全 文 ：第 41 卷第 4 期
2012 年 4 月
应 用 化 工
Applied Chemical Industry
Vol． 41 No． 4
Apr． 2012
收稿日期:2011-12-30 修改稿日期:2012-02-15
作者简介:张宇洁(1979 －) ，女，陕西宝鸡人，西安医学院讲师，硕士，主要从事分析化学、药物分析研究。电话:029 －
86177473，E － mail:llmimi@ tom． com
长春七中异欧前胡素的提取方法研究
张宇洁1，张小莉2，徐玥1
(1．西安医学院 药学院，陕西 西安 710021;2．咸阳市药品检验所，陕西 咸阳 712000)
摘 要:用 80%乙醇回流提取长春七中的异欧前胡素，考察不同溶剂、不同提取方式对异欧前胡素提取率的影响，
用反相高效液相色谱法测定异欧前胡素的含量。结果表明，适宜的实验条件为:用 7 倍量 80%乙醇回流提取 3 次，
每次 1 h。在此条件下，可以获得较高的异欧前胡素提取率。
关键词:异欧前胡素;RP-HPLC法;提取方法
中图分类号:R 917 文献标识码:A 文章编号:1671 － 3206(2012)04 － 0679 － 02
Study on the extraction method of isoimperatorin
from libanotis buethorimensis
ZHANG Yu-jie1，ZHANG Xiao-li2，XU Yue1
(1． Department of Pharmacy，Xi’an Medical College，Xi’an 710021，China;
2． Xianyang City Drug Inspection Office，Xianyang 712000，China)
Abstract:The isoimperatorin was extracted from libanotis buethorimensis by refluxing 80% alcohol． The
effect of solvent，extraction method on extraction rate was studied． The content of isoimperatorin was deter-
mined． The results indicated that the optimal conditions were as follows:80% alcohol 7 times of total
mass，extraction for 3 times，1 h for each time． Under these conditions，the high extraction rate of isoimper-
atorin can be obtained．
Key words:isoimperatorin;RP-HPLC;extraction method
异欧前胡素属于香豆素类化合物，主要存在于
伞形科植物兴安白芷［Angelica dahurica (Fisch． ex)
Hoffm Benth． et Hook． f． ex Franch． et Sav．］的根、芸香
科植物芸香(Ruta graveolens L．)的全草中［1］。长春
七为伞形科岩风属植物长春七(Libanotis buethori-
mensis)的干燥根，是秦巴山区特有的草药，关于长
春七化学成分的研究［2-4］有文献报道，但未见对长春
七中异欧前胡素含量测定的报道。本文对长春七中
异欧前胡素的提取方法和含量测定方法进行了研
究。最终确定的实验方法操作简便快速，测定结果
准确，重现性好，经方法学研究，证明本法可行。
1 实验部分
1． 1 试剂与仪器
异欧前胡素对照品(批号:110715-201019) ，由
中国药品生物制品检定所提供;长春七药材，市购;
纯化水;甲醇，色谱纯;正己烷、乙醚、氯仿、乙酸乙
酯、丙酮、甲醇、乙醇均为分析纯。
P680HPLC Pump;UVD170U 紫 外 检 测 器;
CHROMELEON工作软件。
1． 2 对照品储备液制备
精密称取异欧前胡素对照品约 5 mg，用甲醇溶
解配成浓度为 1 mg /mL的溶液。
1． 3 实验方法
称取长春七细粉 0． 5 g，用 80%乙醇回流提取
2 h。过滤，取滤液 10 μL，用 HPLC 测定异欧前胡素
含量。
1． 4 色谱条件
色谱柱 Kromasil C18(150 mm ×4． 6 mm，5 μm) ，
流动相为甲醇-体积分数为 3% 冰醋酸水溶液
(75 ∶ 25) ，流速为 1 mL /min，检测波长为 306 nm。
在此条件下，测得异欧前胡素对照品及长春七总提
物的色谱图，见图 1。
应用化工 第 41 卷
图 1 异欧前胡素对照(a)、长春七总提物(b)色谱图
Fig． 1 Representive chromatogram
2 结果与讨论
2． 1 提取溶剂的选择
取长春七生药，粉碎成细粉。精密称取约
0． 5 g，分别加入 10 种不同溶剂，超声提取 30 min，
静置过夜，过滤，精密吸取续滤液 10 μL，进样分析
异欧前胡素含量，结果见表 1。结果表明，甲醇和
