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滇重楼品质评价及其甾体皂苷类成分积累规律分析



全 文 :[收稿日期] 20141205(007)
[基金项目] 国家自然科学基金项目(81360616) ;云南省教育厅基金重点项目(2013Z153)
[第一作者] 冯丽丽,在读硕士,从事药用植物次生代谢、品质评价及质量控制研究,Tel:18313001106,E-mail:fengliliabc@ 126. com
[通讯作者] * 李海峰,教授,硕士生导师,从事药用植物次生代谢、品质评价及质量控制研究,Tel:0872-2251475,E-mail:lihfzh888@
sina. com
滇重楼品质评价及其甾体皂苷类成分积累规律分析
冯丽丽,张琳,李海峰* ,张成桂
(大理学院 药学与化学学院,云南 大理 671000)
[摘要] 目的:探讨滇重楼居群内品质差异及甾体皂苷活性成分的积累规律,为该药材的品质评价及优质种质资源筛选
提供实验依据。方法:采用超高效液相色谱法(ultra performance liquid chromatography,UPLC)测定滇重楼居群内根茎、茎、叶中
重楼皂苷Ⅰ,Ⅱ,Ⅵ,Ⅶ的含量,建立各部位的 UPLC 指纹图谱,分析该药材居群内的品质差异及其甾体皂苷类成分的积累规
律。结果:滇重楼居群内根茎和叶中总皂苷含量均 > 0. 6%,不同部位中重楼皂苷Ⅰ,Ⅱ,Ⅶ含量具有显著性差异,而重楼皂苷
Ⅵ含量无显著性差异;UPLC指纹图谱中 5 个共有峰为根茎、茎、叶共有,各部位共有峰 UPLC 指纹图谱相似度均 > 0. 753。结
论:重楼皂苷Ⅰ,Ⅱ,Ⅵ,Ⅶ主要在植物的叶绿体中合成并进行储藏和分配,经茎向下运输,主要在根茎和叶中积累和储存,总
皂苷含量在不同部位的积累规律为叶 >根茎 >茎;滇重楼不同部位中主要活性成分含量及种类差异较大。
[关键词] 滇重楼;总皂苷;品质评价;活性成分积累;重楼皂苷
[中图分类号] R284. 1;R284. 2;R931. 6 [文献标识码] A [文章编号] 1005-9903(2015)13-0041-05
[doi] 10. 13422 / j. cnki. syfjx. 2015130041
[网络出版地址] http:/ /www. cnki. net /kcms /detail /11. 3495. R. 20150512. 1116. 004. html
[网络出版时间] 2015-05-12 11:16
Quality Evaluation of Paris polyphylla var. yunnanensis and Accumulation Law Analysis of Its Steroidal
Saponins FENG Li-li, ZHANG Lin, LI Hai-feng* , ZHANG Cheng-gui (School of Chemistry and
Pharmaceutical Sciences,Dali University,Dali 671000,China)
[Abstract] Objective:To investigate quality differences and accumulation law of steroidal saponins
within Paris polyphylla var. yunnanensis,to provide a basis for quality evaluation and quality germplasm screening
of the medicinal material. Method:UPLC was employed to determine contents of polyphyllin Ⅰ,Ⅱ,Ⅵ and Ⅶ
from roots,stems and leaves in the same population of P. polyphylla var. yunnanensis. UPLC fingerprint of
different parts was established,quality differences of P. polyphylla var. yunnanensis and its accumulation law of
steroidal saponins were analyzed. Result:Contents of total saponins from roots and leaves in the same population
of P. polyphylla var. yunnanensis were more than 0. 6% . There were significant differences about contents of
polyphyllin Ⅰ,Ⅱ and Ⅶ,but polyphyllin Ⅵ showed no significant difference. Five common peaks of UPLC
fingerprint were selected in roots, stems and leaves, similarity of characteristic peaks were above
0. 753. Conclusion:Polyphyllin Ⅰ,Ⅱ,Ⅵ and Ⅶ are synthesized,stored and distributed in the chloroplasts of
green plants, then transported down by stems and majorly accumulated in leaves and rhizomes at last,
accumulation law of total saponins content in different parts is leaves > roots > stems. There are large differences
about contents and species of main active ingredients among roots, stems and leaves of P. polyphylla var.
yunnanensis.
