全 文 ：华西药学杂志
W C J·P S 2010，25(1)∶040 ～ 043
基金项目:国家自然科学基金资助项目(批准号:30772714)
作者简介:侯蕾(1985—) ，女，硕士，从事天然活性成分的研究工作。Email:houlei85@ tom. com
* 通信作者(Correspondent author) ，Email:dalianwyq@ 163. com
西南山茶植物不同部位化学成分的定量分析
侯 蕾，石海峰，唐 玲，史丽颖，冯宝民，王永奇*
(大连大学药物研究所，辽宁 大连 116622)
摘要:目的 测定西南山茶叶(醇提物、乙酸乙酯萃取物) ，花蕾(醇提物) ，种子(醇提物、水提物) ，果皮(醇提物、水提物)各
植物部位中总皂苷、总多酚(鞣质)、总黄酮的含量。方法 采用 UV法。结果 其总皂苷、总多酚(鞣质)、总黄酮的含量依次
为山茶叶醇提物 33. 33%、15. 73% (4. 48%)、10. 95%;山茶叶乙酸乙酯萃取物 38. 69%、20. 01% (8. 32%)、39. 38%;花蕾醇
提物 40. 42%、22. 52% (8. 54%)、18. 34%;种子醇提物 21. 40%、4. 74% (0. 83%)、3. 82%;种子水提物 1. 74%、9. 30%
(3. 06%)、0. 03%;果皮醇提物 11. 20%、10. 61% (2. 82%)、11. 16%;果皮水提物 2. 10%、7. 89% (7. 24%)、1. 39%。结论
UV法测定以上 3 种物质简便易行，准确可靠，重复性较理想，回收率较好。
关键词:西南山茶;总皂苷;总多酚;总黄酮;含量测定
中图分类号:R917 文献标志码:A 文章编号:1006 － 0103(2010)01 － 0040 － 04
Determination of chemical constituents in Camellia pitardii
HOU Lei，SHI Hai － feng，TANG Ling，SHI Li － ying，FENG Bao － min，WANG Yong － qi*
(Institute of Materia Medica of Dalian University，Dalian，Liaoning，116622 P. R. China)
Abstract:OBJECTIVE To determine the chemical constituents of total saponin，total polyphenol (tannin)and total flavonoids in
section Camellia pitardii.METHODS The contents were determined by spectrophotometry. RESULTS The contents of total sapo-
nin，total polyphenol (tannin)and total flavonoids were respectively determined as follows:extracts from alcohol of Cmellia pitardii
leaves:33. 33%，15. 73% (4. 48%) ，10. 95%;extracts from ethyl acetate of Cmellia pitardii leaves:38. 69%，20. 01% (8. 32%) ，
39. 38%;extracts from alcohol of Camellia pitardii buds:40. 42%，22. 52% (8. 54%) ，18. 34%;extracts from alcohol of Cmellia
pitardii seeds:21. 40%，4. 74%(0. 83%) ，3. 82%;extracts from aqueous of Camellia pitardii seeds:1. 74%，9. 30% (3. 06%) ，
0. 03%;extracts from alcohol of Cmellia pitardii peels:11. 20%，10. 61% (2. 82%) ，11. 16%;extracts from aqueous of Camellia
pitardii peels:2. 10%，7. 89% (7. 24%) ，1. 39% . CONCLUSION The method is convenient and reliable to determinate the three
substance and the reproducibility and the recovery were well.
