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密花葛蔓中葛根素及总黄酮的含量测定



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密花葛蔓中葛根素及总黄酮的含量测定
云南省药品检验所 (65 0 1 1) 张雯洁
昆明市轻工业研究所 (65 0 32 ) 阮建林
云南省红河州药品检验所 (6 n o ) 谷俊峰
摘要 测定了密花葛蔓中葛根素和总黄酮的含量 ,为葛蔓的合理利用 、增加葛根素提取的新原料提
供了一定的科学依据 。
关键词 葛蔓 葛根素 总黄酮 含量测定
葛蔓为葛的藤茎 ,始载于 《本草纲 目》〔`〕 ,具
“卒喉痹 , 消痈肿 ” 之功效 。 历版中国药典均只
收载葛根而没有收载同样可作药用的葛蔓 、 葛
叶 、葛花 、 葛谷 (种子 ) 。 本文测定了葛蔓中葛根
素和总黄酮的含量 , 现报道如下 。
1 样品 、对照品与试剂
1
.
, 样品 葛蔓 、 葛根为豆科植物密花葛 几 -
aer 而 a么衅 c our 抚le占 Car ib在云南省楚雄州栽培八
个月的同株植物 的干燥藤茎 、 根 。
1
.
2 对照品 葛根素购 于中国药 品生物制 品
检定所 (供含量测定用 ) 。
1
.
3 试剂 硅胶 H (青岛海洋化工厂 ) ;溶剂均
为分析纯 。
2 溶液的制备
2
.
, 供试品溶液制备 取样品粉末适量 (相 当
于葛根素 巧 m g ) ,精密加甲醇 50 血 ,称定重量 ,
回流 1小 时 ,放冷 , 补足重量 ,滤过 ,取续滤液作
为供试品溶液 。
.
27 0
·
2
.
2 对照品溶液制备 取葛根素对照品 , 甲醇
制成每 1 耐 含 0 . 308 m g 的溶液作为对照 品溶
液 。
3 葛根素含量测定
3
.
1 薄层 色谱条件 精密 吸取供试品溶液和
对照品溶液各 2 川 , 分别点于 同一硅胶 H 薄层
板上 , 以氯仿 一醋酸 乙醋 一甲醇 一水 ( 4 : 4 : 2 . 5 : 0 . 5 )
为展开 剂 , 展 开 , 取出 , 晾干 , 置紫 外 光灯 ( 3 65
nI )下定位 ; 入S = 2 65 n m , 单波长 反射式锯齿扫
描 ,狭缝 l . Z x l . Z rn
,
XS
= 3

3
.
2 线性 范 围考察 精 密 吸取对照 品溶液
0
.
5

l

2

3

4

5

6

7

s

9 拼l , 分别点于 同一薄层
板上 , 展开 , 扫 描测 定 。 结 果表明 , 葛根素 在
0
.
154 拼g 一 2 . 7 7 2 拜g 范围内线性关系 良好 。 回
归方程 Y 二 6 9 5 . 54 + 3 9 3 7 5 . 36 X , r = 0 . 9 9 9 5 。
3
,
3 稳定性试验 按薄层色谱条件 ,精密吸取
葛蔓供试品溶液和对 照品溶液各 2 川 , 分别点
于同一薄层板上 ,展开 , 每隔 30 分钟测定一次 ,
中药材第 23 卷第 5 期 2以X)年 5 月
DOI : 10. 13863 /j . i ssn1001 -4454. 2000. 05. 011
计算含量 。 结果 RS D = 1 . 14 %, 表 明 2 小 时 内
稳定 。
3
.
4 精密度试验 同板精密度 : 按薄层色谱条
件 , 多次精密吸取同一葛蔓 的供试品溶液和对
照品溶液各 2 川 , 分别点于 同一薄层板 的不 同
位置 , 展开 , 扫描测定 , 计算含量 , 结果 SR D =
1
.
6 %
。 异板精密度 : 按薄层 色谱条件 , 多次精
密吸取同一葛蔓的供试品溶液和对照品溶液各
2川 ,分别点于 4 块不同薄层板上 ,展开 ,扫描测
定 ,计算含量 ,结果 R SD 二 1 . 92 % 。
3
.
5 重现性试验 同一葛蔓样品 , 分别制成 5
份供试品溶液 ,按薄层色谱条件 , 分别进行薄层
层析并扫描测定 , 结果 RS D 二 2 . 82 % 。
3
.
6 加样 回收试验 精密称取 已知含量 的葛
蔓样品 5 份 ,加入对照品 ,按前述供试品溶液的
制备方法处理 。 照薄层色谱条件展开 , 扫描测
定 ,平均回收率为 98 . 03 % , SR D 为 3 . 40 % 。
3
.
7 样品含量测定 将样品按供试品溶液制
备方法处理 , 照薄层色谱条件 , 展开 ,扫描测定 ,
计算含量 。 结果葛蔓的含量为 1 . 45 % , 葛根 的
含量为 2 . 36 % 。
4 总黄酮含量测定
4
.
1 测定波长确定 分别测定葛根素和葛蔓
样品在 or % 乙醇 中的紫 外 吸收光谱 , 两 者在
250 n m 波长处 有最 大 吸收 , 且 光谱图基 本相
同 ,确定以 250 mn 为测定波长 。
4
.
2 线性 范 围考察 精密 吸取对照 品溶液
25