[Key words] Paris polyphylla var. yunnanensis; total saponins;quality evaluation;accumulation of
active ingredients;polyphyllin
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第 21 卷第 13 期
2015 年 7 月
中国实验方剂学杂志
Chinese Journal of Experimental Traditional Medical Formulae
Vol. 21,No. 13
Jul.,2015
滇重楼又名独角莲、七叶一枝花等,是云南省道
地稀缺名贵药材[1],其干燥根茎为 2010 年版《中国
药典》收载的常用中药材,具有清热解毒、消肿止
痛、凉肝定惊、抗细胞毒之功效[2-4],临床治疗功能
性子宫出血、神经性皮炎、外科炎症及骨癌等,是云
南白药、宫血宁胶囊、楼莲胶囊等中成药的主要原料
之一[5-6]。野生资源是滇重楼药材的唯一来源,由
于药材需求量巨大,每年的消耗量远超出野生资源
的年再生能力,加之资源再生周期长(8 ~ 12 年)[7],
野生资源利用已发展成为严重的资源危机,不仅各
制药企业在收购原材料时的质量标准不得不降低,
而且《中国药典》滇重楼的含量标准署蓣皂苷(重楼
皂苷Ⅰ,Ⅱ)和偏诺皂苷(重楼皂苷Ⅵ,Ⅶ)总含量已
从 2005 年版[8]的≥0. 80%降至 2010 年版[9]的≥
0. 60%。由于资源短缺,制药企业为了满足生产的
需要,滇重楼的地上部分茎、叶也被收购入药。质量
标准的降低及入药部位的改变势必影响产品的质
量。本 实 验 采 用 超 高 效 液 相 色 谱 法 (ultra
performance liquid chromatograph,UPLC)测定滇重楼
居群内根茎、茎、叶中重楼皂苷Ⅰ,Ⅱ,Ⅵ,Ⅶ的含量,
建立其 UPLC指纹图谱,分析该药材的品质差异及
其甾体皂苷活性成分的积累规律,为滇重楼品质评
价及优质种质资源筛选提供参考。
1 材料
1290 型超高效液相色谱仪(G1313A ALS 型自
动进样器,G1315A /B 型 DAD 检测器,美国惠普公
司) ,AE240 型电子天平(瑞士梅特勒-托利多公
司) ,FY135 型中草药粉碎机(天津市泰斯特仪器有
限公司) ,Milli-Q Century 系列纯水处理系统(美国
密理博公司)。重楼皂苷Ⅰ,Ⅱ,Ⅵ,Ⅶ对照品(中国
食品药品检定研究院,批号分别为 111590-200402,
111591-200301,111592-200301,111593-200402) ,乙
腈为色谱纯,水为超纯水,其余试剂均为分析纯。
2013 年 9 月种子成熟期,在云南省云龙县长新乡新
塘村红栗坡采集滇重楼样品,采样点分别是东
(S1) ,东南(S2) ,南(S3) ,西南(S4) ,西(S5) ,西北
(S6) ,北(S7) ,东北(S8)及中(S9) ,每个采样点随
机采集无病虫害的样品 20 株,采集样品间的株距≥
6 m,经大理学院马晓匡教授鉴定为百合科植物云南
重楼 Paris polyphylla var. yunnanensis,采集的样品自
然干燥。
2 方法与结果
2. 1 滇重楼根茎、茎、叶指纹图谱的建立
2. 1. 1 色谱条件 Thermore C18色谱柱(4. 6 mm ×
250 mm,5 μm) ,流动相乙腈(A)-水(B)梯度洗脱
(0 ~40 min,30% ~ 60% A;40 ~ 50 min,60% ~ 30%
A) ,检测波长 203 nm,柱温 30 ℃,流速 1. 0 mL·
min -1,进样量 10 μL。
2. 1. 2 对照品溶液的制备 分别精密称取重楼皂