Key words:Camellia pitardii;Total saponin;Total polyphenol;Total flavonoids;Determination
CLC number:R917 Document code:A Article ID:1006 － 0103(2010)01 － 0040 － 04
西南山茶系山茶科山茶属植物，具有活血止血、
收敛止泻、解毒敛疮的功效，主治月经不调、月经过
多、肠风下血、吐血、急性肠胃炎、痢疾、脱肛、白带、遗
精、风湿痹痛、烧伤等［1］。在云南各地分布甚广，同时
贵州西部、四川中部、湖南西北部及广西西北部也有
资源。西南山茶的化学、药理及药用价值尚未见报
道。为对其化学成分进行研究，文中以皂苷、多酚、黄
酮类成分为指标，对西南山茶叶(醇提物、乙酸乙酯萃
取物)、花蕾(醇提物)、种子(醇提物、水提物)、果皮
(醇提物、水提物)的化学成分进行了分析测定。
1 实验部分
1. 1 试药与仪器
西南山茶采集于广西，经昆明植物所裴盛基教
授鉴定;黄酮对照品(自制，纯度 98%) ;齐墩果酸
(批号:1107092200304，纯度 > 98%)、没食子酸(批
号:1205632200412，纯度 99. 1%)对照品(中国药
品生物制品检定所;所用试剂为分析纯;水为蒸馏
水。Unico7200 可见分光光度计(尤尼柯上海仪器
有限公司) ;Jasco v － 2560 紫外可见分光光度计
(JASCO日本分光株式会社)。
1. 2 总皂苷的含量测定［2］
1. 2. 1 溶液的制备 精确称取 20 mg 干燥至恒重
的齐墩果酸对照品，置 100 mL量瓶中，加甲醇定容，
得 0. 2 mg·mL －1的对照品溶液，备用。分别精确称
取西南山茶不同植物部位的干浸膏，置 100 mL量瓶
中，加甲醇定容，得供试品溶液，备用。
1. 2. 2 测定波长的选择 齐墩果酸对照品溶液和供
DOI:10.13375/j.cnki.wcjps.2010.01.020
试品溶液用香草醛 －冰醋酸 －高氯酸显色后，在紫
外可见分光光度计上、于 400 ～800 nm扫描，均在 551
nm 处有最大吸收，因此，选择 551 nm 为测定波长。
测得的结果以齐墩果酸为基准计算总皂苷的含量。
1. 2. 3 线性关系与样品测定 精确吸取齐墩果酸
对照品溶液 0、0. 05、0. 10、0. 15、0. 20、0. 25 mL分置
具塞试管中，挥去甲醇，精密加入 0. 2 mL 5%香草
醛 －冰乙酸溶液(新鲜配制)、0. 8 mL高氯酸，摇匀，
于 60 ℃水浴中加热 15 min后，置冰浴中冷却。加 5
mL冰乙酸，摇匀，立即在 551 nm处测定吸光度，同
时以试剂空白做参照。以体积(mL)为纵坐标、吸光
度为横坐标，绘制标准曲线。得到回归方程为:Y =
2. 2520X － 0. 0039(r = 0. 9994)。
1. 2. 4 显色反应的精密度 精确吸取供试品溶液，
置具塞试管中，挥去甲醇，照“1. 2. 3”项下的方法操
作，平行做 5次实验，测定吸光度 ，代入回归方程，
计算总皂苷的含量(表 1)。
表 1 西南山茶不同植物部位的总皂苷
Table 1 Contents of total saponins in different parts of Camellia
pitardii
不同植物部位 平均含量 /% RSD /%
叶醇提物 33. 33 1. 01
叶乙酸乙酯萃取物 38. 69 0. 93
花蕾醇提物 40. 42 2. 96
种子醇提物 21. 40 0. 97
种子水提物 1. 74 0. 98
果皮醇提物 11. 20 0. 49
果皮水提物 2. 10 1. 03
1. 2. 5 重复性试验 取 0. 5 kg 西南山茶的种子，
用 95%乙醇提取，得醇提物浸膏，平行进行 5 组实
