全 文 ：第 33 卷　第 1 期 河南师范大学学报(自然科学版) Vol . 33　No. 1
　2005 年 2 月 J ournal of Henan Normal University (Natural S cience) Feb. 2005　
　　文章编号:1000 - 2367(2005)01 - 0073 - 04
陆英提取物乌索酸的紫外和红外光谱研究①
邹盛勤1 ,张西安2
(1.宜春学院生物工程研究所 ,江西 宜春 336000;2.开封广播电视大学 , 河南 开封 475000)
摘　要:采用高效液相色谱二极管矩阵检测器测定了乌索酸的紫外光谱 ,建立了分析色谱峰纯度的方法.采用
傅立叶红外变换光谱仪测定了乌索酸的红外光谱 , 得到乌索酸的特征 IR光谱结构 ,解析了乌索酸的 IR 光谱与其结
构特征的关系 ,确定了乌索酸 IR光谱的结构特征和官能团归属. IR 光谱的谱峰形态清晰可辨 ,使乌索酸的主要结构
和官能团均能得到准确的分析和指认 ,与质谱联用 ,推定了乌索酸的分子骨架 、官能团位置和结构.
关键词:陆英;乌索酸;紫外光谱;红外光谱;结构解析
中图分类号:R284　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　文献标识码:A
乌索酸(Urso lic acid),又名熊果酸 ,乌苏酸 ,为五环三萜类化合物 ,无色针状结晶 ,分子式 C30H 48O3 ,分
子量 456. 68 ,其分子结构见图 1.
COOH
H3C
CH3
CH3
CH3CH3
H3C CH3
HO
图 1　乌索酸的分子结构
现代药理研究发现 ,乌索酸具有抗肝炎 、抗肿瘤 、抗病
毒 、抗炎抑菌及降血脂等多种药理活性[ 1 ～ 2] ,且其抗肿瘤
作用广泛 ,极有可能成为低毒有效的新型抗癌药物[ 3] ,有
重要的药用开发价值. 江西宜春学院采用“醇提凝析法” ,
使用单一溶剂乙醇从中药陆英中制备出纯度达 99. 51%
的乌索酸[ 4] ,经 TCL 、HPLC , IR ,MS和 NMR检测 ,其结
构被确证为乌索酸. 本文对陆英提取物乌索酸的紫外和红
外光谱进行了研究分析.
1　仪器与试剂
Waters 515型高效液相色谱仪 , 2996 光电二极管矩阵检测器(PAD), Empow er 中文色谱工作站(美
国);Perkin-Elmer Spect ram One 傅立叶红外变换光谱仪;Magnet BPI 型质谱仪(美国);三用紫外线分析仪
(江阴市申港电光仪器厂).甲醇(色谱纯 ,上海陆忠试剂厂);90 %乙醇(食用级 ,广西糖厂);“YCXY-1号”除
杂剂(自制);活性炭(分析纯 ,上海豪申化学试剂厂);水为高纯水;乌索酸对照品(中国药品生物制品检定所 ,
批号 110742-200314)
2　方法与结果
2. 1　乌索酸的分离制备
乌索酸取自于忍冬科接骨木属植物陆英(Sambucus Chinensis L ind l .)(经江西省药物研究所张海道研
究员鉴定).称取 10 kg 晒干的陆英全草粉碎成粗粉(过 20 目筛),用 7 倍量 90 %的乙醇 80 ℃回流提取 2
① 收稿日期:2004 - 11 - 03
基金项目:国家“ 863”计划重点资助项目(2002AA2Z3217)
作者简介:邹盛勤(1970 -), 男 ,江西奉新人 , 宜春学院副教授 ,主要从事有机化工和生物医药研究.
DOI牶牨牥牣牨牰牫牰牰牤j牣cnki牣牨牥牥牥牠牪牫牰牱牣牪牥牥牭牣牥牨牣牥牨牴
次 ,每次 1 h ,合并提取液 、过滤 、减压回收乙醇得浸膏. 浸膏加入自制的 “YCXY-1号”除杂剂 ,除去脂类 、类
脂类及叶绿素等杂质 ,过滤 ,滤取物加乙醇溶解 ,并加活性炭脱色 ,调 pH 值 ,经凝析分离 、纯化精制 ,烘干后
得无色针状结晶乌索酸样品.
