全 文 ：·74· Chinese Journal of Information on TCM Oct.2015 Vol.22 No.10
·中药研究与开发·
HPLC测定竹节参中人参皂苷Rg1、Re、Rb1含量
郑宏,谷泉,王蕾,邹海艳
首都医科大学中医药学院,中医络病研究北京市重点实验室,北京 100069
摘要：目的 建立同时测定竹节参中人参皂苷 Rg1、Re、Rb1含量的高效液相色谱方法。方法 用 70%乙醇
超声提取竹节参药材,采用 Agilent Poroshell 120 C18色谱柱(4.6 mm×100 mm,2.7 μm),流动相为乙腈-0.1%
磷酸,梯度洗脱,流速 1.0 mL/min,检测波长 203 nm,柱温 30 ℃,进样量 10 μL。结果 在该色谱条件下,人参
皂苷 Rg1、Re、Rb1达到基线分离,线性关系良好,加样回收率分别为 99.5%、103.0%、100.5%。结论 该方法操
作简便,重复性好,分析周期短,能准确测定竹节参中人参皂苷 Rg1、Re、Rb1的含量,可为竹节参的质量控制提供
参考依据。
关键词：竹节参；人参皂苷；高效液相色谱；含量测定
DOI：10.3969/j.issn.1005-5304.2015.10.021
中图分类号：R284.1 文献标识码：A 文章编号：1005-5304(2015)10-0074-03
Simultaneous Content Determination of Gensinoside Rg1, Re and Rb1 in Panacis Japonici
Rhizoma by HPLC ZHENG Hong, GU Quan, WANG Lei, ZOU Hai-yan (Beijing Key Lab of TCM Collateral
Disease Theory Research, School of Traditional Chinese Medicine, Capital Medical University, Beijing 100069,
China)
Abstract：Objective To develop an HPLC method for simultaneous content determination of
ginsenoside Rg1, Re and Rb1 in Panacis Japonici Rhizoma. Methods Chromatographic separation
was carried out by using an Agilent Poroshell 120 C18 column (4.6 mm × 100 mm, 2.7 μm). The
mobile phase consisted of acetonitrile-0.1% phosphoric acid with gradient elution at a flowrate of
1.0 mL/min, and the injection volume was 10 μL. The detection wavelength and column
temperature were 203 nm and 30 ℃ respectively. Results Ginsenoside Rg1, Re and Rb1 had the
baseline separation and were in good linear range. The recovery rates were 99.5%, 103.0% and
100.5% respectively. Conclusion The approach is simple, accurate, with good repeatability and
short analysis period, which can determine the contents of ginsenoside Rg1, Re and Rb1 correctly
and provide references for quality control of Panacis Japonici Rhizoma.
Key words：Panacis Japonici Rhizoma；ginsenoside；HPLC；content determination

竹节参 Panax Japonicus C.A.Mey.为五加科人参
属植物,收载于 1975 年及以后历版《中华人民共和国
药典》,但迄今为止尚未建立质量标准。竹节参以根
茎入药,具有散瘀止血、消肿止痛、祛痰止咳、补虚
强壮作用,常用于治疗痨嗽咯血、跌扑损伤、病后虚
弱等症[1]。现代研究表明,竹节参中富含的三萜皂苷类
成分具有抗炎、镇痛、抗脑缺血、抗肿瘤等药理作用,

基金项目：国家自然科学基金青年基金(81403095)；北京市属高校
青年拔尖人才培育项目(CIT&TCD201404175、CIT&TCD201404184)
通讯作者：邹海艳,E-mail：bwzhy@sina.com
是其主要的活性成分[2-11]。竹节参中的皂苷主要为齐
墩果烷型和达玛烷型,其中以齐墩果烷型皂苷含量较
高,包括竹节参皂苷Ⅴ、Ⅳa、Ⅳ等。研究表明,达玛
烷型皂苷对心脑血管系统具有较强活性,如人参皂苷
Rg1、Rb1、Re、Rd[12-15]等。本试验采用高效液相色谱
法(HPLC)同时对竹节参中主要达玛烷型皂苷——人
参皂苷 Rg1、Re、Rb1 进行含量测定,为竹节参质量标
准的研究提供依据。
1 仪器与试药
Agilent 1260 高效液相色谱仪(四元泵,自动进
样器,DAD 检测器),十万分之一分析天平(赛多利斯),
2015 年 10
超声清洗仪
纯,Fisher
为分析纯。
人参皂
人参皂苷 Re
参皂苷Rb1对
成都普瑞法
购自河北安
副教授鉴定
2 方法与结
2.1 色谱条
色谱柱
2.7 μm)；流
洗脱(0～15
22 min,24%→
40%→100% A
量：10 μL；
行测定,各成
下,对照品和
注：A.对照品；B
图
2.2 对照品
分别精
2.00、8.00
解并定容至
2.3 供试品
取竹节
内,精密量取
(功率 300
量,补足减失
月第 22 卷
(德国 BAND
Scientific

