全 文 ：2.3　线性关系考察
取对照液 1 ,分别精密量取 1 、2 、3 、4 、5 、6 、7ml ,
置250ml 量瓶中 ,用 0.04%氢氧化钠溶液稀至刻
度。在λ、λ 波长处分别测定上述溶液的吸收度 ,求
出各自的吸收度差值(ΔA),以 ΔA 对浓度 C 回归 ,
得线性方程 ΔA=0.03739C+0.003671 r=0.9998
(n =7),说明在 1 ～ 7μg/ml浓度范围内 ,线性关系
良好 。
2.4　稳定性试验
取对照液 2 ,每隔 1h测定一次 ΔA ,连续 6h ,结
果 ΔA基本不变 ,即表明测定液至少在 5h内稳定 ,
平均 RSD为 0.23%, n=6。
2.5　回收率试验
取已知含量的快克内容物 ,混匀 、研细 ,精密称
取适量(约相当于对乙酰氨基酚 12.5mg)6份 ,分别
精密加入对乙酰所基酚对照品 12.5mg ,置100ml量
瓶中 ,加盐酸溶液(稀盐酸 24ml加水至 1000m l)充
分振摇使溶解并稀释至刻度 ,摇匀 ,过滤;精密量取
续滤液2ml ,置 100ml量瓶中 ,用0.04%氢氧化钠溶
液稀释至刻度 ,摇匀 。取该溶液及对照液 2 ,按“2.2
及 2.3”项下操作 ,平均回收率结果见表 1。
2.6　样品的测定
取供试品液 ,按“2.5”项下操作 ,结果见表 2。
表 1　回收率试验结果(n =5)
编号 加样量(mg)
测得量
(mg)
回收率
(%)
平均回收
率(%) RSD(%)
1 12.57 12.49 99.36
2 12.08 11.94 98.84
3 12.35 12.24 99.11 99.4 0.43
4 12.29 12.22 99.43
5 12.23 12.23 100.0
表 2　样品含量测定结果(标示量%, n=2)
批号 本法 重氮化法
20010301 101.4 101.9
20010302 101.9 102.0
20010303 101.3 101.9
参考文献
1 卫生部药品标准(1996)第五册
2 杨冬青.速效伤风胶囊中对乙酰氨基酚的双波长分光光度
测定.中国医药工业杂志.1999 , 30(10):460
3 中国药典(2000 年版二部).2000:207
(收稿日期:2001-04-04;修回:2001-07-30)
·中药及天然药物·
薄层扫描法测定知母总皂苷元中菝葜皂苷元的含量
王志安　冯开东　梁卫文　赵邦爱(深圳太太药业股份有限公司　广东 518057)
摘要 　用薄层扫描法测定知母总皂苷元中菝葜皂苷元的含量 ,方法简便 、快速 、重现性好 ,回收率为
98.92%, RSD为 2.44%。
关键词　知母总皂苷元　菝葜皂苷元　薄层扫描法　含量测定
中图分类号:R927.2　文献标识码:A　文章编号:1007-9939(2001)05-0014-03
　　知母为百合科植物知母 Anemarrhena asphode-
loides Bge.的干燥根茎 。具有清热泻火 ,生津润燥 ,
止渴除烦作用[ 1、2] 。知母总皂苷元是知母药材经水
解提取知母总皂苷 ,水解得到的总皂苷元精制而成 ,
能明显降低衰老小鼠脑 β受体-cAMP 系统的反应
性 ,重现知母的下调作用[ 3] ,并且能提高衰老小鼠
脑内受体密度[ 4] ,菝葜皂苷元是其主要有效成分之
一 ,深圳太太药业股份有限公司已将知母总皂苷元
开发制成制剂(中药二类新药),主治早 、中期老年性
痴呆症及脑功能减退(学习 、记忆减退 ,或某些性格
改变)。为控制该产品的内在质量 ,采用薄层扫描法
测定了知母总皂苷元中菝葜皂苷元的含量 ,本法简
单 、快速 、重现性好 ,结果满意。
1　实验部分
1.1 　仪器与试药 　仪器为 SHIMADZU CS -
9301PC薄层扫描仪 ,定量毛细管(美国进口),硅胶
G预制板(Merck),菝葜皂苷元对照品(中国生物制
品检定所提供),知母总皂苷元(深圳太太药业股分
有限公司制备),试剂均为分析纯 。
1.2　对照品溶液的制备　取菝葜皂苷元对照品 ,精
密称定 ,加苯制成每 1ml含 0.5mg 的溶液 ,作为对
照品溶液。
1.3　供试品溶液的制备　取本品粉末适量 ,精密称
·14· 广 东 药 学　2001年第 11卷第 5期
