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落葵和毛叶子花提取液对氧自由基的清除效应



全 文 : [收稿日期]  2006-11-16;2007-01-29修回
 [基金项目]  河南农业大学“国家重点学科作物栽培学与耕作学”项目资助
 [作者简介]  刘华山(1951 -),女 ,教授 ,博士生导师,从事烟草栽培生理生化研究。 E-mai l:liuh s602@sina. com
[ 文章编号] 1001-3601(2007)02-0053-0012-01
落葵和毛叶子花提取液对氧自由基的清除效应
刘华山 , 韩锦峰 , 孟凡庭 , 张玉丰
(河南农业大学 农学院 , 河南 郑州 450002)
  [ 摘 要] 试验范围内 ,落葵和毛叶子花提取液及其混合液均具有较强的清除超氧阴离子自由基(O -2 )和羟基自由基( OH)的作用。落葵随加入提取液量的增加对 O -2 清除作用增强 , 毛叶子花提取液体积则在 60μL 时对 O -2 具有最佳的清除效果;对 OH 的清除作用 ,毛叶子花随加入提取液量增加活性一直升高 , 落葵提取液体积在 90μL 时清除能力最大 , 混
合液清除氧自由基比单一提取液效果更明显。[ 关键词] 落葵;毛叶子花;O -2 ; OH[ 中图分类号] S501 [ 文献标识码] A
Scavenging Effects of Basella rubral L. and Bougainvillea spectabilis Willd
Extracts on Oxide Free Radicals
LIU Huashan , HAN Jinfeng , MENG Fanting , ZHANG Yufeng
(Agricultural College , Henan Agricultural Universit y , Zhengzhou, Henan 450002 , China)
  Abstract:The scaveng ing oxide f ree radicals effects o f the ex trac ts from Basella rubral L. and Bougainvi llea spectabilis
Willd are studied. The results show tha t tw o kinds of ex tracts and their mix tur e ext ract have the st rong scavenging ox ide free
radicals effects. The scaveng ing O -2 effect of the ex tract f rom Basella rubral L . increases with the increa se of the ext ract
amount and the extr act f rom Bougainv illea spectabilis Willd has the best scavenging O -2 effect at the volume of 60μL;while
the scavenging OH of the ex tract f rom Bougainv illea spectabi lis Willd increa ses with the increase o f the ex tract amount and
the ex trac t f rom Basella rubral L. has the best scaveng ing OH effect a t the vo lume o f 90μL. The mix ture ext ract has better
effects than any sing le ex tr act in scavenging oxide free r adicals.
Key words:Basel la rubral L. ;Bougainvil lea spectabilis Willd;O -2 ; OH
  自由基为生物细胞代谢过程连续不断产生的具
有高度活性的物质 ,具有代表性的自由基有超氧阴
离子自由基(O -2 )、羟基自由基( OH)、过氧化氢
(H 2O 2)及单线态氧(1O 2)等 。在正常生理状态下 ,
自由基的产生与清除可维持在一个无害的极低水
平 ,但在生物衰老 、疾病等情况下产生的活性氧会对
蛋白质 、脂类 、多糖和核酸等产生伤害[ 1] 。关于植物
提取液在清除 O -2 和 OH 的能力方面已有报
道[ 2 ~ 7] 。但对落葵(Basel la rubral L.马齿苋科)和
毛叶子花(Bougainv i llea spectabi l is Willd 紫花茉
莉科)的提取液对 O -2 和 OH 的清除效应尚未见
资料报道 。为此 ,作者进行了本试验 ,检测了落葵和
毛叶子花提取液及其混合液对 O -2 及 OH 的清
除效果 ,以期为生物抗氧化胁迫及其利用提供理论
依据 。
1 材料与方法
试验材料为落葵和毛叶子花 ,取新鲜叶片先用
自来水然后用蒸馏水冲洗 , 去叶尖及叶基部 , 用
0. 01mo l /L pH 7的磷酸缓冲液(W∶V =1∶10)进
行研磨提取 ,在 5 000 r /min 条件下离心 15min ,上
清液为植物提取液 ,置于 4℃冰箱中保存备用。
落葵和毛叶子花提取液及其混合液(落葵和毛
叶子花提取液按体积 1∶1混合)的体积量设置 5个
