全 文 :大孔树脂纯化山竹果壳废弃物色素的研究
苏细妹,黄晓敏,黄俊生*
(韩山师范学院 化学系,广东 潮州 521041)
摘要:以大孔树脂为吸附材料分离纯化山竹果壳中的天然色素,并对其纯化工艺条件进行探究。实验
选择了FL-1,FL-2,FL-3,AB-8,NKA-9,D-101,X-5,DA-101,DA-201九种大孔树脂,比较了其对该色
素的吸附率和解吸率,并对静态(吸附率×解吸率)柱形图比较进行考察,筛选出最好的树脂。结果表
明,AB-8大孔树脂对该色素的吸附和解吸效果较好。在动态吸附中,当上样液吸光度为0.100~
0.300,pH 4,上样液流速为3BV/h时,AB-8树脂对山竹果壳色素吸附量大;以90%的乙醇为洗脱剂,
流速为2BV/h时,解吸效果最好;山竹果壳色素纯化后,色价提高了5倍左右。这项研究为山竹果壳
色素的工业化生产提供了理论基础。
关键词:山竹果壳;色素;大孔树脂;吸附和解吸;纯化
中图分类号:TS202.3 文献标识码:A doi:10.3969/j.issn.1000-9973.2013.01.031
文章编号:1000-9973(2013)01-0108-05
Study on Purification of Pigments from Mangosteen
Fruit Huls with Macroporous Resin
SU Xi-mei,HUANG Xiao-min,HUANG Jun-sheng*
(Department of Chemistry,Hanshan Normal University,Chaozhou 521041,China)
Abstract:A method for separation and purification of pigments from mangosteen fruit huls with macroporous
resin is studied and the purification process conditions are researched.The characteristics of adsorption rates
and desorption rates of nine kinds of macroporous resins(FL-1,FL-2,FL-3,AB-8,NKA-9,D-101,X-5,
DA-101,DA-201)to mangosteen fruit huls pigments are investigated.The results show that AB-8resin is
the suitable resin for purifying mangosteen fruit huls pigments.AB-8macroporous resin shows better per-
formance for adsorption and desorption.The appropriate dynamic conditions are:absorbance of sample is
0.100~0.300and pH is 4,the velocity of flow is 3BV/h;when w(EtOH)of 90%is used as eluant and the
velocity of flow is 2BV/h,the desorption efect is the best.After purification,the colourity of pigments from
mangosteen fruit huls raised about fivefold.The study provided a basic theory for the industrial production of
mangosteen fruit hul pigment.
Key words:mangosteen fruit huls;pigment;macroporous resin;adsorption and desorption;purifica-
tion
目前,色泽艳丽、柔和、自然,安全性能高,并且具
有一定的营养价值和生理保健功能的天然色素逐渐取
代具有毒副作用的合成色素成为必然趋势。近年来,
世界各国大力开发和利用天然色素,使两者出现此消
收稿日期:2012-09-23 *通讯作者
作者简介:苏细妹(1989-),女,广东潮安人,学生,主要从事化学教育教学工作;
黄俊生(1982-),男,广东陆丰人,硕士研究生,实验师。
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食品添加剂 2013年第1期
