全 文 ：— 74 — 现代中药研究与实践2011年第25卷第2期Chin Med J Res Prac,2011 Mar.,Vol.25 No.2
况，考虑到制剂中黄芩苷的含量比较大，选择含量较
低的绿原酸的最大吸收波长 327 nm 作为检测波长，
以提高绿原酸的灵敏度，且黄芩苷在此波长下也能准
确的定量。
3.2 在供试品制备中，对提取超声时间（10，15，
20 min）进行了考察，结果无明显差别，故确定用
50% 甲醇，超声处理 15 min 提取。
3.3 流动相的选择，分别选用甲醇 -0.2% 磷酸 [3]、
乙腈 -0.3% 甲酸 [4]、乙腈 -0.1%[5] 磷酸分别按不同洗
脱程序梯度洗脱，结果本方法杂质峰与有效成分分离
效果较好。
3.4 本实验测定了 2 个不同生产厂家的小儿退热口
服液，结果显示，不同厂家生产的样品中绿原酸和黄
芩苷含量相差较大。
参考文献
[1] 国 家 药 典 委 员 会 . 卫 生 部 药 品 标 准 • 中 药 成 方 制 剂 [S] 第 六 册
WS3-B-1089-92.
[3] 刘艳清，汪洪武，易康柱 . HPLC 同时测定复方鱼腥草合剂中绿原酸与
黄芩苷和含量 [J]. 中成药，2008，6（30）：附 14-15.
[4] 杜英峰 , 张兰桐 . 多波长 RP-HPLC 法测定双黄连口服液中黄芩苷、绿
原酸和连翘苷 [J]. 中成药，2009，31(9):1368-1371.
[5] 刘兴超，宋金玉，徐海燕，等 . HPLC 同时测定茵山莲颗粒中野黄芩苷
和栀子苷含量 [J]. 中成药，2008，2（30）：210-213.
豨莶风湿片，为国家卫生部药品标准收载品种，
处方由豨莶草、桑寄生、桑枝、威灵仙、防己、槐
HPLC法测定豨莶风湿片中粉防己碱及防己诺林碱的含量
刘珊珊 1，殷善霞 2，张 峰 2
（1. 山东大学附属省立医院，山东 济南 250021 ； 2. 山东中医药大学，山东 济南 250355）
摘要：目的 建立豨莶风湿片中粉防己碱及防己诺林碱的 HPLC 测定方法。 方法 色谱柱为 C18 柱（4.6
mm×150 mm，5 μm）；流动相为乙腈 - 水 - 三乙胺（70 : 30 : 0.01），流速为 1.0 mL/min，检测波长为 280
nm。 结果 粉防己碱及防己诺林碱的进样量分别在 0.344 µg~1.72 µg（r=0.999 9）、0.153 µg~0.765 µg（r=0.999
9）范围内呈良好线性关系 ；二者的平均加样回收率分别为 99.20%、99.26%。结论 本方法简便可行 , 结
果可靠 , 可用于豨莶风湿片的质量控制。
关键词：HPLC 法 ；豨莶风湿片 ；粉防己碱 ；防己诺林碱
中图分类号：R297.2 文献标识码：A 文章编号：1673-6427(2011)02-0074-03
Determination of Tetrandrine and Fangchinoline in Xixianfengshi Tablet by HPLC
LIU Shan-shan1, YIN Shan-xia2, ZHANG Feng2
（1. The Provincial Affiliated Hospital to Shandong University, Jinan 250021, China; 2 . Shandong
University of Traditional Chinese Medicine, Jinan 250355, China）
Abstract Objective To establish an HPLC method for the determination of tetrandrine and fangchinoline
in Xixianfengshi tablets. Methods The method was performed on C18(4.6 mm×150 mm, 5 μm) column with
acetonitrile-water-triethylamin(70 : 30 : 0.1) as mobile phase. Flow rate was 1.0 mL/min, and the wavelength was
280 nm. Results The linear ranges of tetrandrine and fangchinoline were 0.344 µg~1.72 µg（r=0.999 9），
0.153 µg~0.765 µg（r=0.999 9）, respectively. The average recovery were 99.20% and 99.26%, respectively ，
Conclusion This method is proved to be simple, accurate and can be used for quality control of Xixianfengshi
tablets.
