全 文 :华西药学杂志WCJ· PS 2008, 23(2):201 ~ 202
作者简介:何俊 ,男 ,云南洪河 ,正攻读生药学专业的硕士学位。
*通讯作者(Correspondentauthor)
不同产地的通光藤中总皂苷含量的比较
何 俊 1 ,王 曙 1* ,严晓梁2
(1.四川大学华西药学院 ,四川 成都 610041;2.四川省人民医院 , 四川 成都 610072)
摘要:目的 比较 6个产地的通光藤中总皂苷的含量。方法 采用香草醛 -高氯酸显色 ,比色法测定总皂苷的含量。结果
云南建水 、石屏 、丽江 , 四川崇州 、乐山 、西昌等地通光藤中总皂苷的含量分别为 3.87%、 3.44%、 2.91%、 1.63%、 1.44%、
2.22%。结论 不同产地通光藤中总皂苷的含量差异较大 , 其中以云南建水所产通光藤中总皂苷的含量最高。
关键词:通光藤;总皂苷;产地;比色法
中图分类号:R282.71 文献标识码:A 文章编号:1006-0103(2008)02-0201-02
ComparisonofthecontentsoftotalsaponinsinCaulisMarsdeniae
HEJun1 , WANGShu1* , YANXiao-liang2
(1.WestChinaSchoolofPharmacy, SichuanUniversity, Chengdu610041, China;2.thePeople sHospitalofSichuanProvince,
Chengdu610072, China)
Abstract:OBJECTIVE TocomparethecontentsofthetotalsaponinsinCaulisMarsdeniaederivedfromdiferentprovince.
METHODS Colorimetrywasusedwithvanillin-perchloricacidascoloringreagenttodeterminethecontentoftotalsaponins.RE-
SULTS ThecontentsoftotalsaponinsinCaulisMarsdeniaederivedfromJianshui, Shiping, LijianginYunnanprovince, Chongzhou,
Leshan, XichanginSichuanprovincewere3.87%, 3.44%, 2.91%, 1.63%, 1.44% and2.22%, respectively.CONCLUSION The
contentsoftotalsaponinsinCaulisMarsdeniaederivedfromdiferenthabitatsarequitediferent, andthehighestoneisfromJianshuiin
Yunnanprovince.
Keywords:CaulisMarsdeniae;Totalsaponins;Habitat;Colorimetry;Determination
CLCnumber:R282.71 Documentcode:A ArticleID:1006-0103(2008)02-0201-02
通光藤 Marsdeniatenacisima(Roxb.)Wightet
Arn.是萝摩科牛奶菜属植物 , 含有甾体皂苷 、生物
碱 、有机酸 、多糖 、树脂及色素等多种化学成分 [ 1 ~ 3] ,
具有免疫调节 、保肝利尿 、败毒抗癌等作用 ,是有发
展前景的抗肿瘤中药 [ 4] 。通光藤主要分布于中国
云南 、贵州 、广西等省份 [ 5] ,但课题组近期在四川崇
州 、乐山 、西昌等地也发现了通光藤 ,为比较和评价
其品质 ,我们以总皂苷为指标 ,用比色法测定了川 、
滇 6个不同产地通光藤中的总皂苷。
1 实验部分
1.1 试药与仪器
通光藤采挖于四川 、云南等地 ,经鉴定均为萝藦
科牛奶菜属 植物通光藤 Marsdeniatenacissima
(Robx.)WightetArn的干燥藤茎 。通光藤苷对照
品 L、M、N、O、P(自制 ,经 HR-ESI-MS、1HNMR、
13CNMR确定结构 ,其含量﹥ 99%);试剂均为分析
纯 。UV2300紫外可见分光光度计(上海天美科仪
公司)。
1.2 方法与结果
1.2.1 溶液的制备 分别精密称取通光藤苷对照
品 L、M、 N、O、P(真空干燥至恒重)13.36、8.44、
10.30、10.48、10.84 mg,置 10 ml量瓶中 ,加甲醇定
容 ,作为对照品溶液;精密量取上述 5种对照品溶液
各 1ml,置 5 ml量瓶中 ,混匀 ,作为混合对照品溶液
(通光藤苷 L、M、 N、O、P分别为 0.2672、0.1688、
0.2060、0.2096 、0.2168 mg·ml-1)。精密称取 1.5
g药材粉末(过 40目筛 、50℃烘 4 h)置圆底烧瓶中 ,
加入 20 m170%乙醇 ,浸泡 4h后回流提取(2h×2)
过滤 ,合并滤液 ,减压回收溶剂 ,残渣加 10 ml水使
溶解 ,上 D141大孔吸附树脂柱纯化富集总皂苷。
上样后分别用 100 ml蒸馏水 、50 ml40%乙醇 、250
ml70%乙醇依次洗脱 ,采用 Liebermann-Burchard
反应监控上样后的流出液 、40%乙醇洗脱液 ,皂苷反
应均为阴性。 70%乙醇洗脱液浓缩后 ,用甲醇定容
至 5ml,吸取 1ml,用甲醇定容至 10ml,作为供试品
