全 文 ：澎女了
近年来 , 由于松 口蘑的产量呈现不断减
少的趋势 , 因此提供人工培养的方法生产松
口蘑是人们所强烈期望的 。 然而 , 自然界中的
松 口蘑 , 其子实体的形成过程相当复杂 , 所以
用人工培养的方法生产松 口蘑亦颇为困难 。
发明者就人工培养生产松 口蘑的方法 ,
进行了长年的研究发现 , 微量亚硝酸离子对
松口蘑的菌丝向粒状菌丝体变化具有极其显
著的作用 , 如将这种呈粒状的菌丝体接种在
松口蘑的专用培养基中 , 在 12 ℃ 以下的低温
中进行静置培养 , 则能形成子实体状的菌丝
体 , 这种菌丝体无论在外形还是在色泽 、 风
味上均酷似松 口蘑的子实体 , 从而为用人工
培养的方法生产松 口蘑开辟了一条途径 。 以
下介绍本发明的详细方法 。
首先 , 将松 口蘑的菌丝以无菌操作接种
于松 口蘑的专用培养基 中 , 该培养基通称为
洪田氏培养基 , 组成如下 : 葡萄糖 20 克 、 乾
燥啤酒酵母 5 克 (也可用部分细胞膜破碎的
面包酵母的冷冻于燥物代替 ) , 琼脂 20 克 ,
溶于 1 0 0 0毫升自来水中 , 校正 p H 至 5 . 0 ~
5
.
2
。 将接种过菌丝的培养基 , 以最适 于 松
日蘑菌丝生长的温度 ( 17 一 24 ℃ ) 进 行培
养 , 1 个月以后 , 由于菌丝增殖而形成由众
多菌丝组成的菌丛 (c ol o n y) ,这种菌丛即可
作为菌种使用 。 以无菌操作将菌种接种在从
洪田氏培养基中除去琼脂 , 另加微量亚硝酸
离子的液体培养基 中 (所使用的亚硝酸离子
是 H N O : 以及象K N O Z 、 N a N O Z之 类 的 亚
硝酸盐的酸性溶液 , p H为 5 . 。一 5 . 2 , 最佳
添加量为 5 ~ s o o p p m ) , 在 1 7一 2 4℃ 下无
菌振荡培养或通气培养 2 周左右 , 即可获得
2 m m 左右呈颗粒状的菌丝体 , 这是形成松
口蘑子实体的原基 。 接着将上述颗粒状的菌
丝体移植到不加琼脂的洪田氏液 体 培 养 基
中 , 在该培养基 中最好再加人 0 . 1 ~ 1 . 0 %的
微量尿素 , 然后在 5 ~ 8 ℃下静置培养 1 一
3 个月 。 不加尿素的上述液体培养基经 3 个
月培养后 , 可获得直径为 30 m m 左右的白色 、
微扁平的呈子实体状的菌丝体 。 使用添加过
尿素的培养基 , 只要经 1 个月的培养就能获
得直径为 7 c m左右 、 菌盖上部呈 黄 色 、 鳞
片状的子实体样的菌丝体 。 不管培养基中是
否添加尿素 , 所获得的子实体状菌丝体都具
有松口蘑特有的芳香 , 特别是添加过尿素的
培养基所获得的子实体状的菌丝体 , 如在室
内放置 7 天左右 , 则菌盖的上部呈褐色 , 口
味非常鲜美 。 实例 : 在灭菌过的具有棉塞的
50 0 毫 升三角烧瓶中 , 装入 1 0 毫升下列组
成的液体培养基 : 葡萄糖 20 克 ; 干燥的啤酒
酵母 5 克 ; K N O 2 1 0 0 p p m ; 自来水 1 0 0 0 毫
升 ; 校正 p H 至 5 . 0 。
培养基经灭菌 、 冷却后 , 在无菌箱中以
无菌操作接人在试管内予先以20 ℃培养 30 天
的松口蘑的菌丝体 , 在 20 ℃下 , 以 振 幅 为
75 m m
、
12 5次 /分的频率振荡培养 14 天 , 即
可获得 2 m m 左右呈颗粒状的菌丝体 。
将 1 一 2 粒上述颗粒状的菌丝体 以无菌
操作接人 1 0 毫升下列组成的液 体 培 养 基
中 : 葡萄糖 20 克 ; 干燥的 啤 酒 酵 母 5 克 ;
1 %的尿素溶液 (P H 5 . 0) 5 毫升 ; 自来水
1 0 0 0毫升 ; 校正 p H至 5 . 0 。
在 5 ~ 8 ℃下静置培养 30 天 , 培养后的
第 14 天开始形成白色伞状的菌丝体 , 30 夭后
即可获得菌盖直径达 7c m , 其上部呈黄色 、
鳞片状 , 外形与松 口蘑子实体一样的菌丝体
2 0克 , 这种菌丝体具有松 口蘑特有的芳香 。
陶名勋编译 自 《 特许 公报 》 昭 盯一 4 89 2 4 , 文漪校