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彼长的状况,调查显示:近年来,天然色素使用量以
5%~10%的速度递增。
山竹,号称“果中皇后”,它的果肉不仅味美,而且
含有丰富的蛋白质和脂类,对机体有很好的补养和调
养作用,越来越受到广大民众的喜爱。山竹被制成加
工产品,如罐头、脱水果实、果酱、蜜饯和果汁等。而果
壳我们一般都当废弃物丢弃,如能加以利用,生产出色
价高的天然色素,可谓废物利用。
本文重点研究9种大孔树脂对山竹果壳色素的纯
化,比较了其对色素的吸附率和解吸率,筛选出了较优
的色素吸附剂,对其动力学曲线和动态吸附性进行了
考察,并计算比较纯化前后色价。一系列研究为山竹
果壳色素提取工艺的改进和工业化生产提供了理论和
应用基础。
1 材料与方法
1.1 实验设备
LGJ-10冷冻干燥机 北京松源华兴科技发展有
限公司;H2010型恒温振荡水槽 上海实验仪器总
厂;旋转蒸发器,层析柱,KQ-500B型超声波清洗器
昆山市超声仪器有限公司;PHS-3C型酸度计 上海
精科学仪器有限公司;TU-1900型双光束紫外-可见分
光光度计 北京普析通用仪器有限公司;BT-100B数
显恒流泵 上海泸西分析仪器厂。
1.2 实验材料与试剂
山竹,购于潮州市桥东市场;大孔树脂系列:FL-
1,FL-2,FL-3,AB-8,NKA-9,D-101,X-5,DA-101,
DA-201;95%乙醇溶液、无水乙醇、蒸馏水、盐酸、
NaOH等为分析纯试剂。
1.2.1 树脂的性能
大孔吸附树脂为吸附性和筛选性原理相结合的分
离材料,是近10年来发展起来的一类有机高分子聚
合物吸附剂,其吸附实质为表面分子受作用力不均等
而产生的表面吸附现象,这种吸附作用是由于范德华
引力或生成氢键的结果,同时由于大孔吸附树脂的多
孔结构使其对分子大小不同的物质具有筛选作用。通
过这种吸附和筛选,有机化合物根据吸附力的不同及
分子量的大小,经一定溶剂洗脱而达到分离、纯化、除
杂、浓缩等不同目的。
1.2.2 大孔树脂的分类
通常大孔树脂分为极性、中极性和非极性三大类。
其对植物提取物的吸附,遵循相似相溶原理,即极性强
的物质,极性树脂对其吸附能力较强,而极性弱的物
质,则需要选择极性弱的树脂进行处理。另外,待分离
物质的性质也会在一定程度上影响吸附效果。一般来
说,对非极性大孔树脂,洗脱剂极性越小,洗脱能力越
强;对极性大孔树脂和极性较大的化合物,则用极性强
的溶剂能更好地分离。
本试验中使用的几种大孔树脂的主要参数,见表
1[1]。
表1 不同型号的大孔树脂的物理参数
Table 1Physical parameters of different macroporous resins
树脂
粒径范围
(nm)
外观 极性
比表面积
(m2/g)
骨架结构
FL-1 20~30 球状颗粒,浅黄色不透明 强极性 100~200 聚苯乙烯型
FL-2 25~35 球状颗粒,白色不透明 中极性 120~200 聚苯乙烯-丙烯酸酯型
FL-3 20~30 球状颗粒,乳白色不透明 弱极性 ≥550 聚苯乙烯型
AB-8 20~30 球状颗粒,乳白色不透明 弱极性 ≥400 聚苯乙烯型
NKA-9 30~125 球状颗粒,乳白色不透明 弱极性 650 聚苯乙烯型
D-101 30~125 球状颗粒,乳白色不透明 非极性 700 聚苯乙烯型
X-5 30~125 球状颗粒,乳白色不透明 非极性 700 聚苯乙烯型
DA-101 16~60 球状颗粒,棕褐色不透明 非极性 600~700 苯乙烯-二乙烯苯型
DA-201 30~125 球状颗粒,乳白色不透明 弱极性 650 聚苯乙烯型
1.3 实验方法
1.3.1 粗山竹红色素的制备[2-4]
根据最佳提取工艺条件提取山竹果壳中的粗红色
素,经旋转蒸发、冷冻干燥得色素粗粉。
1.3.2 各种树脂静态吸附率及解吸率测定比较[5]
表1中FL-1,FL-2,FL-3,AB-8,NKA-9,D-101,
X-5,DA-101,DA-201九种吸附树脂经处理后,去除表
面水分,分别准确称取1.000g,装于100mL三角瓶
中,加入吸光度为0.191的山竹果壳粗提取物溶液
20mL于盛有大孔树脂的锥形瓶内,置恒温振荡器上
振荡,30℃,120r/min,2h后过滤,取其滤液,测其吸
光度A,并计算吸附率。吸附率按下式计算:
D=A0-A1A0
×100%。
式中D为吸附率,%;A0 为吸附前样品吸光度;
A1 为吸附后样品吸光度。
分别取出上述各种已吸附有色素的大孔吸附树
