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药
研
究
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抗痛风性关节炎中草药小叶菝葜根茎总皂苷含量的测
定
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★ 黄慧莲1 黄会平2 邵峰1 任刚1 王超1 刘科兰1 段锋1 刘荣华1＊＊ (1．江西中医学院现代制剂
教育部重点实验室 南昌 330004;2．江西省新干县界埠乡卫生院 新干 331300)
摘要:目的:首次建立小叶菝葜药材总皂苷的含量测定方法。方法:选用薯蓣皂苷元作为对照品，采用比色法，高氯酸显色，于
407 nm处测定吸光度。结果:薯蓣皂苷元在 0. 025 － 0． 125 mg范围内与吸光度呈良好的线性关系(r = 0． 999 9，n = 5) ，样品回
收率 99． 2%，RSD = 2． 88%(n = 9)。结论:该方法操作简便、易行，可用于小叶菝葜药材总皂苷含量测定。
关键词:小叶菝葜;总皂苷;薯蓣皂苷元;比色法
中图分类号:R 285． 5 文献标识码:A
Determination the Content of Total saponins in Smilax Mircrophylla C． H． Wright
HUANG Hui-lian1，HUANG Hui-ping2，SHAO Feng1，REN Gang1，WANG Chao1，LIU Ke-lan1，DUAN Feng1，LIU Rong-
hua1
1． Key Laboratory of Modern Preparation of TCM(Jiangxi University of Troditional Chinese Medicine) ，Ministry of Education，Nanchang
330004;
2． Jiebu Town of Xingan County Public Health Center，Xingan 331300
Abstract:Purpose:To establish a method for determination the content of total saponins in Smilax microphylla C． H． Wright． Methods:
Selecting diosgenin as control referance，the colorimetry was used，colorating with perchloric acid，determining absorbability in the point
of 407nm． Result:the linear range of dioscin was 0. 025 － 0． 125 mg(r = 0． 999 9，n = 5) ，the average recovery of the sample was 99．
2% with RSD = 2． 88% (n = 9)． Conclusion:The method was simple and easy． It can be used for determination the content of total sap-
onins in medicine Smilax microphylla．
Key words:Smilax microphylla C． H． Wright;Total saponins;Diosgenin;Colorimetry
小叶菝葜为百合科(Liliaceae)菝葜属植物小叶
菝葜 Smilax microphylla C． H． Wright 的根茎。又名
乌鱼刺、地茯苓藤，主产于华东及华南各省，该植物
在江西、湖南境内野生资源丰富。其味甘、苦，性平，
《全国中草药汇编》、《江西草药》、《湖南药物志》、
《贵州草药》、《陕西中草药》均记载有祛风活络，祛
痰止咳的功效，临床主要用于治疗痛风性关节炎、筋
骨疼痛、跌打损伤、腰肌劳损、支气管炎、肺结核咳嗽
咯血等疾患。菝葜属中草药普遍具有抗炎作用，并
且治疗关节炎效果显著［1 － 2］。现代药理研究表明，
口服小叶菝葜提取物可以明显促进高尿酸血症模型
大鼠的尿酸排泄，降低血液中的尿酸水平［3］。
迄今，尚未发现有关于小叶菝葜化学成分的相
关报道。文献报道显示菝葜属植物中的皂苷主要以
薯蓣皂苷元为母核［4］，其中薯蓣皂苷为代表性有效
成分。本文以薯蓣皂苷元作为对照品，采用比色法
对小叶菝葜中总皂苷的含量进行测定，首次为评价
该药材的质量奠定基础。
1 仪器与材料
1． 1 试验药材 小叶菝葜于 2009 年 10 月和 2010
年 3 月两次采集，由湖南吉首大学张代贵教授采集
并鉴定。薯蓣皂苷元对照品购自中国药品生物制品
检定所。
1． 2 试验试剂 香兰素(购自国药集团化学试剂