苷Rg1对照品
对照品(纯
照品(纯度
科技开发有
国、安徽亳
符合药典规
果
件
：Agilent P
动相：乙腈
min,19%A；
31%A；22～6
；流速：1.
检测波长：
分之间能达
供试品色谱
.供试品；1.人参
1 竹节参中人参
溶液的制备
密称取人参
mg,置于 2
刻度,摇匀,
溶液的制备
参药材粉末
70%乙醇
W,频率 35
的质量,用
1
2
1
2
第 10 期
ELIN DT102
),娃哈哈纯
(纯度＞98%
度＞98%,批
＞98%,批号
限公司。竹节
州等地药材
定。
roshell C18
(A)-0.1%磷
15～20 min,
0 min,31%→
0 mL/min；
203 nm。按
到基线分离
图见图 1。
A
B
皂苷 Rg1；2.人参
皂苷 Rg1、Re、

皂苷 Rg1、Re
mL 容量瓶中
即得混合对照

1.0 g,精密
25.0 mL,称
kHz)1 h,放
0.45 μm
3
3

8H)。乙腈
净水,其余试
,批号14052
号 14051202
14053007)均
参药材 7批
市场,经本院
(4.6 mm×10
酸溶液(B)
19%→24%A；
40%A；60～6
柱温 30 ℃；
上述色谱条
。在此色谱

皂苷Re；3.人参
Rb1 HPLC图
、Rb1对照品
,加入 70%甲
品贮备液。
称定,置于三
定质量,超声
至室温,再称
滤膜过滤,取
中国中医药
(色谱
剂均
305)、
)、人
购自
分别
李佳
0 mm,
,梯度
20～
5 min,
进样
件进
条件


皂苷 Rb1
9.60、
醇溶

角瓶
提取
定质
续滤
液
2.

40
0.
为
Rb
对
量
线
Y＝
6.
1.
关
2.

连
面
密
2.

18
分
内
2.

备
用
的
均
3.
2.

共
苷
品
率
10
明
2.

分
检
10
t/min
信息杂志
,即得。
4 线性关系
分别精密
0、500 μL,
12、0.24、0
0.025、0.05
1浓度为 0.1
照品稀释液
(μg)对峰面
性方程分别
225.83X－
816 7(r＝0.
2～12 μg、
系良好。
5 精密度试
取同一混
续进样 6次
积的 RSD 分
度良好。
6 稳定性试
取同一供
、24 h 测定,
别为 1.5%、
稳定。
7 重复性试
取同一批
6 份样品溶
外标一点法
含量和 RSD。
含量分别为
8%、3.3%,表
8 加样回收
取已知含
6份,精密称
Rg1、Re、Rb
溶液,按“2
和RSD。结果
5%之间,RSD
样品的加样
9 检测限和
根据信噪
的最低检测
测限分别为
、5 ng。

考察
吸取对照品贮
稀释至 2 mL
.48、0.60、
0、0.100、0
、0.2、0.4
,按“2.1”项
积进行回归
为Y＝365.7
40.392(r＝
999 9)。人参
0.25～2.5
验
合对照品溶液
,测定峰面积
别为 0.12%、
验
试品溶液,分
计算人参皂
3.8%、4.0
验
竹节参药材,
液,并按“2
分别计算样品
结果表明,
1.14%、0.2%
明本方法重
率试验
量的同一批
定,分别加入
1对照品,按
.1”项下色
样品中3个
分别为 2.9%
回收率基本符
定量限
比 S/N＝3 和
线和定量限,
2.2、5.0、1

