全 文 ：［收稿日期］ 20100613(005)
［基金项目］ 广东省科技攻关项目(2008A030101009)
［通讯作者］ * 陈丰连，博士，副教授，研究方向:中药资源开发
与质量研究，Tel:13138679251，E-mail:chenfengli-
an@ 21cn. com
不同采收期及不同产地广金钱草地上部分 HPLC指纹图谱研究
陈丰连 * 1，张文进2，徐鸿华1
(1. 广州中医药大学中药学院中药分析教研室，广州 510006;2. 广东南台药业有限公司，广东 平远 514600)
［摘要］ 目的:建立广金钱草地上部分化学成分指纹图谱研究方法，对不同采收期及不同产地的广金钱草指纹图谱进行
研究。方法:采用 RP-HPLC 法，DiamonsilTM C18色谱柱(迪马公司，4. 6 mm × 250 mm，5 μm)，甲醇-0. 2%磷酸水溶液(28∶ 72)，流
速 1 mL·min － 1，检测波长 271 nm，柱温 40 ℃。结果:广东阳春产广金钱草与其他产地色谱指纹图谱差别较大，不同采收期药
材黄酮成分含量有明显的差别。结论:该色谱条件简单易行，可用于广金钱草的鉴别研究。
［关键词］ 广金钱草;不同采收期;不同产地;液相指纹图谱
［中图分类号］ R284. 1 ［文献标识码］ B ［文章编号］ 1005-9903(2010)14-0096-03
HPLC Fingerprints of Overground part of Desmodium styracifolium
in Different Collecting Time and Different Growing Areas
CHEN Feng-lian1* ，ZHANG Wen-jin2，XU Hong-hua1
(1. College of Chinese Materia Medica，Guangzhou University of Chinese Medicine，Guangzhou 510006，China;
2. Cuangdong Nantai Pharmaceutical Co. Ltd，Pingyuan 514600，China)
［Abstract］ Objective:The HPLC fingerprints of chemical composition were established to evaluate different
collecting time and different growing areas of overground part of Desmodium styracifolium. Method:HPLC analysis
was performed on a DiamonsilTM C18 column(4. 6 mm × 250 mm，5 μm)with the mobile phase in isocratic elution :
ethanol(A)-H2O(0. 2% phosphoric acid) (28∶ 72). The column temperature was setup at 40 ℃ and the flow-rate
was 1. 0 mL·min － 1 . The detection of wavelength was at 271 nm. Result:The D. styracifolium from Yangchun has
distinct differences with other place of origin;The accumulation of flavones constituents showed a regular pattern in
different collecting time. Conclusoin:The method is reliable and can be helpful on the quality control of D. styraci-
folium.
［Key words］ Desmodium styracifolium;different collecting time;different growing area;HPLC fingerprint
广金钱草是豆科植物广金钱草 Desmodium styra-
cifolium (Osb.)Merr.的干燥地上部分，主产于广东、
广西等地，原为两广一带民间常用草药，近世以其能
治结石症而闻名，据报道广金钱草含有异牡荆苷等黄
酮类物质，且为药效成分［1-2］。对广金钱草的指纹图
谱研究虽然已有文献报道［3］，但文中所用药材为商品
药材，其产地不确定，未见有对不同原产地及不同采
收期广金钱草药材的指纹图谱研究。本文建立了广
金钱草液相指纹图谱的色谱条件，并对不同采收期和
不同产地的广金钱草进行研究。
1 仪器与试药
1. 1 仪器 Dionex P680A 型高效液相色谱仪(德国
戴安公司)(P680 泵，PDA-100 二极管阵列检测器，
Chromeleon 数据处理系统)，sartorius 电子分析天平，
超声处理提取器(功率 250 W，频率 50 kHz)。
1. 2 试药 异牡荆苷(isovitexin，产品号 17804)对
照品从 Sigma 公司购买，纯度为 98%，甲醇为色谱
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第 16 卷第 14 期
2010 年 10 月
中国实验方剂学杂志
Chinese Journal of Experimental Traditional Medical Formulae
Vol. 16，No. 14
Oct.，2010
DOI:10.13422/j.cnki.syfjx.2010.14.048
纯，其余试剂均为分析纯。广金钱草 D. styracifolium
样品由广东南台药业有限公司广金钱草规范化种植
基地及各地采集，采集其易混淆品假花生 D. hetero-
carpum (L.)DC.、链荚豆 Alysicarpus vaginalis (L.)
