全 文 ：第 24卷 第 9期
2 0 0 6年 9月
中 医 药 学 刊
CH INESE ARCH IVES OF TRAD IT IONAL CH INESE MED IC INE
Vo.l 24 No. 9
Sep. 2 0 0 6
中医药
1753
学刊
HPLC法测定胆木注射液中异长春花苷内酰胺的含量
丁 琳,吴德康,蒋俊毅
(南京中医药大学,江苏 南京 210029)
摘 要:目的:测定胆木注射液中异长春花苷内酰胺的含量。方法: 采用高效液相色谱法, 以 L ichro sphe r C18
( 5Lm, 4. 6mm @ 250mm)为色谱柱,流动相为乙腈 -水 -磷酸 ( 30B 70B 0. 1) , 检测波长为 226nm, 柱温: 30e , 流
速为 1. 0mL /m in, 采用面积外标法。结果: 建立了胆木注射液中异长春花苷内酰胺的 HPLC含量测定方法, 线性
范围为 0. 1992~ 0. 9960Lg,平均回收率为 98. 60% , RSD为 1. 62% ( n = 6)。结论:该方法稳定、可靠、专属性强,
可用于胆木注射液中异长春花苷内酰胺的含量测定, 为胆木注射液的质量控制提供了新方法。
关键词:胆木注射液;异长春花苷内酰胺; 含量测定;高效液相色谱法
中图分类号: R284. 1 文献标识码: B 文章编号: 1009 -5276( 2006) 09 - 1753 -02
收稿日期: 2006 - 03 - 18
作者简介:丁琳 ( 1977 - ) , 女,江苏南京人, 中药师,学士,研究方
向:中药学。
胆木注射液是由胆木 Ramu lus N aucleae单味药材开发
研制而成的中药注射剂,具有抗菌、消炎作用, 临床常用于
治疗上呼吸道感染、支气管炎、急性扁桃体炎及咽喉炎等
症。异长春花苷内酰胺 ( Isov inc iside lac tone)是胆木注射液
中主要有效成分,且含量较高,为有效控制该药的质量,保
证临床用药的安全、有效、可控, 本实验应用高效液相色谱
法对胆木注射液中异长春花苷内酰胺的含量测定方法进行
了研究,并对 10批胆木注射液进行了含量测定。
1 实验材料
1. 1 仪器 Agilen t高效液相色谱仪 (美国, 全套 );
BP211D电子天平 (德国 Sarto ius公司 ); 6010紫外 -可见分
光光度计 (安捷伦科技上海分析仪器有限公司 )。
1. 2 材料与试剂 胆木注射液 (海南制药厂提供 ); 异长
春花苷内酰胺 (自制, 纯度: 98. 56% ); 乙腈为色谱醇, 水为
重蒸水 (实验室自制 );其它试剂为分析纯。
2 方法与结果
2. 1 色谱分析条件 色谱柱: L ich rospher C18 ( 5Lm, 4. 6
mm @ 250mm ); 流速: 1. 0mL /m in; 检测波长: 226nm; 柱温:
30e ,采用面积外标法。异长春花苷内酰胺分离良好,分离
度大于 1. 5, 峰形对称。
2. 2 供试品溶液的制备 精密量取本品 1. 0mL, 置 10mL
量瓶中,以重蒸水定容至刻度,微孔滤膜 ( 0. 45Lm )滤过,取
续滤液,即得。
2. 3 空白试验 将原制剂配方去除胆木提取物, 按制剂
工艺进行制备, 得空白样品, 按以上 /供试品溶液的制备0
及 /色谱分析条件 0处理分析样品, 结果表明空白样品的
HPLC色谱图在与异长春花苷内酰胺相应保留时间上没有
干扰峰。
2. 4 线性关系考察 取经五氧化二磷干燥至恒重的异长
春花苷内酰胺 10mg, 精密称定, 加甲醇制成每 1mL含异长
春花苷内酰胺 0. 9960m g的溶液, 摇匀, 得标准储备液。精
密移取标准储备液 2. 0、4. 0、6. 0、8. 0、10. 0mL至 10mL量
瓶中,流动相定容至刻度,制成浓度为 19. 92、39. 84、59. 76、
79. 68、99. 60Lg /m L的溶液。取上述溶液各 10LL, 进样,检
测。以浓度 ( C )对峰面积 ( A )作线性回归,得线性方程为:
A = 32. 585C - 7. 099, r= 0. 9999。结果表明异长春花苷内
酰胺在 0. 1992~ 0. 9960Lg范围内,呈良好的线性关系。
2. 5 精密度试验 取 /线性关系考察0项下 3号对照品溶
液,连续进样 5次,测定异长春花苷内酰胺峰面积值, 结果
其 RSD为 0. 17% , 表明仪器精密度良好。
