全 文 ：毛茛总皂苷对小鼠耐缺氧及记忆能力的影响
秦汝兰，孟庆双 (通化师范学院制药与食品科学系，吉林通化 134001)
摘要 ［目的］观察毛茛总皂苷对小鼠耐缺氧和记忆能力的影响。［方法］用不同剂量毛茛总皂苷给正常小鼠连续灌胃 14 d，测定其耐
缺氧时间及走迷宫试验成功次数。［结果］毛茛总皂苷高低剂量组均能延长小鼠的耐缺氧时间和增强小鼠记忆能力。［结论］毛茛总皂
苷对小鼠具有益智和延长寿命的作用，具有较好的药用价值和开发前景。
关键词 毛茛(Ranunculus japonicus Thunb．);总皂苷;耐缺氧;记忆力
中图分类号 S567． 23 文献标识码 A 文章编号 0517-6611(2011)22 －13404 －01
Effects of Total Saponins from Ranunculus japonicus Thunb． on Anti-hypoxia and Memory Ability of Mice
QIN Ru-lan et al (Department of Pharmaceutics and Food Science，Tonghua Normal University，Tonghua，Jilin 134001)
Abstract ［Objective］To observe the effects of total saponins from Ranunculus japonicus Thunb． on anti-hypoxia and memory ability of mice．
［Methods］Mice were given with different doses of total saponins from Ranunculus japonicus Thunb． by gastric perfusion for successive 14 days．
Then，the anti-hypoxia time and successful times to run a maze of mice were respectively determined． ［Result］Mice treated with low-dose and
high-dose total saponins from Ranunculus japonicus Thunb． could significantly prolong anti-hypoxia time and improve memory ability． ［Conclu-
sion］The total saponins from Ranunculus japonicus Thunb． could obviously promote intelligence development and prolong life of mice with high
medical value and good development prospect．
Key words Ranunculus japonicus Thunb．;Total saponins;Anti-hypoxia;Memory
作者简介 秦汝兰(1980 － ) ，女，吉林通化人，讲师，硕士，从事中药有
效成分的分离鉴定及生物活性研究，E-mail:qrl_1949@ 163．
com。
收稿日期 2011-04-20
毛茛(Ranunculus japonicus Thunb．)是多年生草本毛茛科
(Ranunculaceae)毛茛属(Ranunculus)植物，在长白山地区广
泛分布，具有消炎、镇痛、抗菌、抗肿瘤等多种活性，在民间广
泛用于治疗黄疸、结核、肝炎等病［1］。近年来，对毛茛化学成
分的研究显示，其全草含有内酯类、黄酮类、皂苷类及生物碱
类等化合物［2］。有研究显示，毛茛总皂苷具有显著的抗心肌
肥大作用［3］，但关于其在耐缺氧、增强记忆方面的研究尚未
见报道。鉴于此，笔者以长白山区野生毛茛为试验材料，观
察其总皂苷对小鼠耐缺氧、增强记忆能力的影响，以期为开
发利用这一药用植物资源提供科学依据。
1 材料与方法
1． 1 材料
1． 1． 1 供试植物。毛茛(Ranunculus japonicus Thunb．)采于
通化师范学院后山，经通化师范学院于俊林教授鉴定。
1． 1． 2 供试动物。ICR 小鼠(合格证号:(吉)2003-0004) ，
重 18 ～22 g，雌雄各半，由长春高新医学动物试验中心提供。
1． 1． 3 主要试剂。尼莫地平、氯丙嗪、钠石灰、医用凡士林，
均购自通化医药大厦;其他试剂均为国产分析纯。
1． 1． 4 主要仪器。TD 3102型动物天平，由沈阳斯瑞特仪器
有限公司生产;JXBM-1 Y型迷宫刺激器，由上海中胜科教设
备有限公司生产。
1． 2 方法
1． 2． 1 毛茛总皂苷混悬液的制备［4］。准确称取毛茛粉末约
3 g，置于 125 ml圆底烧瓶中，加入 95%乙醇 20 ml，连续回流
提取 3 h，过滤，滤液浓缩，用 95%乙醇定容至 50 ml 容量瓶
中，摇匀。精密量取 20 ml，置于蒸发皿中挥散溶剂，残渣加
10 ml蒸馏水溶解，用水饱和的正丁醇振摇萃取 3次，每次 10