苷Ⅰ,Ⅱ,Ⅵ,Ⅶ 5. 280,3. 020,1. 980,2. 090 mg,置
于同一 10 mL量瓶中,加甲醇溶解并稀释至刻度,摇
匀,得混合对照品溶液。4 ℃冰箱保存待用。
2. 1. 3 供试品溶液的制备 精密称取药材根茎、
茎、叶粉末(过 3 号筛,下同)各 0. 5 g,分别置于 10
mL量瓶中,各加入 75%乙醇 4 mL,超声处理 60 min
(54 kHz,60 ℃,下同) ,各加入 75%乙醇 4 mL,过
夜,超声处理 60 min,冷却至室温,加 75%乙醇稀释
至刻度,混匀,即得。
2. 1. 4 稳定性试验 分别取同一采样点的根茎、
茎、叶样品,按 2. 1. 3 项下方法制备供试品溶液,考
察 0,2,4,8,12,24,48 h 各共有峰的相对峰面积和
相对保留时间,计算根茎的相对保留时间的 RSD
均 < 0. 99%,相对峰面积的 RSD 均 < 2. 4%;茎的相
对保留时间的 RSD 均 < 1. 3%,相对峰面积的 RSD
均 < 2. 9%;叶的相对保留时间的 RSD 均 < 1. 5%,
相对峰面积的 RSD 均 < 1. 9%,表明供试品溶液在
48 h内稳定性良好。
2. 1. 5 精密度试验 分别取同一采样点的根茎、
茎、叶样品,按 2. 1. 3 项下方法制备供试品溶液,按
2. 1. 1 项下条件连续进样 6 次,结果根茎的相对保
留时间的 RSD均 < 1. 1%,相对峰面积的 RSD 均 <
1. 9%;茎的相对保留时间的 RSD 均 < 1. 9%,相对
峰面积的 RSD 均 < 2. 1%;叶的相对保留时间的
RSD均 < 2. 1%,相对峰面积的 RSD 均 < 2. 0%,表
明仪器精密度良好。
2. 1. 6 重复性试验 分别取同一采样点的根茎、
茎、叶样品各 6 份,按 2. 1. 3 项下方法制备供试品溶
液,按 2. 1. 1 项下条件,结果根茎的相对保留时间的
RSD均 < 1. 1%,相对峰面积的 RSD 均 < 1. 9%;茎
的相对保留时间的 RSD 均 < 2. 0%,相对峰面积的
RSD均 < 2. 2%;叶的相对保留时间的 RSD 均 <
1. 9%,相对峰面积的 RSD 均 < 2. 0%,表明该方法
重复性良好。
2. 2 重楼皂苷Ⅰ,Ⅱ,Ⅵ,Ⅶ的含量测定 从每个采
样点中随机选取根茎节数相同(生长年限相同)的
植株 5 株混合作为样品,根茎、茎、叶分别粉碎,过
100 目筛,于 30 ℃烘箱中干燥至恒重,采用《中国药
典》2010 年版(一部)重楼药材项下含量测定方法分
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Chinese Journal of Experimental Traditional Medical Formulae
Vol. 21,No. 13
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别测定根茎、茎、叶中重楼皂苷Ⅰ,Ⅱ,Ⅵ,Ⅶ的含量
(n = 3) ,建立其 UPLC指纹图谱,采用最小显著差异
法进行方差分析。
2. 2. 1 居群内根茎中 4 种成分含量的比较 滇重
楼不同样品根茎中重楼皂苷Ⅰ,Ⅱ,Ⅵ,Ⅶ含量的比
较见表 1。结果显示样品 S1,S2,S3,S7,S9 根茎中
重楼皂苷Ⅰ含量均极显著高于其他样品;样品 S5,
S9 根茎中重楼皂苷Ⅱ含量显著低于其他居群;样品
S1,S3,S6 根茎中重楼皂苷Ⅵ含量显著低于其他样
品,但其他样品根茎中该成分含量无显著差异;样品
S4,S5 根茎中重楼皂苷Ⅶ含量极显著高于其他样
品,除 S2,S4,S5 外,其他样品根茎中重楼皂苷Ⅶ含
量无显著差异;样品 S1,S7,S9 茎中总皂苷含量极显
著高于其他样品,且其他样品根茎中该成分含量无
显著差异。
2. 2. 2 居群内茎中 4 种成分含量的比较 滇重楼