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江 西中医学院学报 2 0 1 0年 1 0月第 2 2卷第 5期
JOURNAL OF JIANGXI UNIVERSITY OF TCM2010 Vol. 22 No. 5
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基金项目:国家自然科学基金资助课题(编号:30960494)
通讯作者:刘荣华，男，博士，教授，以中药质量控制为研究方向，0791 － 7119010 e-mail:rhliu@ 163． com
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有限公司 批号:T20090807) ，无水乙醇、乙酸乙酯、
正丁醇、甲醇、高氯酸、冰醋酸等试剂均为分析纯。
1． 3 仪器设备 UV-2550 紫外 /可见分光光度计
(日本岛津公司) ，EYELA 旋转蒸发仪(上海爱郎仪
器有限公司) ，DLSB-5 /20 低温冷却液循环泵(郑州
长城科工贸有限公司) ，Sartorius万分之一和十万分
之一分析天平(德国赛多利斯公司)。
2 方法与结果
2． 1 供试品溶液的配制 精密称取小叶菝葜药材
粉末 1 g(过三号筛) ，置 100 mL 具塞锥形瓶中，加
入 60%的乙醇溶液 50 mL，超声(频率 100KHZ，水
温 40℃)提取 40min，抽滤，精密吸取续滤液 25 mL，
水浴挥干，残渣加水 10 mL，超声，使之溶解，再用 10
mL水润洗，合并溶液，移入 50 mL分液漏斗中，用乙
酸乙酯萃取 2 次，每次 20 mL，弃去乙酸乙酯层。水
液用水饱和的正丁醇萃取 3 次，每次 20 mL，合并正
丁醇液，旋转蒸发至干(水浴温 60℃) ，残渣加甲醇
溶解并定容到 25 mL。
2． 2 对照品溶液的配制 精密称取薯蓣皂苷元对
照品 12． 5 mg，加甲醇溶解并定容，制成每 1 mL 含
0． 5 mg的溶液。
2． 3 测定波长的选择 分别精密吸取对照品溶液
0． 1 mL，供试品溶液 0． 6 mL，水浴挥干，加高氯酸 5
mL，摇匀，于 70℃水浴加热 15 min，取出，流动水冷
却约 1 min，立即置于冷水浴中，摇匀，以试剂做空
白，在 200 － 760nm 波长范围内进行扫描，对照品与
供试品在 406 － 408 nm 均有最大吸收，选择测定波
长为 407nm，结果见图 1。
图 1 薯蓣皂苷元全波长扫描图
2． 4 显色剂的筛选 本试验分别对显色剂一:“5
mL的高氯酸”和显色剂二:“0． 2 mL 5%的香草醛—
冰醋酸溶液加 0． 8 mL 的高氯酸”，反应后加 4 mL
冰醋酸［5］进行了比较，每隔 10 分钟测定一次，测定
一小时，结果发现在 1 小时内两者的 RSD 值有明显
差异(显色剂一的 RSD 为 0． 29%;显色剂二的 RSD
为 7． 1%) ，显示用高氯酸显色更稳定，而且操作简
单易行，结果见图 2 和 3。
图 2 样品经高氯酸显色后吸光度变化
图 3 样品经香草醛-冰醋酸-高氯酸
显色后吸光度变化
2． 5 标准曲线的绘制 分别精密吸取对照品溶液
0. 00，0. 05，0． 10，0． 15，0． 20，0． 25 mL，置具塞试管
中，水浴挥干，精密加入高氯酸 5 mL，摇匀后同“2．
4”项下显色方法显色，以试剂做空白，于 407 nm 出
测定吸光度。以薯蓣皂苷元体积(mL)为横坐标，吸
光度(A)为纵坐标，绘制标准曲线，经线性回归。回
归方程为:Y = 3． 79X － 0. 0105，r = 0． 999 9(n = 5)薯
蓣皂苷元在 0. 025 ～ 0． 125 mg范围内具有良好线性
关系，结果见图 4。
图 4 薯蓣皂苷元对照品标准曲线
2． 6 精密度试验 精密吸取同一对照品溶液 6 份，
按“2． 4”项方法显色后测定，结果 RSD 为 0． 78%(n
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黄慧莲等:抗痛风性关节炎
中草药小叶菝葜根茎总皂苷含量的测定
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= 6) ，结果见表 1。
表 1 对照品精密度试验
编号 1 2 3 4 5 6 RSD
吸光度 0． 364 0． 371 0． 369 0． 372 0． 369 0． 367 0． 78%
2． 7 稳定性试验 精密吸取样品溶液 0． 6 mL，按
“2． 4”项显色后，每隔 10 min测定一次吸光度 A值，
共测 60 min，样品吸光度 RSD 为 0． 29%(n = 6) ，结
果见表 2。
表 2 样品 A、B稳定性试验
编 号 1 2 3 4 5 6 RSD
吸光度 0． 609 0． 611 0． 611 0． 612 0． 613 0． 614 0． 29%
2． 8 重复性试验 分别取样品 6 份，按“2． 1”项方
法制备供试品溶液，再按“2． 4”项方法显色后测定，