验。精确称取干燥至恒重的醇提物干浸膏，置 100
mL量瓶中，加甲醇定容，得不同浓度的溶液，备用。
精确吸取 0. 4 mL的供试品溶液，置具塞试管中，挥
去甲醇，照“1. 2. 3”项下的方法操作，平行做 5 次实
验，测定吸光度，代入回归方程，计算总皂苷的含量
为 21. 48% ，RSD = 1. 06%。
1. 2. 6 加样回收率试验 精确吸取 0. 15 mL 已知
总皂苷含量的供试品提取液，置具塞试管中，分别加
入 0. 1 mL的 0. 2 mg·mL －1齐墩果酸对照品溶液，余
下部分按“1. 2. 3”项下的方法操作，平行测定 5 次，
计算加样回收率(表 2)。
表 2 总皂苷测定的加样回收率实验(μg)
Table 2 Recovery of determination in total saponins(μg)
试品量 加入量 测得量 回收率 /% 珔X /% RSD /%
19. 0 20 38. 3 98. 2 99. 7 1. 10
19. 0 20 38. 7 99. 2
19. 0 20 39. 4 101. 0
19. 0 20 38. 9 99. 7
19. 0 20 39. 2 100. 5
1. 3 多元酚及鞣质的含量测定［3］
1. 3. 1 溶液的制备 精确称取 50 mg 干燥至恒重
的没食子酸对照品，置 100 mL棕色量瓶中，加水定
容，得 0. 05 mg·mL －1的对照品溶液，备用。精确称
取西南山茶不同植物部位的干浸膏，置 100 mL量瓶
中，加水定容，过滤，弃去 50 mL初滤液，精密量取
20 mL，置 100 mL 棕色量瓶中，用水定容，得供试
品溶液Ⅰ;精密吸取 20 mL溶液，加至已盛有 2. 4 g
干酪素的 100 mL具塞锥形瓶中，密塞，置 30 ℃水
浴中保温 1 h ，振摇，取出，放冷，摇匀，过滤，弃去
初滤液，取续滤液作为供试品溶液Ⅱ。
1. 3. 2 测定波长的选择 没食子酸对照品溶液和
供试品溶液经磷钼钨酸 －碳酸钠显色后，在紫外可
见分光光度计上、于 400 ～ 1000 nm 扫描。均在 754
nm 处有最大吸收，因此，选择 754 nm 为测定波长，
测得的结果以没食子酸为基准计算总酚和鞣质的
含量。
1. 3. 3 线性关系的考察 精确吸取 0、0. 5、1. 0、
1. 5、2. 0、2. 5 mL，没食子酸对照溶液分别置 10 mL
棕色量瓶中，各加水至 5 mL ，再分别加入 1 mL磷
钼钨酸试液，用 29% Na2CO3 溶液定容，以相应的
试剂为空白，于 30 min 后，在 754 nm 处测定吸光
度。以体积(mL)为纵坐标、吸光度为横坐标，绘
制标准曲线。得到回归方程为:Y = 4. 9920X －
0. 0433(r2 = 0. 9991)。
1. 3. 4 显色反应的精密度考察 精确吸取供试品
溶液Ⅰ、Ⅱ，分别置于 10 mL 的棕色量瓶中，照
“1. 3. 3”项下的方法操作，同法测定吸光度，各平
行测定 5 次，在 754 nm处测定吸光度 A，代入回归
方程，计算总酚和鞣质的含量(表 3)。
表 3 西南山茶不同植物部位总酚和鞣质的含量(n =5)
Table 3 Contents of total polyphenol in different parts of Camellia
pitardii(n =5)
不同植物部位
总酚
含量 /% RSD /%
鞣质
含量 /% RSD /%
叶醇提物 15. 73 1. 2 4. 48 1. 0
叶乙酸乙酯萃取物 20. 01 1. 3 8. 32 1. 4
花蕾醇提物 22. 52 0. 8 8. 54 1. 1
种子醇提物 4. 74 2. 0 0. 03 2. 3
种子水提物 9. 30 0. 2 3. 06 1. 0