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脂,置于9个100mL的三角瓶中,加入90%的乙醇
20mL,置恒温振荡器上振荡,25℃,120r/min,2h后
测定吸光度值,并计算不同型号树脂的解吸率。解吸
率按下式计算:
D'= A2A0-A1
×100%。
式中D'为解吸率,% ;A0 为吸附前样品吸光度;
A1 为吸附后样品吸光度;A2 为解吸液吸光度。
1.3.3 动态吸附最佳条件的确定[6-9]
1.3.3.1 上样液不同吸光度对动态吸附的影响
将山竹果壳粗提取物用50%乙醇溶液配置成吸
光度为0.100,0.200,0.300,0.400,0.501的待上样溶
液50mL。以3BV/h的速度加入装有5g大孔树脂
AB-8的层析柱内进行吸附,测定每一份5mL渗出液
的吸光度,研究不同上样溶液的吸光度对树脂吸附率
的影响。
1.3.3.2 上样流速对动态吸附作用的影响
将吸光度为0.264的山竹色素粗提液50mL以
1,2,3,4,5BV/h,5种不同的流速通过装有5g AB-8
树脂的层析柱,吸附完全后,测定流出液的吸光度,计
算吸附率,绘制上样流速对动态吸附影响的曲线。
1.3.3.3 上样液pH值对动态吸附的影响
取6份50mL相同浓度山竹果壳粗提液,分别调
节成pH值为2.0,3.0,4.0,5.0,6.0,7.0的待上样溶
液,通过对其色素进行双光速紫外光谱扫描,以
3BV/h的速度加入装有5g AB-8大孔树脂的层析柱
内进行吸附,吸附完全后,测定流出液的吸光度,计算
吸附率,绘制不同上样液pH 对树脂吸附率的影响的
曲线。
1.3.4 动态解吸最佳条件的确定
1.3.4.1 洗脱剂浓度的确定
将吸附有同样该色素的大孔树脂分别上柱,先用
50mL 蒸馏水洗脱,再分别用50mL 50%,60%,
70%,80%,90%,100%不同浓度的乙醇溶液洗脱,收
集洗脱液,测定其吸光度,计算其解吸率,绘制洗脱剂
浓度对动态解吸影响的曲线。
1.3.4.2 洗脱流速对解吸的影响
将吸附有同样该色素的大孔树脂分别上柱,先用
50mL蒸馏水洗脱,然后用浓度为90%,pH为4.0的
乙醇溶液对树脂柱进行解吸,分别控制流速为1,2,3,
4,5BV/h,收集不同流速下的洗脱液,测定吸光度,计
算其解吸率,绘制洗脱流速对动态解吸影响的曲线。
1.3.5 色素的色价与纯化率
将山竹色素的粗提取液和纯化后的山竹色素纯化
液用旋转蒸发仪进行蒸发浓缩,然后将浓缩物放入真
空干燥机干燥至恒重(温度控制在50~60℃)得到固
体样品,分别取出少量固体粉末,精确称量其重量,取
出一定量,并用一定浓度的乙醇将其溶解定容,测量其
吸光度,最后分别计算两者的色价,求出纯化率。色价
和纯化率计算公式如下:
色价=A×fG
;
纯化率=
色价纯化后
色价纯化前
×100%。
式中A为实测试样的吸光度;f为稀释倍数;G为
洗脱液浓缩烘干后得固体物质重量。
2 结果与分析
2.1 各种树脂静态吸附率与解吸率测定比较
不同大孔吸附树脂吸附率与解吸率比较,见表2。
表2 不同大孔吸附树脂吸附率与解吸率比较
Table 2Absorption rates and desorption rates
of different macroporous resins
%
大孔树脂 吸附率 解吸率 吸附率×解吸率
FL-1 59.69 34.21 20.42
FL-2 67.54 68.22 46.07
FL-3 58.12 89.19 51.83
AB-8 78.01 72.48 56.54
NKA-9 93.72 53.63 50.26
DA-101 69.11 72.73 50.26
DA-201 10.99 100.00 10.99
D-101 63.35 85.95 54.45
X-5 60.73 83.62 50.79
上述结果显示,9种树脂中NKA-9型对山竹果壳
色素的静态吸附率最高,AB-8型次之。在静态洗脱
中,NKA-9型解吸率较低,而AB-8型树脂相对较高,
又因为在9种树脂中AB-8型的(吸附率×解吸率)值
最高,使色素得到最大程度的回收,故选AB-8型树脂
为宜。
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2.2 动态吸附最佳条件的确定
2.2.1 不同上样吸光度对动态吸附的影响
不同上样吸光度对动态吸附的影响,见表3和图
1。
表3 不同吸光度对山竹果壳色素的吸附影响
Table 3The effect of different absorbance
on mangosteen fruit hul pigment
