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当归多糖铁治疗溶血性贫血小鼠的实验研究



全 文 :用乙醇稀释至刻度 ,摇匀 ,即得样品溶液。以后按
“2.2”实验方法操作。结果表明该秦皮样品中秦皮
乙素含量为1.25 %,用 HPLC 法测得的秦皮乙素
含量为1.18%,符合中国药典 2005年版规定[ 4] 。
3 讨论
本实验研究了秦皮乙素在 CPE 上的电化学行
为 ,建立其含量测定的新方法 ,并对其测定条件进行
了优化。与同类方法相比 ,具有所用样品量少 、灵敏
度高 、检出限低 、反应快速 、稳定性好和操作简单等
特点 。已成功地用于实际样品的分析。
参考文献:
[ 1]  李启隆 ,汪倩胡 , 劲波 , 等.秦皮乙素的单扫示波极谱法研究
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的含量[ J] .中国实验方剂学杂志 , 2004 , 10(2):6-7.
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定[ J] .分析化学 , 1996 , 24(6):703-705.
[收稿日期] 2006-11-23
[ 基金项目] 湖北省科技厅攻关项目(编号:2005AA301C04) [ 作者简介] 张玉 ,男 ,硕士 ,副教授 ,电话:027-85726302 , E-mai l:w kpzcq@163.
com [ 通讯作者] 王凯平 ,女 ,博士 ,副教授 , E-mail:w kpzcq@163.com
当归多糖铁治疗溶血性贫血小鼠的实验研究
张玉1 ,王珮珮1 ,王凯平2 ,胡明惠2 ,李珂2  (1.华中科技大学同济医学院协和医院药剂科 , 湖北 武汉 , 430022;2.华中科
技大学同济医学院药学院 ,湖北 武汉 , 430030)
[ 摘要]  目的:考察当归多糖铁复合物(APIC)对溶血性贫血小鼠的治疗效果。方法:腹腔注射苯肼建立溶血性贫血小鼠模
型。随机分为阴性对照组(不进行造模)、模型组 、3 个试验组(包括 APIC 组 、硫酸亚铁组及混合物组)和阳性对照组。阴性对
照组和模型组给予去离子水 ,试验组分别给予 APIC(高 、中 、低剂量)、硫酸亚铁 、当归多糖+三氯化铁混合物 , 阳性对照组给
予多糖铁复合物力蜚能 ,监测给药前后红细胞计数 RBC 、血红蛋白 H b、红细胞比积 HCT 等血液指标的变化。结果:除当归多
糖铁低剂量组外 ,试验组和阳性对照组各项检测指标与模型组比较 ,差异均有显著性 , 且实验后 Hb 和 HCT 基本恢复至正常
水平。当归多糖铁低剂量组各检测指标的变化值与模型组相比差异无显著性 , 但各项指标的恢复情况要略优于模型组。结
论:当归多糖铁复合物具有一定的治疗溶血性贫血的作用 ,并存在量效关系。
[ 关键词]  当归多糖;多糖铁复合物;溶血性贫血
[中图分类号] R961  [ 文献标识码] A  [ 文章编号] 1001-5213(2007)12-1652-03
Effects of Angelica sinensis polysaccharide-iron complex on mice with hemolytic anemia
ZHANG Yu1 , WANG Pei-pei1 , WANG Kai-ping 2 , HU Ming-hui2 , LI Ke2(1.Pharmacy of Wuhan Union H os-
pital , Tongji Medical Colleg e , H uazhong Univer sity of Science and Techno log y , Hubei Wuhan 430022 , China;2.Faculty of
Pharmacy , Tong ji Medical College , Huazhong Unive rsity o f Science and Technology , Hubei Wuhan 430030 , China)
ABSTRACT:OBJECTIVE To investig ate the therapeutic efficacy o f Angelica sinensis poly saccharide-iron complex(APIC)on
mice with hemoly tic anemia.METHODS Create animal models o f mice with hemo ly tic anemia by pheny lhydr azine(PHZ)ip.
