全 文 ：关系。定量分析时 ,为得到精确的数据 ,应用标准品
做校正曲线对实验条件进行校正或直接用标准曲线
法定量 。本试验采用如下方法:精密吸取对照品溶
液 5 μl、10 μl、20 μl及供试品溶液 10 μl,注入液相
色谱仪 ,测定 ,即得。对照品峰面积积分值与进样量
(μg)均取自然对数后列出线性方程 ,将供试品峰面
积积分值取对数后代入方程求得进样量(μg)的自
然对数 ,再换算成供试品的含量即可 。
4.3 　方法中确定的 ELSD参数 ,是经反复试验后
得出的最佳仪器参数 。雾化气体流速及漂移管温度
是影响 ELSD检测的 2个重要可调节参数。雾化气
体流速太低 ,会形成大量液滴 ,导致尖峰信号或噪音
信号;相反 ,流速太高时微滴量会下降导致信号响应
降低。漂移管温度太低 ,溶剂挥发不够完全;太高 ,
则会由于分析样品部分挥发 ,导致颗粒量下降而使
检测器响应下降 。实验室操作时需注意调节。
4.4 　曾对甲醇-水(90∶10)、乙腈 -水(75∶25)、甲
醇 -0.5%醋酸铵溶液 (92∶8)、乙腈 -甲醇-水 (64∶
20∶16)等不同流动相做过对比研究 ,结果发现以甲
醇-0.5%醋酸铵溶液(92∶8)作流动相即可得到满意
的色谱峰形 ,齐墩果酸与熊果酸峰的分离度也较高。
4.5　实验中所用女贞子来自不同产地 ,加上采集
时间 、炮制方法等各不相同(主要为直接晒干或蒸
后晒干),故其中齐墩果酸与熊果酸含量均有差异。
但总体来说 ,齐墩果酸含量均高于药典规定限度
(0.60%),熊果酸含量均在 0.1%以上 。与以前文
献报道女贞子中齐墩果酸和熊果酸的含量测定结果
基本一致 〔2 ～ 4〕。
参 考 文 献
1　卫生部药典委员会 .中华人民共和国药典 .北京:化学
工业出版社 , 2000∶249
2　吕曙光 ,等 .中药女贞子中齐墩果酸 、熊果酸的高效液
相色谱分析 .药物分析杂志 , 1993, 13(5)∶291
3　刘美兰 , 等 .不同产地的女贞子中齐墩果酸的含量比
较 .中草药 , 1990, 21(6)∶20
4　宓鹤鸣 ,等 .女贞子中齐墩果酸含量的动态变化研究 .
中草药 , 1995, 26(5)∶258
(2004-10-29收稿)
RP-HPLC法测定滇桂艾纳香中原儿
茶酸与原儿茶醛的含量
王治平　杨　柯　孟祥平　李久香　王一飞＊
(暨南大学生物医药研究开发基地 ,广州 510632)
　　摘要　目的:采用高效液相色谱法测定了滇桂艾纳香中原儿茶酸 、原儿茶醛的含量。方法:LichrocartC18(250
×4 mm)柱;流动相:甲醇-水(冰醋酸调 pH值 2.8)(15∶85);检测波长为 256 nm。原儿茶酸线性范围 0.057 ～ 0.57
μg, 相关系数 r=0.99999,平均加样回收率 97.60%, RSD0.45%(n=5)。原儿茶醛线性范围 0.03 ～ 0.30 μg,相关
系数 r=0.9997,平均加样回收率 99.44%, RSD1.52%(n=5)。结论:方法简便 , 结果准确 ,可用于该中药的质量控
制。
关键词　反相高效液相色谱法;滇桂艾纳香;原儿茶酸;原儿茶醛
　　滇桂艾纳香为壮族民间草药 ,在广西有较长的
使用历史〔1、2〕 ,来源于菊科植物滇桂艾纳香 Blumea
riparia(BI.)DC.的干燥全草〔3、4〕 ,主产于云南东南
部和广西西南部。具有活血 、止血 、利水作用 ,用于
