 月、6 月、7 月、8 月、9 月、10 月、
11 月，共 8 个水平，3 次重复。各月 15 日在试验设计
的相应小区内随机挖取鲜知母药材 1kg，去除地上
部分及须根。根茎用微湿润的毛刷仔细刷净泥土后
切片，快速晒干或 60℃以下快速烘干。
2.2 菝葜皂苷元含量测定方法
按照文献 [8] 中高效液相内标法测定知母中菝
葜皂苷元含量。
色 谱 条 件：色 谱 柱：Kromasil C18 柱（250mm×
4.6mm，5μm）。 流 动 相：甲 醇，流 速 1mL·min-1。
柱温为 30℃。蒸发光散射检测器漂移管温度为
50℃，蒸发温度为 70℃，以氮气为雾化气，压力为
1.03×105Pa。在此条件下，菝葜皂苷元保留时间为
11.0min，内标胆固醇保留时间为 27.0min，色谱图见
图 1。
1. 菝葜皂苷元（sarsasapogenin）；2. 内标胆
固醇（cholesterol，internal standard）。
图 1 菝葜皂苷元对照品和内标色谱图
供试品溶液的制备：知母药材低温干燥，粉碎
过 3 号筛。精密称取药材粉末 0.5g，置 25mL 量瓶中，
加入乙醇接近刻度，浸泡过夜。超声波振荡（功率
200W，频率 30kHz）40min，取出放至室温后，以乙醇
定容。滤过，取续滤液 10mL 置烧瓶中，蒸干，加入浓
盐酸 1.5mL，水 10mL，水蒸气回流水解 2h。水解液
放至室温，滴加 40％氢氧化钠溶液至由黄色突变为
橙红色。用氯仿 30mL 萃取 2 次，合并萃取液，回收
氯仿至干。残渣用甲醇溶解，转移至 10mL 量瓶中，
加入胆固醇内标溶液 1mL，以甲醇定容后用 0.45μm
滤膜过滤备用。
线性关系、精密度、稳定性、重复性、回收率等
各项考察结果均良好，本方法符合含量测定分析方
法学要求。
精密吸取供试品溶液 10μL，注入液相色谱仪
测定，进样 3 次取峰面积的平均值，根据回归方程计
算含量，结果见表 1。药材样品色谱图见图 2。
1. 菝葜皂苷元（sarsasapogenin）；2. 内标胆
固醇（cholesterol，internal standard）。
图 2 知母药材样品色谱图
3 结 果
西陵知母中菝葜皂苷元的含量测定结果见表
1。
表 1 不同采集时间西陵知母中菝葜皂苷元含量
采集时间 含量（%）
2004 年 4 月 15 日 1.68±0.33
2004 年 5 月 15 日 1.57±0.85
2004 年 6 月 15 日 2.35±0.14
2004 年 7 月 15 日 1.12±0.28
2004 年 8 月 15 日 1.22±0.18
2004 年 9 月 15 日 1.31±0.17
2004 年 10 月 15 日 1.13±0.14
2004 年 11 月 15 日 1.09±0.26
从表 1 数据可以看出，从 4~11 月西陵知母菝葜
皂苷元含量变化较大。对表中数据进行方差分析，
多重比较结果显示各月间含量差异显著。说明采
收期对西陵知母药材质量有较大影响。据表中菝
葜皂苷元含量数据绘制得菝葜皂苷元含量随时间
变化折线图，见图 3。从图和方差分析结果可看出，
菝葜皂苷元含量以六月为最高，并且与 4 月和 5 月
有显著差异（P<0.05），与其他 5 个月份的差异达到
了极其显著的水平（P<0.01）。在所有月份中，7 月
最低，从 6 月的含量高峰立即降低到最低，变化非
常迅速。春季各月含量总体平均高于 6 月份以后
各月。
0
0.5
1
1.5
2
2.5
3
4 5 6 7 8 9 10 11
月份
菝
葜
皂
苷
元
含
量
％
图 3 “西陵知母”葜皂苷元含量变化动态
4 讨 论
本文研究了西陵知母中菝葜皂苷元积累特征。
本研究所选取的材料是道地产区栽培的知母，所反
映出来的就是道地西陵知母有效成分积累变化的
自身特殊规律。对不同月份菝葜皂苷元含量动态
试验采用随机区组设计，取样量较大，具有较高的
代表性。对菝葜皂苷元含量动态的研究结果与洪
永福等 [7] 的结果从表面看有一定的差异。其结果是
4 月含量最高，7 月份最低 [6]。但是仔细分析菝葜皂
苷元含量的变化动态，虽然含量高峰推后 1 个月左
右，但趋势十分一致，同样是春季返青后含量逐渐升
高，至花前期最高，开花后较快地下降到最低点，然
（
）
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后有缓慢回升，秋后缓慢下降。引起时间点差异的