处理:15μL 、30μL 、60μL 、90μL 和 120μL 的植物提
取液 , 实验重复 3 次 。O -2 的产生和测定按照
Stew ar t和 Bew ley[ 8] 的方法进行 , OH 的产生与
测定按照 Smirnof f和 Cumbes[ 9] 的方法 ,其反应体
系的体积均为 3mL , 以提取液抑制 NBT(氮蓝四
唑)光还原的效应表示其清除 O -2 的能力 ,以提取
液竞争性抑制 OH 引发的水杨酸羟基化作用的效
应来表示其清除 OH 的能力 。
2 结果与分析
2. 1 提取液对 O -2 的清除效应
向 O -2 的反应体系中分别加入不同体积的落
葵和毛叶子花提取液及其混合液 ,清除效应以体系
的吸光值变化来表示。检测结果如图示。从中可以
看出 ,落葵和毛叶子花提取液及其混合液对 O -2
均具有清除作用 ,其中落葵随着加入提取液体积的
增加 ,清除 O -2 能力逐渐增强;而毛叶子花提取液
体积在 60μL 时清除作用达到最大值 ,之后开始下
降;混合液的清除效果明显优于单一植物提取液 。
2. 2 提取液对 OH 的清除效应
由图中结果显示 ,落葵和毛叶子花提取液的混
合液对 OH 的清除效应要比单一提取液大 。其中
落葵提取液体积在 90μL 时对 OH 的清除效应最
佳 ,而后随着体积量的增加清除效应反而降低;毛叶
子花提取液随加入体积量的增加 ,对 OH 清除效
应则随之增强。 (下转第 25 页)
 贵州农业科学 2007 , 35(2):12 Guizhou Ag ricultural Science s
4 结论
4. 1 毕节地区玉米生产的不同技术措施中 ,肥料措
施对玉米产量影响最大 ,贡献率达到 41. 03%;品种其
次 ,达 33. 58%;栽培技术再次 ,达 20. 07%;病虫害综
合防治最后 ,达 5. 33%。毕节地区玉米生产技术措施
对玉米贡献率大小 ,从总体上反映了毕节地区各种技
术措施对玉米产量的影响 ,从技术角度给毕节地区农
业科技管理者和农业技术推广者 ,较为客观的评价了
各种技术措施在提高玉米单产中的贡献份额 ,从总体
上对技术在玉米增产上的作用有了了解。
4. 2 在各项新技术科技进步对玉米产量的贡献率
中 ,杂交种对产量的影响最大 , 科技进步贡献率达
30. 19%,其次是氮肥和合理密植 ,前三项技术的科
技进步贡献率达 62. 78%,其它 8项技术的贡献率
依次为磷肥 、有机肥 、钾肥 、育苗移栽 、地膜覆盖 、种
子包衣 、绿肥垄作 、虫害综合防治和病害综合防治 。
4. 3 从单项技术评价排序可看出 ,毕节地区玉米
新技术作用大小 ,品种是关键 ,氮肥是基础 ,合理密
植是保证 。在毕节地区玉米各项新技术中 ,杂交玉
米对玉米的贡献率最大 ,因为杂交品种的推广 ,改变
了玉米的栽培特性 ,耐肥 、耐密植程度增加 ,对肥料
需求更大 ,对密度要求更高 ,从而可获得较高的产
量 。肥料的施用是玉米获得高产的物质保障 ,由于
土壤中有效养分不能满足玉米需要 ,因此通过增加
化肥投入 ,才能获得玉米持续高产。在栽培技术中 ,
只有合理密植才能协调个体与群体的发展 ,个体才
有合适的冠层空间和营养面积 ,群体才有最大的绿
叶面积 ,提高叶面积系数 ,增加吸光量 ,增强光合势 ,
有效地利用光能 ,充分发挥基因型潜力和环境潜力 ,
达到强大粒多粒重从而提高群体产量 。
4. 4 玉米育苗移栽 、地膜覆盖 、种子包衣 、绿肥垄
作 、病虫害综合防治等其它栽培措施 ,虽然对玉米产
量的影响有一定的作用 ,但总的来讲 ,其中某一项技
术的采用与否对玉米产量影响不是不可替代 ,如育
苗移栽技术可以通过加大播种量 ,提高种子出苗率 ,
保证苗整齐度等技术来弥补;地膜覆盖可选育新适
宜当地气候条件品种来替代;种子包衣可通过增加
播种量来替代;绿肥垄作可通过增施有机肥来替代;
病虫害综合防治可选育抗病品种等技术替代。同时
其最终对玉米产量的影响也是通过杂交玉米 、施肥
技术和合理密植三项技术来影响玉米的产量。
(责任编辑:高红卫)
(上接第 12 页)
图示 不同体积提取液对O -2 和 OH 的清除效应
  Fig. The scavenging ef fect s of dif ferent ex tract s wi th diff erent
volume on O-2 and OH
3 结论与讨论
两种植物的提取液及其混合液对O -2 和 OH
均具有明显的清除效应 ,其中落葵提取液对 O -2
的清除效应比毛叶子花提取液强 ,而对 OH 的清
除能力是毛叶子花优于落葵。结果还显示 ,混合液
清除氧自由基的效果明显优于单一提取液 ,说明两
种植物提取液混合后由于互补原因产生了累加效
应。因此 ,二种植物在综合开发利用方面可以作为
清除氧自由基的天然植物源。这方面我们已在烟草
上做过试验 ,检测烟草被 TMV(烟草普通花叶病
毒)感染后 ,烟株大量产生 O -2 ,膜脂过氧化产物
MDA(丙二醛)含量升高 ,膜透性增加 ,而用落葵和
毛叶子花提取液及混合液分别在烟株接种 TMV 前
和后处理 ,均有较好的防治效果(资料未列出)。烟
草一旦被 TMV 感染 ,很难将病毒完全清除 ,由于
TMV 在活细胞中能自我复制 ,所以在烟草生产上
预防比治更重要。因此 ,两种植物提取液对 TMV
的发生能起到积极的预防作用 ,是一种极好的绿色
植物药剂 ,至于它们有效的化学成分及作用机理有
待进一步研究。
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(责任编辑:高红卫)
25  第 2 期 郑元红 等 层次分析在科学技术对玉米增产作用评价中的应用