备液 50、1
,得到人参皂
0.96、1.20
.125、0.200
、0.5、0.8
下色谱条件
,得人参皂苷
5X＋11.592
0.999 3)、
皂苷 Rg1、
μg、1～10
,按“2.1”
,人参皂苷
0.20%、0.6
别于配制后
苷 Rg1、Re、
%,表明供试
按“2.3”项
.1”项下色
中人参皂苷
人参皂苷 Rg
、0.65%,RS
复性基本符
竹节参药材
与样品含量
“2.3”项下
谱条件测定
成分的加样回
、2.4%、2.
合要求。
S/N＝10 分
人参皂苷 R
.2 ng,定量限
·75
00、200、2
苷 Rg1浓度
mg/mL,Re 浓
、0.250 mg/m
、1.0 mg/mL
测定。以进
Rg1、Re、
(r＝0.999 9
Y＝165.90X
Re、Rb1分别
μg 范围内线
项下色谱条
Rg1、Re、Rb
3%,表明仪器
0、4、8、1
Rb1峰面积 R
品溶液在 24
下方法平行
谱条件检测,
Rg1、Re、
1、Re、Rb1的
D 分别为 2.2
合要求。
粉末约 0.1
相同的人参
方法制备供
,计算加样回
收率在95%
6%,见表 1。
别确定 3 种
g1、Re、Rb1
分别为 4.9
·
50、
为
度
L,
的
样
Rb1
)、
－
在
性
件
1峰
精
2、
SD
h
制
采
Rb1
平
%、
g,
皂
试
收
～
表
成
的
5、
·76· Chinese Journal of Information on TCM Oct.2015 Vol.22 No.10
2.10 样品含量测定
精密称取 7 批不同来源的竹节参粉末约 0.50 g,
各 3份。按“2.3”项下方法处理,并按“2.1”项下色
谱条件测定,根据外标一点法计算样品中含量,见表 2。
表 1 人参皂苷 Rg1、Re、Rb1加样回收率试验
成分
取样量
(g)
样品中
含量(mg)
加入
量(mg)
测得
量(mg)
回收
率(%)
平均回
收率(%)
RSD
(%)
人参皂苷 Rg1 0.101 2 1.154 1.200 2.332 98.2
0.102 4 1.167 1.080 2.231 98.5
0.102 4 1.167 1.080 2.290 104.0
99.5 2.9
0.102 0 1.163 1.120 2.241 96.3
0.101 7 1.159 1.020 2.199 102.0
0.100 7 1.148 1.020 2.148 98.0
人参皂苷 Re 0.101 2 0.195 0.200 0.401 103.1
0.102 4 0.197 0.200 0.407 105.0
0.102 4 0.197 0.200 0.408 105.0
103.0 2.4
0.102 0 0.196 0.200 0.397 100.4
0.101 7 0.196 0.200 0.395 99.9
0.100 7 0.194 0.200 0.401 104.0
人参皂苷 Rb1 0.101 2 0.662 0.605 1.281 102.3
0.102 4 0.670 0.600 1.262 98.7
0.102 4 0.670 0.600 1.264 99.0
100.5 2.6
0.102 0 0.667 0.592 1.289 105.1
0.101 7 0.665 0.662 1.321 99.1
0.100 7 0.659 0.662 1.314 99.0
表 2 样品含量测定结果(%,n＝3)
编号 产地(采购地) 人参皂苷 Rg1 人参皂苷 Re 人参皂苷 Rb1
1 广西(安徽亳州) 0.11 0.18 0.86
2 四川(安徽亳州) 0.02 0.08 0.84
3 云南(安徽亳州) 0.20 0.16 0.62
4 湖北(湖北恩施) 1.14 0.20 0.65
5 陕西(河北安国) 0.19 0.49 0.93
6 四川(安徽亳州) 0.19 0.14 0.89
7 陕西(河北安国) － － 0.27
注：“－”为未检测到
3 讨论
本试验前期对供试品的提取溶剂和方法进行了
考察。分别以甲醇、70%甲醇、35%甲醇、70%乙醇、
95%乙醇为溶剂,采用浸渍、超声、回流等方法提取,
并对提取时间进行了考察,其中以 70%甲醇或乙醇提
取效果为佳,超声和回流提取 1 h 效果接近,因此,选
择 70%乙醇超声处理 1 h。
本试验采用 100 mm、2.7 μm 规格色谱柱,用常规
液相进行分析,在保证人参皂苷 Rg1、Re、Rb1 色谱峰
分离度的前提下,较常用的 5 μm 色谱柱分析时间明显
缩短,有利于提高工作效率和节约溶剂。
试验结果表明,市售 7 批竹节参药材中人参皂苷
Rg1、Re、Rb1 含量差异大,最低含量与最高含量相差
10 倍,在有些地区的药材中甚至检测不到上述有效成
分。综合比较这 7 批药材认为,湖北恩施地区的竹节
参药材质量最好。目前对竹节参的质量标准研究多集
中于其高含量的齐墩果烷型皂苷,我们认为,竹节参
中低含量的达玛烷型皂苷有可能是药效的主要贡献
者,其含量也应作为药材质量的控制指标之一。
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(收稿日期：2015-04-29)
(修回日期：2015-05-22；编辑：陈静)