ml，合并正丁醇液，蒸干，并用蒸馏水配制成浓度分别为 0． 10
和 0． 40 g /ml的混悬液，置于 4 ℃冰箱保存备用。
1． 2． 2 毛茛总皂苷对小鼠常压耐缺氧能力的影响［5］。选取
小鼠 40只，随机分为空白对照组、阳性对照组、高、低剂量
组，每组 10只。分别灌胃，给药剂量以 0． 2 ml /10g小鼠体重
计算，给予阳性对照组小鼠等量 10%氯丙嗪溶液，给予对照
组小鼠等容量生理盐水，每天 1次，连续 14 d。末次给药 1 h
后，将小鼠逐只放进底部放有 15 g 钠石灰的 250 ml 广口瓶
中，每瓶放 1只，用凡士林涂抹瓶口后盖严，使之不漏气，即
刻计时，记录各鼠因缺氧而致窒息性死亡的时间。
1． 2． 3 毛茛总皂苷对小鼠记忆能力的影响［6］。选取小鼠 60
只，将小鼠两前肢置于 150 ～ 300 kΩ 的试验条件下，实验室
保持安静，光线适宜，室温为 18 ℃，试验条件恒定，进行训
练。方法为:将小鼠置于起步点适应 2 min，电击刺激使其奔
跑(电击电压 30 ～60 V) ，若偶然窜到无电击的安全区，并停
留 10 s，则取出，重复训练，直至小鼠在连续 10次电击后有 9
次“正确”，仅有 1次“错误”。经训练后获得记忆成功的小
鼠 40只，随机分为空白对照组、阳性对照组、高、低剂量组，
每组 10只。分别灌胃，给药剂量以 0． 2 ml /10g 小鼠体重计
算，给予阳性对照组小鼠等量 10%尼莫地平溶液，给予对照
组小鼠等容量生理盐水，每天 1次，连续 14 d。末次给药 1 h
后，进行走迷宫试验，记录小鼠成功次数。
1． 3 数据处理 试验数据用均数加减标准差(珋x ± s)表示，
统计学处理方法采用组间 t检验。
2 结果与分析
2． 1 毛茛总皂苷对小鼠常压耐缺氧能力的影响 以小鼠在
常压缺氧环条件下存活时间评价小鼠耐缺氧能力，结果见表
1。毛茛总皂苷高、低剂量组均能够明显延长小鼠在缺氧条
件下的存活时间，与空白对照组比较，高、低剂量组差异显著
(P ＜0． 01)。
2． 2 毛茛总皂苷对小鼠记忆能力的影响 以小鼠走迷宫成
功次数来评价小鼠的记忆能力，结果见表 2。毛茛总皂苷高、
低剂量组均能够明显提高小鼠的记忆能力，与空白对照组比
较，高、低剂量组差异显著(P ＜0． 01)。
(下转第 13406页)
责任编辑 侯美灵 责任校对 李岩安徽农业科学，Journal of Anhui Agri． Sci． 2011，39(22):13404，13406
DOI:10.13989/j.cnki.0517-6611.2011.22.198
有小幅度的升高，再用川芎溶液灌流，发现 0． 04 g /ml川芎溶
液使蟾蜍心率和心肌收缩力变化不明显(P ＞0． 05)。
表 3 注入阿托品再灌流不同浓度川芎溶液对心率及心肌收缩力的
影响
Table 3 Effects of atropine injection and RHIZOMA CHUANXIONG
solution perfusion with different concentrations on myocardial
contractility and heart rate
组别
Group
心率
Heart rate
次 /min
心肌收缩力
Myocardial
contractility∥g
任氏液 Ringer 36． 000 ±0． 784 0． 070 ±0． 045
0． 04 g /ml川芎溶液 38． 000 ±0． 827 0． 070 ±0． 037
0． 04 g /ml RHIZOMA
CHUANXIONG solution
3 结论与讨论
(1)结果表明，0． 01、0． 02和 0． 05 g /ml 川芎溶液能使心
肌收缩力下降，与王正忠等［8］的研究结果川芎有效成分川芎
嗪具有活血化瘀之功效一致，证明了川芎具有改善心肌收缩
力的作用。
(2)当用阿托品作为阻断剂对离体心脏进行灌流后，再
用0． 04 g /ml川芎溶液灌流，蟾蜍心肌收缩力无明显变化，心
率变化不显著。刘凤岐等［9］的研究表明，阿托品能够阻断 M
型受体;曹永孝［10］的研究表明，较大剂量的阿托品能加快心
率;1． 00 ～2． 00 mg阿托品因阻断窦房结的 M2 受体，解除迷
走神经对心脏的抑制作用而使心率加快，但小剂量(0． 05
mg)阿托品可使部分病人的心率短暂地减慢，一般减少 4 ～ 8
次 /min，这可能是阿托品阻断突触前膜 M1 受体，从而减弱乙
酰胆碱对递质释放的负反馈作用所致［11］。由此推测，川芎
溶液的作用可能与 M型受体结合相关，阿托品与 M型受体
的结合使得川芎的有效成分失去了与 M 型受体结合的机
会，从而阻断了川芎溶液抑制心肌收缩力的作用，使蟾蜍心
脏收缩力不再发生变化。但有关川芎与其他受体结合，是否
导致心率加快的原因有待于进一步研究。
参考文献
［1］唐莉萍，梁钢．中药预处理对缺血再灌注损伤心肌保护作用的研究进
展［J］．华夏医学，2007，20(3):632．
［2］戈继业，张振岭．川芎药理作用研究及临床应用新进展［J］．中国中西
医结合杂志，1994，14(10):638 －640．
［3］解景田，赵静．生理学实验［M］．北京:高等教育出版社，2002:130 －132．