Mice we re divided into a negative contro l g roup , a model gr oup , three expe rimental g roups and a positive control g r oup at ran-
dom.The negative control g roup and the model g ruop w ere giv en deionized wa te r.The three expe rimental g roups were given
APIC (o f high , middle , and low dosage), fer rous sulfa te , and the mix ture o f Angelica sinensis po ly saccharide and ferric chlo-
ride.The positive control gr oup w as g iven niferex.Change s of the indies such a s red blood cell count(RBC), hemog lobin(Hb)
and hematocrit(HCT)w ere determined.RESULTS There w as significant difference between the indies o f expe rimental g roups
(except the APIC g roup of low do sage)and the positive cont rol g roup and chose of the model g roup.The indies o f Hb and
HCT w ere r esto red to the norma l level.The re w as no significant difference between the indies o f APIC g roup of low dosage
and cho se o f the model g roup.Howeve r , the recuper ation of APIC g roup of low dosage w as superio r to tha t o f the model
gr oup.CONCLUSION APIC has therapeutic efficacy on hemolytic anemia w ith does dependance.
KEY WORDS:Angelica sinensis polysaccha ride;Angelica sinensis po ly saccharide-iron complex;H emoly tic anemia
·1652· 中国医院药学杂志 2007年第 27卷第 12期 C hin H osp Pharm J , 2007 Dec , Vol 27 , No.12
  当归多糖铁是本实验室为开发新型抗贫血药
物 ,用当归多糖和高价铁合成的复合物 ,其合成方
法 ,理化性质和生物利用度等已得到初步研究[ 1-4] 。
为进一步观察当归多糖铁的药效 ,进行了当归多糖
铁治疗溶血性贫血小鼠的实验研究 ,现报道如下。
1 材料
SpectrAA-40原子分光光谱仪(美国瓦里安
公司),G -3000 全自动血液分析仪(美国雅培公
司);当归(华中科技大学同济医学院协和医院 ,产
地甘肃岷县);当归多糖(由本课题组提取并纯
化);当归多糖铁(由本课题组制备并纯化 , APIC
纯度 95%以上 ,其中铁含量为 27%,多糖含量为
13.5%);多糖铁复合物力蜚能(珠海许瓦兹制药
有限公司 ,每粒铁含量为 150 mg);苯肼(上海试剂
三厂 ,批号 9905);硫酸亚铁(天津市泰兴试剂 ,批
号 20031015);三氯化铁(广东省台山市众诚化工
有限公司 ,批号 20040804);所用试剂均为分析纯;
水为注射用水;KM 小鼠 80 只(♀♂各半 ,健康状
况良好 ,体质量 20 g ,华中科技大学同济医学院实
验动物中心)。
2 方法
2.1 溶血性贫血小鼠模型的建立 将小鼠随机分
为 8个组 ,除了阴性对照组外 ,其余组小鼠腹腔注射
苯肼的生理盐水溶液 ,注射剂量为 90 mg·kg -1[ 5] 。
实验期间给予普通标准饲料及去离子水 ,室温控制
在 20 ℃左右。
2.2 当归多糖铁治疗溶血性贫血小鼠的疗效观察
 造模当天各组小鼠灌胃给予相应药物 ,连续给药
10 d。给药情况及剂量见表 1 。
表 1 溶血性贫血小鼠分组和给药情况
Tab 1 Grouping and administr ation
组别 给药情况
阴性对照组 去离子水
模型组 去离子水
APIC高剂量组 当归多糖铁溶液 72 mg·k g -1
APIC中剂量组 当归多糖铁溶液 36 mg·k g -1
APIC低剂量组 当归多糖铁溶液 18 mg·k g -1
硫酸亚铁组 硫酸亚铁溶液 36 mg·k g -1
混合物组(当归多糖+FeC l3)当归多糖溶液 18 mg·kg -1 , FeCl3溶液 36 m g·kg -1
阳性对照组 力蜚能溶液 36 mg·kg -1
  给药前一天 ,给药第 4 ,7 ,10天 ,剪尾取血检测
红细胞计数 RBC 、血红蛋白 Hb 、红细胞比积 HCT