2. 2　乌索酸的 TLC鉴别
取硅胶 G板 ,于 110 ℃活化 1 h.取乌索酸样品约 2 mg ,加 1 ml无水乙醇溶解 ,点样 ,同时用对照品作对
照 ,以环已烷∶丙酮(3∶1)为展开剂 ,展距 10 cm ,晾干后喷以 10 %硫酸乙醇溶液 ,于 110 ℃加热10 min ,结
果在与对照品相应的位置上显相同颜色的紫红色斑点 ,在 365 nm 紫外光下显相同颜色的金黄色荧光斑点.
2. 3　乌索酸的紫外吸收光谱
2. 3. 1　色谱条件　Symme tryShield RP18色谱柱(3. 9×150 mm ,5 μm),流动相为甲醇 ,流速 1 m l /min ,柱
温 25 ℃ .
2. 3. 2　乌索酸紫外吸收光谱　乌索酸为五环三萜酸 ,属α-香树脂醇型三萜类衍生物 ,分子结构中含有孤立
　　
双键和羧基 P-π共轭体系 ,在紫外区有弱吸收. 取 10 μl乌索酸
样品甲醇溶液(0. 95 μg /μl)进样 ,经 HPLC-2996光电二极管矩
阵检测器(PAD)在 190 ～ 400 nm 波长范围扫描 ,乌索酸在溶剂
甲醇中有吸收 ,其最大紫外吸收波长为 205. 7 nm ,与对照品一
致.在色谱峰顶点 ,起始点和终止点分别进行光谱采集 ,经归一
化及光谱叠加 , 3 点光谱曲线完全重合 ,光谱匹配系数为 999.
528 ,接近完全匹配系数值 1 000 ,可判断此色谱峰为单一组分吸
收峰.乌索酸样品紫外吸收光谱图见图 2.
2. 4　乌索酸的红外光谱
2. 4. 1　样片压制　称取 2 mg(精确至 0. 001 g)乌索酸样品与
200 mg 已干燥过的 KBr粉末混合 ,在玛瑙研钵中充分研磨(每
个样品的研磨次数相同)均匀后 ,在压片机上压片 ,压片压力为
25 MPa.
2. 4. 2　红外光谱图　用傅立叶红外变换光谱仪对乌索酸样片
扫描 ,波数分辨率 0. 1 cm - 1 ,所得红外光谱图见图 3. 红外光谱
中有羟基强峰 3 402 cm - 1 ;羧酸羰基峰 1 711 cm - 1 ,并且具有乌索酸型化合物的特征吸收峰.
74 河南师范大学学报(自然科学版)　　　　　　　　　　　　　　　　2005 年
　　2. 5　乌索酸的质谱
2. 5. 1　测定条件　离子源:EI 源(电子轰击离子源);电子轰击能:70 eV;加速电压:8 kV;质量范围:29 ～
800m /e.
2. 5. 2　主要离子裂解碎片　由于乌索酸分子中有烯键存在 ,在电子撞击下 ,其 C 环易产生 RDA 裂解 ,得到
含 A 、B环和含 D 、E环的离子 ,质谱图上乌索酸裂解为以下三个系列.
(1)分子离子及其失去取代基的离子 , EIM S(m /z):456(M +),441(M - CH3), 438(M - H2O),423(M
- CH 3 - H2O),411(M - COOH),410(M - HCOOH).
(2) C环 RDA 裂解得到的含 D 、E环的离子 a及其失去取代基的离子 , EIM S(m /z):248(a - 100), 203
(a - COOH),189(a - HC2COOH),133.
(3) C 环 RDA 裂解得到的含 A 、B环的离子 b系列碎片 , EIMS(m /z):208(b), 207(b - H), 190(b -
H 2O),189(b - H 2O - H).质谱裂解数据与文献值[ 5] 一致.
