作 者 ：田艳伶;李志辉;杨模华;张 斌
期 刊 ：中南林业科技大学学报 2015年 02期 页码：32-37
关键词：关键词钩栗；ISSR-PCR；正交设计；单因素试验；优化；
摘 要 ：摘 要：本研究以钩栗叶片为实验材料，采用单因素和 L16(45) 正交实验探讨了 DNA 模板用量、Mg2+浓度、引物用量、Taq DNA 聚合酶、dNTP 用量以及不同退火温度对钩栗 ISSR-PCR 扩增的影响，建立了钩栗 ISSR-PCR反应体系。研究结果显示，优化后的最佳反应体系为，20 μL 反应总体系中，含 30 ng 模板 DNA，3 mmol/LMg2+，0.4 mmol/L dNTPs，0.75 U Taq DNA 聚合酶，0.3 μmol/L 引物；对钩栗 DNA 样品材料进行 ISSR-PCR 扩增体系的检测结果显示，该优化体系扩增的产物条带清晰，稳定性高，本研究为钩栗种...