不同样品茎中重楼皂苷Ⅰ,Ⅱ,Ⅵ,Ⅶ含量的比较见
表 2。结果 9 个样品中均未检测到重楼皂苷Ⅰ;样
品 S6,S8,S9 茎中重楼皂苷Ⅱ含量极显著高于其他
样品;样品 S1,S5 茎中重楼皂苷Ⅵ含量极显著低于
其他样品;样品 S5 茎中重楼皂苷Ⅶ含量极显著高于
其他样品,样品 S1,S2,S3,S4 样品茎中该成分含量
无显著差异,样品 S6,S8,S9 茎中重楼皂苷Ⅶ含量显
著低于其他居群;样品 S1,S2,S3,S4,S5,S6 样品茎
中总皂苷含量极显著高于样品 S7,S8,S9 中该成分
含量。
表 1 滇重楼居群内根茎中重楼皂苷Ⅰ,Ⅱ,Ⅵ,Ⅶ含量的比较(珋x ± s,n = 3)
Table 1 Contents comparative analysis of polyphyllins in roots of Paris polyphylla var. yunnanensis(珋x ± s,n = 3)
样品
质量分数 /%
重楼皂苷Ⅰ 重楼皂苷Ⅱ 重楼皂苷Ⅵ 重楼皂苷Ⅶ 总皂苷
相似度
S1 0. 974 6 ±0. 018 0A,a 0. 305 4 ±0. 005 7A,B,a,b 0. 021 0 ±0. 000 8B,C,c,d 0. 101 2 ±0. 008 5B,b,c 1. 402 2 ±0. 007 0A,a 0. 862 0
S2 0. 935 0 ±0. 007 9A,B,C,a,b 0. 300 9 ±0. 006 8A,B,a,b 0. 024 0 ±0. 001 3A,B,b 0. 088 5 ±0. 003 7C,c 1. 348 4 ±0. 005 0B,b 0. 842 0
S3 0. 949 4 ±0. 022 0A,B,C,a,b 0. 299 3 ±0. 007 8A,B,b 0. 019 4 ±0. 000 3C,c 0. 089 4 ±0. 002 0C,c 1. 357 5 ±0. 014 0B,b 0. 867 0
S4 0. 883 7 ±0. 003 3D,d 0. 296 2 ±0. 010 0A,B,b 0. 025 2 ±0. 000 8A,a,b 0. 142 1 ±0. 000 9A,a 1. 347 2 ±0. 016 0B,b 0. 850 0
S5 0. 909 7 ±0. 003 3C,D,b,c,d 0. 281 8 ±0. 006 3B,b 0. 027 2 ±0. 000 7A,a 0. 139 9 ±0. 001 6A,a 1. 358 6 ±0. 004 2B,b 0. 958 0
S6 0. 902 3 ±0. 006 7C,D,c,d 0. 330 9 ±0. 001 1A,a 0. 020 3 ±0. 000 7C,c 0. 106 9 ±0. 000 7B,b 1. 360 4 ±0. 007 0B,b 0. 850 0
S7 0. 947 6 ±0. 005 7A,B,C,a,b 0. 294 6 ±0. 005 6A,B,b 0. 025 2 ±0. 000 8A,a,b 0. 101 4 ±0. 001 9B,b,c 1. 368 8 ±0. 008 0A,a 0. 865 0
S8 0. 920 6 ±0. 009 0B,C,D,b,c,d 0. 302 5 ±0. 003 7A,B,a,b 0. 024 7 ±0. 000 3A,a,b 0. 092 8 ±0. 001 3B,c 1. 340 6 ±0. 004 2B,b 0. 924 0
S9 0. 967 7 ±0. 004 7A,B,a 0. 279 0 ±0. 018 0B,b 0. 026 7 ±0. 004 1A,a 0. 099 5 ±0. 004 1B,b,c 1. 372 9 ±0. 009 8A,a 0. 926 0
