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炒制对栀子不同饮片中熊果酸的含量影响



全 文 :166
第 1 1 卷 第 9 期
2009 年 9 月
辽 宁 中 医 药 大 学 学 报
JOURNAL OF LIAONING UNIVERSITY OF TCM
Vol. 11 No. 9
Sep .,2009
炒制对栀子不同饮片中熊果酸的含量影响
陈 红,陈卫琳,程再兴
(福建中医学院药学系,福建 福州 350108)
摘 要:目的 :建立栀子及其炮制品中熊果酸的测定放法 , 考察栀子炮制前后熊果酸的含量变化。方法 :采用
高效液相色谱法,色谱柱为 Agilent C18(4.6mm×150mm,5μm),流动相为流动相 :甲醇 -0.1% 磷酸(86:14);检测
波长 220 nm。结果 :熊果酸在 0. 120~1.200μg 之间线性关系良好,平均加样回收率 97.54%,RSD 为 1.8%。结论 :
方法用于栀子及其炮制品中熊果酸含量测定简单方便,重复性好。
关键词:HPLC 法 ;栀子 ;炒栀子 ;焦栀子 ;熊果酸
中图分类号:R282.71 文献标识码:A 文章编号:1673-842X (2009) 09- 0166- 02
收稿日期:2009-05-08
作者简介:陈红(1977-),女,河南许昌人,讲师,博士,研究方向 :中药药效物质基础及炮制原理研究。
通讯作者:程再兴,男。Tel :0591-22861335,E-mail :chengzaixing2086@sohu.com。
Influence of Processing on Content of Ursolic Acid in Three Kind of Gardenia Jasminoids Ellis Slices
CHEN Hong,CHEN Wei-lin,CHENG Zai-xing
(School of Pharmacy,Fujian University of Traditional Chinese Medicine,Fuzhou 350108,Fujian,China)
Abstract :Objective: To analysis the content change of ursolic acid in three kind of Gardenia jasminoids
Ellis slices processed. Method:A HPLC method was developed, the chromatographic conditions are as
fellow: Agilent C18 column, 4.6mm×150mm, 5μm, methanol-1.0% phosphoric acid (86:14) as mobile
phase, detection wavelength at 220nm, the flow was 1.0mL/min. Result:The content of ursolic acid changed
markedly in three sorts slices. Conclusion:The average content of ursolic acid in Sheng slice is 0.053%,
0.048% in Chaohuang slice and 0.027% in Chaojiao slice. The content of ursolic acid reduce sharply after
processed. This method is scientific to control the processing degree of Gardenia jasminoids Ellis slices with
chinensis(Bge.) Regel、 越 南 槐 Sophora tonkinensis
Gapnep.、商 陆 Phytolacca acinosa Roxb.、徐 长 卿
Cynanchum paniculatum (Bge.) Kitag.、穿 龙 薯 蓣
Dioscorea nipponica Makino、茜草 Rubia cordifolia L.、
紫菀 Aster tataricus L.f. 等。
4.3 皮类 约 20 种,占 该 区 药 用 植 物 总 数 的
5.24%。主要的药用植物有杜仲 Eucommia ulmoides
Oliv.、细柱五加Acanthopanax gracilistylusW.W.Smith、
合 欢 Albizia julibrissin Durazz.、白 藓 Dictammnus
dasycarpus Turcz、牡 丹 Paeonia suffruticosa Andr.
