全 文 ：文章编号:1001-5949(2003)05-0274-03 ·论　著·
薄层扫描法测定金莲清热胶囊中菝葜皂苷元的含量
丁建宝 ,李艳萍 ,张建民
　　[ 摘要] 　目的　建立金莲清热胶囊中菝葜皂苷元的含量测定方法。方法　以苯-氯仿-丙酮(5∶4∶1)为展开
剂 ,以香草醛硫酸乙醇溶液为显色剂 , 于λS=443nm 处进行扫描测定。结果　菝葜皂苷元点样量在 0.45-2.70μg
范围内 ,点样量与斑点峰面积呈良好线性关系 , 平均回收率为 100.19 , RSD为 2.14%。结论　本方法准确 、可靠 、
高效 、重现性好 , 可作为金莲清热胶囊质量控制方法。
[ 关键词] 　金莲清热胶囊;菝葜皂苷元;薄层扫描法
[ 中图分类号] 　R927.2　　[ 文献标识码] 　A
Assay of sarsasapogenin in jinlian qingre capsules by thin layer scanning chromatography
DING Jian -bao , LI Yan -ping , ZHANGJ ian-min.(Ningxia Qiyuan Pharmaceutical CO., LTD.Yinchuan 750002 , China)
[ Abstract] 　Objectives　To de termine the content of Sarsasapogenin in Jinlian Q ingre Capsules.Method　Thin lay er scanning
chromatography w as used , the mix ture of 5 volume of benzene , 4 volume of chloroform and 1 volume of acetone as the mobile phase,
the solution of mixture of sulfuric acid-alcohol and vanillin w as sprayed and the maximum wave at about of 443 nm was set to scan the
thin layer plate.Results　The volume of application was set at the range of 0.45μg to 2.70μg , the volume of application and the peak
area of spot have proper linearity relationship.The average recovery rate is 100.19% and the rela ted standard deviation coefficient is 2.
14%.Conclusions　This method has good accuracy , credit , efficiency and reproducibility so that it is appropriate to control the quality
of Jinlian Q inre Capsules.
[ Key words] 　Jinlian Qinre Capsules , Chinese plant extracts;Sarsasapogenin ;Thin layer scanning chromatography
　　金莲清热胶囊是由金莲花 、大青叶 、生石膏 、知
母等药材为原料加工制成的纯中药制剂 ,主要用于
治疗外感风热或风寒郁久化热引起的高热 、口渴 、咳
嗽 、咽痛等 ,以及流感和上呼吸道感染 。为控制该产
品的内在质量 ,研究建立了薄层扫描法测定金莲清
热胶囊中菝葜皂苷元含量的方法。
1　仪器与试药
1.1　仪器:CS-9301型薄层扫描仪(日本岛津)。
1.2　试药:金莲清热胶囊(宁夏启元药业有限公司 ,
批号为 20010809 、20021001 、20021002 、20021003);
菝葜皂苷元对照品(中国药品生物制品检定所);硅
胶G 板(青岛海洋化工集团公司);苯 、乙醇 、氯仿 、丙
酮 、等均为分析纯。
2　方法与结果
2.1　薄层色谱条件的确定:经过多种色谱条件的对
比试验 ,确定选用硅胶 G 薄层板 ,分别吸取对照品溶
液及样品溶液点于同一硅胶 G 薄层板上 ,以苯-氯
仿-丙酮(5∶4∶1)为展开剂 ,上行法展开 ,展距 8cm ,
取出 ,晾干 ,喷以显色剂甲液:取水 25ml ,缓慢加硫酸
　[作者单位] 宁夏启元药业有限公司 ,宁夏银川 750002