注:不同 A,B,C,D,E表示差异极显著(P < 0. 01) ;不同 a,b,c,d,e表示差异显著(P < 0. 05) (表 2,3 同)。
表 2 滇重楼居群内茎中重楼皂苷Ⅰ,Ⅱ,Ⅵ,Ⅶ含量的比较(珋x ± s,n = 3)
Table 2 Contents comparative analysis of polyphyllins in stems of Paris polyphylla var. yunnanensis (珋x ± s,n = 3)
样品
质量分数 /%
重楼皂苷Ⅱ 重楼皂苷Ⅵ 重楼皂苷Ⅶ 总皂苷
相似度
S1 0. 062 5 ± 0. 000 1C,D,c 0. 023 0 ± 0. 000 5B,C,c,d 0. 120 9 ± 0. 000 6B,b,c 0. 206 4 ± 0. 000 6A,B,a,b 0. 786 0
S2 0. 061 7 ± 0. 000 7D,c 0. 024 6 ± 0. 001 1A,B,C,b,c,d 0. 120 4 ± 0. 000 4B,b,c 0. 206 7 ± 0. 000 9A,B,a,b 0. 807 0
S3 0. 060 6 ± 0. 000 7D,c 0. 025 8 ± 0. 0006A,B,C,a,b,c,d 0. 118 3 ± 0. 000 1B,b,c,d 0. 204 7 ± 0. 000 2A,B,b,c 0. 878 0
S4 0. 064 9 ± 0. 000 3B,C,b 0. 024 7 ± 0. 001 0A,B,C,a,b,c,d 0. 122 1 ± 0. 000 5B,b 0. 211 7 ± 0. 000 6A,a 0. 792 0
S5 0. 052 5 ± 0. 000 2E,d 0. 021 5 ± 0. 001 1D,d 0. 131 3 ± 0. 000 1A,a 0. 205 3 ± 0. 001 0A,B,b,c 0. 782 0
S6 0. 068 4 ± 0. 000 1A,a 0. 029 3 ± 0. 000 9A,a 0. 107 0 ± 0. 000 5D,e 0. 204 7 ± 0. 001 3A,B,b,c 0. 788 0
S7 0. 060 9 ± 0. 000 2D,c 0. 026 9 ± 0. 000 1A,B,a,b,c 0. 115 9 ± 0. 001 4C,d 0. 203 7 ± 0. 001 4B,b,c 0. 874 0
S8 0. 067 5 ± 0. 000 6A,a 0. 026 4 ± 0. 002 7A,B,C,a,b,c 0. 106 3 ± 0. 002 1D,e 0. 200 2 ± 0. 004 1B,c 0. 907 0
S9 0. 067 1 ± 0. 000 3A,B,a 0. 028 4 ± 0. 000 9A,a,b 0. 108 4 ± 0. 000 3D,e 0. 203 9 ± 0. 000 6B,b,c 0. 806 0
注:重楼皂苷Ⅰ均未被检测到。
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2. 2. 3 居群内叶中 4 种成分含量的比较 滇重楼
不同样品叶中重楼皂苷Ⅰ,Ⅱ,Ⅵ,Ⅶ含量的比较见
表 3。结果显示样品 S1,S2 叶中重楼皂苷Ⅰ含量无
显著差异,其他样品叶中该成分含量显著高于样品
S1 和 S2;样品 S1,S4,S6,S9 叶中重楼皂苷Ⅱ含量极
显著高于其他样品;不同样品叶中重楼皂苷Ⅵ含量
无显著差异;样品 S5,S6,S9 叶中重楼皂苷Ⅶ含量显
著低于其他样品;样品 S1,S4,S6 叶中重楼总皂苷含
量显著高于其他居群样品。说明不同样品中各指标
成分的含量可能存在一定差异。
表 3 滇重楼居群内叶中重楼皂苷 I,II,VI,VII含量的比较(珋x ± s,n = 3)
