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竹节参提取液抗风湿作用的实验研究



全 文 :基金项目 湖北民族学院 2007年资助团队项目。
作者简介 陈龙全(1955-),男 , 湖北建始人 ,硕士 , 教授。主要研究方向:中医药治疗风湿病。
竹节参提取液抗风湿作用的实验研究
陈龙全1 ,刘小琴 1 ,张金红2
1.湖北省生物资源保护与利用重点实验室(湖北 恩施 445000)
2.湖北中医学院基础医学部(湖北 武汉 430061)
【摘要】目的 观察竹节参提取液的抗炎镇痛作用。方法 采取大鼠足跖肿胀实验 、大鼠佐剂性关节炎(AA)及小
鼠耳廓肿胀实验 , 观察竹节参提取液对大鼠右后足 、小鼠右耳廓肿胀度和血液流变学指标以及对小鼠痛觉的影响。
结果 竹节参提取液可明显降低大鼠足跖肿胀率 ,减轻小鼠耳廓肿胀度 , 显著改善血液流变学指标 ,与生理盐水组
比较有统计学意义(P<0.05、 P<0.01);对二甲苯所致的耳廓肿胀均有明显的抑制作用;还可明显提高小鼠的痛
阈值。结论 竹节参提取液有较好的抗炎镇痛作用 ,能够有效对抗动物实验性关节炎 。
【关键词】竹节参;佐剂关节炎;抗炎;镇痛
【中图分类号】R593.22;R285.1  【文献标识码】A  【文章编号】1008-8164(2008)03-0015-03
ExperimentalStudiesonAntirheumaticEffectsoftheExtractionSolution
fromRhizomaofPanaxJaponicus
CHENLong-quan1 , LIUXiao-qin1 , ZHANGJin-hong2
(1.KeyLaboratoryofBiologicalResourcesProtectionandUtilizationofHubeiProvince, Enshi445000 , China;
2.BasicMedicineBoardofHubeiColegeofTCM, Uuhan430061 , China)
【Abstract】ObjectiveToobservetheanti-inflammationandabiritationoftheExtractionSolu-
tionfromRhizomaofPanaxjaponicus.MethodsFoot-swelingofratsexperiment、adjuvant-in-
ducedarthritis(AA)ofratsandear-swelingofmiceexperimentwereusedtoobservethe
efectsofTheExtractionSolutionfromRhizomaofPanaxJaponicustotheswelingofratsright
hindfeetandmicesrightears, bloodrheologytargetandpainthresholdofmice.ResultsBythe
ExtractionSolutionfrom RhizomaofPanaxJaponicus, theswolenrateofratsfeetcanbere-
ducedobviously, theswelingofmiceearscanbeeased, andbloodrheologytargetcanbeim-
proveddistinctly.Comparedwiththebrinegroup, astatisticdifferencehasbeenshowed(P<
0.05, P<0.01);Itrestrainedtheswelingofmicesauriclewhichwasworkedbydimethyl-
benzenesignificantly, italsocanraisepainthresholdofmiceobviously.ConclusionTheExtrac-
tionSolutionfromRhizomaofPanaxJaponicushasaquiteobviousefectofabirritationandanti
-inflammation, itcanantagonizeexperimentalarthritisofanimals.
【Keywords】RhizomaofPanaxJaponicus;Adjuvant-inducedArthritis;Anti-inflammation;Abir-
ritation
  竹节参系五加科人参 (PanaxjaponicmC.A.