等各项观察指标 ,以跟踪监测贫血小鼠的恢复情况 。
2.3 数据处理 用 SPSS 10.0软件进行 t检验。
3 结果
给药 10 d中各组小鼠 RBC , Hb和 HCT 测定
值见表 2 ~表 4 。
表 2 给药期间各组小鼠 RBC 测定值(1012· L-1 , x±s , n=
10)
Tab 2 Changes o f RBC during administration (1012 L-1 , x
±s , n=10)
0d 4d 7d 10d
阴性对照组 8.0±0.6 7.6±0.4 7.1±0.5 7.2±0.6
模型组 8.1±0.5 2.6±0.5a 4.4±1.0a 5.7±0.6a
APIC高剂量组 8.2±0.8 3.8±0.5b 5.9±1.3b 6.5±0.5ba
APIC中剂量组 7.9±0.6 3.3±0.5 6.1±0.5b 6.48±0.26ba
APIC低剂量组 7.9±0.5 3.2±0.6 4.18±0.26 5.5±0.5a
硫酸亚铁组 8.1±0.6 4.4±1.0b 5.5±0.9b 6.55±0.29ba
混合物组 8.1±0.4 3.7±0.6b 5.4±1.0b 6.5±0.5ba
阳性对照组 8.12±0.24 5.1±0.8b 6.1±0.8b 6.4±0.6ba
注:与阴性对照组比较 , aP<0.05;与模型组比较 , bP<0.05
表 3 给药期间各组小鼠 H b 测定值(g·L-1 , x±s , n=10)
Tab 3 Changes of H b during administration(g·L-1 , x ±s ,
n=10)
0d 4 d 7d 10d
阴性对照组 139.4±8.5 135.8±12.1 120.1±12.7 121.9±10.0
模型组 133.6±7.2 51.1±11.4a 81.7±17.0a 99.5±13.2a
APIC高剂量组 132.7±12.0 69.2±13.0b 107.7±24.1b 123.8±8.9b
APIC中剂量组 134.2±7.0 61.3±11.5 107.9±6.2b 118.5±7.3b
APIC低剂量组 136.0±6.6 55.3±6.0 82.3±4.6 104.7±4.9a
硫酸亚铁组 136.7±5.2 74.3±15.3b 110.8±21.5b 130.0±8.9b
混合物组 138.0±11.0 72.3±10.6b 104.8±21.1b 125.7±7.6b
阳性对照组 137.5±8.6 95.5±14.8b 116.7±15.8b 122.8±9.0b
注:与阴性对照组比较 , aP<0.05;与模型组比较 , bP<0.05
表 4 给药期间各组小鼠 HCT 测定值( x±s , n=10)
Tab 4 Changes of HCT during administ ration ( x ±s , n=
10)
0d 4 d 7d 10d
阴性对照组 0.444±0.027 0.42±0.05 0.43±0.07 0.43±0.04
模型组 0.435±0.019 0.18±0.04 a 0.31±0.07a 0.36±0.05a
APIC高剂量组 0.44±0.05 0.23±0.05 a 0.42±0.06b 0.42±0.04b
APIC中剂量组 0.43±0.03 0.20±0.04 0.410±0.027b 0.40±0.03b
APIC低剂量组 0.44±0.04 0.190±0.011 0.322±0.013 0.385±0.026a
硫酸亚铁组 0.45±0.04 0.27±0.06 b 0.42±0.06b 0.482±0.017b
混合物组 0.44±0.04 0.242±0.026 b 0.41±0.07b 0.45±0.050b
阳性对照组 0.45±0.029 0.30±0.04 b 0.44±0.06b 0.449±0.027b
注:与阴性对照组比较 , aP<0.05;与模型组比较 , bP<0.05
造模后给药期间 ,除了阴性对照组外 ,其他组小
鼠的体质量均经历了一个不同程度下降再恢复的过
程。造模初期 ,小鼠食欲下降 ,体温较低 ,行动迟缓 ,
毛发光泽较差 ,表现出明显的贫血症状。造模第 4
天贫血状况最严重。给药中后期各种症状逐渐改
善 ,第 10天基本恢复到正常状态 。
从 RBC 来看 , APIC 高 、中剂量组 , 硫酸亚铁
组 、混合物组和阳性对照组对溶血性贫血都有治疗
作用(与模型组比较差异有显著性),但疗效略有差
异。APIC 高剂量组 、硫酸亚铁组 、混合物组和阳性
对照组第 4 天有恢复(与模型组比较差异有显著
性),APIC 中剂量组第 4 天有所恢复 ,但是与模型
组比较差异无显著性。第 7天和第 10天 APIC 高 、
中剂量组 ,硫酸亚铁组 ,混合物组和阳性对照组之间
恢复情况差异无显著性 ,与模型组比较差异均有显
·1653·中国医院药学杂志 2007年第 27卷第 12期 Chin H osp Pharm J , 2007 Dec , Vol 27 , No.12
著性;但未恢复到正常水平(与阴性对照组比较差异
有显著性)。APIC 低剂量组第 4 ,7 , 10天与模型组
比较差异无显著性 ,但恢复情况略好于模型组 。
Hb和 HCT 的恢复情况与 RBC 基本相同 ,不
同的是 APIC高 、中剂量组 ,硫酸亚铁组 ,混合物组