Table 3 Contents comparative analysis of polyphyllins in leaves of Paris polyphylla var. yunnanensis (珋x ± s,n = 3)
样品
质量分数 /%
重楼皂苷Ⅰ 重楼皂苷Ⅱ 重楼皂苷Ⅵ 重楼皂苷Ⅶ 总皂苷
相似度
S1 0. 089 6 ±0. 002 6B,c 2. 603 ±0. 014 0A,a,b 0. 023 9 ±0. 001 8A,a,b 0. 889 1 ±0. 011 0A,B,a,b 3. 606 ±0. 017 0A,a 0. 835 0
S2 0. 091 0 ±0. 002 1B,C 2. 354 ±0. 037 0C,d 0. 023 0 ±0. 002 5A,b 0. 859 9 ±0. 017 2A,B,C,D,b,c 3. 328 ±0. 021 1C,D,c,d 0. 935 0
S3 0. 106 8 ±0. 005 1A,a,b 2. 221 ±0. 031 0D,e 0. 027 9 ±0. 001 3A,a,b 0. 910 7 ±0. 008 7A,a 3. 267 ±0. 028 0D,d 0. 758 0
S4 0. 106 2 ±0. 004 5A,a,b 2. 652 ±0. 016 1A,a 0. 026 0 ±0. 001 2A,a,b 0. 859 9 ±0. 017 1A,B,C,D,b,c 3. 644 ±0. 025 1A,a 0. 865 0
S5 0. 108 1 ±0. 000 3A,a,b 2. 389 ±0. 002 3C,d 0. 028 8 ±0. 000 7A,a 0. 856 2 ±0. 014 2B,C,D,b,c 3. 382 ±0. 017 2B,C,b,c 0. 868 0
S6 0. 108 3 ±0. 001 0A,a 2. 662 ±0. 003 5A,a 0. 025 3 ±0. 002 4A,a,b 0. 831 4 ±0. 013 0C,D,c,d 3. 627 ±0. 008 3A,a 0. 857 0
S7 0. 107 5 ±0. 001 3A,a,b 2. 414 ±0. 014 2B,C,d 0. 024 6 ±0. 000 1A,a,b 0. 885 2 ±0. 006 1A,B,C,a,b 3. 431 ±0. 007 1B,C,b 0. 835 0
S8 0. 104 2 ±0. 002 7A,a,b 2. 428 ±0. 070 1B,C,c,d 0. 022 9 ±0. 001 6A,b 0. 911 2 ±0. 010 1A,a 3. 466 ±0. 055 3B,b 0. 935 0
S9 0. 097 8 ±0. 000 5A,B,b,c 2. 533 ±0. 006 6A,B,b,c 0. 027 3 ±0. 000 3A,a,b 0. 809 0 ±0. 006 9D,d 3. 467 ±0. 012 1B,b 0. 753 0
2. 3 指纹图谱共有模式的建立及相似度评价
2. 3. 1 根茎 将 9 个滇重楼样品根茎图谱的 AIA
格式原始数据导入“中药色谱指纹图谱相似度评价
系统”(2004A 版) ,设定样品 S3 为参照图谱,时间
窗宽度 0. 1 min,对照图谱的生成方法为中位数,选
定 5 个特征峰进行多点校正,自动匹配,结果见图
1,相似度分析见表 1。结果表明同一居群不同采样
点样品间的相似性良好。确定了 8 个共有峰,经过
与对照品保留时间比较,确认了 7,5,4,3 号色谱峰
分别为重楼皂苷Ⅰ,Ⅱ,Ⅵ,Ⅶ,其中重楼皂苷Ⅰ,Ⅱ
的峰面积占比较大,分离度亦能达到要求,是滇重楼
药材的主要药效成分。
R.对照色谱;3. 重楼皂苷Ⅶ;4. 重楼皂苷Ⅵ;5. 重楼皂苷Ⅱ;7. 重楼