Mey)的干燥根茎 , 又称竹节人参 、北三七 、白三七
等 ,具有消肿止痛 、活血散瘀 、滋补强壮等功效 。在
土家族民间医药中被视为 “草药之王” ,属珍稀濒危
名贵中草药 。常用于治疗风湿痹证 、关节疼痛 、跌打
损伤等病症。竹节参与人参 、田三七是同科同属植
物 ,其主要有效成分皂苷的结构与人参皂苷和三七
皂苷相似 ,与人参和三七类似的药理活性相似和兼
具人参和三七的部分功效 。因此 ,具有极高的药用
和保健开发价值。近几年已越来越成为研究与应用
第 25卷第 3期(第 1页)
2008年
湖北民族学院学报·医学版JournalofHubeiUniversityforNationalities· MedicalEdition Vol.25 No.3P.12008
的热点 。为探讨其抗风湿的作用机制 ,笔者开展了
抗炎镇痛的实验研究 。现将研究结果报告如下:
1 材料和方法
1.1 实验材料
1.1.1 实验动物 Wistar大鼠 ,体质量 180 ~ 220g,
雄性;昆明种小鼠 ,体质量 18 ~ 22g,雌雄兼用 ,健康
状况均良好 ,由湖北民族学院医学院实验中心提供 。
1.1.2 药物 竹节参提取液的制备:竹节参购于恩
施中药材公司。先将竹节参粉碎加水蒸馏 ,收集馏
液;继用 95%乙醇回流提取 3次 ,除去乙醇后得醇
提物。两液合并 ,制备成 1∶1浓度 ,垂熔漏斗过滤 ,
调 pH至中性 ,冷藏备用。独一味胶囊(甘肃独一味
生物制药有限责任公司生产),临用前配置成所需
浓度的混悬液;醋酸地塞米松(西南药业股份有限
公司生产);盐酸吗啡(东北制药集团公司沈阳第一
制药厂出品)。
1.1.3 试剂及仪器 弗氏完全佐剂(FCA)(Sigma
公司产品);二甲苯 (分析纯), 武汉有机合成厂生
产;GJ-8402型热板测痛仪 ,宁海白石电子医药仪
器厂生产;JN-A精密分析天平(称量 250mg,分度
值 0.5mg),上海第二天平厂生产;MS/XW型血流
变检测仪 ,成都麦赛科贸公司生产。
1.2 实验方法
1.2.1 佐剂型关节炎大鼠原发病变实验 方法按
文献[ 1] ,大鼠 40只 ,随机分为 4组 ,即生理盐水空白
组(A组)、独一味对照组(B组)、竹节参高剂量组
(C组)、竹节参低剂量组(D组)。在大鼠右后跖内
注射 FCA0.1mL致炎 ,复制成佐剂型关节炎(AA)
模型。致炎后第 2dB组 、C组 、D组开始分别灌胃
给药 , A组灌等量生理盐水 ,每天 1次 ,连续 22d。
于致炎前及致炎后 15h、2、3、8、12、19d分别用软尺
测量每只大鼠的右后足踝关节周长 ,以致炎前后右
后足踝关节周长的差值作为肿胀度。
1.2.2 二甲苯致小鼠耳廓肿胀实验  方法按文
献 [ 2] ,小鼠 40只 ,随机分为 4组 ,即生理盐水组 、地
塞米松组 、竹节参高 、低剂量组。地塞米松组于试验
当天腹腔注射给药 ,其余 3组连续灌胃给药 3d,每
天 1次。末次给药 30min后 ,用二甲苯 0.1mL涂于
小鼠右耳前后两面 , 15min后将小鼠断颈处死 ,剪去
左右两耳 ,用 9mm直径打孔器分别在同一部位打下
圆耳片 ,用分析天平称重 ,左右耳片重量之差为肿胀
度。
1.2.3 佐剂型关节炎大鼠血液流变学实验 用弗
氏完全佐剂(FCA)诱导大鼠关节炎模型 ,并用竹节
参提取液进行干预 ,采用血液流变学自动分析仪检
测大鼠血液流变学的改变 ,以全血粘度 、全血还原粘
度 、血浆粘度的参数为指标 ,观察竹节参提取液对各
组大鼠血液流变学的影响。分组情况参照实验 1.