果皮醇提物 10. 61 0. 4 2. 82 0. 9
果皮水提物 7. 89 1. 2 7. 24 1. 4
1. 3. 5 重复性试验 取 0. 5 kg 西南山茶的种子，
用 95%乙醇提取，回收溶剂得醇提物浸膏，平行进
行 5 组实验。精确称取 0. 200 g 干燥至恒重的醇提
物干浸膏，置 100 mL 量瓶中，加水定容，过滤，弃
14第 1 期 侯 蕾，等。西南山茶植物不同部位化学成分的定量分析
去 50 mL初滤液，精密量取 20 mL该液，置 100 mL
棕色量瓶中，用水定容，得供试品溶液Ⅰ;精密吸取
20 mL溶液，加至已盛有 2. 4 g 干酪素的 100 mL 具
塞锥形瓶中，密塞，置 30 ℃水浴中保温 1 h ，振摇，
取出，放冷，摇匀，过滤，弃去初滤液，续滤液作为
供试品溶液Ⅱ。精确吸取 1 mL 的供试品溶液Ⅰ、
Ⅱ，分别置于 10 mL的棕色量瓶中，照“1. 3. 3”项下
的方法操作，同法测定吸光度。各平行测定 5 次，在
754 nm处测定吸光度，代入回归方程，计算总酚和
鞣质的含量分别为 4. 83%、0. 036%，RSD 分别为
0. 76%、1. 01%。
1. 3. 6 加样回收率试验 精确吸取 1. 0 mL已知总
酚以及不被吸附多酚含量的供试品溶液置于 10 mL
棕色量瓶中，分别加入 1. 0 mL 0. 01 mg·mL －1的没
食子酸对照品溶液余下部分按“1. 3. 3”项下的方法
操作，平行测定 5 次，计算加样回收率(表 4)。
表 4 总酚和鞣质的加样回收率结果(μg)
Table 4 Recovery of determination in total polyphenols and not be
adsorbed polyphenols(μg)
成份 供试品量 加入量 测得量 回收率 /% 珔X /% RSD /%
总酚 8. 80 10. 00 18. 80 100. 00 100. 04 0. 21
8. 80 10. 00 18. 82 100. 20
8. 80 10. 00 18. 77 99. 70
8. 80 10. 00 18. 81 100. 10
8. 80 10. 00 18. 82 100. 20
鞣质 8. 00 10. 00 18. 03 100. 30 100. 34 0. 68
8. 00 10. 00 17. 94 99. 40
8. 00 10. 00 18. 10 101. 00
8. 00 10. 00 18. 00 100. 00
8. 00 10. 00 18. 10 101. 00
1. 4 总黄酮的含量测定［4 － 5］
1. 4. 1 溶液的制备 精确称取 20 mg 干燥至恒重
的对照品，置 100 mL 量瓶中，加甲醇定容，得 0. 20
mg·mL －1的对照品溶液，备用。精确称取山茶组植
物提取物的干浸膏，置 100 mL量瓶中加甲醇定容，
得供试品溶液，备用。
1. 4. 2 测定波长的选择 取“1. 4. 1”项对照品溶
液和供试品溶液 NaNO2 － AlCl3 显色后，在紫外可
见分光光度计上，于 200 ～ 600 nm 扫描，均在 400
nm处有最大吸收，因此，选择 400 nm 为测定波长。
测得的结果以对照品为基准计算总黄酮的含量。
1. 4. 3 线性关系的考察 精密吸取 0、0. 3、0. 6、
0. 9、1. 2、1. 5 mL对照品溶液，各加甲醇至 4 mL，再
分别加入 0. 3 mL质量分数为 5%的 NaNO2 溶液，摇
匀，室温下放置 6 min，再加 0. 3 mL的 10% AlCl3 溶
液，摇匀，室温放置 10 min，在 400 nm 处测定吸光
度，同时以试剂空白做参比。以体积为纵坐标、吸光
度为横坐标，绘制标准曲线。得到回归方程为:Y =