皂苷Ⅰ
图 1 滇重楼居群内根茎 UPLC指纹谱共有模式
Fig. 1 Common mode of UPLC fingerprints for roots of Paris
polyphylla var. yunnanensis in same population
2. 3. 2 茎 按 2. 3. 1 项下方法进行相似度分析,见
图 2 和表 2。结果表明不同样品的茎中有效成分相
似性良好。确定了 7 个共有峰,经过与对照品保留
时间比较,确认了 6,5,4 号色谱峰分别为重楼皂苷
Ⅱ,Ⅵ,Ⅶ,但未检测到重楼皂苷Ⅰ。
R.对照色谱;4. 重楼皂苷Ⅶ;5. 重楼皂苷Ⅵ;6. 重楼皂苷Ⅱ
图 2 滇重楼居群内茎 UPLC指纹谱共有模式
Fig. 2 Common mode of UPLC fingerprints for stems of Paris
polyphylla var. yunnanensis in same population
2. 3. 3 叶 按 2. 3. 1 项下方法进行相似度分析,见
图 3 和表 3。结果表明不同样品的叶中有效成分相
似性良好。确定了 11 个共有峰,经过与对照品保留
时间比较,确认 8,6,3,2 号色谱峰分别为重楼皂苷
Ⅰ,Ⅱ,Ⅵ,Ⅶ。
3 讨论
滇重楼的活性成分重楼皂苷Ⅰ,Ⅱ,Ⅵ,Ⅶ主要
在植物的叶绿体中合成并进行储藏和分配,从叶经
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第 21 卷第 13 期
2015 年 7 月
中国实验方剂学杂志
Chinese Journal of Experimental Traditional Medical Formulae
Vol. 21,No. 13
Jul.,2015
R.对照色谱;2. 重楼皂苷Ⅶ;3. 重楼皂苷Ⅵ;6. 重楼皂苷Ⅱ;8. 重楼
皂苷Ⅰ
图 3 滇重楼居群内叶 UPLC指纹谱共有模式
Fig. 3 Common mode of UPLC fingerprints for leaves of Paris
polyphylla var. yunnanensis in the same population
茎向下运输,主要在根茎和叶中积累和储存[10]。滇
重楼居群内根茎、茎、叶中次生代谢产物在相同土
壤、气候条件下,不同样品间主要活性成分的代谢规
律应相似。本文研究结果表明重楼皂苷Ⅱ,Ⅶ主要
在叶中积累,重楼皂苷Ⅰ主要在根茎中积累和储存,
而茎中总皂苷含量很低,表明重楼皂苷Ⅰ较易通过
茎向下运输;重楼皂苷Ⅱ,Ⅶ在叶中合成后不容易向
下运输,主要在叶中储存积累;重楼皂苷Ⅵ在根茎、
茎、叶中均有存在,且含量差异不大,说明重楼皂苷
Ⅵ在滇重楼植物根茎、茎、叶中分布比较平均。重楼
皂苷Ⅰ,Ⅱ,Ⅵ,Ⅶ及总皂苷在根茎中含量差异较小,
在茎、叶中含量差异较大,总皂苷含量在不同部位的
积累规律为叶 >根茎 >茎。
因滇重楼的地上部分为 1 年生可再生资源,由
于该药材资源日渐枯竭,有学者提出滇重楼地上部
分替代根茎入药的设想[11]。但本文研究表明滇重
楼茎中总皂苷含量未达到 0. 6%的限量标准[9],而
且在茎中均末检测到重楼皂苷Ⅰ,虽然叶中总皂苷
含量 > 0. 6%的限量标准,比根茎中总皂苷含量高了
2 倍多,但滇重楼不同样品间根茎、茎、叶 UPLC 指
纹谱差异较大,UPLC 指纹谱中 5 个共有峰为根茎、
茎、叶所共有,其中叶比根茎多 3 个共有峰,叶比茎
多 4 个共有峰。说明滇重楼茎、叶作为根茎的替代
品入药需进一步确认。
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[责任编辑 刘德文]
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