5 0

10

15 0

20

2 5 0

30

4 0 拜l , 分别加
or % 乙醇至 or 血 , 测定 。 结果表明 , 葛根素在
.7 7 滩 一 123 . 2 拼g 范围内线性关系 良好 。 回归
方程 Y = 0 . 0 3 3 6 + 7 . 94 6 X , r = 0 . 9 9 9 8 。
4
.
3 稳定性试验 精密吸取对照 品溶液 30
沁 ,加人 10 % 乙醇 至 or 而 , 每隔 30 分钟测定一
次 ,计算含量 。 结果 SR D = 0 . 24 % ,表明 2 小时
内稳定 。
4
.
4 精密度试验 多次精密 吸取 同一葛蔓的
供试品溶液依法测定 , 计算含量 。 结果 SR D 二
1
.
19% (
n = 4 )

4
.
5 重现性试验 同一葛蔓样品 ,分别制成 5
份供试品溶液 ,依法测定 。 结果 SR D = 1 . 69 % 。
4
.
6 加样回收试验 精密称取 已知含量的葛
蔓样 品 5 份 , 加人对照品 , 按前述供试品溶液的
制备方法处理 , 制成加 样 回收供试液 , 依法测
定 ,平均 回收率为 97 . 91 % , RS D 为 2 . 43 % 。
4
.
7 样品含量测定 将样 品按供试品溶液制
备方法处理 ,精密取供试品溶液 o . l iln ,加 10 %
乙醇至 10 以 , 依法 与标准 曲线 同时测定 , 计算
含量 。 结果葛蔓的含量 为 4 . 69 % , 葛根的含量
为 3 . 10 % 。
5 讨论
葛根为常用 中药 , 《中国植物志 》记载葛属
有八个种闻 ,其中密花葛 中葛根素及总黄酮含
量均未见报道 。 本文测定了葛蔓中葛根素及总
黄酮含量 ,并与同株植物的根 (葛根 )作了比较 。
结果葛根素在根 中含量较高 , 而总黄酮则是在
藤茎 中含量较高 ,且含量仅低于野葛凶 , 这为葛
蔓的合理利用 、 增加葛根素提取的新原料提供
了一定的科学依据 。
注 :本课题为昆明 市重点科技计划项 目 (昆科工字 19 8-
18 )
, 中国科学院昆明植物研究所植物分类研究 室李锡 文研究
员帮助鉴定植物标本 , 谨致谢意 。
参 考 文 献
1 李时珍 . 本草纲 目 (上册 ) . 北京 :人民卫生出版社 ,
1 982 : 1 280
2 杨云 ,等 . 通脉口服液质量控制方法的研究 . 中国
中药杂志 , 1 998 , 23 ( 8 ) : 4 80
3 楼之岑 ,等 . 常用中药材品种整理和质量研究 (北
方编第一册 ) . 北京 :北京医科大学中国协和 医科大
学联合出版社 , 19 4 : 3 79
4 中国科学院中国植物志编辑委员会 . 中国植物志
(第四十一卷 ) . 北京 :科学出版社 , 1995 : 220
5 顾志平 , 等 . 中药葛根资源的调查研究 . 中药材 ,
1 99 3
,
1 6 ( 8 )
: 1 3
( 2 (X刀 一 0 2 一 14 收稿 )
中药材第 23 卷第 5 期 2 0以)年 5 月