全 文 ：暋暋暋暋暋暋暋暋暋暋暋暋暋暋暋暋暋暋暋暋暋暋暋暋暋暋
暋
暋
暋
暋
暋
暋
暋
暋
暋
暋
暋
暋
暋
暋
暋暋暋暋暋暋暋暋暋暋暋暋暋暋暋暋暋暋暋暋暋暋暋暋暋
暋
暋
暋
暋
暋
暋
暋
暋
暋
暋
暋
暋
暋
暋
暋
收稿日期:2015灢09灢24
修回日期:2015飊11飊17
作者简介:黄敏桃(1987飊),女,硕士研究生,助教,主要从事中药
质量控制方面的研究。
*国家科技支撑计划项目(2011BAI01B04),广西科学研究与技
术开发计划(0992003A飊20)和广西科学研究与技术开发计划项目
(桂科重1298001飊2飊3)资助。
**通讯作者:黄庶识(1964飊),研究员,硕士生导师,主要从事中
药质量控制研究,E飊mail:hshushi@gxas.cn。
刘华钢(出生年飊),教授,博士生导师,主要从事中药质量控制研
究,E飊mail:lhg@gxfda.gov.cn。
广西科学GuangxiSciences2015,22(6):
网络优先数字出版时间:2014飊3飊19
网络优先数字出版地址:
苦丁茶有效成分与抗菌活性的相关性研究*
StudyontheCorrelationbetweenEffectiveComponents
ofIlexkudingchaC.J.TsengandAntibacterialActivity
黄敏桃1,2,吴尤娇2,蔡暋鹃3,黄云峰4,赖茂祥4,黄庶识2**,刘华钢5**
HUANGMin飊tao1,2,WU You飊jiao2,CAIJuan3,HUANGYun飊feng4,LAIMao飊
xiang4,HUANGShu飊shi2,LIUHua飊gang5
(1.广西生态工程职业技术学院,广西柳州暋545004;2.广西科学院生物物理实验室,广西南宁暋
530007;3.江西省赣州卫生学校,江西赣州暋341000;4.广西中医药研究院,广西南宁暋530022;
5.广西医科大学,广西南宁暋530021)
(1.GuangxiEco飊engineeringVocationalAndTechnicalColege,Liuzhou,Guangxi,545004,Chi灢
na;2.LabofBiophysics,GuangxiAcademyofSciences,Nanning,Guangxi,530007,China;3
HealthSchoolofGanzhouinJiangxiProvince,Ganzhou,Jiangxi,341000,China;4.Guangxiin灢
stituteofChineseMedicine& PharmaceuticalScience,Nanning,Guangxi,530022,China;5.
GuangxiMedicalUniversity,Nanning,Guangxi,530021,China)
摘要:暰目的暱研究不同产地及不同采收部位的苦丁茶抗菌活性与其5种成分之间的相关性。暰方法暱采用热水提
取苦丁茶;使用杯碟法测定苦丁茶水提物的抑菌活性;经高效液相色谱法同时测定苦丁茶中槲皮素、山萘酚、熊
果酸、齐墩果酸的含量,苯酚飊硫酸法测定其多糖含量,采用SPSS统计软件将测得的5种活性成分的含量与抑菌
活性进行双变量相关性研究。暰结果暱苦丁茶水提物抗菌活性强弱顺序:金黄色葡萄球菌>绿脓杆菌>大肠杆
菌,商品>嫩芽>成熟叶子。除山萘酚外,其余4种成分与3种细菌均呈显著性相关(R<0.01)。暰结论暱苦丁
茶水提物中多糖、槲皮素、熊果酸对抑菌活性有显著相关性。
关键词:苦丁茶暋不同产地暋商品暋抗菌活性暋成分暋相关性
中图分类号:暋暋文献标识码:A暋暋文章编号:1005灢9164(2015)06灢0000灢00
Abstract:暰Objective暱Researchingthecorrelationbetweenfiveelementsandantimicrobialactivi灢
tyfromIlexkudingchaC.J.Tsengindifferentlocalitiesandparts.暰Methods暱Usingcylinder
platemethodtodetermintheeffectofbacteriostasisfromIlexkudingchaC.J.Tsengafterex灢
tractionbyhotwater.Simultaneousdeterminationofcontentofquertetin,kaempferol,ursolic
acid,oleanolicacidwithHPLCmethodandphenylhydrate飊sulfuricacidmethodtodetermine
the content of polysaccharides.Then using
bivariate method ofcorrelation betweenfive
elementsandantimicrobialactivitybySPSS.
暰Results暱Theantibacterialactivitypeckingor灢
der:Staphylococcus aureus > Pseudomonas
aeruginosa>E.coliandgoods>buds>mature.
Besideskaempferol,therestofelementshavea
significantcorrelationwithantimicrobialactivity
(R<0.01).暰Conclusion暱Thereisasignificant
correlationbetweenquertetin,kaempferol,ursol灢
icacid,oleanolicacidandantimicrobialactivity.
