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伞房花耳草中乌索酸的分离提纯及HPLC分析



全 文 :伞房花耳草中乌索酸的分离提纯及 HPLC分析
朱智勇1 , 邹盛勤2 , 陈武1* , 李开泉1
(1.宜春学院化学与生物工程学院,江西宜春 336000;2.江西省天然药物活性成分研究重点实验室 ,江西宜春 336000)
摘要 采用“醇提凝析法”从伞房花耳草中分离提纯乌索酸 ,并用光谱等技术对乌索酸结构进行了表征 ,建立了伞房花耳草中乌索酸的
分离提纯及含量测定的方法。结果表明 ,此方法具有快速简便、精密度高、重现性好、线性范围宽的特点 ,可用于乌索酸的质量控制。
关键词 伞房花耳草;乌索酸;结构表征;HPLC分析
中图分类号 Q503  文献标识码 A  文章编号 0517-6611(2007)33-10567-02
Separation and HPLC Analysis of Ursolic Acid in Hedyotidis Corymbosae Lam
ZHU Zhi-yong et al (Chemistry&Bioengineering College of Yichun University , Yichun , Jiangxi 336000)
Abstract To develop a method for extracting and analysis of ursolic acid in Hedyotidis Corymbosae Lam.the method of ethanol extracting and agglutina-
tion separating were used to extract ursolic acid from Hedyotidis Corymbosae Lam and the structure of ursolic acid was identified by IR ,MS ,NMR.HPLC
was carried out on the chromatographic column of SymmetryShield RP18(3.9 mm×150mm ,5μm)at 25 ℃, using methanol-water(88∶12 , V/ V)as mobile
phasewith a flow of 1.0 ml/min , and detectionwavelength was set at 210 nm.Therewas a good relationship between the peak area and the sample content
injected at the range of 3.9~ 19.6μg(r = 0.999 9).The content was 99.58%byHPLC and the gain ratewas 3.04‰.Themethod was simple , accurate
and had good repeatability and wider linear range, and can be used to evaluate the quality of ursolic acid.
Key words Hedyotidis Corymbosae Lam;Ursolic acid;Structural characteristics;HPLC
安徽农业科学, Journal of Anhui Agri.Sci.2007 ,35(33):10567-10568                    责任编辑 罗芸 责任校对 李洪
DOI :10.13989/j.cnki.0517-6611.2007.33.122
(上接第 10566页)
1.2.6 抑菌实验 。用移液枪精密吸取各菌悬液 0.2 ml于
不同浓度的培养基中 ,用无菌三角涂布棒涂布均匀 ,待干后
倒置于生化恒温培养箱中培养(37 ℃、24 h),观察培养
结果。
2 结果与分析
经过 37 ℃、24 h培养后观察结果如表 2。由表 2可见 ,
  表2 不同浓度的提取液培养基的抑菌情况
菌种 提取液 提取液培养基浓度∥%
0 0.05 0.10 0.15 0.20 0.25 0.30
金黄色 桫椤叶 ++++++ ++ ++ + + +
葡萄球菌 桫椤茎干 ++++++ ++ ++ + + +
黄连 +++ ++ + + - - -
大肠杆菌 桫椤叶 +++ ++ + + - - -
桫椤茎干 +++++++++ ++ ++ + +
黄连 +++ ++ + - - - -
枯草芽 桫椤叶- ++++++++++++ ++ + -
孢杆菌 桫椤茎干 ++++++ ++ ++ + - -
黄连 +++ ++ + - - - -
 注:“ -”表示培养基上无菌;“ +”表示培养基上有菌。
桫椤叶对大肠杆菌的抑制效果较好 ,最低抑制浓度为
0.10%,对枯草芽孢杆菌的抑制效果次之 ,对金黄色葡萄球
菌的抑制作用最弱;而桫椤茎干对枯草芽孢杆菌的抑制效
果较好 ,最低抑制浓度为 0.10%,对大肠杆菌的抑制效果次
之 ,对金黄色葡萄球菌的抑制作用最弱。桫椤叶和茎干的
抑菌作用与抑菌中药材黄连提取物相比较弱。
3 小结与讨论
金黄色葡萄球菌 、大肠杆菌常会引起食物中毒 ,其主要
症状为呕吐 、腹泻 、腹痛 ,中毒严重可引起死亡;而枯草芽孢
杆菌属革兰氏阳性需氧芽孢杆菌 ,广泛存在于土壤 、尘埃和
环境空气中 ,为一种条件致病菌 ,可致呼吸道感染 、心内膜
炎 ,以及菌血症 、败血症等 ,而通过实验验证了桫椤叶对大
肠杆菌的抑制效果比较好 ,桫椤茎干对枯草芽孢杆菌的抑
制效果比较好 。
参考文献
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10568              安徽农业科学                        2007年