吸光度A 0.100 0.200 0.300 0.400 0.501
吸附率(%) 73.00 67.50 66.00 63.25 61.28
图1 不同吸光度的上样液经吸附后流出
液的吸光度的变化(上样流速为3BV/h)
Fig.1The effect of different sample absorbance
on adsorption performance
由表3和图1可知,随着上样溶液吸光度的增加,
树脂的吸附率下降。由上样溶液吸光度对吸附率的影
响曲线中可知,随着山竹果壳色素提取液浓度的增加,
AB-8大孔树脂的吸附量也有一定程度的提高,但吸附
率却呈现减小趋势。从节省试剂、树脂及省时三方面
考虑,将上样液吸光度定在0.100≤A466≤0.300。
2.2.2 不同上样流速对动态吸附的影响
不同上样流速对动态吸附的影响,见图2。
图2 不同上样流速的动态吸附率比较
(上样吸光度为0.264)
Fig.2Effect of sample flow rate on dynamic adsorption
rate(the sample absorbance is 0.264)
由图2可知,随着流速的提高,吸附率逐渐下降,
显然低流速有利于吸附完全,但为了节省时间,提高纯
化速率,综合考虑下,选择耗时适中、吸附效果较好的
流速3BV/h。
2.2.3 不同pH上样液对动态吸附的影响
双光速紫外光谱扫描图,见图3。
图3 双光速紫外光谱扫描图
Fig.3UV-Vis Spectrophotometer scanning spectrum
由图3可知,在吸收波长466nm处,溶液吸光度
受pH的影响不大。
不同pH上样液下动态吸附率的比较,见图4。
图4 不同pH上样液下动态吸附率的比较
(同一浓度上样液,上样流速为3BV/h)
Fig.4Influence of sample pH on dynamic adsorption
rate(the sample flow rate is 3BV/h)
由图4可知,吸附效果受上样液的pH 值影响较
大。在酸性至中性上样液区间,pH 2~4的吸附效果
较好,而pH 5~7的吸附率明显较低,且变化不大,因
在pH 3~7范围内色素稳定,故选定pH值为4的上
样液。
2.3 动态解吸最佳条件的确定
2.3.1 不同浓度的乙醇溶液对动态解吸的影响
不同浓度的乙醇溶液对动态解吸的影响,见
图5。
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图5 不同浓度的乙醇溶液对动态解吸影响的比较
Fig.5Elution concentration on dynamic desorption
由图5可知,解吸率随着乙醇浓度的提高而攀
升,从节省成本考虑,选择浓度为90%的乙醇溶
液。
2.3.2 不同洗脱流速对动态解吸的影响
不同洗脱流速对动态解吸的影响,见图6。
图6 不同洗脱流速对动态解吸动力学曲线
Fig.6Effects of different eluent flow
rates on dynamic desorption
由图6可知,洗脱流速3,4和5BV/h的峰值低,
峰形不明显,解吸效果较差,当洗脱流速为1,2BV/h
时,峰值较高,但流速为2BV/h时,峰形较尖,峰值与
解吸率最高,动态解吸效果最好,故选定2BV/h为洗
脱流速。
2.4 色价与纯化率
色价与纯化率,见表4。
表4 色价与纯化率
Tab.4Pigment value and purification efficiency
结果
类别
色价 纯化率 (%)
纯化前色素 92.7 584.1
纯化后色素 541.7
由表4可知,纯化后的色价明显的提高了449,且
纯化率高达584.1%。
3 结论
通过筛选适合纯化山竹果壳色素的大孔树脂和确
定较优的纯化条件,可以得到以下结论:
山竹果壳色素纯化后的色价明显高于粗提物。
通过比较 FL-1,FL-2,FL-3,AB-8,NKA-9,D-
101,X-5,DA-101,DA-201型大孔树脂对山竹果壳
色素的吸附、解吸性能以及吸附动力学曲线,可以
确定 AB-8型大孔吸附树脂最适合于山竹果壳色素
的纯化。
通过对AB-8型大孔吸附树脂动态吸附和解吸条
件的研究,确定了上样液吸光度为0.100~0.300,
pH为4,上样液流速为3BV/h;洗脱剂为90%的乙醇
溶液,解吸流速为2BV/h,在此条件下纯化后的纯化
率达584.1%。
在适宜条件下,用 AB-8型大孔树脂纯化山竹色
素,回收溶剂,样品干燥后呈桔黄色。
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