80%乙醇的提取率较高，综合考虑，选择 80%乙醇
作为提取溶剂。
表 1 提取溶剂选择实验结果
Table 1 Extraction solvent selection test result
提取溶剂 异欧前胡素含量 /%
正己烷 0． 232
乙醚 0． 193
氯仿 0． 435
醋酸乙酯 0． 346
丙酮 0． 397
甲醇 0． 442
乙醇 0． 415
80%乙醇 0． 454
70%乙醇 0． 424
60%乙醇 0． 399
2． 2 提取方式的选择
精密称定长春七药材细粉约 0． 2 g，以 80%乙
醇作溶剂，分别采用不同的提取方式进行提取，
过滤，定容至 10 mL。精密吸取续滤液 10 μL，进样
分析异欧前胡素的含量，结果见表 2。
表 2 提取方法选择实验结果
Table 2 Extraction method of selection test result
提取方法
回流提取 /h
1 2 3
索氏提取 /h
1． 5
超声时间 /min
30 60 90
放置过夜
异欧前胡素含量 /% 0． 437 0． 496 0． 482 0． 443 0． 451 0． 459 0． 464 0． 376
采用超声提取以及用 80%乙醇加热回流提取
2 h 以上时，异欧前胡素的提取率都达到了 0． 45%
以上，而放置过夜的提取率则最低。
2． 3 最佳提取条件的选择
以上的实验结果表明，采用 80%的乙醇回流提
取提取率较高，因此，采用 3 因素 3 水平正交实验法
对提取溶剂的倍量、回流时间、回流次数进行研究
(见表 3)。称取长春七药材粉末约 10 g，进行提取，
并将提取液定容至 250 mL，用 HPLC 法测定溶液中
异欧前胡素含量，计算其提取率(见表 4)。正交实
验结果用 SAS软件进行方差分析，结果见表 5。
表 3 实验因素水平表
Table 3 Factors and levels
水平
A B C
溶剂量 /(v·g － 1) 回流次数 回流时间 /h
1 5 1 0． 5
2 6 2 1
3 7 3 2
由表 4 可知，影响异欧前胡素提取率各因素作
用的大小为 A ＞ C ＞ B。由表 5 可知，A 因素的影响
具有显著性，以 A3B3C2 组合为佳，即用 7 倍量 80%
乙醇加热回流 3 次，每次 1 h 。
表 4 正交实验结果
Table 4 Resuts of orthogonal experiment
序号 A B C 异欧前胡素含量 /%
1 1 1 1 0． 398
2 1 2 2 0． 453
3 1 3 3 0． 412
4 2 1 2 0． 473
5 2 2 3 0． 452
6 2 3 1 0． 461
7 3 1 3 0． 457
8 3 2 1 0． 440
9 3 3 2 0． 504
k1 1． 263 1． 328 1． 299
k1 1． 386 1． 342 1． 430
k1 1． 401 1． 377 1． 321
R 0． 138 0． 049 0． 131
(下转第 684 页)
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应用化工 第 41 卷
料液比 1∶ 4(g /mL)比较适宜。
综合单因素实验结果最优条件为，提取次数为
4，助剂丙酮含量为 20%，固液比 1 ∶ 4(g /mL) ，超声
时间为 50 min，超声温度为 55 ℃，超声功率为
90 W。
2． 5 验证实验
按上述优化条件进行验证实验(n = 6) ，结果叶
绿素平均提取率为 90． 6%，表明所确定的较优方案
合理可行。
3 结论
采用石油醚-丙酮为混合溶剂，超声波辅助提取
蚕沙中叶绿素的工艺研究切实可行，最佳工艺参数
为:提取次数为 4，助剂丙酮含量为 20%，固液比
1∶ 4，超声时间为 50 min，超声温度为 55 ℃，超声功
率为 90 W，在此条件下，叶绿素提取率达到
90． 6%。
参考文献:
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(上接第 680 页)
表 5 方差分析表
Table 5 Variance analysis
误差来源 DF SS 平均方差 F值 Pr ＞ F
A 2 0． 202 2 0． 101 1 12． 27 0． 073 8
B 2 0． 056 0 0． 027 4 3． 38 0． 227 8
C 2 0． 149 5 0． 074 7 9． 10 0． 099 2
3 结论
(1)异欧前胡素属于香豆素类化合物，属于非
极性化合物，按照提取原则，应选用极性较小的溶剂
进行提取。由本实验可知，用甲醇和乙醇提取时，异
欧前胡素的提取率均较高。综合考虑其实用性，最
终选用 80%乙醇为提取溶剂。
(2)采用超声提取以及用 80%乙醇加热回流提
取 2 h 以上时，异欧前胡素的提取率都达到了
0． 45%以上，考虑到操作的简便性及实用性，含量测
定中可选择超声法，但在工艺研究中则选择回流方
式。
参考文献:
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