全 文 ：收稿日期:2011-07-10; 修订日期:2011-10-28
基金项目:国家药品标准提高研究项目(No． 172)
作者简介:张志勇(1977-) ，男(汉族) ，贵州贵阳人，现任贵州省食品药品
检验所主管药师，学士学位，主要从事药品检验工作．
天冬中菝葜皂苷元含量的双波长薄层扫描测定
张志勇，熊慧林，茅向军
(贵州省食品药品检验所，贵州 贵阳 550004)
摘要:目的 建立天冬中菝葜皂苷元含量测定方法。方法 对样品的提取条件和色谱条件进行研究，采用双波长薄层扫描
分析，检测波长 λs = 445nm，λR = 700nm。结果 菝葜皂苷元在 0． 250 2 ～ 3． 502 8μg 线性关系良好，平均回收率97． 62%，
RSD为 2． 2%。结论 该方法操作简便，结果稳定可靠，可作为该药材的定量分析方法及质量评价。
关键词:天冬; 双波长薄层扫描; 菝葜皂苷元
DOI标识:doi:10． 3969 / j． issn． 1008-0805． 2012． 01． 040
中图分类号:R284． 2 文献标识码:B 文章编号:1008-0805(2012)01-0093-01
天冬又名天门冬，为百合科植物天冬 Asparagus cochinchinen-
sis (Lour．)Merr．的干燥块根。天冬具有养阴润燥，清肺生津，用
于肺燥干咳，顿咳痰黏，咽干口渴，肠燥便秘。据报道［1，2］，天冬
中主要化学成分为糖类、氨基酸、甾体皂苷等，其中甾体皂苷是以
菝葜皂苷元、薯蓣皂苷元、萨尔萨皂苷元、雅姆皂苷元等为其苷
元。2010 版《中国药典》天冬项下只有鉴别和检查项，没有含量
测定［3］。因菝葜皂苷元无紫外吸收，笔者参照相关文献资
料［4 ～ 8］，采用双波长扫描对天冬中菝葜皂苷元进行测定，并对测
定的方法进行研究。
1 仪器与试药
岛津 CS － 9301 型薄层扫描仪;KM51 自动点样器;AE200 电
子分析天平(METFLER)。菝葜皂苷元对照品由中国药品生物制
品检定所提供，供含量测定用(批号 110744 － 200509) ;预制硅胶
G薄层板(青岛海洋化工厂) ;其它试剂为分析纯。17 批样品均
由全国各药检所提供，并由贵州省药品检验所熊慧林主任药师鉴
定。
2 方法与结果
2． 1 对照品溶液的制备 精密称取五氧化二磷减压干燥至恒重
的菝葜皂苷元对照品适量，加甲苯，制成每毫升含 0． 5 mg 的溶
液，作为对照品溶液。
2． 2 供试品溶液的制备 取本品切成薄片，80℃干燥 6 h 后，打
粉，取本品粉末(过 3 号筛)约 4 g，精密称定，置具塞锥形瓶中，加
甲醇 60 ml，水浴回流 1． 5 h，放冷，滤过，用适量的甲醇洗残渣和
滤器，合并滤液和洗液于同一具塞锥形瓶中，水浴中蒸干，加 2
mol /L的盐酸溶液 25 ml，水浴中水解 1． 5 h，取出，加入 40 ml 甲
苯，振摇后移入分液滤斗中，静置，分层，分取甲苯层，再用甲苯提
取 3 次(30，25，20 ml) ，合并提取液，水浴蒸干，残渣加甲苯溶解，
转入 5 ml的容量瓶中，加甲苯至刻度，摇匀，放置，取上清液作为
供试品溶液。
2． 3 薄层色谱条件 展开剂:甲苯 －丙酮(9∶ 0． 8)和甲苯。展
开方式:先用甲苯 －丙酮(9∶ 0． 8)为展开剂，上行展开，展距约 8
cm，取出，晾干，再以甲苯为展开剂，展开相同距离，取出，晾干。
显色剂:甲液:取水 25 ml，缓慢加硫酸 50 ml，放冷，再加乙醇 25
ml，摇匀;临用时取 0． 4 g香草醛加无水乙醇 5 ml，再加甲液 25 ml
