全 文 ：古科技出版社，1987:402．
［4］ 杨秀娟，吴莉宇，徐 志，等． 芒果核仁粗提物对几种植
物病原菌的抑菌活性研究［J］． 安徽农业科学，2009，37
(6) :2585 － 2586，2591．
［5］ 李春美，田 燕，钟慧臻，等． 芒果核仁提取物的抑菌活
性组分分析［J］． 食品工业科技，2011，32(3) :172-
174，177．
［6］ 莫武桂，刘华钢，郑陈光，等． 芒果核提取物体外抑菌及
急性毒性实验研究［J］． 时珍国医国药，20 (8) :
1932-1933．
［7］ 梁耀光，徐巧林，谢海辉，等． 芒果核仁的化学成分及其
抑菌活性［J］． 热带亚热带植物学报，2010，18(4) :
445-448．
［8］ Abdalla A E M，Darwish S M，Ayad E H E，et al． Egyptian
mango by-product 2:Antioxidant and antimicrobial activities of
extract and oil from mango seed kernel［J］． Food Chem，2007，
103 (4) :1141-1152．
［9］ Soong Y Y，Barlow P J． Quantification of gallic acid and ellagic
acid from longan (Dimocarpus longan Lour．)seed and mango
(Mangifera indica L．) kernel and their effects on antioxidant
activity［J］． Food Chem，2006，97 (3) :524-530．
［10］ 许维国，刘 洋，刘多见，等． 没食子酸抑菌活性分析
［J］． 中国公共卫生，2012，28(10) :1329-1331．
［11］ 杨晓燕，张力力，张 琦． HPLC 法测定藏药四味姜黄汤
散中没食子酸的含量［J］． 西南民族大学学报·自然科学
版，2012，38(3) :401-404．
［12］ 周跃勇，王岸娜，吴立根． 从猕猴桃中提取多酚的研究
［J］． 食品科学，2007，28(3) :56-60．
［13］ 翟清波，李 诚，王 静，等． 植物多酚降血糖和降血脂
作用研究进展［J］． 中国药房，2012，23(3) :279-282．
HPLC法测定露水草胶囊中蜕皮甾酮
卜跃华1， 张晓笛2， 国无双2
(1． 中国医科大学高等职业技术学院，辽宁 沈阳 110001;2． 沈阳药科大学药学院，辽宁 沈阳 110016)
收稿日期:2012-05-31
作者简介:卜跃华(1961—) ，女，副教授，硕士，主要从事分析研究。Tel:18900910889，E-mail:876262389@ qq． com
摘要:目的 用 ＲP-HPLC测定露水草胶囊中蜕皮甾酮的量。方法 样品用甲醇超声提取 1 h，微孔滤膜过滤进样，
采用 Kromasil C18色谱柱 (250 mm × 4. 6 mm，5 μm) ;柱温 30℃;流动相为乙腈-水 (30 ∶ 70) ;体积流量 1 mL /min;
紫外检测波长 242 nm;进样量 5 μL。结果 蜕皮甾酮在 0. 001 ～ 0. 02 mg /mL范围内峰面积与浓度呈良好的线性关系，
回归方程为 A = 6. 876 × 104C + 25. 71 (r = 0. 999 9)。结论 确立的方法能准确、快速地对露水草中的蜕皮甾酮进行定
量检测，可用于该制剂的质量控制标准。
关键词:露水草胶囊;反相高效液相色谱法;蜕皮甾酮
中图分类号:Ｒ285. 5 文献标志码:B 文章编号:1001-1528(2013)10-2301-02
doi:10. 3969 / j． issn． 1001-1528. 2013. 10. 058
珍珠露水草异名露水草、鸡冠参［1］。拉丁名为 Cyano-
tis arachnoidea C． B． Clarke。露水草胶囊由主产于云南的露
水草精制而成，是纯植物提取物。露水草胶囊主要成分是
蜕皮甾酮［2-3］，是唯一属于非噻唑烷二酮类的国家二类标准
新药。本实验研究旨在建立一种用反相高效液相色谱法［4-5］
测定露水草胶囊中的蜕皮甾酮的量［6-7］，为露水草胶囊质量
标准的制定提供良好的依据。
1 仪器与试剂
Agilent 1100 高效液相色谱仪 (美国 Agilent 公司) ;
ＲE—52AA 旋转蒸发仪 (上海亚荣生化仪器厂) ;BS110 型
电子天平 (北京赛多利斯仪器系统有限公司) ;TG332A 型
微量分析天平 (上海分析天平厂) ;Kromasil C18色谱柱
(大连中汇达公司) ;超声波发生器 (象山县石浦海天电子
仪器厂) ;0. 45 μm 微孔滤膜 (山东禹王实业总公司化工
厂)。
甲醇，乙腈均为色谱纯 (山东禹王实业有限公司) ;
三重蒸馏水为实验室自制。
蜕皮甾酮对照品 (纯度为 99. 3%) ，购自天津博能仪
器科技有限公司。卓奇诺露水草胶囊由昆明制药集团股份
有限公司生产 (批号 20061117、20061118、20061119)。
2 方法与结果
2. 1 色谱条件 Kromasil C18色谱柱 (250 mm × 4. 6 mm，
5 μm) ;柱温 30 ℃;流动相为乙腈-水 (30 ∶ 70) ;体积流
量 1 mL /min;紫外检测波长 242 nm;进样量 5 μL。蜕皮甾
酮在此条件下 3. 25 min出峰。结果如图 1 所示。
2. 2 标准曲线的制备 称取 1 mg 的蜕皮甾酮对照品于 50
mL量瓶中，用甲醇溶解稀释至刻度，作为贮备液，此质量
浓度作为最高浓度点，取 1 mL 贮备液于 2 mL 量瓶中用甲