2.1末次给药后 ,断头取约 2 ~ 3mL全血置肝素抗
凝管中 ,测定血粘度指标 。
1.2.4 对小鼠痛觉影响(热板法)的实验 取小鼠
40只 ,随机分为 4组 ,即生理盐水组 、吗啡组 、竹节参
高 、低剂量组。在实验前进行预试验 ,选用痛阈值在
5 ~ 30s之间者为实验对象 ,少于 5s多于 30s或喜跳
跃的小鼠均剔除。吗啡组于试验当天腹腔注射给药 ,
竹节参组连续灌胃给药 3d,空白对照组连续灌胃等
量生理盐水 ,每天 1次。末次给药后 30、60和 120min
分别将小鼠放到事先加热至 55℃的金属板上 ,以舔
后足作为 “疼痛”反应的指标 ,若 60s内不出现疼痛
反应者应立即取出 ,痛阈值按 60s计算。
1.3 统计学处理 所有结果数据以(x±s)表示 ,采
用 SPSS11.5统计软件包进行分析 ,组间差异性比
较 ,采用 t检验 。
2 结果
2.1 对佐剂性关节炎大鼠足踝关节肿胀的影响 
致炎后 3d竹节参提取液高 、低剂量组足肿胀度低
于生理盐水组(P<0.05),且在 8、12、19d仍对足肿
胀度有较强抑制作用。与独一味组相比 ,竹节参提
取液高剂量组更能抑制关节肿胀 ,而低剂量组各时
段对足肿胀度的影响不明显 ,见表 1。
表 1 竹节参提取液对大鼠佐剂性关节炎原发病变的影响(x±s, n=10)
组别 剂量g/kg
造模后不同时间大鼠右后足肿胀度(mm)
15h 2d 3d 8d 12d 19d
A组 2.56±0.27 5.71±1.60 6.89±1.24 8.23±2.02 11.4±1.72 10.14±2.32
B组 20.0 4.23±0.62 4.48±1.19* 5.22±1.18* 7.14±1.46* 9.25±3.01* 8.53±1.14*
C组 40.0 4.12±0.39 4.31±1.04*■ 5.02±1.57*■ 6.35±1.26*■ 8.65±2.10*■■ 7.25±1.57*■
D组 20.0 4.50±0.78 5.16±2.43* 5.63±1.76* 7.34±1.42* 9.55±2.15 9.12±1.24*
  与 A组(生理盐水组)比较 , *P<0.05;与 B组(独一味组)比较 , ■P<0.05, ■■P<0.01。
2.2 对二甲苯所致小鼠耳廓肿胀的影响 竹节参 提取液高 、低剂量组与地塞米松组对二甲苯所致小
16            湖北民族学院学报·医学版              第 3期
鼠耳廓肿胀均具有明显的抑制作用 ,与生理盐水组
比较差异显著(分别 P<0.05、P<0.01、P<0.001
),见表 2。
表 2 竹节参提取液对二甲苯所致
小鼠耳肿胀的影响(x±s, n=10)
组别 剂量(g/kg) 肿胀值 /mg
生理盐水组 15.81±3.86
地塞米松组 0.005 6.23±1.52***
竹节参高剂量组 40.0 8.65±2.28**
竹节参低剂量组 20.0 11.92±2.57*
  注:与生理盐水组比较 , *P<0.05;**P<0.01;***P<0.001
2.3 对佐剂性关节炎大鼠血液流变学改变的影响
 由表 3可知 , 模型组大鼠的全血各切变率下的全
血粘度 、还原粘度 、血浆粘度都呈显著增高 ,表明佐
剂性关节炎大鼠的血液处于浓 、粘 、凝 、聚状态 。除
竹节参低剂量组对全血还原粘度的低切值作用不明
显外 , C组与 D组均能显著改善 AA大鼠的血粘度 ,
与模型组比较(P<0.05、P<0.01);而 C组与 B组
在改善血液流变学指标方面也比较接近 ,只是 B组
仅对全血粘度的高切值影响较小 ,与 A组比较无显
著性差异 ,说明竹节参和独一味这两个药都有较好
的活血降粘作用。
2.4 对小鼠疼痛反应的影响 竹节参提取液高 、低
剂量组和盐酸吗啡对照组在给药 120min内均能显
著提高热板法所致小鼠疼痛的阈值 ,提高痛阈百分
率 ,延长小鼠出现疼痛反应的潜伏期 。竹节参随着
剂量的增加和时间的延长而镇痛作用增强 ,与生理
盐水组比较具有显著的统计学意义(P<0.05、P<
0.01)。见表 4。