搅拌混匀。在 70℃加热 7 ～ 10 min，至斑点显色清晰，取出，在薄
层板上覆盖同样大小的玻璃板，周围用胶布固定进行薄层扫描。
2． 4 扫描条件 双波长反射法扫描。扫描波长:λs = 445 nm，
λR = 700 nm。散射系数:3;步进:0． 1 mm。
2． 5 标准曲线与线性范围 精密称取五氧化二磷减压干燥至恒
重的菝葜皂苷元对照品 15． 51 mg，置 25 ml 容量瓶中，加甲苯稀
释至刻度，摇匀，作为对照品溶液;分别精密吸取上述菝葜皂苷元
对照品溶液 0． 5，1． 0，2． 0，4． 0，7． 0 μl点于同一硅胶板上，按上述
条件测定，以对照品溶液点样量(μg)为横坐标，峰面积为纵坐标
计算菝葜皂苷元的回归方程 Y = 227． 362 704 8X － 23． 352 686 17
(r = 0． 999 0) ，菝葜皂苷元在 0． 250 2 ～ 3． 502 8 μg 范围内具有良
好的线性关系。
2． 6 精密度实验 精密吸取菝葜皂苷元对照溶液(0． 500 4 mg /
ml)2 μl分别在同一板上点 6 个点和在 6 块板上分别点样，菝葜
皂苷元峰面积积分值相对标准偏差(RSD)同板为 1． 44%(n =
6) ;异板为 2． 03%(n = 6) ，结果表明有良好精密度。
2． 7 重复性实验 取同一批样品，分别精密称取 6 份，每份约 4 g
照上述供试品溶液方法制备，分别测定，计算含量，6 份样品菝葜
皂苷元含量测定平均值质量分数为 0． 0312%，RSD为 1． 71%，说
明重现性良好。
2． 8 稳定性实验 每隔 10 min对同一斑点进行扫描测定菝葜皂
苷元峰面积值，相对标准偏差 1． 23%，结果表明样品斑点在 60
min内稳定性良好。
2． 9 回收率实验 采用加样回收试验，取以知含量的样品 6 份，
每份 2 g精密称定;再精密称定菝葜皂苷元对照品 15． 86 mg 于
25 ml的量瓶中，加甲醇至刻度，于每份样品中加入 1 ml 上述菝
葜皂苷元对照品溶液挥干后按上述方法提取点样，计算测得回收
率。平均回收率 97． 62%，RSD为 2． 2%(n = 6)。
2． 10 样品的测定 按上述测定，不同产地的 13 批样品中菝葜皂
苷元的含量测定。结果见表 1。
表 1 不同产地的天冬中菝葜皂苷元含量测定结果 %
产地 菝葜皂苷元含量* 产地 菝葜皂苷元含量*
贵州(黔东南) 0． 031 2 广西(桂林) 0． 006 7
青海(河湟) 0． 051 6 贵州(安顺) 0． 004 6
天津 0． 027 6 四川 0． 027 8
湖北 0． 032 4 福建 0． 026 3
贵州(水城) 0． 002 8 浙江 0． 012 6
厦门 0． 033 8 广西 0． 003 5
成都 0． 032 0 山东 0． 006 5
青岛 0． 007 6 陕西 0． 008 4
深圳 0． 007 1 宁夏 0． 020 1
江苏 0． 021 0
* 以干燥品计;n = 2
3 讨论
比较水浴上回流和超声两种提取方法所得结果证明水浴上
回流提取较高。比较了回流 1，1． 5 和 2 h等 3 种方法，所得结果
证明回流 1． 5 h即可将菝葜皂苷元较完全地提取出来。
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LISHIZHEN MEDICINE AND MATERIA MEDICA RESEARCH 2012 VOL ． 23 NO． 1 时珍国医国药 2012 年第 23 卷第 1 期