等。
4.4 花类 约 8 种,占该区药用植物总数的 1.31%。
主 要 的 药 用 植 物 有 菊 Dendranthema morifolium
(Ramat.) Tzvel、野菊 Chrysanthemum indicum L.、旋覆
花 Inula japonica Thunb. 等。
4.5 果实及种子类 约 60 种,占 该 区 药 用 植
物 总 数 的 15.71%。 主 要 的 药 用 植 物 有 苍 耳
Xanthium sibiricum Patr.、牛蒡 Arctium lappa L.、连
翘 Forsythia suspense(Thunb.)Vahl、大 麻 Cannabis
sativa L.、裂 叶 牵 牛 Pharbitis nil(L.)Choisy、茴 香
Foeniculum vulgare Mill. 南 瓜 Cucurbita moschata
(Duch.) poiret 等。
4.6 叶类 约31种,占该区药用植物总数的8.12%。
主 要 的 药 用 植 物 有 桑 Morus alba L.、莲 Nelumbo
nucifera Gaertn.、艾 Artemisia argyi Levl. et Vant.、侧柏
Platycladus orientalis(L.)Franco 等 [2-4]。
5 对唐山地区药用植物资源可持续开发利用的对策
唐山地区蕴藏着丰富的药用植物资源,具有较
大的开发利用潜力,应有计划、有步骤科学地进行开
发利用研究,开展对唐山地区药用植物资源的系统
调查,建立数据库,制定统一的野生药用植物资源开
发利用发展规划。
野生药用植物在中药资源中占很大比重,在唐
山地区某些野生药用植物资源由于长期过度开采及
环境原因导致资源逐渐减少,如桔梗、党参等,甚至
濒临灭绝,所以必须尽快开展野生药用植物的引种
驯化研究,这对于解决药用植物资源可持续利用具
有重要意义。
应用现代科学方法研究中药成分,在明确有效
成分或指标性成分的基础上,建立、完善药用植物
质量标准。建立药用植物 GAP 质量生产基地保证
药材生产的质量和疗效,达到“安全、有效、稳定、可
控”,使药用植物生产规模化、规范化 [5]。◆
参考文献
[ 1 ] 张玉芹,徐景贤 . 唐山地区野菜资源调查初报 [ J ] . 北方园艺,
2007 ( 2 ) :47-48.
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1996.
[ 3 ] 江苏新医学院 . 中药大辞典 [ M ] . 上海 :上海科学技术出版
社,1986.
[ 4 ] 贺士元 . 河北植物志 [ M ] . 石家庄 :河北科学技术出版社,
1983.
[ 5 ] 韩虹,张峰.晋城野生药用种子植物资源及可持续利用研究[ J ] .
山西大学学报 ( 自然科学版 ),2008,31 ( 2 ) :269-272.
DOI:10.13194/j.jlunivtcm.2009.09.168.chenh.101
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1 1 卷 辽 宁 中 医 药 大 学 学 报
栀子为茜草科植物栀子 (Gardenia jasminoides
Eills) 的干燥成熟果实,为临床常用中药,具有泻火
除烦,清热利尿,凉血解毒之功效。临床常用于热病
心烦,黄疸尿赤,血淋涩痛,血热吐衄,目赤肿痛,火
毒疮疡等 [1]。栀子中的环烯醚萜类成分栀子苷等含
量报道较多而对其中的有机酸类成分的含量测定报
道甚少,方法不稳定,重现性不好。熊果酸为栀子中
重要的有机酸类成分,具有抗菌、抗炎、降低血糖、保
肝、抗病毒、抗肿瘤和降血脂等作用,是栀子饮片降
温的主要成分。本文采用高效液相色谱法测定栀子
生品及其炮制品中熊果酸的含量,为栀子质量标准
的完善制定提供一定的依据。
1 仪器与试药
Agilent1100A 高效液相色谱仪,DAD 检测器 ;北
京塞多利斯天平有限公司万分之一天平,METTER
TOLEDO AB265-S 型 十 万 分 之 一 天 平 ;供 实 验 用
的栀子购自福建省药材公司,经福建中医学院鉴
定教研室杨成梓鉴定为茜草科植物栀子 Gardenia
jasminoides Eills 的干燥成熟果实,炒栀子、焦栀子饮
片均由本实验室炮制。熊果酸对照品(供含量测定
用)购自中国药品生物制品检定所。甲醇为色谱纯,
水为高纯水。
2 方法与结果
2.1 色 谱 条 件 Agilent C18 色 谱 柱 (4.6mm×