　[ 作者简介] 丁建宝 ,男(1970-), 宁夏籍 ,汉族 , 学士学位 , 工程师 ,
从事药物研制。
50ml ,放冷后 ,再加乙醇 25m l ,摇匀;乙液:8%香草醛
无水乙醇溶液。用时将甲液 5 份与乙液 1 份混合
后[ 1] ,在 70℃加热 7-10分钟 ,至斑点显色清晰 ,取
出 ,在薄层板上覆盖同样大小的玻璃板 ,周围用胶布
固定 ,照薄层色谱法(《中国药典》2000年版一部附录
VIB薄层扫描法)进行扫描测定 。
2.2　扫描条件的确定:在同一块硅胶 G 薄层板上 ,
分别点样品溶液 10μl与对照品溶液 4μl ,依上法展
开 ,在 365-700nm 范围内对菝葜皂苷元对照品斑点
和样品色谱中相应的斑点分别进行光谱扫描 ,结果
二者均在 443nm 处有最大吸收 ,故选择 λ=443nm
作为测定波长 ,见图 1。
确定扫描条件为:单波长反射法锯齿扫描 ,测定
波长λS=443nm ,狭缝 2.0 mm ×2.0mm ,线性参数
SX=3 ,扫描速度 20mm/min。
2.3　线性关系考察:对照品溶液的制备 精密称取
105℃干燥至恒重的菝葜皂苷元对照品 22.5mg ,加
苯制成每 1ml含 0.45mg 的溶液 ,作为对照品溶液 。
标准曲线的制备 精密吸取菝葜皂苷元对照品溶
液 1.0μl 、2.0μl、3.0μl 、4.0μl 、5.0μl、6.0μl分别点于
同一硅胶 G薄层板上 ,照前述色谱条件展开 ,扫描测
定 ,以点样量(X , μg)为横坐标 ,斑点吸收度积分值
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(Y)为纵坐标 ,进行线性回归 ,得方程 Y=1879.811X
-53.485 , r=0.9954。菝葜皂苷元标准品在 0.45-
2.70μg 之间 ,点样量与斑点吸收度积分值呈良好线
性关系。
1.金莲清热胶囊供试品　2.菝葜皂苷元对照品　3.知母药材
附图　金莲清热胶囊 、知母及菝葜皂苷元的 TLCS光谱图
2.4　样品溶液的制备:取本品内容物 1g ,精密称定 ,
加入乙醇 50ml ,称定重量 ,加热回流提取 45min ,放
冷 ,再称定重量 ,用乙醇补足减失的重量 , 摇匀 , 滤
过 ,精密量取续滤液 25ml ,加盐酸 2.5ml ,置水浴上
用蒸汽缓缓回流 1小时 ,浓缩至 10m l ,加水 20ml ,用
苯提取 5 次(30 , 30 , 20 , 20 , 20ml),合并苯提取液 ,蒸
干 ,残渣加苯溶解并转移至 2ml 量瓶中 ,加苯至刻
度 ,摇匀 ,即得。
2.5　空白对照试验:按处方比例及工艺制成知母阴
性样品 , 同样品溶液制备方法制成空白对照溶液。
将样品溶液 、空白对照溶液和菝葜皂苷元对照品溶
液点于同一硅胶 G 薄层板上 ,展开 ,扫描。在扫描图
中 ,样品与菝葜皂苷元对照品均在 443nm 处有最大
吸收峰 ,空白对照品 443nm 处无吸收峰 ,表明样品中
无干扰菝葜皂苷元测定的成分存在 ,该方法专属性
好。
2.6　稳定性试验:精密吸取金莲清热胶囊样品溶液
3μl ,依法展开后进行测定 ,之后每隔 20 分钟重复扫
描测定 。结果在放置 0 , 20 , 40 , 60 , 80 , 100 , 120min
时的测得量分别为 0.9962 ,0.9726 ,0.9573 ,0.9410 ,
0.9272 ,0.9031 ,0.8852μg ,平均值为 0.9404μg , RSD
为 3.80%。
从结果来看 ,测得量随着时间延续 ,逐渐降低 ,
呈现一定的衰减趋势 , 显色后的薄层板在放置
120min 时的测定结果较 0min 时的测定结果降低
11.14%,为保证测定结果的准确性 ,应保证样品在
薄层板展开 ,晾干 ,显色后 30min内测定。
2.7　精密度试验
2.7.1　同板精密度考察:吸取同一样品溶液 3μl ,在
同一硅胶G 薄层板上依次点 5个点 ,照“标准曲线”
项下操作 ,依法测定 。结果见表 1。
表 1　同板精密度考察结果
点次序 1 2 3 4 5
点样量(μl) 3.0 3.0 3.0 3.0 3.0
峰面积 0.9448 0.9137 0.9507 0.9363 0.9461
　　由以上测定结果可知 ,峰面积平均值为 0.9383 ,
RSD=1.57%,说明同板精密度良好 。
2.7.2　异板精密度考察:吸取同一样品溶液 3μl ,分
别点于 5块不同硅胶 G 薄层板上 ,同法进行操作 ,测
定 。结果见表 2。
表 2　异板精密度考察结果
点次序 1 2 3 4 5
点样量(μl) 3.0 3.0 3.0 3.0 3.0