2. 6 稳定性试验 取同一分供试品溶液, 分别在 0、1、2、
4、8、14、26h测定异长春花苷内酰胺的峰面积值, 结果其
RSD为 0. 14% ,表明供试品溶液在 26h内稳定性良好。
2. 7 加样回收率试验 取已知异长春花苷内酰胺含量的
同一批胆木注射液 (批号: 20030910 ), 以前法制备供试品
溶液,精密加入一定量的异长春花苷内酰胺对照品, 测定,
结果平均回收率为 98. 60% , RSD为 1. 62% ,结果表明此方
法具有良好的回收率。结果见表 1。
表 1 异长春花苷内酰胺加样回收率试验结果
样品中含量
(Lg)
加入量
( Lg)
测得量
( Lg)
回收率
(% )
平均回收率
(% )
RSD
(% )
132. 85
99. 60 231. 11 98. 66
99. 60 231. 48 99. 03
134. 46 267. 70 100. 3
134. 46 267. 59 100. 2
164. 34 291. 67 96. 64
164. 34 291. 89 96. 78
98. 60 1. 62
2. 8 重复性试验 取同一批胆木注射液 (批 号:
20030910),以前法平行制备 6份供试品溶液, 分别测定其
中异长春花苷内酰胺的峰面积值, 结果 RSD为 0. 58% , 表
明该方法的重现性良好。
2. 9 供试品含量测定 按上述测定方法, 对 10批胆木注
射液进行含量测定,结果测得异长春花苷内酰胺的平均含
量为 0. 5162mg /mL, 结果见表 2。
表 2 10批胆木注射液中异长春花
苷内酰胺的含量测定结果 ( n = 3)
批号 含量
( mg /mL)
批号 含量
( mg /mL)
平均
( mg /mL)
20030910 0. 5402 20040217 0. 5693
20030912 0. 5745 20040219 0. 4459
20030914 0. 6627 20040301 0. 5429 0. 5162
20040213 0. 2556 20040303 0. 5752
20040215 0. 4626 20040305 0. 5326
1753
DOI：10.13193/j.archtcm.2006.09.171.dingl.088
第 24卷 第 9期
2 0 0 6年 9月
中 医 药 学 刊
CH INESE ARCH IVES OF TRAD IT IONAL CH INESE MED IC INE
Vo.l 24 No. 9
Sep. 2 0 0 6
中医药
1754
学刊
HPLC法测定苦参总碱控释微丸中生物碱含量的研究
马方励1,时 军 2,程 怡2
( 1. 广州汉方现代中药研究开发有限公司, 广东 广州 510240; 2.广州中医药大学, 广东 广州 510405)
摘 要:目的:探讨苦参总碱控释微丸的质量控制方法。方法: 采用 HPLC法测定苦参总碱控释微丸中苦参
碱和氧化苦参碱的含量。结果: 苦参碱线性范围为 0. 1~ 1. 002m g /m L, 加样回收率为 103. 3% ; 氧化苦参碱线性
范围为 0. 1~ 0. 996m g /mL,加样回收率为 98. 47% ; 精密度符合要求; 所测 3批控释微丸中苦参碱和氧化苦参碱
含量平均为 ( 38. 66 ? 1. 20) mg /g、( 68. 12 ? 1. 62)m g /g。结论: HPLC法稳定可靠, 可用于该制剂的质量控制。
关键词: HPLC;苦参总碱;控释微丸
中图分类号: R285. 5 文献标识码: B 文章编号: 1009 -5276( 2006) 09 - 1754 -02
苦参总碱控释微丸 ( T ota lM a trine, TM )是依据机体生
理功能和缓控释制药技术设计 [1 ]、利用流化技术和膜控包
衣技术制备的现代新型制剂。为了控制本品的内在质量,
用 HPLC法测定其中苦参碱和氧化苦参碱的含量, 以保证
产品的疗效。
1 仪器和试药
DIONEX P680型 HPLC仪 ( TCC - 100泵, UVD170U检
测仪 ); Sa rto rius1712型万分之一电子天平。苦参总碱控释
微丸 (自制 ) ;苦参碱对照品 (中国药品生物制品检定所,批
号 0805 -200005,供含量测定用 ) ; 氧化苦参碱对照品 (中
国药品生物制品检定所, 批号 0780 - 200004, 供含量测定
用 )。
2 试验方法
