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不同温度对滇重楼光合作用及有效成分含量的影响



全 文 :2015 年 10 月 第 17 卷 第 10 期 中国现代中药 Modern Chinese Medicine Oct. 2015 Vol. 17 No. 10
·中药农业·
△[基金项目] 云南省高新技术产业发展项目计划项目(云发改高技 20121956) ;国家自然基金项目(31260075) ;云南省自然基
金(2012FB146) ;云南省教育厅重点项目(2013Z031)
*[通信作者] 杨生超,教授,研究方向:药用植物学;E-mail:shengchaoyang@ sohu. com
不同温度对滇重楼光合作用及有效成分含量的影响

刘涛,王玲,李玛,杨生超*
(云南农业大学,云南 昆明 650201)
[摘要] 目的:探究不同温度对滇重楼光合作用及根茎中有效成分含量的影响。方法:采用 3 种不同温度(22
℃ /15 ℃、28 ℃ /25 ℃、32 ℃ /28 ℃;人工气候箱,16:8,L:D)处理滇重楼,各重复 3 个,生长 6 个月测定其开
花期阶段叶片的光合特性及根茎中有效成分含量的变化。结果与结论:不同温度对滇重楼的光合特性及根茎有效成
分的含量均有显著影响,其中 22 ℃ /15 ℃处理不仅有利于滇重楼甾体皂苷的积累,也利于其光合作用。该结果为生
产上滇重楼药材质量的提高提供了一定的理论参考。
[关键词] 滇重楼;温度;光合作用;有效成分
Effects of Different Temperature on Photosynthesis and Effective Components of
Paris polyphylla var. yunnanensis
LIU Tao,WANG Ling,LI Ma,YANG Shengchao*
(Yunnan Agricultural University,Kunming 650201,China)
[Abstract] Objective:To explore the influence of different temperature on the photosynthesis and content of effective
components in Paris polyphylla var. yunnanensis. Methods:P. polyphylla var. yunnanensis was treated with three different
temperature(22 ℃ /15 ℃、28 ℃ /25 ℃、32 ℃ /28 ℃,artificial climate box,16:8,L:D). The photosynthesis and
content of effective components were determined in flowering leaf stage after 6 months periods. Results and Conclusion:The
results showed that the different temperature significantly influenced the photosynthesis and content of effective components in
P. polyphylla var. yunnanensis. 22 ℃ /15 ℃ process not only greatly induced P. polyphylla steroidal saponins accumulation,but
also the photosynthesis. The results provide a theoretical reference for quality improvement of P. polyphylla var. yunnanensis
production.
[Keywords] Paris polyphylla var. yunnanensis;temperature;photosynthesis;effective component
doi:10. 13313 / j. issn. 1673-4890. 2015. 10. 011
中药的有效成分通常是植物的次生代谢产物,
是植物在长期进化中与环境(生物的和非生物的)相
互作用的结果,因此次生代谢产物的积累很大程度
上受到外界环境的影响,其中温度所扮演的角色不
容忽视。例如,刘春朝等[1]在研究青蒿 Artemisia
annua毛状根合成青蒿素的培养条件时发现,青蒿
毛状根培养中青蒿素的合成以 30℃为最好,青蒿素
产量达 223. 3 mg·L -1,高温有利于青蒿毛状根青蒿
素合成。
滇重楼 Paris polyphylla Smith var. yunnanensis
(Franch. )Hand. -Mass 为延龄草科(Trilliaceae)重楼
属根茎多年生草本植物[2-3],以根茎入药[4-5],是云
南白药、宫血宁胶囊、楼莲胶囊等云南品牌中成药
的主要原料植物。滇重楼喜欢生长在冬季严寒、夏
无酷暑的地区,生长的年平均气温为12 ~ 15 ℃左
右,如苏文华等曾报道滇重楼最适生长温度为 16 ~
28 ℃,并且此温度可以提高滇重楼叶片净光合速
率。但温度对滇重楼产量和品质的具体影响仍不得
而知[6]。
近年来,关于滇重楼栽培的研究才刚刚起步,
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2015 年 10 月 第 17 卷 第 10 期 中国现代中药 Modern Chinese Medicine Oct. 2015 Vol. 17 No. 10
尚未见温度对滇重楼影响的相关报道。本研究将探
索温度对滇重楼光合作用及有效成分含量的影响,
为将来的滇重楼的 GAP 规范种植奠定重要的理论
基础。
1 材料与方法
1. 1 滇重楼
本实验于 2014 年 3 月 1 日至 2014 年 6 月 20 日
进行,实验材料来自于云南省弥渡县的 6 年生滇重
楼种苗,这些种苗长势基本一致,共计 9 株,移栽
于塑料花盆(20 cm × 20 cm)中,每盆种 1 株,每个
处理 3 株,分别放于人工气候箱中(22 ℃ /15 ℃、