1. 5651X － 0. 0317(R2 = 0. 9996)。
1. 4. 4 显色反应精密度的考察 精确吸取供试品
溶液，置试管中，加甲醇至 4. 0 mL，按“1. 4. 3”项下
的方法操作，测定吸光度，平行做 5 次实验，代入
回归方程，计算总黄酮的含量(表 5)。
表 5 西南山茶不同植物部位的总黄酮含量
Table 5 Contents of total flavonoids in different parts of Camellia
pitardii
不同植物部位 平均含量 /% RSD /%
叶醇提物 10. 95 0. 10
叶乙酸乙酯萃取物 39. 38 0. 15
花蕾醇提物 18. 34 0. 15
种子醇提物 3. 82 0. 40
种子水提物 0. 03 0. 15
果皮醇提物 11. 16 0. 15
果皮水提物 1. 39 0. 15
1. 4. 5 重复性试验 取 0. 5 kg 西南山茶的种子，
用 95%乙醇提取，回收溶剂得醇提物浸膏，醇提物
平行进行 5 组实验。精确称取干燥至恒重的醇提物
干浸膏，置 100 mL量瓶中，加甲醇定容，得不同浓度
的溶液，备用。精确吸取 3. 0 mL的供试品溶液，置
试管中，加甲醇至 2. 0 mL，按“1. 4. 3”项下的方法操
作，测定吸光度，平行做 5 次实验，代入回归方程，
计算总黄酮的含量为 4. 05%，RSD = 1. 10%。
1. 4. 6 加样回收率试验 精确吸取 1. 0 mL已知总
黄酮含量的供试品提取液置于试管中，分别加入
0. 5 mL的 0. 2 mg·mL －1的芦丁对照品溶液，余下部
分按标准曲线项下的方法操作，平行测定 5 次，计算
加样回收率(表 6)。
表 6 总黄酮的加样回收率(μg)
Table 6 Recovery of determination in total flavonoids(μg)
供试品量 加入量 测得量 回收率 /% 珔X /% RSD /%
72. 8 100. 0 173. 0 100. 20 100. 13 0. 12
72. 8 100. 0 173. 1 100. 30
72. 8 100. 0 172. 9 100. 10
72. 8 100. 0 172. 9 100. 08
72. 8 100. 0 172. 8 99. 98
2 讨论
皂苷的分析测定有多种方法，如沉淀法、溶血指
数法、层析法等，作者选择了与山茶皂苷类成分基本
母核结构接近的齐墩果酸为对照品，采用分光光度
法测定其总皂苷的含量。鞣质的测定方法有重量
法、容量法、比色法等，2005 年版《中国药典》一部鞣
质测定法以没食子酸为对照品，稳定性好，干酪素的
吸附作用具有专属性，其方法操作简便，用时短，且
重复性和回收率都较理想。采用可见分光光度法测
定总黄酮的含量是比较成熟的方法，此方法稳定性
24 华 西 药 学 杂 志 第 25 卷
华西药学杂志
W C J·P S 2010，25(1)∶043 ～ 045
好、准确度高、且简便快捷、易于操作、结果可靠。
参考文献:
［1］ 中国国家中医药管理局《中华草本》编委会. 中华草本［M］.
第 9 卷.上海:上海科学技术出版社，1999:564.
［2］ 高声传，郭涛，夏维杰，等. 比色法测定酸枣仁提取物中总皂
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［3］ 中华人民共和国国家药典委员会.中国药典［S］.一部.北京:
化学工业出版社，2005:附录 57，附录 63.
［4］ 郑一敏，胥秀英，傅善权，等. 青皮总黄酮的提取工艺与测定
［J］.华西药学杂志，2007，22(5) :580 － 581.
［5］ 毕和平，韩日长，廖家旺，等.穿心莲总黄酮含量的测定［J］.
光谱实验室，2006，23(3) :356 － 359.