溶液 。
1.2.2 测定波长的选择 分别取 5个对照品溶液
和供试品溶液各约 0.1 ml,分置具塞试管中 ,水浴挥
DOI :10.13375/j.cnki.wcjps.2008.02.022
干溶剂 ,精密加入 5%香草醛 -冰醋酸溶液 0.2 ml,
高氯酸 0.8ml,混匀 , 60℃恒温水浴加热 15 min后 ,
流水冷却至室温 ,加冰醋酸 5ml,混匀 。以冰醋酸作
空白 ,在 300 ~ 800 nm紫外扫描 ,比较光谱图知 ,通
光藤苷 M对照品溶液与通光藤提取液的最大吸收
波长均为 480 nm左右 ,故选取通光藤苷 M作为对
照品 ,检测波长为 480nm。
1.2.3 标准曲线制备 精密吸取 0.02、 0.05、
0.10、0.20、0.50、1.00 ml通光藤苷 M,分别置具塞
试管中 ,按 “ 1.2.2”项下方法操作 ,在 480 nm处分
别测定吸光度 ,将吸光度 A和对照品量 C进行线性
回归 ,回归方程为:A=0.216C-4.000×10-4(r=
0.9984),对照品 0.017 ~ 0.170mg与吸光度线性关
系良好 。
1.2.4 稳定性试验 精密吸取 0.1 ml0.844 mg·
ml-1通光藤苷 M对照品溶液和 0.2ml供试品溶液 ,
分别置具塞试管 ,按 “ 1.2.2”项下方法操作 ,测定对
照品与样品显色液 0、20、40、60、80、120 min在 480
nm处的吸光度 , 吸光度的 RSD分别为 0.8%、
0.3%,说明对照品与样品显色液在 2h内稳定 。
1.2.5 加样回收试验 精密称取药材样品粉末 ,共
6份 ,分别精密加入 0.844 mg·ml-1的对照品 M溶
液 0.05、0.05、0.06、0.06、0.07、0.07ml,按 “1.2.1”
项下方法制备供试品溶液 ,并按 “1.2.2”项下方法 ,
测定 480 nm的吸光度并计算含量 ,回收率分别为
98.6%、97.3%、103.4%、100.7%、99.6%、101.8%,
平均回收率为 100.2%, RSD=2.2%,说明方法回收
率较高 。
1.2.6 重复性试验 精密称取药材粉末 1.5 g,共
6份 ,按 “1.2.2”项下方法制备供试品溶液 ,分别吸
取各供试品溶液 0.2ml,置具塞试管中 ,按 “1.2.3”
项下方法操作 ,分别在 480nm处测定吸光度 。计算
总皂苷含量 , RSD=1.7%,说明方法重复性良好。
1.2.7 样品的测定 分别精密称取不同产地的通
光藤药材粉末各 1.5g,按 “ 1.2.1”项下方法制备供
试品溶液。吸取供试品溶液各 0.2 ml,分置具塞试
管中 ,按 “1.2.2”项下方法处理后测定吸光度 ,再用
标准曲线法计算含量(表 1)。结果表明 ,不同产地
的通光藤总皂苷的含量不同 ,其中云南建水的最高 、
四川乐山的最低。
表 1 不同产地通光藤中总皂苷的含量
Table1 ContentsoftotalsaponinsinCaulisMarsdeniaefromsix
differenthabitats
Habitat Averagecontent/% RSD/%
YunnanJianshui 3.87 2.1
YunnanShiping 3.44 2.2
Yunnanlijiang 2.91 2.3
SichuanChongzhou 1.63 2.8
SichuanLeshan 1.44 3.1
SichuanXichang 2.22 2.3
2 讨论
与传统的氯原酸为指标的测定方法[ 6]相比 ,文
中所建方法以具活性的总皂苷为指标 ,更能反映药
材的疗效和质量。不同产地的通光藤总皂苷含量不
同 ,其中以云南建水的最高 ,四川乐山的最低 , 3个
滇产通光藤的总皂苷含量明显高于川产通光藤 ,故
对通光藤进行产品开发研究时应确定产地。对于不
同时期采收的通光藤中总皂苷含量的变化 ,有待进
一步研究 。
曾用 HPLC分析通光藤的皂苷类成分 ,发现其
所含皂苷类成分较多 ,不同产地的通光藤所含皂苷
的种类相似 ,但单体成分含量差异较大 ,且药效又不
明确 ,以单体成分来衡量通光藤的品质有一定局限
性 ,因此 ,以总皂苷含量来评价通光藤药材的品质具
有一定的意义 。
参考文献:
[ 1] 张家俊 , 胡德禹.乌骨藤化学成分和生物活性研究进展 [ J].
贵州大学学报(自然科学版), 2007, 24(2):213-215.
[ 2] WangShu, LaiYu-Han.TwonewC
21
steroidalglycosidesfrom
Marsdeniatenacissima(Roxb.)WightetArn[ J].ChemPharma
Bul, 2006, 54(5):696-698.
[ 3] 刘傲镭 ,王曙 ,何俊 , 等.HPLC-ELSD鉴别不同产地通光藤
的皂苷类成份 [ J].华西药学杂志 , 2007, 22(3):328-329.
[ 4] 孙珏 ,沈建华 ,朱美华 ,等.消癌平对人胃癌细胞治疗作用的
实验研究 [ J] .上海中医药大学学报 , 2000, 14(2):41.
[ 5] 江苏新医学院.中药大辞典 [ M].上海:上海人民出版社 ,
1977.1976.
[ 6] 赖玉菡 ,王曙.HPLC测定通关藤中绿原酸的含量 [ J] .华西药
学杂志 , 2006, 21(1):79-81.
收稿日期:2007-07
202 华 西 药 学 杂 志 第 23卷