28 ℃ /25 ℃、32 ℃ /28 ℃;12 L:12 D 光照周期) ,
栽培基质为:腐殖土 /红土 = 3 /1,每盆土壤均匀一
致,常规管理,等量浇水。
1. 2 监测与统计
1. 2. 1 光合参数的测定 对每个处理下的滇重楼进
行叶片的光合测定,测定时间选在 2013 年 6 月,采
用 LI-6400XT便携式光合测定系统,分别对不同温
度处理滇重楼的光合参数进行测定。在测定 CO2 响
应曲线时,设置 12 个 CO2 浓度梯度(0、50、100、
200 、300 、400 、600、800、1000、1200 、1500 和
2000 μmol·mol -1),叶室内光强为 1200 μmol·m-2·s -1。
通过 光 合 助 手 软 件 (Photosyn Assistant, V1. 1,
Dundee Scientific,UK)的 Mechanistic A-Ci curve
analysis 拟合 CO2 响应曲线,并计算相关的参数。
1. 2. 2 甾体皂苷含量的测定方法 称取磨碎的滇重
楼块茎粉 0. 5 g,加乙醇定容为 10 mL,超声波振荡
提取 30 min过滤后取上清液测定;采用美国 Aglient
1100 液相色谱,在流动相水 /乙腈 65 /35,柱温
30 ℃,在检测波长 203 nm的条件下测定。
1. 2. 3 叶绿素含量 用叶绿素仪测定,取叶片用打
孔器(0. 38 cm /片)打取 20 个圆片,称重。加入少许
石英砂和 95%乙醇,研磨至匀浆,再过滤定容。与
649 nm、665 nm 处测定吸光度。计算出叶绿素 a、
叶绿素 b的含量。重复 3 次,取其平均值。
1. 2. 4 数据分析 实验数据用 Excel 2003 与
SPSS13. 0 统计软件进行统计分析。
2 结果与分析
2. 1 不同温度对滇重楼光合参数的影响
滇重楼光合特性受不同温度影响显著,具体情
况见表 1。滇重楼最大羧化速率、最大电子传递速
率、呼吸速率和叶绿素 a、叶绿素 b 含量以 22 ℃ /
15 ℃下最髙,显著大于其余温度处理;其次为
28 ℃ /25 ℃,而 32 ℃ /28 ℃温度处理下最低,后两
者处理下无显著差异;不同温度下滇重楼磷酸丙糖
利用率以 22 ℃ /15 ℃下和 28 ℃ /25 ℃较高,两者间
差异不显著,但都显著大于 32 ℃ /28 ℃。
2. 2 不同温度对滇重楼根茎有效成分含量的影响
不同温度下,滇重楼皂苷和总皂苷以 22 ℃ /15 ℃
下和 28 ℃ /25 ℃较高,两者间差异不显著,但都显
著大于 32 ℃ /28 ℃;表明低温更有利于滇重楼有效
成分的积累,不同温度下滇重楼皂苷产量见表 2。
表 1 不同温度对滇重楼叶片光合参数的影响
温度
最大羧化速率
Vcmax /μmol·m -2·s - 1
最大电子传递速率
Jmax /μmol·m -2·s - 1
呼吸速率
Resp /μmol·m -2·s - 1
磷酸丙糖利用率
TPU /μmol·m -2·s - 1
叶绿素 a含量
chla /μg·cm -2
叶绿素 b含量
chlb /μg·cm -2
22 ℃ /15 ℃ 10. 03 ± 0. 08a 10. 58 ± 0. 35a 1. 67 ± 0. 22a 2. 81 ± 0. 09a 15. 21 ± 0. 04a 7. 00 ± 0. 20a
28 ℃ /25 ℃ 7. 63 ± 2. 82b 8. 41 ± 3. 07b 1. 31 ± 0. 30b 2. 23 ± 0. 80a 8. 90 ± 0. 29b 3. 95 ± 0. 02b
32 ℃ /28 ℃ 5. 80 ± 0. 72b 6. 17 ± 0. 37b 1. 23 ± 0. 09b 1. 77 ± 0. 29b 8. 15 ± 0. 02b 4. 02 ± 0. 08b
表 2 不同温度对滇重楼地下部分有效成分含量的影响
/mg·g - 1
温度
含量
重楼皂苷 I 重楼皂苷 II 重楼皂苷 VI 重楼皂苷 VII 总皂苷
28℃ /25℃ 1. 081 184 1. 376 367 0. 118 762 0. 194 974 2. 771 287
22℃ /15℃ 1. 012 458 1. 330 75 0. 139 963 0. 286 569 2. 769 739
32℃ /28℃ 0. 862 617 0. 057 639 0. 412 172 0. 075 54 1. 407 967
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3 讨论
有效成分多是药用植物次生代谢的产物,温度
的改变往往会影响到植物代谢并间接影响到其次生
代谢物的合成量。为了了解药用植物滇重楼对于不
同温度下的生理生态反应,本研究使用不同温度处
理滇重楼,进行滇重楼生长和次生代谢产物的影响
研究。
研究表明,温度对滇重楼光合特及有效成分含
量都有显著影响。滇重楼叶片的最大羧化速率、呼
吸速率、最大电子传递速率、磷酸丙糖利用率和叶
绿素含量均以低温处理最高,高温处理最低。梅中
青等曾报道滇重楼较耐寒,低温对其无冻害[7];马
云淑等也调查发现,一般气温较高地区胶质重楼较
多,气候温和地区粉质者较多[8];说明适当低温有
利于滇重楼的生长,本实验的结果也恰与滇重楼属
于耐低温植物的特征相吻合。
本实验结果也认为低温对甾体皂苷的积累具有
明显的促进作用,而高温对甾体皂苷的积累有明显
的抑制作用。此现象与另一种皂苷植物西洋参相
似,研究表明,低温处理下的西洋参有效成分含量
更高,低温不仅有利于参根量的增加,也有利于西
洋参人参皂试含量的积累[9];但在植物中,不同
温度对植物的效应也具有显著差异,如欧乌头根在
高温气候条件下含乌头碱,但在寒冷低温时则变为
无毒[10];所以前人研究温度对植物次生物质的积
累似乎没有明显规律。本研究证明低温(22 ℃ /
15 ℃)更有利于高品质滇重楼的生产,可用于生产
实践。
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(收稿日期 2014-11-02
檿檿檿檿檿檿檿檿檿檿檿檿檿檿檿檿檿檿檿檿檿檿檿檿檿檿檿檿檿檿檿檿檿檿檿檿檿檿檿檿檿檿檿檿檿檿檿檿
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