定 ,加苯制成每 1ml含 0.5mg 的溶液 ,作为供试品
溶液 。
1.4　薄层层析条件及扫描参数的测定　硅胶 G 预
制板 ,以苯-丙酮(9∶1)为展开剂 ,上行展开 ,展距约
7cm ,取出晾干 ,喷以显色剂〔(1)取水 25ml ,缓慢加
硫酸 50ml ,放冷后 ,再加乙醇 25ml ,摇匀;(2)8%香
草醛无水乙醇溶液;用时将(1)(2)两液按 5∶1混合 ,
冰箱中保存〕后 ,在 70℃加热 7 ～ 10min ,至斑点显色
清晰 ,取出 ,在薄层板上覆盖同样大小的玻璃板 ,周
围用胶布固定 ,用薄层扫描仪进行扫描 ,波长:λs =
443nm ,λR=700nm 测量供试品吸收度积分值与对
照品吸收度积分值。
1.5　线形关系考察　分别精密吸取对照品溶液
0.5 、2 、4 、8 、12 、16μl分别点于同一硅胶 G 预制板
上 ,依法展开 、显色 、扫描测定吸收度积分值 ,以吸收
度积分值为纵坐标 ,以菝葜皂苷元量为横坐标绘制
标准曲线 ,计算回归方程及相关系数:线性回归方程
为 Y=4632.6X+525.16;r=0.997。在 0.176 ～
5.632μg 范围内点样量与峰 面积有良好的线性关
系。由于回归曲线未过原点 ,所以含量按外标二点
法计算含量。
1.6　稳定性试验　取知母总皂苷元供试品溶液样
品 ,依法点样 4μl ,展开 ,显色 ,扫描 ,每间隔 0.5h测
定一次 ,结果证明菝葜皂苷元在 1.5h内测定结果均
稳定 ,四次测定斑点吸收度积分值 RSD为 0.4%。
1.7　精密度试验
1.7.1　仪器精密度试验:取供试品溶液 ,依法点样
4μl ,展开 ,显色 ,扫描 ,测定同一斑点吸收度积分值 ,
共测 5次 , RSD为 0.2%。
1.7.2　同板精密度试验:取同一供试品溶液 ,依法
点样 5μl于同一块薄层板上 ,共点 7个点 ,依法测定
7个斑点吸收度积分值 , RSD为 2.4%。
1.7.3　异板精密度试验:取对照品溶液及同一批供
试品溶液 ,照含量测定法 ,分别交叉点样于 5块薄层
板上 ,测定供试品中菝葜皂苷元含量 ,结果 RSD为
2.8%。结果证明有良好精密度 。
1.8　重复性试验　取同一批供试品 ,称取5份 ,按含量
测定法测定 ,结果菝葜皂苷元含量分别为 71.7%、
75.0%、75.3%、77.1%、74.9%,平均74.8%,重复性试
验结果良好 ,5次测定结果 RSD为 2.6%。
1.9　回收率试验　采用加样回收法 。定量称取同
一批已知含量(74.0%)的供试品 5 份 ,精密加入定
量菝葜皂苷元对照品 ,依法测定 ,计算回收率 , 5份
测定结果见表 1。
表 1　菝葜皂苷元含量测定回收率试验结果
序号 样品称样量(mg)
样品中菝葜皂
苷元量(mg)
添加菝葜皂
苷元量(mg)
测出菝葜皂
苷元量(mg) 回收率(%) 平均值(%) RSD(%)
1 23.43 17.34 18.82 36.10 99.70
2 26.31 19.47 18.82 37650 95.82
3 22.70 16.80 18.82 35.90 101.49 98.92 2.44
4 24.65 18.24 18.82 36.50 97.01
5 23.60 17.47 18.82 36.40 100.60
1.10　样品测定　吸取供试品溶液 4μl ,对照品溶液
2μl及 6μl分别交叉点于同一薄层板上 ,按上述方法
展开 、显色 、扫描测定各斑点吸收度积分值 ,用外标
两点法测定供试品含量 ,共测定了 6批供试品中菝
葜皂苷元含量。结果分别为 77.3%、78.5%、
78.9%、76.3%、75.8%、76.8%。
2　讨论
2.1　知母总皂苷元为知母药材经提取知母总皂苷 ,
水解后提取总皂苷元进一步纯化制得。主要成分为
菝葜皂苷元(3β -OH , 5β -H , 25s -CH3 -spiper-
one),另含有部分其它皂苷元如异菝葜皂苷元及一
些脂溶性成分。因菝葜皂苷元为主要的有效成分 ,
而且含量高 、结构清楚 、性质稳定 ,所以选择菝葜皂
苷元作含量测定指标成份 。菝葜皂苷元含量测定方
法主要有薄层扫描法 、高效液相色谱法和气相色谱
法 。由于菝葜皂苷元没有紫外吸收 ,所以高效液相
色谱仪中紫外检测器不能使用 ,需用差示折光检测