150mm,5μm),流动相 :甲醇 -0.1% 磷酸(86:14),检
测波长 220 nm,流速 :0.5 mL/min ;柱温 20℃。
2.2 对照品溶液的制备 精密称取熊果酸对照品
适量,加甲醇制成每 1 mL 含 60μg 的溶液。
2.3 供试品溶液的制备 取本品粉末约 1.0g,精密
称定,置具塞锥形瓶中,精密加入甲醇 40mL,密塞,
称重,超声 40min,放冷,甲醇补重,摇匀,用 0.45μm
滤膜过滤,即得。
2.4 线性范围考察 精密吸取熊果酸液 1、2、4、
6、8、10、20 μL,注入液相色谱仪 , 测定色谱峰面
积 , 以进样量为横座标,色谱峰面积积分值为纵座
标,绘制标准曲线,得熊果酸回归方程为 :Y=2.076
1X-2.014 3,r=0.999 9,在 0.12~1.20μg 之间线性关
系良好。
2.5 精密度试验 分别精密吸取上述对照品溶液
10μL,连续 5 次进样,按前述色谱条件分析,测定峰
面积,计算熊果酸 RSD1.0%,结果表明精密度良好。
2.6 稳定性试验 精密吸取上述各对照品溶液 10
μL,按 0、2、4、6、8、12 h 时间间隔分别进样分析,测
定色谱峰面积 , 计算熊果 RSD1.8%,实验结果表明
熊果酸在 12h 内均稳定。
2.7 重复性试验 取本品粉末每份 2.0 g,精密称
定,照供试品溶液制备方法制备,分别取 10 μL 进
样分析,测定熊果酸含量,计算熊果酸 RSD2.0%,结
果表明该方法重复性良好。
2.8 加样回收率试验 精密称定已知含量本品
粉末 6 份,精密加入熊果酸对照品溶液适量,按供
试品溶液制备方法处理,同法测定含量,计算熊
果酸平均回收率为 97.54%,RSD=1.8% , 结果见
表 1。
表 1 熊果酸加样回收率(n=6)
取样量 样品中含量 加入量 测量 回收率 平均值 RSD
(g) (mg) (mg) (mg) (%) (%) (%)
1.999 2 0.964 0 0.960 0 1.893 5 96.82
2.000 1 0.964 2 0.960 0 1.899 5 97.43
2.001 0 0.964 1 0.960 0 1.931 3 95.34 97.54 1.8
2.001 0 0.964 4 0.960 0 1.940 9 100.72
2.001 2 0.964 3 0.960 0 1.907 6 98.26
1.999 5 0.967 2 0.960 0 1.894 9 96.64
2.9 含量测定 取样品粉末 2.0 g,精密称定,按“供
试品溶液的制备”项下方法制备各供试品,分别精
密吸取各供试品溶液 10 μL 进样,每一份样品进样
3 次,测定结果计算平均值,其色谱图见图 1,结果表
2。

A. 熊果酸对照品 B. 栀子

C. 炒栀子 D. 焦栀子
图 1 3 种栀子饮片中熊果酸含量测定 HPLC 图谱
表 2 栀子 3 种不同饮片中熊果酸含量(%,n=3)
测定次数 栀子 炒栀子 焦栀子
1 0.053 0.048 0.028
2 0.052 0.048 0.027
3 0.053 0.047 0.026
平均含量(%) 0.053 0.048 0.027
3 讨 论
提取方法比较了超声、回流、索氏提取等不同
提取方式,结果表明甲醇超声提取比较完全,同时
考察了超声提取时间从 15 min 至 40 min 熊果酸含
量呈递增趋势,40 min 后趋于平衡,故超声提取 40
min。流动相比较了甲醇 -0.1% 磷酸水、乙腈 - 水、
乙腈 -0.1% 冰醋酸等不同流动相组成体系,分离效
果以甲醇 -0.1% 磷酸(86:14)较好,使熊果酸在较短
时间内出峰,而且峰分离良好 ;经紫外 - 可见全波长
扫描确定熊果酸的最大吸收波长为 220 nm。
从含量测定结果可以看出,栀子 3 种不同炮制
品中熊果酸的含量随着炒制时间的延长和炒制温度
的升高呈下降趋势,炒栀子与生栀子相比含量变化
不显著,而焦栀子与之相比含量降低比较明显,说明
熊果酸受热不稳定。
本文用高效液相色谱法测定了栀子生品及其
炮制品中熊果酸的含量,本法简便易行,稳定可控,
容易操作,重复性好,可以作为栀子中熊果酸含量测
定的方法。◆
参考文献
[ 1 ] 高学敏 . 中药学 [ M ] . 北京 :人民卫生出版社,2000 :351.
the content of ursolic acid.
Key words :HPLC ;Gardenia jasminoids Ellis ; Processed slices; Ursolic acid