全 文 ：HPLC法测定蒙药材糙苏不同药用部位中的绿原酸的含量
武桂芝1 段文婷2 李秀梅2 周雪梅3 白音夫1
(1．内蒙古自治区中医医院，内蒙古 呼和浩特 010020;
2．内蒙古易和皮肤病医院，内蒙古 呼和浩特 010010;
3．内蒙古药品食品监督所，内蒙古 呼和浩特 010055)
摘 要:目的:建立民族药材糙苏绿原酸 HPLC法测定方法。方法:HPLC法，流动相为乙腈 －水 －磷酸(65:440:1) ，流速 1．
0mL·min －1，检测波长为 328nm，柱温为 30℃。结果:绿原酸在 0． 007 ～ 0． 464μg 范围内呈良好的线性关系，r = 0． 9999;平
均回收率为 101． 1%，ＲSD为 0． 88%。结论:糙苏中绿原酸含量根部 0． 11%，叶 0． 22%，茎枝 0． 08%，花 0． 51%，平均含量
0． 23%。
关键词:HPLC法;糙苏;绿原酸
中图分类号:Ｒ291． 2 文献标识码:A 文章编号:1006 － 6810(2015)07 － 0067 － 01
本品唇形科糙苏属植物糙苏 Phlomis umbrosa Turcz．，
以地上全草或根入药。夏秋采割地上全草，秋季挖取根部，
去净泥土和杂质，晒干。系蒙古族习用药材，蒙药名渥古乐
金 －突来。本品甘，糙，温，平;止咳祛痰，祛风活络，消肿。
用于感冒，慢性支气管炎，风湿关节痛，腰痛，跌打损伤，疮
疖肿毒，是蒙医常用药［1］。目前尚无含量测定标准，本文
依据糙苏成分建立该品的绿原酸含量测定方法。
1 仪器与试剂
高效液相色谱仪 (美国安捷伦公司)，TJ － 912型色谱分
析平台(太极计算机公司)。绿原酸对照品(110753 － 200413)
由中国药品生物制品检定所提供;乙腈为色谱纯;其他均为分
析纯试剂;水为纯化水;糙苏采于呼和浩特市蛮汉山。
2 方法学考察
2． 1 色谱条件:色谱柱填充剂为十八烷基硅烷键合硅胶，色
谱柱 Kromasi － C18 (4． 6mm × 200mm，5μm) ，流动相乙腈 －
水 －磷酸(65:440:1) ，流速 1mL·min －1，柱温 30℃，检测波
长 328nm，进样量 10μL，理论板数按绿原酸峰≥5000。
2． 2 测定溶液的制备
2． 2． 1 对照品溶液的制备:精密称取绿原酸对照品适量，
置棕色量瓶中，甲醇溶解，配制成 1mL 含 0． 28 mg 绿原酸
对照品溶液。
2． 2． 2 供试品溶液的制备:取糙苏，粉碎，过 100目筛，精密
称定 50mg，置具塞锥形瓶中，精密加入甲醇 10mL，称重，超声
处理 30min ，放冷，称重 ，补足减失重量，滤过，摇匀，即得。
2． 3 线性关系考察:取绿原酸对照品溶液 0． 25、0． 5、1、2、
3、4、5(mL) ，分置 10mL 量瓶内，甲醇稀释至刻度，分别精
密吸取 10μL进样，按上述色谱条件测定。结果，绿原酸在
7 ～ 140 μg·mL －1范围内呈良好的线性关系，回归方程 A
=5452 + 7008C，r = 0． 999 。
2． 4 精密度试验:取同一供试品溶液，在上述色谱条件下，
连续进样 6 次，测定绿原酸峰面积积分值，ＲSD 0． 31%，精
密度良好。
2． 5 提取率的考察:供试品溶液行 10、20、30、40 (min)的
超声处理。20min后绿原酸含量不再增加，确定 30min为最
适合提取时间。
2． 6 稳定性试验:取同一份供试品溶液，分别于 0、2、6、8
(h)进行测定，结果，绿原酸在 8h 内的峰面积积分值基本
稳定不变。
2． 7 重复性试验:取同一批号供试品(叶子)6 份，各约
50mg，精密称定，分别按上述拟定方法制备供试品及测定。
样品平均含量 0． 21%，ＲSD 0． 52%。
2． 8 回收率试验:取上述含量的同批样品 6 份，每份约
60mg，置 50 mL量瓶中，依次精密加入分别加入 0． 1mL(每
mL含绿原酸 5． 41mg)对照品溶液，挥去溶剂，按供试品溶
液的制备操作，测定含量，计算回收率。绿原酸平均回收率
为 101． 1%，ＲSD为 0． 88%
2． 9 样品含量测定:取糙苏药材不同部位，按2． 2． 2 项下方法
制备供试品溶液，按拟定的色谱条件测定绿原酸含量，根部 0．
11%，叶 0． 22%，茎枝 0． 08%，花 0． 51%，平均含量0． 23%。
2． 10 方法的专属性:在拟定的色谱条件下，分别取对照品
溶液和供试品溶液进样测定，得到特征峰，与杂质分离良
好，无干扰，见图。
图 1 HPLC图谱
A．绿原酸对照品; B．供试品;1． 绿原酸
3 结论
绿原酸是糙苏的主要活性成分，含量根部 0． 11%，叶
0． 22%，茎枝 0． 08%，花 0． 51%，平均含量 0． 23%。
方法学研究表明，HPLC法测定糙苏绿原酸含量，测定
方法稳定、重现性好，准确度高，色谱分离度好，无干扰。
参考文献
［1］卫生部药典委员会． 卫生部药品标准蒙药分册［S］．
1998:57．
2015 年 3 月 31 日收稿
762015 年 7 月第 7 期 中国民族医药杂志
DOI:10.16041/j.cnki.cn15-1175.2015.07.039