经期提前 、产后血崩 、产后浮肿 、不孕症 、阴疮。本品
含有原儿茶酸 ,笔者发现本品还含原儿茶醛 。现代
药理实验表明 ,原儿茶酸具有增加冠脉流量〔5〕、体
外具有明显抑制血小板聚集活性和抗菌活性 〔6〕等
生理活性。原儿茶醛有扩张冠状动脉 、降低心肌氧
耗量 、抑制血小板聚集 、抗肿瘤作用 、清除自由基和
抗脂质过氧化 、抗炎等作用 〔7〕。瘀血证患者单核细
胞趋化游走能力增强 ,原儿茶醛抑制单核细胞趋化
游走 〔6〕和在趋化游走过程中产生的 IL-8活性 〔8〕。
可见 ,原儿茶酸和原儿茶醛是活血化瘀类中药中的
重要活性成分之一 。滇桂艾纳香中原儿茶酸的含量
测定已有报道〔9〕。我们参考有关文献 〔10〕建立了同
时测定二者含量的测定方法 ,用于内在质量控制 。
1　仪器与试药
Agilentl100高效液相色谱仪(惠普公司),二极
管阵列检测器 , Sartorius电子分析天平(德国)。甲
醇为色谱纯 ,其他试剂为分析纯 。对照品为中国药
品生物制品检定所提供 ,原儿茶酸(809-200102)、原
·393·中药材第 28卷第 5期 2005年 5月
DOI :10.13863/j.issn1001-4454.2005.05.015
儿茶醛(110810-200205)。生药样品购于广西百色
市 ,经鉴定为菊科植物滇桂艾纳香 Blumeariparia
(Bl.)DC.的干燥全草 。
2 　方法与结果
2.1 　色谱条件　LichrocartC18(250×4 mm)卡套
柱(德国 Merck产品),加预柱;流动相:甲醇-水(冰
醋酸调 pH值 2.8)(15∶85),流速:1.0ml/min;检测
波长为 256nm;柱温为室温;进样量 5 μl,外标法峰
面积定量。
2.2 　标准曲线的制备　精密称取原儿茶酸对照品
5.7mg,置 10 ml量瓶中 ,甲醇溶解稀释至刻度 。精
密吸取 1 ml,置 10 ml量瓶中 ,流动相稀释至刻度 。
分别进样 1μl、2μl、5 μl、8 μl、10 μl,以峰面积(A)
对对照品的进样质量(C)进行回归 ,得回归方程 A
=5123.7C-160.52,相关系数 0.99999 ,进样量在
0.057 ～ 0.57 μg范围内线性关系良好。
精密称取原儿茶醛对照品 3.0 mg,置 10 ml量
瓶中 ,甲醇溶解稀释至刻度。精密吸取 1 ml,置 10
ml量瓶中 ,流动相稀释至刻度 。分别进样 1 μl、 2
μl、5 μl、8 μl、10 μl,以峰面积(A)对对照品的进样
质量 (C)进行回归 , 得回归方程 A=625.33C-
27.869,相关系数 0.9997,进样量在 0.03 ～ 0.30 μg
范围内线性关系良好 。
2.3 　精密度试验　对照品溶液连续进样 5次 ,结
果原儿茶酸峰面积分别为 436.81, 448.24, 437.09,
463.65, 438.59,平均值 439.08, RSD=1.21%;原儿
茶醛峰面积分别为 103.11, 103.77, 100.93, 102.91,
102.15,平均值 102.57, RSD=1.06%。
2.4 　稳定性试验　对照品溶液在 0, 1, 2 , 4, 8 h测
定 ,结果原儿茶酸峰面积值的为 1.13%;原儿茶醛
峰面积 RSD为 1.35%。表明在 8h内基本稳定 。
2.5 　重现性试验　测定同批样品 5份 ,结果表明 ,
原儿茶酸的 RSD为 3.05%(n=5);原儿茶醛的