表 3 竹节参提取液对佐剂性关节炎大鼠血液流变学改变的影响(x±s, n=10)
组别 剂量g/kg
全血粘度
低切 高切
全血还原粘度
低切 高切 血浆粘度
A组 21.28±2.57 7.13±0.26 32.31±1.31 10.60±0.66 1.93±0.26
B组 20.0 13.28±1.24** 6.25±1.74 27.24±2.49** 8.48±0.27** 1.39±0.11**
C组 40.0 13.94±2.11** 5.28±0.37** 27.22±2.86* 8.74±0.08** 1.38±0.57**
D组 20.0 13.86±2.21** 5.98±1.25* 29.65±6.58 9.07±0.48* 1.37±0.16*
  注:与 A组(生理盐水组)比较 , *P<0.05, **P<0.01。
表 4 竹节参提取液对小鼠痛觉的影响(热板法)(x±s, n=10)
组别 剂量g/kg
用药后痛阈值(s)
30min 60min 90min 120min
生理盐水组 - 22.1±3.2 22.3±4.2 23.7±2.8 24.4±5.4
吗啡组 0.02 53.4±12.4*** 43.5±11.2*** 39.3±4.6*** 35.2±7.3***
竹节参高剂量组 40.0 26.4±4.4* 29.6±4.7** 30.4±6.6** 32.6±4.3**
竹节参低剂量组 20.0 24.5±2.4* 27.3±3.8* 28.5±3.8** 29.7±4.5*
  注:与生理盐水组比较 , *P<0.05, **P<0.01, ***P<0.001
3 讨论
风湿类病症是临床常见疾病 ,尤其是类风湿关
节炎(RA)更是严重影响人类健康的多发病 ,国外发
病率约 0.5% ~ 3%,国内约 0.3% ~ 0.4%[ 3] 。临床
主要特征为局部关节肿痛 ,晚期可引起关节的僵直 、
畸形和功能严重受损 。该病具有病程长 、缠绵难愈 、
致残率高又易复发等特点 ,严重威胁人类的健康和
生活质量。近年来 ,我们以竹节参为主药 ,研究制成
复方竹节参糖衣片制剂 ,用于临床治疗类风湿关节
炎患者取得了较满意疗效 [ 4] ,但对于单味竹节参的
抗风湿效果尚未开展系统性的药效学研究 ,本实验
旨在探讨其抗炎镇痛的实验效应 ,选独一味胶囊为
实验对照药 ,是因考虑独一味属藏药 ,性味甘 ,苦 ,
平 ,具有活血止血 、镇痛消肿等功效 ,用于治疗各种
外科手术后的切口疼痛 、出血 、外伤骨折 、筋骨扭伤 、
风湿痹痛等 ,与竹节参的作用功效相似 。竹节参益
气固本 、通络止痛 、活血化瘀 ,符合类风湿关节炎本
虚标实的病机 [ 5] 。大鼠佐剂性关节炎是常见 RA的
实验模型 ,其组织病理学及血液变化与人 RA相似。
RA患者及 AA大鼠异常活化的单核巨噬细胞产生
炎症反应的介质 ,在关节炎中使局部毛细血管扩
张 ,血浆渗出 , 组织水肿 [ 6] 。本实验通过热板法表
明竹节参提取液能提高小鼠机体痛阈 ,延长疼痛潜
伏期;通过小鼠二甲苯性耳廓肿胀证实竹节参提取
液对急性渗出性炎症能够起到抑制作用;通过佐剂
性关节炎实验证实竹节参提取液对免疫损伤性炎症
有显著的拮抗作用;通过对佐剂性关节炎大鼠血液
流变学实验显示 ,类风湿关节炎确实存在着血液高
粘和高凝状态 [ 7] ,而本药能够明显降低全血粘度和
血浆粘度 ,促进和恢复微循环的正常状态。研究结
果表明竹节参抑制佐剂性关节炎的(下转第 21页)
17第 3期              湖北民族学院学报·医学版           
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[收稿日期 2008-07-11]
(上接第 17页)炎性肿胀 ,减少炎症组织介质含量 ,
比独一味效果更为显著 ,可能是通过免疫调节来减
少炎症介质合成和释放 ,实现其抗炎消肿 、抗风湿的
作用机制 ,但尚需要进一步实验验证 。
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