2. 1 色谱条件 固定相: K rom asil柱; 柱温: 20e , 流速:
1. 0m L /m in, 进样量: 10LL, 流动相: 甲醇 -水 -三乙胺
( 48B52B0. 03)。
2. 2 对照品溶液的配制 分别精密称取苦参碱对照品
25. 05m g和氧化苦参碱对照品 24. 90m g,置于 5mL量瓶中,
加甲醇溶解并稀释至刻度,摇匀, 即得。
2. 3 供试品溶液的制备 取控释微丸 3批, 每批 10粒,
倾出内容物, 研细, 精密称定细粉 0. 5g, 量于 100mL量瓶
中,加流动相 60m L, 超声 15m in,滤过。取续滤液 4mL,水浴
蒸干,用流动相溶解并定容成 1mL, 即得。
2. 4 标准曲线的绘制 分别精密移取苦参碱对照品溶液
和氧化苦参碱对照品溶液 0. 1、0. 2、0. 4、0. 8、1. 0m L置 5. 0
m L量瓶内, 甲醇定容。精密吸取 10LL, HPLC进样测定,以
峰面积 A对浓度 C作线性回归。测得苦参碱和氧化苦参
碱峰面积 ( Y ), 用 Y对各自浓度 ( X )进行分析, 苦参碱:线
3 讨 论
本文采用高效液相色谱法对胆木注射液中异长春花苷
内酰胺的含量测定进行了研究, 经过对甲醇 -水、乙腈 -水
不同体系流动相的色谱行为的比较, 最终以乙腈 -水 -磷
酸 ( 30B70B0. 1)的分离效果较佳。根据对照品的紫外扫描
光谱图,最终确定选择 226nm作为检测波长。该方法可使
异长春花苷内酰胺的色谱峰与其它杂质峰达到基本分离,
而且无干扰。试验结果表明,该方法简便, 专属性强, 重复
性好,为胆木注射液的质量控制提供了新方法。
Determ ination of Isov inc is ide Lactone Content in Danmu In ject ion by HPLC
Ding L in, W u Dekang, Jiang Juny i
( Nanjing Un ive rsity o f TCM, N an jing 210029, Jiangsu, China)
Abstrac t: Ob jective: To de te rm ine the conten t o f Isov inc iside lactone in Danm u in jiection. Methods: TheHPLC sy stem consisted
of the co lum n of L ichrospherC18 ( 4. 6mm @ 250mm, 5Lm ) and acetonitrtle -w a te r- pho spho ric ac id( 30B70B0. 1) as the m obile
phase. The tem pe ra turew as 30e . The de tec tivew ave leng th was 226nm. The flow ra tew as 1. 0 m l /m in. Ex tennal standa rd m ethod.
R esu lts: The m ethod o f de te rm ina ting the conten t o f Isov inc iside lactone in Danmu injiec tion w as estab lished. And itw as linearw ith-
in the range o f 0. 1992~ 0. 9960Lg, the average recove ryw as 98. 60% , and theRSD was 1. 62% ( n = 6). Conclusion : Thism e th-
od is simp le, reliab le, p recise and provide s a sc ien tific basis for the qua lity contro lling of Danmu in jec tion.
Keywords: danm u injection; isov inciside lactone; con tent determ ination; HPLC
收稿日期: 2006 - 03 - 16
作者简介:马方励 ( 1978 - ) ,女,广东广州人,助理工程师,硕士,主要从事药物制剂研究。
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