RSD为 1.73%。
2.6 　加样回收试验　称取已知含量的滇桂艾纳香
药材适量 ,加入一定量的对照品储备液 ,同法处理 ,
结果表明 ,原儿茶酸的平均回收率为 97.60%, RSD
为 0.45%;原儿茶醛的平均回收率为 99.44%, RSD
为 1.52%。
2.7 　样品的测定　取本品最粗粉约 10 g,精密称
定 ,置 400 ml烧杯中 ,加水 100 ml,浸泡 30 min,煎
煮提取 3次 ,第一次 1.5h,第二次 、第三次各 1 h,滤
液合并 ,浓缩至 100 ml,加盐酸 1.0 ml,以等量醋酸
乙酯-乙醇(4∶1)提取 4次 ,合并提取液 ,蒸干 ,残渣
加甲醇定量转移至 10 ml量瓶中 , 0.45 μm滤膜过
滤 ,进样分析。结果原儿茶酸的平均含量为 6.31
mg/100g,原儿茶醛的平均含量为 7.29 mg/100g(n
=3)。
3　讨论
3.1　系统适应性试验时 ,从 DAD检测器收集的图
谱信息可知 ,原儿茶酸最大吸收波长为 256±2 nm,
原儿茶醛最大吸收波长为 280±2 nm。如果选择
280 nm波长处测定 ,现有取样量不变 ,则原儿茶酸
几乎检测不到;而在 256nm波长测定 ,二者可兼顾。
为了不增加取样量 ,减少对分析柱的污染 , 故选用
256 nm为检测波长 。
3.2　水提取液适当浓缩 ,用乙醚 、醋酸乙酯 、醋酸
乙酯 -乙醇(4∶1)萃取 ,进样分析 ,图谱质量无明显差
别。故本法采用醋酸乙酯-乙醇进行前处理 。
3.3　含测结果与文献报道〔9〕的产于广西百色市的
滇桂艾纳香原儿茶酸含量接近。本法同时测定其活
血化瘀活性成分的含量 ,对控制该药材质量以及新
药的开发利用具有一定意义 。
注:本课题由广东省自然科学团队基金(粤科基办 [ 2003] 11
号)、广东省科技计划项目(2002A301030206)、广州市科技攻关项目
(2002Z3-E5031)资助;＊通讯作者
参 考 文 献
1　百色专区革委会中草药验方编写组 .百色地区常用中
草药验方选 , 1997∶414
2　江苏省植物研究所等 .新华本草纲要 .第三册 .上海:
上海科学技术出版社 , 1990∶95
3　林榕 , 等 .中国植物志(75卷).北京:科学出版社 ,
1979∶13
4　广西壮族自治区卫生厅 .广西中药材标准 .第二
册 .1996∶274
5　张遵义 ,等 .原儿茶酸衍生物的化学结构与冠脉流量 、
心肌耗氧量关系的探讨 .药学学报 , 1980, 15(11)∶641
6　杨东明 ,等 .五灵脂活性成分的研究 .药学学报 , 1987,
22(10)∶765
7　徐宗佩 ,等 .中药单体原儿茶醛对瘀血证患者单核细胞
趋化游走能力的影响 .天津中医 , 2002, 19(1)∶49
8　陈克奇 ,等 .原儿茶醛对血 IM＆NI, Ⅰ证患者外周血单
个核细胞趋化游走能力变化的影响 .中国病理生理杂
志 , 2001, 17(11)∶1064
9　谢培德 ,等 .反相高效液相色谱法测定滇桂艾纳香中原
儿茶酸的含量 .中国中药杂志 , 2000, 25(4)∶227
10　胡晓炜 , 等 .RP-HPLC法测定风寒感冒宁冲剂中原儿
茶酸 、原儿茶醛的含量 .中国现代应用药学杂志 ,
2002, 19(1)∶53
(2004-04-21收稿
2005-02-08修回)
·394· 中药材第 28卷第 5期 2005年 5月