全 文 :doi: 10. 3969 / j. issn. 1002 -154X. 2011. 12. 009
菊花脑花 70%乙醇
提取物的抗氧化活性评价
章莺鸿
( 南京工程高等职业学校,江苏 南京 211135)
摘 要 为了提高菊花脑的综合利用价值,测定了菊花脑花 70%乙醇提取物的总酚含量,同时以总还原能力、清除
DPPH·为指标,对其抗氧化作用进行研究。结果表明,菊花脑花 70%乙醇提取物中总酚含量为 3. 2% ( 以没食子酸
计) ,具有一定的抗氧化能力,但其抗氧化能力比芦丁弱。在样品浓度 0. 02 到 0. 2 g /L范围内,随着浓度的升高,其总
还原力、清除 DPPH·能力逐渐增大。
关键词 菊花脑 总还原能力 DPPH自由基清除能力
收稿日期: 2011 - 11 - 08
作者简介:章莺鸿( 1978 ~ ) ,女,本科,研究方向:天然有机化学,E - mail: zhangyinghong5862@ 163. com
Study on Antioxidant Activities of 70% Ethanol Extract
from Chrysanthemum Nankingense Flower
Zhang Yinghong
( Nanjing Engineering Vocational College,Jiangsu Nanjing 211135)
Abstract Folin - Ciocalteu method was used to determine the content of total polyphenols from 60% ethanol ex-
tract from Chrysanthemum nankingense flower. And the antioxidant activities of the extract were investigated using to-
tal reduction ability,DPPH· scavenging activity. The results showed that the content of total polyphenols from the
extract is 3. 2% which exhibited antioxidant activities. With the increase of the concentration from 0. 02 to 0. 2 gL -1
antioxidant capacity increased.
Keywords chrysanthemum nankingense DPPH· scavenging activity reduction ability
菊花脑 ( Chrysanthemum nankingense ) 为草本菊
科菊属植物,是江苏地区广泛食用的野生蔬菜[1,2],
其茎叶中含有大量的挥发油及黄酮类化合物[3,4],具
有较好的抗菌活性[5]。与其同科同属的菊花被广泛
用于医疗和生活等方面,其主要化学成分为绿原酸、
挥发油类及黄酮类等[6 ~ 8],具有较好的抗氧化活
性[9 ~ 11],国内外均有报道。而菊花脑花朵提取物的
抗氧化活性尚未见报道。本文对南京本地菊花脑的
花朵进行提取,并测定提取物的总酚含量,评估其抗
氧化活性,为其进一步开发应用提供理论依据。
1 实验部分
1. 1 材料与试剂
新鲜菊花脑花:采集于南京市郊区。
试剂: DPPH ( 1,1 - 二 苯 - 2 - 苦 肼 基,
C18H12N5O6) ( St. Louis,MO,USA) ;无水乙醇、铁
氰化钾、三氯乙酸、三氯化铁等试剂均为国产分析纯。
1. 2 仪器
UV -751 - GD紫外 /可见分光光度计( 上海分析
仪器总厂) ; RE - 52C 旋转蒸发器( 上海亚荣生化仪
器厂) ; SHB - III 循环水式多用真空泵( 郑州合众仪
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第 25 卷第 12 期
2011 年 12 月
化工时刊
Chemical Industry Times
Vol.25,No.12
Dev.12.2011
器有限集团) ;冷冻干燥机( 郑州杜甫仪器厂) 。
1. 3 菊花脑花提取物的制备
取新鲜菊花脑花朵 100 g,加入 1 000 mL的 70%
乙醇,在 85℃下水浴加热回流 2 h,过滤。滤液经旋
转蒸发浓缩、冷冻干燥得到 1. 028 6g 干燥样品置于
干燥器内备用。
1. 4 菊花脑花总酚含量的测定[12]
1. 4. 1 没食子酸标准曲线的绘制
精确配制没食子酸标准溶液 0. 02、0. 03、0. 04、
0. 05、0. 06 g /L。分别以上不同浓度的没食子酸标准
溶液 2 mL,加入 0. 5 mL 现配的福林 -酚试剂,避光
