全 文 ：分光光度法测定维吾尔药核桃分心木中总皂苷的含量
韩艳春1＊ , 阿布都热合曼·合力力2 , 阿依吐伦·斯马义1＊＊
(1新疆医科大学药学院 , 2新疆维吾尔自治区维吾尔医院 , 新疆　乌鲁木齐　830000)
摘要:目的　研究维吾尔药核桃分心木总皂苷的含量测定方法。方法　用 95%乙醇提取 , 水饱和正丁醇萃
取的方法提取纯化核桃分心木中总皂苷。高氯酸显色 , 紫外分光光度法测定核桃分心木中总皂苷的含量。结果
　以人参皂苷 Rb1为标准品作标准曲线 , A =0.059 3C+0.057 6 , r =0.999 7 , 样品检测量在 0.208 6 ～ 0.327 8
mg的范围内与吸光度线性关系良好 ,回收率为 89.11%,测得核桃分心木总皂苷的含量为 4.187%。结论　此测
定方法简便 、快速 、灵敏 、准确 , 可作为维吾尔药核桃分心木中总皂苷含量测定方法的参考依据。
关键词:核桃分心木;总皂苷;分光光度法
中图分类号:R27.11　　文献标识码:A　　文章编号:1009-5551(2009)03-0286-02
Spectrophotometric determination of total saponins in Uygur
medicine of diaphragma juglandis fructus
HAN Yan-chun , Abdurahman·Holly , Aytulun·Simayil
(Pharmacy College , X inj iang Medical Univ ersity , Urumqi 830011 , China)
Abstract:Objective　To establish a method fo r de termining the content o f total saponins in Uygur herbal
medicine o f diaphragma juglandis f ructus.Methods　To tal saponins w as ex tracted by 95%e thanol and pu-
rif ied by w ater-saturating n-butano l.The method of pe rchloric acid spectrophotometry w as used to deter-
mine to tal saponins.Results　Ginsenoside Rb1 w as taken as the standard to make the standard curve:A =
0.059 3 C+0.057 6 , r =0.999 7 , the linear range w as 0.208 6 ～ 0.327 8 mg .The average recovery rate
w as 89.11%.The contents of to tal saponins in diaphragma jug landis fructus w as 4.187%.Conclusion　
These me thods are simple , accurate and suitable for the quality cont ro l of the total saponins in diaphragma
jug landis f ructus.
Key words:diaphragma juglandis f ructus;to tal saponins;spect ropho tometry ;assay
　　维吾尔药核桃分心木(diaphragma jug landis
f ructus)是胡桃科核桃属植物核桃的果核内木质隔
膜 ,体轻 、质脆 、易折断[ 1] 。分心木味苦 、涩 ,性平;归
脾 、肾经。维吾尔医用于治疗肾虚遗精疗效显
著[ 2-4] 。目前国内外核桃属植物[ 5] 及核桃楸各药用
部位的研究较多[ 6] ,但对于分心木的研究较少 。对
分心木的药用价值没有充分地认识 ,导致该药用资
源的严重浪费。本文主要针对核桃分心木中总皂苷
的含量进行初步测定 ,以期指导皂苷类成分的进一
步研究。
1　主要仪器与试药
核桃分心木采自新疆和田地区 ,经新疆医科大学
药学院天然药物化学教研室帕丽达·阿布利孜教授
鉴定为胡桃科核桃属植物核桃的果核内木质隔膜。
UV-2550紫外光谱仪(日本岛津), EYELA SB-
1000型旋转蒸发仪(上海爱朗仪器有限公司),
AB104-N型多功能电子天平(To ledo Inst r.Shang-
hai L td.),SK2510HP 超声清洗仪(上海科导超声
清洗仪有限公司), DHG-9053A 型电热恒温鼓风干
燥箱(上海精宏实验设备有限公司)等 。正丁醇 ,
95%乙醇 ,甲醇(天津市富宇精细化工有限公司 ,分
析纯),高氯酸 ,浓硫酸(北京北细精细化学品有限责
任公司 ,分析纯),人参皂苷 Rb1标准品(中国药品
生物制品检定所提供 ,批号 110704-200420)等。
2　实验方法与结果
2.1　样品溶液的制备[ 7] 　精密称取 5.0 g 药材粉
286 新疆医科大学学报　JOURNAL OF XINJIANG MEDICAL UNIVERSITY　2010 Mar., 33(3)
＊
＊＊
作者简介:韩艳春(1983-),女 ,在读硕士 ,研究方向:新疆地方药用植物的研究。
通讯作者:阿依吐伦·斯马义 ,女(乌孜别克族),教授 ,硕士生导师 ,研究方向:药物分析和天然药物化学, E-mail:aytulun ss@126.com。
末 ,置索氏提取器内 ,加 95%乙醇 50 ml在 80℃回