峰面积 0.9912 0.9626 0.9784 0.9380 0.9405
　　由以上测定结果可知 ,峰面积平均值为 0.9621 ,
RSD=2.42%,说明异板精密度良好 。
2.8 　重现性试验:取同一批号样品(批号为
20010809)1g ,精密称定 ,参照 2.4样品溶液的制备
方法 ,重复操作 5份 ,按上述色谱条件及扫描条件测
定 ,以外标两点法计算菝葜皂苷元的含量。结果见
表 3 。
表 3　重现性考察结果
称取重量(g) 测得量(mg/g)
1.1075 1.087
1.0386 1.133
1.0921 1.149
1.1547 1.109
1.0908 1.136
1.0840 1.124
　　由以上测定结果可知 ,测得量平均值为 1.123 ,
RSD为 1.97%,说明该方法重现性良好。
2.9　回收率试验:取已测知菝葜找苷元含量的金莲
清热胶囊样品(已测得含量为 1.123mg/g)5份 ,每份
约 1.0g ,精密称定 ,分别精密加入一定量的菝葜皂苷
元对照品溶液 ,60℃烘干 ,参照 2.4样品溶液的制备
方法制备。分别精密吸取 3μl ,照”标准曲线”项下操
作 ,依法展开 ,扫描测定 ,结果见表 4。
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表 4　加样回收率试验结果
序号 称样量(g)
样品菝葜皂
苷元含量(mg)
加入菝葜
皂苷元量(mg)
测得菝葜
皂苷元量(mg)
回收率(%)
1 0.9074 1.019 0.450 1.474 101.11
2 0.8120 0.912 0.900 1.797 98.33
3 0.7084 0.796 1.350 2.181 102.59
4 0.6209 0.697 1.800 2.522 101.38
5 0.4963 0.557 2.250 2.752 97.56
　　由以上试验结果可知 , 平均加样回收率为
100.19%,RSD为 2.14%。
2.10　样品的含量测定:精密取对照品溶液 2μl 、6μl ,
样品溶液 4μl ,点于同一硅胶 G 薄层板上 ,按色谱条
件展开 , ,在薄层条件下测定 ,用外标两点法计算 ,结
果见表 5。
表 5　三批金莲清热胶囊中菝葜皂苷元含量测定结果
批号 金莲清热胶囊菝葜皂苷元含量(mg/粒)
20021001 0.35
20021002 0.38
20021003 0.32
平均 0.35
3　讨论
3.1　菝葜皂苷元的含量测定方法有 HPLC 法[ 2 , 3] 、
薄层扫描法[ 4 , 5] 、气相色谱法[ 6]等。本文参考《中国
药典》2000年版一部“知母”项下“含量测定”的方法 ,
建立了薄层扫描法测定金莲清热胶囊中菝葜皂苷元
含量的方法。该方法操作简便 ,准确可靠 , 重现性
好 ,可作为金莲清热胶囊的定量测定方法 。
3.2　对采用三批不同批次知母原料药材连续中试
生产的三批金莲清热胶囊的菝葜苷元含量进行了测
定 ,同时采用药典法对该三批知母药材的菝葜皂苷
元含量进行了测定 ,并根据测定结果 ,计算出转移率
为 61.72%。我们按照每粒胶囊相当于知母原生药
的量 0.375g , 乘以 1.0%, 再乘以平均转移率
61.72%,所得值为 0.23 ,将此值下浮 10%后的值为
0.208 ,据此规定金莲清热胶囊的含量限度标准为本
品每粒含知母以菝葜皂苷元(C27H44O3)计 ,不得少于
0.21g 。
[ 参考文献]
[ 1] 　国家药典委员会.中国药典 2000年版[ S] .北京:化学工业出版
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含知母制剂中葜皂苷元的含量[ J] .中草药 , 2001 , 32(10):889.
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苷元的含量[ J] .西北药学杂志 , 1998 , 13(6):246.
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[ 5] 　韩丽萍 ,赵树进 ,李俭洪 ,等.双波长薄层扫描法测定菝葜皂甙元
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[ J] .分析测试学报 , 1995 , 14(1):61.
[收稿日期] 2003-01-10　　[责任编辑] 马兴忠
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