反应 5 min后,加入 2 mL 7. 5%的碳酸钠溶液,放置 2
min,摇匀后于暗处放置 30 min,在 725 nm 波长处测
定其吸光度,实验平行 3 次取平均值,绘制标准曲线,
求回归方程。
1. 4. 2 总酚含量测定
取 0. 1 g 菊花脑花提取物,用蒸馏水定容至 100
mL,用移液枪精密移取 2 mL 样品溶液,按照上述方
法加入福林 -酚试剂和碳酸钠溶液,用蒸馏水定容至
10 mL,混合均匀后置于暗处反应 30 min,过 0. 45 μm
水系滤膜后,用可见分光光度计在波长 725 nm处测
定吸光度,根据标准曲线计算检测结果,计算样品中
总酚含量( 以没食子酸计) 。
1. 5 总还原能力测定[13]
取 1 mL样品加入 2. 5 mL磷酸缓冲液( 0. 2 mol /
L,pH 6. 6) ,再加入 l%的铁氰化钾[K3Fe( CN) 6]
溶液 2. 5 mL,混匀,在 50℃水浴下保温 20 min,再加
入 2. 5 mL 10%三氯乙酸( TCA) 溶液,2 000 r /min 下
离心 10 min,取 2. 5 mL 上层清液加入 2. 5 mL 的蒸
馏水和 0. 5 mL的 0. 1%三氯化铁,在 700 nm 处测溶
液吸光度。吸光度越高,说明的总还原能力越强。
1. 6 DPPH·清除能力测定[14]
准确称取 0. 001、0. 002、0. 004、0. 006、0. 008、
0. 01 g芦丁及菊花脑花提取物样品,用无水乙醇定容
至 50 mL,得到溶液质量浓度分别为 0. 02、0. 04、0.
08、0. 12、0. 16、0. 20 g /L。2 mL 样品溶液与 2 mL 的
DPPH溶液 ( 0. 002 mol /L) 混和于具塞试管中,用无
水乙醇定容至 10 mL。室温下反应 30 min后,以无水
乙醇作参比溶液,测定混合溶液和空白样品的 DPPH
溶液在 517 nm 处的吸光度,分别用 Ablank和 Asample表
示,实验平行 3 次取平均值。用下式计算样品对 DP-
PH 自由基的清除率: I / ( % ) 100 × ( Ablank -
Asample ) /Ablank。
2 结果与讨论
2. 1 标准曲线的绘制
根据上述方法,以标准溶液的质量浓度为横坐
标,吸光度纵坐标,绘制标准曲线,,得到相应回归方
程 Y 0. 767 14X + 0. 000 428 571( R2 0. 999 26) ,
标准曲线见图 1。根据标准曲线,计算菊花脑花提取
物中总酚含量( 以没食子酸计) 为 3. 2%。
图 1 没食子标准曲线图
Fig. 1 Standard curve of gallic acids
2. 2 菊花脑花提取物总还原能力
还原能力是评价物质抗氧化能力的重要指
标[15],还原能力较强的物质,可以提供更多的电子使
自由基形成稳定的物质[16]。图 2 为菊花脑花提取物
与芦丁在不同浓度下的总还原能力对比。由图 2 可
知,随着浓度的升高,提取物总还原能力逐渐增大,但
低于芦丁的总还原能力,差异显著。
图 2 菊花脑花提取物与芦丁总还原能力对比
Fig. 2 Reducing power of the fractions from
Chrysanthemum nankingense flower
2. 3 菊花脑花 DPPH·清除能力
DPPH·清除实验灵敏度高、简便实用、重现性
好,是一种能够较好地评价自由基清除活性的方法。
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化工时刊 2011. Vol. 25,No.12 工艺·试验《Technology &Experiment》
图 3 为不同浓度的菊花脑花提取物及芦丁对 DPPH
·的清除率曲线,由图可知,随着样品浓度的增加,菊
花脑花提取物对 DPPH·的清除能力增加,但明显低
于芦丁。菊花脑花提取物与芦丁的 IC50 值分别为
0. 13 g /L 和 0. 01 g /L。菊花脑花提取物具有一定的
清除自由基的能力,可进一步开发成天然抗氧化剂。
图 3 菊花脑花提取物与芦丁在
不同浓度的自由基清除率
Fig. 3 DPPH· scavenging activities of the
fractions from Chrysanthemum nankingense flower
3 结 论
DPPH法和总还原能力法是考察体外抗氧化能
力的重要方法,准确、灵敏、操作简便,为国内外广泛
应用。同时总酚含量也部分反映了样品的抗氧化活
性。通过以上测试表明:菊花脑花提取物具有一定的
抗氧化活性,但其抗氧化能力比芦丁弱,可以开发为
天然抗氧化物。
参考文献
[1] 江苏新医学院. 中药大辞典( 下册) [M].上海: 上海出
版社,1986,( 6) : 2 144 ~ 2 145.