原因是其所测知母样品为南方的，上海的物候期当
然比北方的易县早。
菝葜皂苷元含量的高峰出现在知母 6 月或 7 月
生长活动较旺盛的时期，也是抽苔开花前期。高峰
过后有所降低，说明抽苔开花对皂苷成分含量影响
较大，消耗较多。结合前文研究的结果，春季皂苷和
芒果苷的含量相对高一些。所以，若侧重皂苷类成
分和芒果苷宜在春季采挖。而易县当地多在春季采
挖，所以这与一般以皂苷类成分作为主要评价指标
的要求是极为吻合的。从栽培生产来讲，这也可以
说是采收措施对“西陵知母”内在质量的贡献。
菝葜皂苷元无紫外吸收，用高效液相测定菝葜
皂苷元含量蒸发光散射检测器是比较好的选择。采
用内标法避免了用外标法时对照品测定与样品测定
过程间仪器状态的波动造成的定量误差，从而提高
了测定的准确性，并且内标法在方法建立之后，测定
时只需分析样品溶液根据回归方程就可定量，所以
内标法不仅准确而且更为简便快速。采用知母药材
中不含的甾体化合物胆固醇作为内标，其结构和性
质与菝葜皂苷元相近，而且在色谱图上分离良好，获
得了很好的测定效果。
对供试样品溶液制备过程中水解时添加浓盐
酸的量和回流水解的时间进行了优化。分别考察了
加盐酸 1、1.5、2mL，水解时间 1.5、2、3h。以菝葜皂苷
元含量作为指标，反复试验，最终确定了水解时加入
1.5mL 浓盐酸，回流水解 2 h 为最佳条件。
由于易县西陵地区 11 月开始至次年春季 3 月
以前土壤结冰，不宜采挖。本项目从指导实际生产
的目的出发，试验只选取了 4~11 月的样品进行含量
动态分析。栽培西陵知母冬季的菝葜皂苷元含量情
况有待进一步实验考察。◆
参考文献
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3种方案治疗小儿幽门螺旋杆菌相关胃病中焦积热症前后
症状体征积分分值变化及与疗程的关系
王秀坤
（苏州大学附属儿童医院，江苏 苏州 215005）
摘 要：目的：观察3种方案治疗小儿幽门螺旋杆菌（H.Pylori）相关胃病中焦积热症前后症状体征积分分值变
化及与疗程的关系，寻找最佳治疗方案。方法：108例H.Pylori胃病患儿按1：1：1对照原则随机分为3组：中药组、
西药组和中西药组，每组各36例。中药组口服安幽颗粒（大黄、槟榔、黄连、丹参、香附、白芍）；西药组口服克拉霉素、
洛赛克；中西药组口服同疗程安幽颗粒加克拉霉素、洛赛克。结果：组内比较：西药组治疗1周与治疗后相比，在总
症、主症积分方面均不存在统计学差异（P>0.05）；而中药组、中西药组治疗1周与治疗后在主症积分、总症积分方面
均存在统计学差异（P<0.01），主症积分、总症积分均有下降。组间比较：治疗1周时中药组与中西药组间在主症积
分方面存在统计学差异（P<0.05），而在总症积分方面不存在统计学差异（P>0.05）；治疗后主症、总症积分方面不存
在统计学差异（P>0.05）（P>0.05），中药组与西药组在治疗1周时主症总症积分、治疗后主症总症积分方面均存在
统计学差异（P<0.05，P<0.05，P<0.01，P<0.01）。西药组与中西药组在治疗1周时主症、总症积分，治疗后主症、总症
积分方面均存在统计学差异（P<0.01，P<0.01，P<0.01，P<0.01）。结论：中西药结合治疗能明显降低小儿H.Pylori相
关胃病中焦积热证主症、总症积分分值，改善临床症状；中药治疗疗效明显与疗程相关，疗程较长者疗效较好。
关键词：小儿；幽门螺旋杆菌；中西医结合；中焦积热症；症状体征积分；疗程
中图分类号：R256.3 文献标识码：B 文章编号：1673-842X (2011) 03- 0024- 04
收稿日期：2010-09-12
基金项目：国家中医药管理局中医药科学技术研究专项课题项目（04-05LQ02）
作者简介：王秀坤（1970-），女，山东人，副主任医师，硕士，研究方向：小儿脾胃病。
Changes of Symptom and Sign Integral and Relation to Course of Treatment with Three Method
Treating Childrens H. Pylori Gastropathy of Accumulation Symptom of Heat in Middle-Jiao
WANG Xiu-kun
（The Childrens Hospital Affiliated to Suzhou University，Suzhou 215005，Jiangsu，China）