器或其它特殊检测器 ,这些检测器并非常规配置 ,另
外也可将样品转化为衍生物 ,但转化率不易控制且
操作复杂 ,限制了此方法的推广;气相色谱法中 ,由
于菝葜皂苷元分子量较大(416),气化温度高 ,研究
证明会产生裂解导致杂峰 ,降低温度又易造成色谱
柱污染 ,需经常冲洗 ,使色谱柱寿命降低 ,故也不是
太好的方法;薄层扫描法简单 、重现性好 ,而且中国
药典(2000年版一部)知母药材项下亦采用薄层扫
描法测定药材中菝葜皂苷元含量 ,故选用薄层扫描
法作为测定知母总皂苷元中菝葜皂苷元的定量方
法 。
·15·广 东 药 学　2001年第 11卷第 5期
2.2　知母总皂苷元及菝葜皂苷元亲脂性非常强 ,所
以供试品及对照品能完全溶解于苯中。
2.3　菝葜皂苷元在展开后应充分挥干溶剂 ,显色时
喷雾应均匀 ,烘干时应控制显色时间 ,显色后应覆盖
同样大小的玻璃板 ,四周以胶布封口 ,以免斑点褪
色 ,保证测定结果的准确性。
参考文献
1 黄泰康.常用中药成分与药理手册.中国医药出版社 ,
1994:1240
2 国家中医药局.中华本草.上海科技出版社 , 1998:2023
3 丁元生 ,等.核技术.1991 ,(5):256
4 胡雅儿 ,等.中药药理与临床.1994 ,(2):10
(收稿日期:2001-07-30;修回:2001-08-28)
HPLC法测定上清丸中黄芩苷的含量
王振南　张俊雄(梅州市药品检验所　广东 514021)
摘要　用 HPLC法对上清丸中黄芩苷进行含量测定 ,采用 Shimpack C[ 18]柱 ,磷酸二氢铵溶液:甲醇(40:60)
为流动相 ,检测波长 278nm 。黄芩苷在 1.81 ～ 9.07μg 之间呈良好的线性关系 ,回收率为 98.6%, RSD为
1.3%。本方法分离度好 ,可用于上清丸质量控制 。
关键词　上清丸　黄芩苷　HPLC法
中图分类号:R282.7;R927.2　文献标识码:A　文章编号:1007-9939(2001)05-0016-02
　　上清丸为传统的中药制剂 ,由黄芩 、连翘等中药
组成 ,具有清热散风 、解毒 、通便功效 。收载于卫生
部药品标准中药成方制剂(第十册),原标准未建立
黄芩苷的含量测定方法。黄芩苷的含量测定在药
材[ 1]及其他成药中[ 2] 有报道 。本试验使用甲醇超
声处理 ,直接进行 HPLC测定黄芩苷含量。该法分
离度好 ,稳定性佳 ,平均加样回收率 98.6%, RSD=
1.3%,可用于上清丸中黄芩苷的含量测定。
1　仪器与试剂
日本岛津 LC -10AD泵 ,SPD-10A紫外检测
器 ,黄芩苷对照品由中国药品生物制品检定所提供 。
流动相甲醇为色谱纯 ,样品由广东兴宁明珠药业有
限公司提供。
2　实验条件
色谱柱Shimpack C18(6.0×150mm),流动相:
磷酸二氢铵溶液(取磷酸二氢铵 2.88g ,加水溶解成
1000ml ,并以磷酸调节至pH3.0)-甲醇(40:60),流
速 1.0m l/min ,检测波长 278nm ,测得黄芩苷对照品
与样品色谱图见图 1。
3　方法与结果
3.1　线性范围:精密称取黄芩苷对照品 5.67mg ,置
25ml量瓶中加 50%甲醇溶解并至刻度 、摇匀 ,精密
吸取 0.2 、0.4 、0.6 、0.8 、1.0ml于 25ml 量瓶中 ,加
50%甲醇至刻度 ,摇匀 ,取上述对照品溶液分别进样
20μl ,以对照品浓度C 为横坐标 ,相应峰面积为纵坐
标 ,作线性回归 ,得回归方程 A=10880.76+90685.
69C , r=0.9998 ,结果表明黄芩苷对照品在 1.814 ～
9.072μg/ml浓度范围内线性良好。
3.2　精密度试验
精密吸取对照品溶液 20μl ,注入色谱仪 ,重复测
定 6次 ,结果见表 1 ,RSD=0.28%(n=6)。
3.3　稳定性:将测定后的对照品溶液放置 5h后测
定相应峰面积及保留时间基本不变。
图 1　HPLC 图谱
A 对照品　B 样品　1 黄芩苷
表 1　精密度测验
序号 1 2 3 4 5 6 RSD(%)
峰面积 832568 826843 828425 826936 830765 831148 0.28
·16· 广 东 药 学　2001年第 11卷第 5期