全 文 :283※分析检验 食品科学 2005, Vol. 26, No. 8
3 结 论
气-质联机分析荆条叶、枝超临界萃取物,计算机
NIST02谱库检索结合气相色谱保留指数二维定性的方
法,鉴定出35种沸点较低的挥发油成分。从荆条叶、
枝萃取物中鉴定出的挥发性组分基本相同,均为单萜及
倍半萜类化合物,主要挥发性成分为β-丁香烯(叶44.
20%;枝47.15%)、β-甲基紫罗兰酮(叶14.17%;枝8.
68%) 和β-金合欢烯(叶8.64%;枝10.55 %)。
参考文献:
[1]潘炯光, 徐植灵. 牡荆、荆条、黄荆和蔓荆叶挥发油的
GC-MS分析[J]. 中国中药杂志, 1989,14(6):37-39.
[2]孙艳丽, 王守宗, 杨炳才. 荆条精油成分研究简报,林业
科技通讯[J]. 1990, (2):30-31.
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收稿日期:2005-06-15
基金项目:湖南省教育厅资助项目(03C438)
作者简介:蒋盛岩(1967-),男,副教授,主要从事生物技术研究。
树头发的成分分析
蒋盛岩,赵良忠, 陈立德,段林东,王放银,谭宝秀
(邵阳学院生物工程系,湖南 邵阳 422004)
摘 要:采用反相高效液相色谱法、蒽酮比色法分别对树头发的氨基酸、水溶性维生素、可溶性糖等成分进行
分析。结果表明,除色氨酸被水解破坏而未检出外,树头发蛋白中含有16种氨基酸,9种必需氨基酸,其氨基
酸的总含量达179.652μg/mg,总必需氨基酸含量为63.546μg/mg,必需氨基酸含量占总含量的35.37%;树头发中
可溶性糖含量为2.93%,粗纤维含量为7.55%,维生素的含量:维生素C 1.484mg/g,烟酸1.096mg/g,维生素B1
0.586mg/g,维生素B2 0.096mg/g.
关键词:树头发;氨基酸;可溶性糖;粗纤维;维生素
Analysis of Components of Pterula umbriuella Bres.
JIANG Sheng-yan,ZHAO Liang-zhong,CHEN Li-de,DUAN Lin-dong,WANG Fang-yin,TAN Bao-xiu
(Bioengineering Department,Shaoyang College,Shaoyang 422004,China)
Abstract :Components of Pterula umbriuella Bres. were studied with reversed-phase high performance liquid chromatography
and Anthrone colorimetric analysis.The result showed that sixteen kinds of amino acid(included kinds of essential amino acids)
existed in Pterula umbriuella Bres.,except th t tryptophane destroyed by hydrolysis is not checked out.The sum of amino acids
is 179.652μg/mg.The percentage of essential amino acids is 35.37%.Soluble sugar content of Pterula umbriuella Bres. is 2 93%,
and the coarse fibre 7.55%.vitamin C 1.484mg/g, nicotinic acid 1.096mg/g,vitamin B 0.586mg/g,vitamin B2 0.096 g/g.
Key words:Pterula umbriuella Bres;amino acids;soluble sugar;coarse fibre;vitamin
中图分类号:TS207.3 文献标识码在:A 文章编号:1002-6630(2005)08-0283-03
2005, Vol. 26, No. 8 食品科学 ※分析检验284
树头发(Pterula umbrinella Bres.)是珊瑚菌科龙须菌
属的一种真菌,别名黑龙须、银头发,细丝状,黑
色,担子果丛生,质韧,基部细圆柱形,向上渐细,
干后象人头发,生于高山,多附于潮湿的黄栎树皮裂
缝中,或悬挂在树枯枝上,具有止咳止痛,接骨消肿
的作用[1,2]。对树头发的氨基酸、水溶性维生素、可溶
性糖等成分进行测定,结果报道如下。
1 材料与方法
1.1树头发可溶性糖含量的测定
称取干树头发粉末1g,按照植物生理学实验指导
的蒽酮比色法(3)进行,测定样品OD值;将葡萄糖标准
溶液稀释成一系列不同浓度的溶液,在分光光度计上测
OD值(波长625nm),求出标准直线回归方程,根据标