［4］霍展样，千智斌．两种方法对比研究不同药物对蛙心活动的影响［J］．
齐齐哈尔医学院学报，2004，25(6):605．
［5］张颖．如何提高蛙心插管的成功率［J］．实验动物科学与管理，2004，21
(4):49 －50．
［6］王春艳，郭素红，郭景森．提高蛙心灌流实验中蛙心插管成功率的方法
［J］．吉林医药学院学报，2007，28(4):203 －204．
［7］王小君，孙娜．蛙心灌流实验中插管方法的改进［J］．华北煤炭医学院
学报，2010，12(4):457 －458．
［8］王正忠，花继平．川芎嗪注射液配合常规治疗不稳定性心绞痛疗效观
察［J］．中医药临床杂志，2004(5):12 －18．
［9］刘凤岐，滕守志，陈永喜．阿托品试验结果受体位影响［J］．哈尔滨医科
大学学报，1987(4):33 －34．
［10］曹永孝．药理学总论［M］．北京:人民卫生电子音像出版社，2007:21 －
23．
［11］易必达，马蓓，邢宝仁．皮质醇对离体牛蛙交感神经节 B细胞胆碱能
突触传递的快速作用［J］．生理学报，1999，51(2):
檪檪檪檪檪檪檪檪檪檪檪檪檪檪檪檪檪檪檪檪檪檪檪檪檪檪檪檪檪檪檪檪檪檪檪檪檪檪檪檪檪檪檪檪檪檪檪
147 －152．
(上接第 13404页)
表 1 毛茛总皂苷对小鼠耐缺氧能力的影响
Table 1 Effect of total saponins from Ranunculus japonicus Thunb． on
anti-hypoxia ability of mice (珔x ± s，n =10)
组别
Group
剂量
Dose∥ml /10 g
存活时间
Survival time∥min
空白对照组 0． 2 60． 07 ±0． 32
Blank control
阳性对照组 0． 2 90． 16 ±0． 65*
Positive control
高剂量组 0． 2 178． 53 ±0． 47＊＊
High-dose
低剂量组 0． 2 103． 43 ±0． 52*
Low-dose
注:与空白对照组比较，* P ＜0． 05，＊＊P ＜0． 01(下同)。
Note:＊＊ means significant difference at 0． 01 level compared with blank
control group;* means significant difference compared with control
group at 0． 05 level (the same as below)．
表 2 毛茛总皂苷对小鼠记忆能力的影响
Table Effect of total saponins from Ranunculus japonicus Thunb． on
memory ability of mice(珔x ± s，n =10)
组别
Group
剂量
Dose∥ml /10 g
成功次数
Successful times
空白对照组 Blank control 0． 2 5 ±3
阳性对照组 Positive control 0． 2 8 ±2*
高剂量组 High-dose 0． 2 15 ±5＊＊
低剂量组 Low-dose 0． 2 10 ±4＊＊
3 结论与讨论
研究发现毛茛总皂苷能在常压缺氧情况下，延长小鼠的
存活时间，说明毛茛总皂苷对小鼠具有明显的耐缺氧作用。
通过观察小鼠走迷宫试验发现，毛茛总皂苷能显著提高小鼠
的记忆力，增加成功次数，说明毛茛总皂苷具有提高记忆力、
益智的功效，可将其开发成治疗老年性痴呆和益智类药物。
该研究对于毛茛资源今后的充分开发利用提供了一定的理
论依据。
参考文献
［1］江苏新医学院．最新中药大辞典(一册)［M］．北京:中国中医药出版
社，2005:437 －438．
［2］郑威，周长新，张水利，等．毛茛化学成分的研究［J］．中国中药杂志，
2006，31(11):892 －894．
［3］王榕乐．毛茛化学成分及毛茛总苷的药理学研究［D］．广州:广东药学
院，2007．
［4］万德光，裴瑾，唐远．分光光度法测定威灵仙中总皂苷的含量［J］．成都
中医药大学学报，2007，30(3):52 －53．
［5］朱华野，朴龙．黄芪提取物抗炎、镇痛、耐缺氧及抗疲劳作用的研究
［J］．时珍国医国药，2007，18(5):1156 －1157．
［6］杨晓秋．五味子健脑补益强壮作用的药理研究［J］．中国医药导报，
2007，4(23):107 －108．
［7］SU J Q，CHU X L，WEI X B． Effects of proliferation of CEF with ginsen-
oside and its derivatives［J］． Agricultural Science ＆ Technology，2009，10
(6):97 －100，167．
［8］董南，王海燕，陈良龙，等． HPLC测定毛茛属几种植物中小麦黄素的含
量［J］．中国中药杂志，2007(22):2427 －2428．
［9］彭勇，陈四保，刘勇，等．毛茛科扁果草亚科药用植物亲缘学的探讨
［J］．中国中药杂志，2006(14):1210 －1214．
60431 安徽农业科学 2011 年