收稿日期:2009 － 05 － 27
基金项目:国家自然科学基金资助项目(批准号:30460149)
作者简介:李向阳(1974—) ，男，甘肃会宁，副教授，正攻读药理学专业的博士学位。Email:qhmclxy@ 163. com
* 通信作者(Correspondent author) ，Email:geriligao@ hotmail. com
磺胺甲噁唑及其代谢产物在健康人体内的药物动力学研究
李向阳1，2，冯伟力2，程会云2，朱俊博2，格日力2*
(1.沈阳药科大学生命科学与生物制药学院，辽宁 沈阳 110016;2.青海大学医学院，青海 西宁 810001)
摘要:目的 探讨磺胺甲噁唑及其代谢产物 N4 －乙酰磺胺甲噁唑在健康男性志愿者体内的药物动力学。方法 20 名受试者
口服复方新诺明片后，采用 RP － HPLC法测定磺胺甲噁唑及其代谢产物 N4 －乙酰磺胺甲噁唑的血药浓度，DAS 2. 0 软件计算
药物动力学参数。结果 磺胺甲噁唑及其代谢产物 N4 －乙酰磺胺甲噁唑的主要药物代谢动力学参数 t1 /2分别为 9. 30 ± 1. 11、
12. 43 ± 2. 43 h，AUC0 － t为 1202. 5 ± 238. 3、240. 9 ± 47. 1 μg·h·mL
－1，CL为 1. 01 ± 0. 22、1. 99 ± 0. 43 L·h －1·kg －1，Vd为 13. 27 ±
1. 73、34. 49 ± 4. 38 L·kg －1，MRT为 12. 06 ± 0. 94、15. 40 ± 1. 81 h。结论 磺胺甲噁唑在体内吸收迅速、消除半衰期较长，其乙
酰化代谢途径为生成限速代谢模式，20 名受试者中没有发现明显的快慢代谢分型。
关键词:磺胺甲噁唑;N4 －乙酰磺胺甲噁唑;药物动力学;高效液相色谱
中图分类号:R917 文献标志码:A 文章编号:1006 － 0103(2010)01 － 0043 － 03
Pharmacokinetic study of Sulfamethoxazole and metabolite in healthy chinese volunteers
LI Xiang － yang1，2，FENG Wei － li2，CHENG Hui － yun2，ZHU Jun － bo2，GE Ri － li2*
(1. College of Life and Biopharmaceutical Science，Shenyang Pharmaceutical University，Shenyang，Liaoning，110016 P. R. China;
2. Medical College of Qinghai University，Xining，Qinghai，810001 P. R. China)
Abstract:OBJECTIVE To study the pharmacokinetics of sulfamethoxazole and metabolite N4 － acetylsulfamethoxazole in healthy
Chinese volunteers.METHODS 20 healthy Chinese volunteers were administrated orally of cotrimoxazole tablets. Then the plasma
concentration of sulfamethoxazole and metabolite N4 － acetylsulfamethoxazole were determined by RP － HPLC，and plasma
concentration － time data were analyzed by DAS 2. 0 software to get the related pharmacokinetic parameters. RESULTS The main
pharmacokinetic parameters t1 /2 of sulfamethoxazole and metabolite N
4 － acetylsulfamethoxazole were 9. 30 ± 1. 11 h and 12. 43 ±
2. 43 h，respectively;AUC0 － t were 1202. 5 ± 238. 3 μg·h·mL
－1 and 240. 9 ± 47. 1 μg·h·mL －1，CL were 1. 01 ± 0. 22 L·h －1·kg －1 and
1. 99 ± 0. 43 L·h －1·kg －1，Vd were 13. 27 ± 1. 73 L·kg
－1 and 34. 49 ± 4. 38 L·kg －1，MRT were 12. 06 ± 0. 94 h and 15. 40 ± 1. 81 h.
CONCLUSION Sulfamethoxazole has rapid absorption and long half － life time of elimination after oral administration，and the elimi-
nation of N4 － acetylsulfamethoxazole was a formation rate － limited metabolism. Slow and fast acetylators for sulfamethoxazole were not
be found in this study.
Key words:Sulfamethoxazole;N4 － acetylsulfamethoxazole;Pharmacokinetics;HPLC
CLC number:R917 Document code:A Article ID:1006 － 0103(2010)01 － 0043 － 03
复方新诺明为中效磺胺类抗菌药物，临床用于
急慢性尿路感染、脑膜炎、呼吸道感染等的预防和治
疗［1］，对系统红斑狼疮等结缔组织病也有一定疗
效［2］。长期使用可引起过敏反应、恶心、呕吐、肝毒
性、血液学毒性和皮肤黏膜眼综合征等不良反
应［3］。磺胺甲噁唑为复方新诺明的主要成分之一，
在体内主要被 N －乙酰基转移酶代谢为 N4 －乙酰
磺胺甲噁唑后排除体外，且毒性与体内的代谢产物、
代谢途径及酶的多态性有关［4 － 5］。磺胺甲噁唑的药
物动力学研究文献有大量报道，但其代谢产物的报