准直线回归方程计算提取液的含糖量,再按公式计算样
品中含糖量%:可溶性糖含量=CV/W×10-6×100%,
其中,V为样品稀释后的体积(ml),C为提取液的含糖
量(μg/ml),W为样品干重(g)。
1.2树头发氨基酸含量的测定
样品制备:将树头发干样品研成粉末,称取5mg,
放入样品小管中,真空抽干,置于反应瓶中,利用三
通阀充氮气再次抽真空,将反应瓶置于恒温加热器中,
105℃水解24h;水解完毕后,将再干燥液加入,涡漩
搅拌器搅拌均匀后置于真空干燥泵中抽干;再将衍生剂
加入样品小管中,用涡漩搅拌器充分搅拌后,室温下
放置20min后,用真空干燥泵抽干3~4h,加磷酸缓冲
液稀释,离心后进行HPLC分析。标准品亦同法处理,
得出氨基酸样品图,按外标法以峰面积定量方式,计
算样品各种氨基酸含量。
氨基酸组成测定:氨基酸组成测定参照梁宋平
(1994)方法,采用微量、快速的Waters HPLC PICO-TAG-
m以及反相高效液相色谱法[4]对树头发进行氨基酸分析测
定。将样品稀释液加入样品小管,用涡漩搅拌器搅拌
使其充分溶解;在台式离心机上以500r/min离心5min,
取上清液进样。色谱条件:氨基酸分析柱YWGC(3.9×
300mm),检测波长为254nm,柱温为45℃,流动相A
为0.04mmol/L乙酸钠,6%乙腈,0.05%三乙胺的混合
液(pH值为6.4);流动相B为60%乙腈水溶液。
1.3粗纤维含量的测定
称取干树头发粉末1g,按照植物生理学实验指导(3)
进行。
1.4树头发水溶性维生素含量测定
甲醇、醋酸钠、盐酸、三乙胺均为分析纯试剂。
维生素C、B1、B2、B6、烟酸均为生化试剂(纯度>
97%)。用ddH2O分别溶解以上维生素标准试剂,使其
浓度大约为1ml相当于1mg作为储备液(维生素C分析前
配制),使用前分别吸取维生素C、B2、B6各0.2ml,
维生素B1、烟酸各0.05ml于10ml容量瓶,用ddH2O定
容制成混合标样。
按照文献[5]的方法测定:称取树头发干粉末4g,加
入50ml 0.1mol/L HCl于70℃水浴中提取30min,冷却后,
用NaAc调pH至4.18,定容至100ml,微孔滤膜过滤后
进样10μl,进行HPLC分析。分别取维生素C、B1、
B2、B6、烟酸标样5、10、15、20、25μl,以峰
面积为纵坐标,以进样体积(μl)为横坐标,求出各种
维生素标样的线性回归方程,根据线性回归方程计算树
头发中各种维生素的含量。
色谱条件:分析柱YWGC(3.9×300mm),检测波
长为254nm,柱温为40℃,流动相A为色谱纯甲醇。流
动相B为水(0.1mol/LNaAc-HAc,0.02%三乙胺,pH值为
4.18)。流动相采用曲线型梯度淋洗法,洗脱梯度见表1。
时间(min) 流速(ml/min)A(%) B(%) Curve
Initial 1.0 18 82 6
10.0 1.0 18 82 6
25.0 1.0 28 72 6
28.0 1.0 18 82 6
30.0 1.0 18 82 6
表1 洗脱梯度表
Table 1 Washing solvent and gradient
2 结果与分析
2.1树头发可溶性糖含量
将葡萄糖标准溶液稀释成一系列不同浓度的溶液,
在分光光度计上测OD值(波长625nm),求得标准直线回
归方程为:y=-1.2833+1666.8378x。在分光光度上(波长
625nm)测得样品OD值为0.057,根据标准直线回归方程
计算提取液的含糖量,再按公式计算出树头发样品含糖
量为2.93%。
2.2树头发氨基酸含量
图1是氨基酸标准样品图,图2是树头发的氨基酸
色谱图,氨基酸的含量结果见表2。
Asp 14.57 Glu 13.39
Arg 14.44 Ser 20.97
Gly 40.38 His 6.37
Pro 12.29 ﹡Ala 17.55
﹡Ile 6.49 Tyr 0.066
﹡Leu 10.03 ﹡Met 0.007
﹡Val 8.39 ﹡Phe 8.72
﹡Lys 0.039 ﹡Thr 5.95
总氨基酸含量(μg/ mg) 179.652
总必需氨基酸(μg/ mg) 63.546
必需氨基酸占总氨基酸(%) 35.37
表2 树头发样品中氨基酸的含量(μg/mg)
Table 2 Amino acid content of sample Pterula umbriuella Bres(μ/mg)
注:﹡为必需氨基酸。
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6.00 8.0010. 0 12.0014.0016.0018.0020.0022.0024.00
时间(min)
0.10
0.09
0.08
0.07
0.06
0.05
0.04
0.03
0.02
0.01
0.00
A
U D
E
S
G
H
R/T
Y VM
C
F
K
7
.