样品吸光度 RSD为 1． 7%(n = 6) ，结果见表 3。
表 3 样品 A、B重复性试验
编 号 1 2 3 4 5 6 RSD
吸光度 0． 506 0． 522 0． 512 0． 528 0． 529 0． 520 1． 7%
2． 9 加样回收率试验 取已知总皂苷含量的小叶
菝葜药材粉末 0． 5 g，精密称定，按低、中、高值分别
加入薯蓣皂苷元对照品溶液 3、5、7 mL，再加入 60%
的乙醇 50 mL，按“2． 1”项方法制备供试品溶液，再
按“2． 3”项方法测定，计算，结果见表 4、5。
表 4 样品加样回收率结果
序号 药材量(mg)
药材中总
皂苷量
(mg)
加入量
(mg)
总测得量
(mg)
回收率
(%)
平均值
(%)
RSD
(%)
1 0． 5009 2． 4845 1． 4592 3． 994 103． 5%
2 0． 5009 2． 4845 1． 4592 3． 962 101． 3%
3 0． 5008 2． 4840 1． 4592 3． 866 94． 7%
4 0． 5004 2． 4820 2． 4320 4． 890 99． 1%
5 0． 5003 2． 4815 2． 4320 4． 936 100． 9% 99． 2% 2． 88%
6 0． 5006 2． 4830 2． 4320 4． 957 101． 7%
7 0． 5008 2． 4840 3． 4048 5． 7591 96． 2%
8 0． 5005 2． 4825 3． 4048 5． 8233 98． 1%
9 0． 5005 2． 4825 3． 4048 5． 8020 97． 5%
2． 10 样品的测定 取不同采收期的小叶菝葜药材
粉末各三份，按“2． 1”项下方法制备供试品溶液，精
密吸取 0． 6 mL，置具塞试管中，水浴挥干溶剂，按
“2． 4”项下方法显色，进行测定，计算样品中总皂苷
的含量，结果见表 6。
表 6 不同采收期小叶菝葜总皂苷含量测定结果(n = 3)
批 号 样 品 含 量(mg·g － 1)
091001 10 月份采集样品 4． 96
100301 3 月份采集样品 4． 20
3 结论
(1)比色法是测定总皂苷含量的经典方法，但
它所显颜色会随显色温度和时间变化而变化，因此，
必须严格控制实验条件和操作的时间差，尽量消除
因操作产生的误差。
(2)本文将香草醛-冰醋酸-高氯酸反应的显色
法和高氯酸显色法两种方法进行了比较，两者之间
的颜色也有所不同。采用高氯酸比色法，显色后为
深黄棕色;采用香草醛-冰醋酸-高氯酸反应的比色
法，显色后为深紫红色。试验结果表明，高氯酸显色
后 1 小时内稳定，操作快速、简单，能够准确测定小
叶菝葜皂苷总量。
(3)通过对不同采收期的药材进行检验，发现
采集时间不同的药材中所含总皂苷的含量有所不
同，其含量与采集时间的相关性有待进—步研究。
另外，植物茎和叶中所含的总皂苷量也有待测定。
参考文献
［1］Shu XS，Gao ZH，Yang XL． Anti-inflammatory and anti-nociceptive
activities of Smilax china L． aqueous extract［J］． Journal of Ethno-
pharmacology． 2006，103:327 – 332．
［2］Ageel A，Mossa J，al-Yahya M，etc． Experimental studies on antirheu-
matic drugs used in Saudi traditional medicine［J］． Drugs under Ex-
perimental and Clinical Research，1989，15，369 － 372．
［3］Giachetti D，Taddei I，Taddei E． Effects of Smilax macrophylla Vers．
in normal or hyperuricemic and hyperuricosuric rats［J］． Pharmacol
Res Commun． 1988，20 (Suppl 5) :59 － 62．
［4］邓家刚，陈壮．金刚藤活性成分与药效学及临床应用研究［J］．
河南中医学院学报，2005，20 (3) :23 － 24．
(收稿日期:2010-07-29
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专题征稿
《江西中医药》为中医药核心期刊，新设重点栏目《明医心鉴》，以介绍名老中医经验
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尿病、老年痴呆、高血压、中风、盆腔炎、萎缩性胃炎、癌症疼痛。欢迎广大中西医临床工作
者不吝赐稿。
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江西中医学院学报 2010 年第 22 卷第 5 期