Key words：HPLC；Xixianfengshi tablets；fangchinoline；tetrandrine
收稿日期：2010-06-24
枝等 6 味中药组成，功能祛风除湿，通络止痛。用
于四肢麻痹，腰膝无力，骨节疼痛及风湿性关节炎。
防己为方中主要药物，其主要活性成分为粉防己碱、
防己诺林碱等生物碱类成分，在中国药典 2010 年版
（一部）防己药材项下，采用高效液相色谱法对粉防
DOI:10.13728/j.1673-6427.2011.02.029
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己碱和防己诺林碱的含量进行了测定，而豨莶
风湿片原标准中没有含量测定项。为了更好的控制制
剂质量，保证疗效，笔者建立了 HPLC 法测定豨莶
风湿片中粉防己碱和防己诺林碱的方法，作为质量控
制的参考指标。
1 仪器与试药
岛津 LC-10A 型高效液相色谱仪，SPD-M10VP
型紫外检测器，Classvp 色谱工作站 ；KQ-250E 型超
声波清洗器 ( 昆山市超声仪器有限公司 ) ；AB265-
SDU 电子天平（Mettler-Toledo 公司）。粉防己碱（中
国药品生物制品检定所，批号 110711-200808，供含
量测定用）、 防己诺林碱（中国药品生物制品检定所，
批号 0793-200705，供含量测定用）；豨莶风湿片样
品及缺防己的阴性样品均由山东省立医院提供 ；水为
重蒸馏水 ；乙腈、三乙胺为色谱纯。
2 方法与结果
2.1 色谱条件 色谱柱 ：岛津 Shim-Pak vp-ods C18 (5
μm，4.6 mm×150 mm)； 流动相：乙腈 - 水 - 三乙胺（70
: 30 : 0.05）；流速 1.0 mL/min ；检测波长 280 nm ；柱
温 30 ℃ ；进样量 10 μL ；理论板数均不低于 2 000。
对照品和供试品溶液的图谱见图 1、图 2。

2.2 对照品溶液的制备 精密称取粉防己碱 17.20
mg、防己诺林碱 7.65 mg，置 10 mL 量瓶中，加适量
甲醇溶解并稀释至刻度，摇匀，作为储备液。精密
吸取储备液 1.0 mL 置 25 mL 量瓶中，加甲醇稀释至
刻度，摇匀，作为对照品溶液（含粉防己碱 68.8 μg/
mL、防己诺林碱 30.6 μg/mL）。
2.3 供试品溶液的制备 取样品 10 片，除去包衣，
精密称定，研细，取约 1 g，精密称定，置具塞锥形
瓶中，精密加入 2％盐酸甲醇溶液 50 mL，称定重量，
加热回流 30 min，放冷，再称定重量，用 2％盐酸甲
醇溶液补足减失的重量，摇匀，滤过。精密量取续滤
液 10 mL，加浓氨水调 pH 8~9，水浴蒸干，残渣加
流动相使溶解，并转移至 10 mL 量瓶中，加流动相
至刻度，摇匀，以微孔滤膜（0.45 μm）滤过，即得。
2.4 线性关系考察 精密吸取粉防己碱、防己诺林
碱对照品储备液 1.0、2.0、3.0、4.0、5.0 mL，置 50
mL 量瓶中，加甲醇稀释至刻度，摇匀，在上述色谱
条件下进样 10 μL，依次注入高效液相色谱仪，测定
峰面积。以进样量对峰面积进行线性回归。得粉防己
碱的回归方程为 Y = 512 964.36 X-1 214.38，r=0.999
9，在 0.344~1.72 µg 范围内线性关系良好 ；防己诺林
碱回归方程为 Y = 421 754.36 X +1 174.52，r=0.999 9，
在 0.153~0.765 µg 范围内线性关系良好。
2.5 精密度试验 精密吸取对照品溶液 ( 粉防己碱
68.8 μg/mL、防己诺林碱 30.6 μg/mL)，连续进样 5 次，
每次 10 µL，测得 5 次峰面积值，粉防己碱和防己诺
林碱 RSD 分别为 0.27% 和 0.32%，表明仪器精密度
良好。
2.6 稳定性试验 取样品（批号 20090901），按照
“2.3”项下方法制备供试品溶液。取供试品溶液分
别在 0、4、8、12、24 h 测定，粉防己碱和防己诺林
碱 RSD 分别为 0.46% 和 0.55%。表明供试样品在 24
h 内稳定。
2.7 重现性试验 取样品（批号 20090901），精密称
取 5 份，按照“2.3”项下方法制备供试品溶液，测
定峰面积，计算含量，粉防己碱和防己诺林碱的平均
含量为 1.932 1 mg/ 片和 1.284 2 mg/ 片，RSD 分别为
0.39% 和 0.50%。表明该方法重现性很好。
2.8 空白试验 按照处方比例，不加防己药材，制
备阴性样品，按照供试品溶液的制备方法制备阴性样
品溶液，结果在粉防己碱、防己诺林碱峰位处均无吸
收。结果见图 3。

图1  对照品HPLC图谱（1防己诺林碱   2粉防己碱） 
Fig.1 HPLC chromatogram of reference
图2  供试品HPLC图谱 （1防己诺林碱   2粉防己碱） 
 Fig.2 HPLC chromatogram of sample
图3  阴性样品HPLC图谱 
Fig.3 HPLC chromatogram of negative sample


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2.9 加样回收试验 取样品 ( 批号 20090901, 粉防己