通过对斑点的光谱扫描(370 ～ 700 nm) ，最大吸收为 445
nm，因此确定为 λs = 445 nm。用 λs = 445 nm单波长发现基线不
稳，峰形不好，所以选择最低吸收 700 nm 作为参比波长，消除显
色背景的干扰，这样所得的扫描图基线平稳，峰形较好。
通过笔者的反复试验，以甲苯 －丙酮(9∶ 0． 8)和甲苯为展
开剂，二次分别展开，得到菝葜皂苷元斑点能与其它斑点分离完
全，分离度符合要求。
参考文献:
［1］ 徐从立，陈海生，谭兴起．中药天冬的化学成分研究［J］． 天然产物
研究与开发，2005，7(2) :128．
［2］ 沈 阳，陈海生，王 琼．天冬化学成分研究(Ⅱ) ［J］．第二军医大
学学报，2007，28(11) :1241．
［3］ 国家药典委员会． 中国药典，Ⅰ部［M］． 北京:化学工业出版社，
2010:52．
［4］ 余伯阳，罗向东，徐 颖． 天冬类药材中洋菝葜皂苷元的含量测定
［J］．中药材，2001，24(8) :577．
［5］ 李 敏，费 曜，王 琦． 天冬中菝葜皂苷元含量测定方法的探讨
［J］．现代中药研究与实践，2004，18(4) :34．
［6］ 马长华，钱 捷．知母中菝葜皂苷元含量测定［J］．中成药，2000，22
(11) :804．
［7］ 任爱农，季锡忠，农湘鸿． 知母中菝葜皂苷元含量测定方法探讨
［J］．中成药，2000，22(2) :171．
［8］ 杨 云，张 晶，张玉亭．天然药物化学成分提取分离手册［M］．北
京:中国中医药出版社，2003:106．
收稿日期:2011-07-26; 修订日期:2011-10-31
基金项目:广东省科技计划社会发展类项目(No． 2010B030700058)
作者简介:王春怡(1979-) ，女(汉族) ，安徽合肥人，现任广州中医药大学
中药学院讲师，博士学位，主要从事药物制剂研究工作．
* 通讯作者简介:高 英(1956-) ，女(汉族) ，河北高邑人，现任广州中医
药大学新药研究开发中心研究员，硕士研究生导师，学士学位，主要从事
新药研究与开发工作．
黄芪总皂苷提取物的质量标准研究
王春怡，叶雪兰，李卫民，高 英*
(广州中医药大学，广东 广州 510006)
摘要:目的 建立黄芪总皂苷提取物的质量标准。方法 采用薄层色谱法进行定性鉴别。对黄芪总皂苷提取物的干燥失
重进行测定。紫外分光光度法测定黄芪总皂苷的含量。高效液相色谱 －蒸发光散射法测定黄芪甲苷的含量。结果 定
性鉴别薄层色谱特征明显，专属性强，黄芪总皂苷提取物干燥失重不得过 5%，黄芪总皂苷以黄芪甲苷(C41H68 O14)计，不
得少于 50%，黄芪甲苷含量不得少于 2． 8%。结论 该方法准确方便，能较全面地控制黄芪提取物总皂苷提取物的质量。
关键词:黄芪总皂苷提取物; 质量标准; 薄层色谱法; 紫外分光光度法; 高效液相色谱 －蒸发光散射法
DOI标识:doi:10． 3969 / j． issn． 1008-0805． 2012． 01． 041
中图分类号:R284． 1 文献标识码:B 文章编号:1008-0805(2012)01-0094-03
黄芪为豆科植物蒙古黄芪 Astragalus membranaceus (Fisch．)
Bunge var． mongholicus (Bunge)H siao 或膜荚黄芪 A． membrana-
ceus (Fisch．)Bunge 的干燥根。黄芪，首见于《神农本草经》，称