[2] 汤庚国,李湘萍. 江苏野菜资源的利用与开发[J]. 植
物资源与环境,1995,4( 3) : 35.
[3] 官艳丽,邹多生等. 安徽产菊花脑挥发油成分分析[J].
中成药,2007,29( 6) : 914 ~ 916.
[4] 翁德宝,汪海峰,翁佳颖. 菊花脑茎叶中黄酮类化合物
的测定[J]. 药物生物技术,2001 ,8 ( 3) : 167 ~ 169.
[5] 纪丽莲. 菊花脑茎叶挥发油的化学成分与抗霉菌活性
的研究[J]. 2005,26( 10) : 91 ~ 94.
[6] 张广强,刘伟,常广福.不同产地菊花的挥发油含量测定
GC分析[J].中药材,1990,13 ( 2) : 31 ~ 33.
[7] 王民海.安徽产三种菊花总黄酮量的比色测定[J]. 基
层中药杂志,1997,11 ( 2) : 37 ~ 38.
[8] 蒲婧哲.杭菊中总黄酮花茎动态积累研究[J]. 安徽医
药,2008,12 ( 9) : 788 ~ 789.
[9] 孔琪,吴春. 菊花黄酮的提取及抗氧化活性研究[J].中
草药,2004,35( 9) : 1 001 ~ 1 002.
[10]严亦慈,娄小娥. 野菊花水提液抗氧化作用的实验研究
[J].中国现代应用药学杂志 1999,16( 6) : 16 ~ 18.
[11]申海进,郭巧生,房海灵. 野菊花 60 %乙醇提取物的酚
类成分组成及其清除自由基和防霉变能力分析[J]. 植
物资源与环境学报,2010,19 ( 1) : 20 ~ 25.
[12] Singleton V L,Orthofer R,&Lamuela - Raventós R S. A-
nalysis of total phenols and other oxidation substrates and
antioxidants by means of Folin - Ciocalteau Reagent[J].
Methods in Enzymology,1999,299: 152 ~ 178.
[13] Yen G C & Duh P D. Antioxidative properties of methanol-
ic extracts from Peanut Hulls[J]. Journal of the American
Oil Chemistry Society,1993,70: 383 ~ 386.
[14] Shimada K,Fujikawa K,Yahara K & Nakamura T. An-
tioxidative properties of xanthan on the anti - oxidation of
soybean oil in cyclodextrin emulsion[J]. Journal of Agri-
cultural and Food Chemistry,1992,40: 945 ~ 948.
[15] Meir S,Kanner J,Akiri B & Philosoph - Hadas S. Deter-
mination and involvement of aqueous reducing compounds
in oxidative defense systems of various senescing leaves
[J]. Journal of Agricultural and Food Chemistry,1995,
43: 1 813 ~ 1 819.
[16] Barros L,Baptista P,Ferreira I C. Effect of lactarius pipe-
ratus fruiting body maturity stage on antioxidant activity
measured by several biochemical assays[J]. Food and
Chemical Toxicology,2007,45:
檸檸檸檸檸檸檸檸檸檸檸檸檸檸檸檸檸檸檸檸檸檸檸檸檸檸檸檸檸檸檸檸檸檸檸檸檸檸檸檸檸檸檸檸檸檸檸
1 731 ~ 1 737.
化工信息
扬子石化耐热聚乙烯管材材料填补国内空白
目前,扬子石化率先在国内成功开发出耐热聚乙烯( PE - RT) 管材料。据悉,耐热聚乙烯( PE - RT) 耐热性与无规共聚聚丙
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该产品有望替代进口。扬子石化组成产品应用指导专家,深入加工厂家指导他们正确使用。
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章莺鸿 菊花脑花 70%乙醇提取物的抗氧化活性评价 2011. Vol. 25,No.12 化工时刊