和阳性对照组第 10天可以恢复到正常水平(与阴性
对照组比较差异无显著性)。
在试验组中 A PIC组高 、中剂量组 、硫酸亚铁组
与混合物组第 10天的 RBC 、Hb 、HCT 恢复情况差
异无显著性 ,但是从小鼠的体征来看 , APIC 组的小
鼠食欲 、体温 、行动和毛发光泽等恢复情况都优于其
他试验组 ,提示 APIC 可能不良反应较小 。
APIC3个剂量组的恢复情况说明 APIC 对溶血
性贫血有较好的治疗效果 ,并且该复合物治疗作用
呈现出一定的量效关系。高剂量组各观察指标的恢
复情况较好 ,起效较快 ,第 4天即有较好恢复;中剂
量组起效较慢 ,第 4天恢复较差 ,第 7 天和第 10 天
恢复情况较好;低剂量组则一直恢复较差。
4 讨论
本实验造模所采用的苯肼剂量较小 ,第 4 天贫
血状况最严重。小鼠自身可有一定恢复 ,但到第 10
天并不能恢复到正常水平 。
当归多糖与铁所合成的当归多糖铁复合物 ,已
通过实验证实对缺铁性贫血大鼠有较好的疗效[ 6] ,
可以有效补充贫血所导致的机体铁缺乏 ,增加造血
速度 。当归多糖铁不仅具有较理想的稳定性 、水溶
性和吸收率等 ,不良反应少 ,生物利用度高;并且 ,配
体当归多糖是传统中药当归中刺激红细胞生成 、促
进造血祖细胞和多能造血干细胞增殖和分化的主要
活性成分 ,对溶血性贫血有一定的治疗效果。即当
归多糖铁具有补血和补铁的双重功效 。因此该复合
物有望开发成为一种新型的 、具有双重补血作用的 、
不良反应小的抗贫血药物。
参考文献:
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[ J] .中国新药与临床 , 2007 , 26(6):405-407.
[收稿日期] 2007-01-26
[ 基金项目] 国家科技部十五科技攻关项目(编号:02C26214200695) [ 作者简介] 陈平 , 女 ,教授 , E-mail:ch enping vip24@163.com  [ 通讯
作者] 陈新 ,男 ,博士 ,讲师 ,电话:027-83943842 , E-mail:xchen@mai l.shcnc.ac.cn
硫酸-蒽酮法测定鄂产竹节参多糖含量
陈平 ,陈新 ,王珲 ,钱丽娜 ,张长春  (武汉工业学院生物与制药工程系 , 湖北 , 武汉 , 430023)
[ 摘要]  目的:建立鄂产竹节参多糖含量的测定方法。方法:采用水提 、醇沉的方法提取分离鄂产竹节参多糖 ,以葡萄糖为标
准液绘制标准曲线 ,用硫酸-蒽酮分光光度法测定多糖含量 ,检测波长为 610 nm。结果:鄂产竹节参的多糖含量为126.80 mg·
g-1 , 平均回收率为99.58%。结论:该方法简便 、快速 、重现性好。对鄂产竹节参多糖的测定可获得满意结果。
[ 关键词]  鄂产竹节参;多糖;硫酸-蒽酮法
[中图分类号] R927.2  [ 文献标识码] A  [文章编号] 1001-5213(2007)12-1654-03
Determination of polysaccharide from Panax ja ponicus of Hubei by anthrone-sulfuric acid
method
CHEN Ping , CHEN Xin , WANG Hui , QIAN Li-na , ZHANG Chang-chun (Depa rtment of Bio technology and
Chemical Enginee ring , Wuhan Polytechnic University , Hubei Wuhan , 430023 , China)
ABSTRACT:OBJECTIVE To establish a spectr opho tometric me thod for the determina tion o f the poly saccharides in P anax ja-
ponicus CA.Mey of HuBei.METHODS The po ly saccharides w ere extr acted w ith distilled wa te r and precipita ted w ith ethano l.
Its total so luble sugar contents we re de tected colorimetrically by the anthr one-sulf uric acid method a t 610 nm with gluco se as
standard.RESULTS The so luble poly saccharide from Panax japonicus C.A.M ey of HuBei w as 126.8 mg·g -1 .The average
recove ry w as 99.58%.CONCLUSION The methods is simple , rapid and w ell reproducible , it is suitable fo r the determination
·1654· 中国医院药学杂志 2007年第 27卷第 12期 C hin H osp Pharm J , 2007 Dec , Vol 27 , No.12

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