　　
3　讨　论
附表　乌索酸的红外吸收特征峰
n / cm - 1 特征振动形式 n / cm - 1 特征振动形式
3 402 束缚 OH 伸缩振动 1 359 OH 弯曲振动
2 977 CH 3 不对称伸缩振动 1 244 羟基 O - C - C伸缩振动
2 948 CH 2 不对称伸缩振动 1 268 亚甲基(CH2)同相扭摆
2 920 CH 3 对称伸缩振动 1 044 醇羟基仲醇 C- O伸缩振动
2 868 CH 2 对称伸缩振动 998 CH(C=C)面外变角振动
2 617 COOH 特征峰 973 反式 C=C特征峰
1 711 C=O 伸缩振动 950 OH 面外变角振动
1 688
1 659
C =C 伸缩振动 877
849
烷基取代 C=C面外 C - H 变形
环呼吸
1 524 环振动 828 烷基取代 C=C面外 C - H 弯曲振动
1 457 CH 2 对称弯曲振动 820 环己烷式环“呼吸”
1 386 CH 3 对称弯曲振动 662 O - C=O面内弯曲振动
1 377 CH 3 - C - CH 3 偶合分裂为双峰 606 环呼吸
75第 1 期　　　　　　　　　　　　　邹盛勤等:陆英提取物乌索酸的紫外和红外光谱研究
3. 1　用 HPLC-PAD扫描紫外吸收光谱快速 、简便 ,并可采用光谱匹配系数检测色谱峰纯度 ,判断色谱的分
离效果.与对照品谱图比较 ,其最大特征吸收波长可作为乌索酸提取 、生产过程中的初步鉴别参数 ,对工艺条
件的控制具有重要参考价值.
3. 2　乌索酸红外光谱的各谱峰形态清晰可辨 ,结构中的特征官能团和结构特征均能在红外光谱中找到归
属[ 6 ～ 7] ,使乌索酸的主要结构和官能团得到准确的分析和指认 , 其对应的红外吸收特征峰归纳于附表.
参　考　文　献
[ 1] 　陈　武 , 李开泉 ,熊筱娟 , 等.陆英抗肝炎活性成分的研究[ J] .南昌大学学报(理科版), 2001 , 25(2):165 - 167.
[ 2] 　熊筱娟 , 陈　武 ,李开泉 , 等.乌索酸防治大鼠实验性肝损伤作用的研究[ J] . 宜春医专学报 , 2001 , 13(2):126 - 127.
[ 3] 　黄　镜 , 孙　燕.熊果酸的抗肿瘤活性[ J] . 中国新药杂志 , 1997 , 6 (2):101 - 104.
[ 4] 　李开泉 , 邹盛勤 ,陈　武 , 等.陆英中乌索酸提取工艺的正交优选[ J] . 中草药 , 2003 , 34(9):791 - 792.
[ 5] 　丛浦株. 质谱学在天然有机化学中的应用[ M] .北京:科学出版社 , 1987. 685 - 686.
[ 6] 　董庆年. 红外光谱法[ M] . 北京:化学工业出版社 , 1977. 27 - 39 , 102 - 126.
[ 7] 　王宗明 , 何欣翔 ,孙殿卿. 实用红外光谱学[ M] .第 2 版. 北京:石油工业出版社 , 1990. 212 - 219 , 263 - 264.
Studies on UV and IR Spectrum of Ursolic Acid in Sambucus Chinensis Lindl.
ZO U Sheng-qin1 ,ZHANG Xi-an2
(1. In sti tu te of Biology , Yich un University , Yichun 336000 , China;2. Kaifeng Radio &T elevision University , Kai feng 475000 , China)
Abstract:In this a rticle , H PLC w ith a photodiode ar ray detecto r wa s used to reco rd the UV spec tra of the ursolic acid.
The analysis method o f chr omatog ram peak has been e stablished. Fourier transf orm-inf rared spectro scopy (FT IR) w as used to
record the IR spectra of the ur so lic acid and ge t the IR spect ral characteristics o f the ursolic acid. The rela tionship of the wave
peaks of IR spectra and the structur al char acte ristics was analy zed. The a ttribution of the functional g roups in the structural
char acte ristics of ur so lic acid w as basically defined. The peaks in the IR spectr a are clear and distinguishable and are used to as-
sign the functional g roups easily . U sing with mass spect rum toge ther , mo lecule framew ork , position of functional g roups and
structur e of ursolic acid is concluded.
Key words:Sambucus Chinensis L indl . ;ur so lic acid;UV spectra;IR spectr a;structural char acte ristics
76 河南师范大学学报(自然科学版)　　　　　　　　　　　　　　　　2005 年