3
9
3
1
0
.
1
7
1
1
0
.
7
6
9
1
1
.
5
9
4
1
2
.
4
4
8
1
4
.
8
6
5
1
6
.
5
5
6
1
7
.
8
4
8
1
8
.
4
2
4
1
9
.
3
3
9 2
2
.
1
7
3
2
3
.
7
6
0
2
4
.
2
8
6
6
.
4
5
2
图1 标准氨基酸HPLC图
Fig. 1 HPLC spectrum of standard amino acid
6.00 8.0010. 0 12.0014.0016.0018.0020.0022.0024.00
时间(min)
1.80
1.60
1.40
1.20
1.00
0.80
0.60
0.40
0.20
0.00
A
U
D
Y
1
9
.
3
3
9E
G
H
R/T
C L
F K
6
.
9
2
0
1
0
.
3
2
8
1
1
.
1
0
8
1
4
.
4
9
8
1
6
.
1
5
3
1
7
.
4
5
2
1
9
.
1
2
6
2
0
.
5
7
6
2
1
.
8
2
4
6
.
1
9
3
2
3
.
4
5
2V1
2
.
0
1
1
图2 树头发氨基酸HPLC图
Fig. 2 HPLC spectrum of amino acid from Pterula umbriuella Bres.
0 1 2 3 4 5 6 7 8 91011123 41516171819
时间(min)
140
120
100
80
60
40
20
0
m
V
2
.
4
6
5
2
.
7
4
0
5
.
2
8
2
3
.
3
3
2
7
.
7
7
3
9
.
9
0
7
1
4
.
3
6
5
1
5
.
8
2
3 1
7
.
6
6
5
1
2 3 4
5
图3 维生素混合标样HPLC图
Fig. 3 HPLC spectrum of standard vitamin
1.维生素C;2.烟酸;3.维生素B1;4.维生素B6;5.维生素B2
1.VC;2. nicotinic acid;3 VB1;4. VB6;5. VB2
图4 树头发维生素HPLC图
Fig. 4 HPLC spectrum of vitamin from Pterula umbriuella Bres.
0 2 4 6 8 10 12 14 16 18 20 22
时间(min)
600
500
400
300
200
100
0
m
V
1
7
.
8
2
3
1
4
.
3
9
8
7
.
4
4
0
1
1
.
7
4
8
6
.
1
5
2
2
.
9
3
7
3
.
6
9
8
2.3树头发粗纤维含量
实验中滤纸重(Wp)1.4134g,滤纸及粗纤维总重量
为(Wt)1.4895g,粗纤维重量(Wc)按Wc=Wt-Wp计算,
Wc=1.4895g-1.4134g=0.0761g,再换算成百分含量:
0.0761÷1.0082×100%=7.55%,得出树头发中粗纤维
含量为7.55%.
2.4树头发水溶性维生素的测定
维生素混合标样的HPLC图见图3,各种维生素标
样的线性回归方程见表3,树头发样品的HPLC图见图
4。比较图3和图4,可以看出,树头发中含有维生素
C、烟酸、维生素B1、维生素B2,不含有维生素B6。
根据线性回归方程分别求出树头发样品中维生素的含量
(mg/g):维生素C 1.484,烟酸1.096,维生素B1 .586,
维生素B2 0.096。
名称 线性回归方程
维生素C y=2390826.442x+1222447.914
烟酸 y=1336844.435x-152271.231
维生素B1 y=1607520.122x-767486.004
维生素B2 y=1440308.731x-59 75.680
维生素B6 y=379074.572x-1073247.057
表3 维生素标样的线性回归方程
Table 3 Linear equation of standard vitamin
3 讨 论
随着人们物质生活水平的提高,保健食品在人们的
消费中占的比重愈来愈大,提高生活质量和健康长寿成
了人们生活追求的主要目标。药(食)用真菌不仅是公认
的高蛋白、低脂肪、高维生素、高纤维的保健食品,而
且药用真菌还有较强的提高人体免疫功能、抗衰老及其
他许多保健功能。从上述成分测定的结果看,树头发
的蛋白中含有16种氨基酸,8种必需氨基酸,其氨基
酸的总含量达179.652μg/mg,总必需氨基酸含量为63.
546μg/mg,必需氨基酸含量占总含量的35.37%,可溶
性糖含量为2.93%,粗纤维含量为7.55%,维生素C
1.484 mg/g,烟酸1.096 mg/g,维生素B1 0.586 mg/g,
维生素B2 0.096 mg/g,因此,树头发这种药用真菌具
有一定的开发应用价值。
参考文献:
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