黄芪为戴糁，至《纲目》始称黄芪，性微温，味甘，归肺、脾经，具有
补气升阳、益卫固表、托毒生肌、利水退肿之功效［1］。黄芪是补
气的要药，也具有活血、抗氧化等多种药理活性，它在防治糖尿病
并发症上有很好的疗效，历代医家均用之治“消渴”。据统计表
明在治疗糖尿病的处方中，黄芪单味药的使用率最高［2］。
黄芪的化学成分主要有皂苷类、多糖和黄酮类等［3］，目前对
黄芪有效部位的研究主要集中在皂苷类和多糖类，皂苷类成分主
要有黄芪皂苷Ⅰ ～ Ⅷ(astragalosideⅠ ～ Ⅷ) ，乙酰基黄芪皂苷
(acetylastragaloside) ，异黄芪皂苷Ⅰ、Ⅱ、Ⅳ(isoastragalosideⅠ、
Ⅱ、Ⅳ) ，大豆皂苷Ⅰ(soyasaponinⅠ)等。除大豆皂苷Ⅰ、黄芪皂
苷Ⅷ外，其余均以 9 － 19 －环羊毛脂烷型的四环三萜皂苷类为苷
元，总称为黄芪皂苷或黄芪总皂苷，其中黄芪皂苷 IV是黄芪中主
要活性成分之一。本课题在前期优化黄芪总皂苷有效部位提取、
纯化的工艺基础之上，进一步对获得的有效部位提取物进行质量
标准研究，采用 10 个批次符合药典质量要求的黄芪，按照提取、
纯化工艺分别制备了 10 批黄芪总皂苷提取物，并参照《中国药
典》2010 版Ⅰ部三七总皂苷质量标准相应项制定，对其制法、性
状、鉴别、检查、含量测定等项进行规定，初步建立其质量标准，为
规范其作为制剂原料和提取、纯化工艺在生产中的推广应用提供
依据。
1 材料
1． 1 仪器 Sartorius BS 110S 精密天平;KQ3200DE型医用数控超
声仪;RE － 2000 旋转蒸发器，上海亚荣生化仪器厂出品;WFH －
203B三用紫外分析仪;unic uv － 2100 紫外分光光度计;岛津 LC
－10AT vp Plus高效液相色谱仪，包括:二元泵，柱温箱;Alltech
ELSD 800 蒸发光散射检测器;Phenomenex 预柱。
1． 2 试剂与材料 黄芪甲苷对照品，中国药品生物碱制品检定
所，批号:07812200512;天津海光化工厂 AB － 8 型大孔树脂;德国
Merck公司色谱甲醇、色谱乙腈;其他试剂均为分析纯。
1． 3 药材来源 黄芪药材分别购于安徽、河北、广东等地，经广州
中医药大学新药中心高英教授鉴定为豆科植物膜荚黄芪 A． mem-
branaceus (Fisch．)Bunge的干燥根(产地及来源见表 1)。对 10
批黄芪药材进行总皂苷和黄芪甲苷的含量测定［4］。结果表明 10
批药材黄芪甲苷含量均符合《中国药典》要求。
表 1 黄芪样品来源
样品号 样品来源 产地 规格 收集时间
1 安徽亳州药材市场 甘肃 个子货 2007 － 08
2 河北安国药材市场 甘肃 个子货 2007 － 07
3 安徽亳州药材市场 甘肃 个子货 2007 － 08
4 河北安国药材市场 内蒙古 饮片 2007 － 07
5 广州清平药材市场 内蒙古 饮片 2007 － 04
6 广州清平药材市场 山西 饮片 2007 － 04
7 广州采芝林大药房 山西 饮片 2007 － 09
8 河北安国药材市场 河北 个子货 2007 － 07
9 广州健泽药业 山西 饮片 2008 － 09
10 广州健泽药业 山西 饮片 2008 － 11
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时珍国医国药 2012 年第 23 卷第 1 期 LISHIZHEN MEDICINE AND MATERIA MEDICA RESEARCH 2012 VOL． 23 NO． 1