流提取至无色 ,溶液回收 95%乙醇至干 ,加蒸馏水
10 ml超声溶解 ,用等量的水饱和正丁醇萃取 4次 ,
合并水饱和正丁醇部分萃取液 ,正丁醇饱和水洗涤 ,
水浴蒸干 ,残渣用甲醇溶液定容至 50 m l ,制得样品
溶液 。
2.2　标准品溶液的制备　精密称定人参皂苷 Rb1
标准品14.9 mg ,置 100 ml容量瓶中 ,加入 10 ml甲
醇使溶解 ,用甲醇稀释至刻度 ,摇匀 。配制浓度为
0.149 mg/ml的人参皂苷 Rb1标准品溶液 。
2.3　吸收波长的确定　取人参皂苷 Rb1标准品溶
液 、样品溶液各 1 ml , 分别置具塞试管中 ,挥去溶
剂 ,精密加入 10 ml 高氯酸 , 旋涡混匀 1 min , 于
70℃水浴加热反应 15 min ,立即于冰水中终止反
应。以高氯酸为空白对照 ,在分光光度计上 200 ～
700 nm 进行扫描 ,结果样品溶液和标准品溶液均在
250 nm有最大吸收 ,故确定吸收波长为 250 nm 。
2.4　标准曲线的制备　精密吸取人参皂苷 Rb1标
准品溶液 1.4 、1.6 、1.8 、2.0 、2.2 m l于具塞试管中 ,
其余步骤按“2.3”项下操作 ,于 250 nm 处测定吸光
度 ,不同体积标准品溶液的吸光度值见表 1 。回归
方程为 A =0.059 3 C+0.057 6 , r =0.999 7 ,样品
检测量在 0.208 6 ～ 0.327 8 mg 的范围内与吸光度
线性关系良好 ,其标准曲线见图 1。
表 1　250 nm 下不同体积标准品溶液的吸光度值
样品编号 1 2 3 4 5
标准品体积(ml) 1.4 1.6 1.8 2.0 2.2
吸光度值(A) 0.179 0.233 0.293 0.354 0.415
检测浓度(μg/ml) 20.86 23.84 26.82 29.80 32.78
图 1　标准曲线图
2.5　精密度试验精密吸取人参皂苷 Rb1标准品溶
液 1.2 ml ,按“2.3”项下操作 6次 ,测定吸光度。相
对标准偏差(RSD)=0.30%,表明本法精密度良好。
2.6　重复性试验　取同批分心木 6份 ,按“ 2.1”项
下样品溶液的制备方法和“2.3”项下的显色方法测
定吸光度 ,RSD为 0.41%。
2.7　显色稳定性试验　精密吸取人参皂苷 Rb1标
准品溶液 1.0 ml ,按“2.3”项下显色方法显色后 ,分
别在 0 、0.5 、1 、1.5 、2 h 测定吸光度 ,结果表明在 2 h
内 ,测定结果较稳定 , RSD为 0.44%。
2.8　样品含量测定　精密吸取样品液 0.06 m l ,按
“2.3” 项下的显色方法后 ,在 250 nm 下测定其吸光
度 ,以人参皂苷 Rb1为标准品计算得分心木总皂苷
的含量为 4.187%,含量均以干燥品计。
2.9　加样回收率实验　精密称取分心木粉末 12.5
mg 平行 6份 ,并分别精密加入人参皂苷 Rb1溶液
0.3 m l ,按“2.1”项下样品溶液的制备方法和“2.3”
项下的显色方法测定吸光度 ,计算回收率 。平均回
收率为 89.11%, RSD 为 7.68%,结果见表 2 。
表 2　回收率实验
编号 样品量(μg)
加入量
(μg)
测得量
(μg)
回收率
(%)
平均回收
率(%)
RSD
(%)
1 209.0 44.7 251.0 93.96
2 209.0 44.7 250.0 91.72
3 209.0 44.7 248.0 87.25
89.11 7.68
4 209.0 44.7 245.0 80.54
5 209.0 44.7 246.0 82.77
6 209.0 44.7 253.0 98.43
3　结论
用紫外分光光度法测定总皂苷含量的方法常利
用皂苷与芳香醛-硫酸或高氯酸的显色反应进行比色
定量。目前较常用的方法有 3种 ,即高氯酸法[ 7] 、香
草酸-冰醋酸-高氯酸法[ 8] 、茴香醛-浓硫酸法。本实验
中采用高氯酸法 ,最大波长明显 ,反应相对稳定 。
本文所采用高氯酸显色检测核桃分心木总皂苷
含量的方法 ,速度快 、操作方便 、结果准确 、灵敏度
高 , 且重现性好 ,可为维吾尔药核桃分心木药材及
其制剂的质量控制提供一定的参考依据。
参考文献:
[ 1] 　茹克娅·沙德克.维吾尔医常用药材学(维吾尔文):下册[ M ] .
乌鲁木齐:新疆科技卫生出版社 , 1993:323.
[ 2] 　吐尔洪·吾买尔.维吾尔医药植物学(维吾尔文)[ M ] .乌鲁木
齐:新疆人民出版社 , 2004:122.
[ 3] 　阿巴拜克热·热合曼.维吾尔医常用生药(维吾尔文)[ M] .乌
鲁木齐:新疆人民卫生出版社 , 2004:772.
[ 4] 　穆塔力甫·艾力 ,阿吉· 艾米提.维吾尔医常用草药(维吾尔
文)[ M] .乌鲁木齐:新疆人民卫生出版社 , 2005:695.
[ 5] 　李福双 ,申　健 ,谭桂山.胡桃属植物化学成分及药理作用研究
进展[ J] .中成药 , 2007 , 29(10):1490-1495.
[ 6] 　于海玲.核桃楸的研究进展[ J] .延边大学医学学报 , 2005 , 28
(2):154-156.
[ 7] 　周桂芬 ,吕圭源.麦冬茎叶的总皂苷含量测定及采收时间[ J] .
江西中医药 , 2008 , 39(302):46-47.
[ 8] 　董　平 ,薛长湖 ,盛文静,等.海参中总皂苷含量测定方法的研
究[ J] .中国海洋药物杂志 , 2008 , 27(1):28-32.
[ 收稿日期:2009-11-10]
287新疆医科大学学报　JOURNAL OF XINJIANG MEDICAL UNIVERSITY　2010 Mar., 33(3)