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2013 年 10 月
第 35 卷 第 10 期
中 成 药
Chinese Traditional Patent Medicine
October 2013
Vol． 35 No． 10
图 1 HPLC色谱图
醇稀释至刻度，作为第 2 个质量浓度点，以此类推，配制
成系列质量浓度的对照品溶液，分别进样 5 μL，以峰面积
A为纵坐标，质量浓度 C (mg /mL)为横坐标，绘制标准
工作曲线。蜕皮甾酮在 0. 001 ～ 0. 02 mg /mL 范围内峰面积
与浓度呈良好的线性关系。所得回归方程为 A = 6. 8755 ×
104C + 25. 714，r = 0. 999 9。
2. 3 仪器精密度试验 精密吸取 0. 02 mg /mL 的对照品溶
液 5 μL，重复进样 6 次，计算得到峰面积的 ＲSD 值
为 0. 3%。
2. 4 方法精密度 精密称取 3 份低、中、高不同质量的样
品 0. 015 1，0. 025 2 和 0. 054 3 g 于 100 mL 量瓶中，超声
提取 1 h，定容后摇匀，微孔滤膜过滤，分别测定 5 次，通
过测定其峰面积，计算 ＲSD 值，结果分别为 0. 89%，
0. 064%和 1. 16%。
2. 5 回收率试验 分别称取 3 份样品 8. 45、9. 44 和 9. 91
mg各 3 份于 50 mL 量瓶中，分别加入 1. 40、2. 60 和 3. 33
mg的对照品作为低、中、高的待测样品，加入甲醇超声提
取 1 h，定容、摇匀、过滤后进样，测定，计算回收率及
ＲSD值。平均回收率为 98. 8%、94. 45%、99. 43%，ＲSD
分别为 3. 9%、2. 0%、1. 5%。
2. 6 样品测定 用上述方法处理 3 批样品，精密称定样品
第 1 批 0. 051 9 g、第 2 批 0. 052 0 g、第 3 批 0. 051 9 g于 3
个 100 mL的量瓶中，加甲醇超声提取 1 h，定容、摇匀、
过滤进样，每批进样 5 次，测定，结果分别为第 1 批含蜕
皮甾酮 298. 73 mg /g、第 2 批为 280. 81 mg /g、第 3 批为
288. 71 mg /g，最终确定每克露水草胶囊中含蜕皮甾酮为
289. 42 mg。
3 讨论
3. 1 配制一定质量浓度的蜕皮甾酮标准溶液进行紫外扫
描，并参考文献［8］，确定紫外检测波长为 242 nm。
3. 2 经过查阅大量的文献［9-12］，将甲醇溶解的对照品，在实
验条件下 5 μL进样分析，再将甲醇超声提取的样品进样分析，
根据保留时间及峰形的一致性，判断为同一物质。
3. 3 本实验考察了用甲醇、乙醇、乙腈等溶剂进行超声提
取，经多方考虑选择用甲醇提取，该提取方法经济，方便
且回收率较高。同时考察了 0. 5、1 和 2 h 的超声提取时间
的回收率值，最终选择 1 h。
3. 4 本实验确立的方法能准确、快速地对露水草中的蜕皮
甾酮进行定量检测，可用于该制剂的质量控制。
参考文献:
［1］ 谭成玉，王金辉，李 铣，等． 露水草化学成分研究［J］．
中国药学杂志，2005，40(20) :1537-1538．
［2］ 谭成玉，王金辉，李 铣，等． 露水草中的植物甾酮类成
分［J］． 沈阳药科大学学报，2001，18(4) :263-265．
［3］ 谭成玉，王金辉，李 铣，等． 露水草的化学成分［J］．
药学学报，2003，38(10) :760-762．
［4］ Ivanovica D，Medenicab M，Jancica B，et al． Ｒeversed-phase
liquid chromatography analysis of imatinib mesylate and impurity
product in Glivec Capsules［J］． Chromatogr B，2004，800(1 /
2) :253-258．
［5］ Sarkzi ，Janicsk G，Kursinszki L，et al． Alkaloid composi-
tion of Chelidonium majus L． studied by different chromato-
graphic techniques［J］． Chromatographla，2006，63 (13) :
S81-S86．
［6］ 张 英，韦 异，粟 辉． 超声提取-反相高效液相色谱
法测定牛膝中蜕皮甾酮［J］． 光谱实验室，2002，19(5) :
668-671．
［7］ 惠玉虎，张 立，李 建． ＲP-HPLC法测定珍珠露水草提
取物中蜕皮激素的含量［J］． 中草药，2002，33(5) :426．
［8］ 李文莉，汪文涛，雷玉萍，等． ＲP-HPLC测定脉络宁注射
液中蜕皮甾酮的含量［J］． 华西药学杂志． 2001，16(4) :
382-383．
［9］ 张振凌，吴国学，许真真，等． 不同种类酒炮炙对牛膝饮
片蜕皮甾酮含量的影响［J］． 中药材，2009，32(9) :
1369-1371．
［10］ 陈小霞，卢 伟． 福建省三种常用筋骨草属植物中蜕皮甾
酮的含量测定［J］． 海峡药学，2007，19(12) :64-65．
［11］ 刘 姣，周亚球，彭 超． 怀牛膝蜕皮甾酮的含量测定
［J］． 安徽中医学院学报，2005，24(3) :43-44．
［12］ 张翠英，梁生旺，张光强． 不同产地牛膝中蜕皮甾酮的含
量测定［J］． 中国药学杂志，2001，36(10) :699-700．
2032
2013 年 10 月
第 35 卷 第 10 期
中 成 药
Chinese Traditional Patent Medicine
October 2013
Vol． 35 No． 10