碱和防己诺林碱的平均含量为 1.932 1mg/ 片和 1.284 2
mg/ 片，每片重 0.50 g），研细，称取 0.5 g，精密称定，
精密加入粉防己碱和防己诺林碱对照品甲醇溶液适
量，挥干甲醇，分别按“2.3” 项下方法制备供试品溶
液，测定，计算回收率，结果见表 1、表 2。


试验结果表明，本品的加样回收率较高，说明
以此方法作为本品的含量测定方法可行。
表1  粉防己碱加样回收率试验结果（n=6）
Tab.1 Results of tetrandrine recovery test(n=6)
样品量g
0.5003
0.5029
0.5071
0.5015
0.5091
0.5038
含量mg
1.9333
1.9433
1.9595
1.9379
1.9673
1.9468
加入量mg
2.06
2.06
2.06
2.06
2.06
2.06
测得量mg
3.9842
4.0115
3.9955
3.9917
3.9838
3.9902
回收率%
99.56023
100.3978
98.83321
99.69921
97.89009
99.19495
平均回收率%
99.20
RSD％
0.86
表2  防己诺林碱加样回收率试验结果（n=6） 
Tab.2 Results of fangchinoline recovery test(n=6)
样品量g
0.5003
0.5029
0.5071
0.5015
0.5091
0.5038
含量mg
1.2850
1.2916
1.3024
1.2881
1.3076
1.2940
加入量mg
1.13
1.13
1.13
1.13
1.13
1.13
测得量mg
2.4129
2.4188
2.4361
2.4109
2.4078
2.4119
回收率%
99.81677
99.74793
100.3243
99.36703
97.36527
98.93275
平均回收率%
99.26
RSD％
1.05
2.10 样品含量测定 取豨莶风湿片样品三批，按照
“2.3” 项下方法制备供试品溶液，分别精密吸取对照
品溶液与供试品溶液各 10 μL，注入液相色谱仪，测
定，即得。结果见表 3。
3 讨论
3.1 流动相的确定 参照文献报道 [1~2] 及药典 [3] 防
己项下含量测定方法试验，结果以文中所述流动相分
离度好，重现性强，在同一色谱条件下可以同时检测
出粉防己碱、防己诺林碱，且可达到基线分离。
3.2 供试品提取方法的确定 参考《中国药典》（2010
年版一部）防己药材项下的供试品制备方法，以文中
所述流动相可以达到无杂质干扰，且提取完全，故确
定以药典方法作为该样品的制备方法。
参考文献
[1] 林能明 . HPLC 测定中肺合剂中防己诺林碱和粉防己碱的含量 [J]. 中国
药学杂志，2008，43(20):1593-1595.
[2] 黄泽春，王益群 . 高效液相色谱法测定防己药材中粉防己碱与防己诺
林碱的含量 [J]. 中南药学，2008，6(5):541-543.
[3] 国家药典委员会 . 中国药典（一部）[S]. 北京 : 中国医药科技出版社，
2010，139.
表3  样品含量测定结果表（mg/片） 
Tab.3 Results of content determination in sample(mg/tablet)
批 号
20090901
20090902
20090903
粉防己碱
1.9321
1.9128
1.9830
防己诺林碱
1.2848
1.2562
1.2093
总含量
3.2169
3.1690
3.1923
痛经灵颗粒质量标准研究
任红兵
（江苏联合职业技术学院＆连云港中医药分院，江苏 连云港 222006）
摘要：目的 研究制定痛经灵颗粒的质量标准。方法 用薄层色谱法定性鉴别赤芍、香附、元胡、桂
枝和红花 ; 用高效液相色谱法测定原儿茶醛的含量。结果 原儿茶醛在 0.169~1.123μg 范围内呈良好的线性
关系 , r=0.999 7, 平均回收率为 99.5%, RSD=0.83%。结论 鉴别方法专属性强 , 定量方法简便、准确、可靠 ,
可用于该制剂的质量控制。
关键词 : 痛经灵颗粒 ; 原儿茶醛 ; 质量标准 ；薄层色谱法 ；反相高效液相色谱法
中图分类号：R926 文献标识码：A 文章编号：1673-6427(2011)02-0076-04
Study on the Quality Standard of Tongjingling Granules
REN Hong-bin
(Lianyungang TCM Branch of Jiangsu Union Technical Institute, Lianyungang 222006, China)
Abstract: Objective To research the quality control standard of Tongjingling Granule. Methods Red
Peony Root，Cyperi Rhizoma ，Corydalis Rhizoma ， Cinnamom Ramulusi and Carthami Flos were identified
收稿日期：2010-04-19
作者简介：任红兵（1976-），讲师，主要从事中药制剂的教学研究工作。