DC. 及其同名异物品金钱草 Lysimachia christinae
Hance，以上样品经广州中医药大学药用植物教研室
潘超美教授鉴定。见表 1。
表 1 广金钱草药材样品来源
样品 产地 备注
1 广东平远县大柘镇 种植(采集样品多份)
2 广东高要 种植
3 广东江门 种植
4 广东遂溪 种植
5 广东揭阳 种植
6 广东化州 种植
7 广东云浮 种植
8 广东阳春 种植
9 广东雷州 种植
10 广西玉林 种植
11 广西宜州 种植
12 广西罗村 野生
13 广东阳春 野生
金钱草 四川仁寿 野生
假花生 平远县大柘镇 野生
链荚豆 平远县大柘镇 野生
2 方法与结果
2. 1 参照物溶液的制备 取异牡荆苷对照品加甲
醇制成 29. 6 mg·L － 1的溶液，作为参照物溶液。
2. 2 供试品溶液的制备 取以上各样品粗粉 0. 5
g，精密称定，置具塞锥形瓶中，加入三氯甲烷 20
mL，超声处理 10 min，滤过，弃去三氯甲烷液，滤渣
挥干。加甲醇 35 mL，密塞，称定质量，超声处理 20
min，取出，放冷，再称定质量，用甲醇补足减失的质
量，摇匀，以 0. 45 μm 微孔滤膜滤过，备用。
2. 3 色谱条件 DiamonsilTM C18色谱柱(迪马公司，
4. 6 mm × 250 mm，5 μm);流动相甲醇-0. 2%磷酸溶
液(28∶ 72);流速 1 mL·min － 1;检测波长 271 nm;柱
温 40 ℃。
2. 4 测定法 分别精密吸取参照物溶液及供试品
溶液各 10 μL，注入高效液相色谱仪，测定峰面积，
即得。色谱图见图 1。
2. 5 方法学考察
图 1 HPLC 指纹色谱图
A. 对照品;B. 供试品 ;S. 异牡荆苷
2. 5. 1 稳定性试验 取同一供试品溶液，分别在不
同时间按拟定的色谱条件测定，结果表明，24 h 内各
峰相对峰面积和相对保留时间 RSD < 3%，表明供试
品溶液在 24 h 内稳定。
2. 5. 2 精密度试验 精密吸取同一供试品溶液 10
μL，重复进样测定 5 次。结果表明，色谱图中各色
谱峰的相对保留时间 RSD < 2%，相对峰面积 RSD <
3%，表明仪器精密度良好。
2. 5. 3 重复性试验 取 1 号药材 5 份，分别精密称
定，照供试品液制备方法处理并按拟定的条件进样
测定，结果表明，色谱图中各色谱峰的相对保留时间
RSD < 2%，相对峰面积 RSD < 3%，表明该方法重复
性良好。
2. 6 指纹图谱的建立及分析
2. 6. 1 方法建立 分别选择 10 批广东南台药业有
限公司规范化种植基地的样品，采收时间均一致，按
前面确定的方法进行样品测定。将所测数据导入中
药指纹图谱相似度计算软件(Version 1. 285)，并计
算，建立起共有模式，10 批样品相似度均大于 0. 9。
图 2 6 月 20 日采收样品色谱
2. 6. 2 不同采收期指纹图谱 取广金钱草规范化
种植基地的不同采收期的样品，采收时间分别为 6
月 20 日起，每隔 20 ～ 30 d 取样 1 次，直至 10 月 30
日，共 7 个样品。按供试品溶液的制备方法处理，进
样测定，结果见图 2 ～ 8。分析测定结果可得:不同
采收期样品与共有模式相比，其相似度均大于 0. 9;
7 月 10 采收样品的各色谱峰面积最大，从 7 月 30 日
至 10 月 10 日采收的样品其各色谱峰面积逐渐
减小。
2. 6. 3 不同产地及野生品指纹图谱 取不同产地
的广金钱草及野生品，按供试品溶液的制备方法处
理，测定指纹图谱，不
同产地样品与共有模
式相比其相似系数见
表 2，由表可知广东阳
春产的广金钱草(种
植和野生)相似度均
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图 3 7 月 10 日采收样品色谱 图 4 7 月 30 日采收样品色谱 图 5 8 月 10 日采收样品色谱
图 6 9 月 10 采收样品色谱 图 7 10 月 10 日采收样品色谱 图 8 10 月 30 日采收样品色谱
为 0. 3 左右，广东江门和广东遂溪产相似度为 0. 7
左右。
表 2 不同产地及野生金线草相似度
样品 广地 相似系数
1 广东平远 0. 985 3
2 广东高要 0. 989 0
3 广东江门 0. 739 9
4 广东遂溪 0. 710 7
5 广东揭阳 0. 983 9
6 广东化州 0. 976 7
7 广东云浮 0. 952 1
8 广东阳春(种植) 0. 348 0
9 广东雷州 0. 986 4
10 广西玉林 0. 961 4
11 广西宜州 0. 990 5
12 广西罗村 0. 970 2
13 广东阳春(野生) 0. 336 1
2. 6. 4 广金钱草易混淆品的样品分析 取广金钱草
易混淆品金钱草、假花生、链荚豆，按供试品溶液的制
备方法处理，测定指纹图谱，易混淆品与共有模式相
比，其相似度分别为 － 0. 014 9，0. 230 5，0. 234 7。
3 讨论
本文对不同产地的药材进行了指纹图谱研究，
所建立的色谱条件简便易行，利用该色谱指纹图谱
可鉴别广金钱草及其易混淆品。发现广东阳春产广
金钱草相似度在 0. 3 左右，与其他产地黄酮类成分
差异明显。作者在采集药材样品时发现，阳春产广
金钱草其植物形态与其他产地有明显的区别，其叶
片大小约为 5 cm × 5 cm，颜色为墨绿色，花期在 10
月，而其他产地的叶片大小约为 2. 5 cm × 2. 5 cm，颜
色为绿色，花期在 8 月。这可能是不同的气候条件
和生态环境影响到其化学成分及生物形态。
同一产地不同采收期的广金钱草其相似度在
0. 9 以上，可见同一产地黄酮类成分差异不明显。
由不同采收期的指纹图谱可见，广金钱草黄酮类成
分含量在 7 月中旬最高，随后逐渐降低，说明其黄酮
类成分含量随采收时间的推后而变小。黄酮类成分
为广金钱草的药效成分，本研究结果对广金钱草的
采收期的确立有一定的借鉴作用。
［参考文献］
［1］ 王植柔，白先忠，覃光熙 . 广金钱草主要成分防治尿石
症的实验研究［J］. 中华泌尿外科杂志，1991，12(1):
13.
［2］ 苏亚伦，王玉蓝，杨峻山 . 广金钱草黄酮类化学成分的
研究［J］. 中草药，1993，24(7):343.
［3］ 陈思妮，张振秋 .广金钱草 HPLC 指纹图谱研究［J］. 中
成药，2008，30(9):1250.
［责任编辑 邹晓翠］
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