Keywords:IlexkudingchaC.J.Tseng,different
localities,goods,antimicrobial activity,ele灢
1广西科学暋2015年12月暋第22卷第6期
DOI：10.13656/j.cnki.gxkx.20160106.004 网络出版时间：2016-01-06 10:10:40
网络出版地址：http://www.cnki.net/kcms/detail/45.1206.G3.20160106.1010.008.html
ments,correlation
0暋引言
暋暋暰研究意义暱近年来,由于具有极佳的药用功效和
较高的饮用价值,苦丁茶成为仅次于茶叶在我国广泛
应用的代茶饮品。《中华本草》上记载,苦丁茶冬青
(IlexkudingchaC.J.Tseng)属于正品苦丁茶的一
种。暰前人研究进展暱苦丁茶含有多糖类、三萜类、黄
酮类、皂苷类等多种成分而被广泛应用[1]。研究表
明[2~8],苦丁茶水提液能够促进脑循环、调整脑血管
功能,具有降血压、降血脂以及抗炎抗菌等作用,并在
临床上得到验证。暰本研究切入点暱以不同产地及不
同采摘部位的苦丁茶叶子为研究对象,对其进行体外
抑菌研究,与所含主要活性成分黄酮类、三萜类等含
量相比较,建立相关性模型。暰拟解决的关键问题暱优
选出最佳采摘时期与采摘部位,为苦丁茶商品工业化
采摘提供参考。
1暋材料与方法
1.1暋样品
暋暋槲皮素(批号:100081飊200406),山奈素(批号:
110861飊200405),熊果酸(批号:110742飊200518),齐
墩果酸(批号:110709飊200505)均购于中国药品生物
制品检定所;
暋暋 大肠杆菌 (ATCC44102),金黄色葡萄球菌
(ATCC26003),绿脓杆菌(ATCC27583)购自美国模
式培养物集存库(AmericanTypeCultureColec灢
tion);
暋暋不同产地样品:2011年7月至2012年8月采摘
自不同产地的各种栽培及野生苦丁茶见表1,经鉴定
为冬青科冬青属苦丁茶冬青(IlexkudingchaC.J.
Tseng),采回后晾干,粉碎,备用。
表1暋苦丁茶不同产地样品
Table1暋IlexkudingchaC.J.Tsengsamplesfromdifferentlocalities
No. 产地Locality
采 集 时 间
Time
备注
Remarks No.
产地
Locality
采集时间
Time
备注
Remarks
1
广西天等县都康乡
Dukangvilage,Tiandeng
country,Guangxiprov灢
ince
2011.07.
12
栽培,成熟叶
Cultivation, old
leaves
25
广东英德市新联村1
Xinlian vilage,Yingde
country, Guangdong
province
2012.02.
12
栽培,成熟叶
Cultivation, old
leaves
2
广西天等天茗茶厂
TeafactoryofTianDeng
country,Guangxiprov灢
ince
2011.07.
13
栽培,嫩芽
Cultivation,bur灢
geon
26
广东英德市新联村2
Xinlian vilage,Yingde
country, Guangdong
province
2012.02.
12
栽培,成熟叶
Cultivation, old
leaves
3
广西天等县仕民村
Shiminvilage,Tiandeng
country,Guangxiprov灢
ince
2012.03.
28
栽培,嫩芽
(Cultivation,bur灢
geon
27
广东英德市新联村3
Xinlian vilage,Yingde
country, Guangdong
province
2012.02.
12
栽培,成熟叶
Cultivation, old
leaves
4
广西武鸣罗波镇1
Luobo vilage,Wuming
country,Guangxiprov灢
ince
2012.03.
29
栽培,成熟叶
Cultivation, Old
leaves
28
广东英德市新联村4
Xinlian vilage,Yingde
country, Guangdong
province
2012.02.
12
栽培,成熟叶
Cultivation, old
leaves
5
广西武鸣罗波镇2
Luobo vilage,Wuming
country,Guangxiprov灢
ince
2011.12.
21
野生,成熟叶
Wild,oldleaves 29
广东梅州大麻镇1
Dama vilage,Meizhou
country, Guangdong
province
2012.02.
10
栽培,成熟叶
Cultivation, old
leaves
6
广西武鸣罗波镇3
Luobo vilage,Wuming
country,Guangxiprov灢
ince
2011.12.
21
野生,成熟叶
Wild,oldleaves 30
广东梅州大麻镇2
Dama vilage,Meizhou
country, Guangdong
province
2012.02.
10
栽培,成熟叶
Cultivation, old
leaves
7
广西上林县北梁村
Beiliangvilage,Shanglin
country,Guangxiprov灢
ince
2011.12.
22
野生,成熟叶
Wild,oldleaves 31
广东梅州大麻镇3
Dama vilage,Meizhou
country, Guangdong
province
2012.02.
10
栽培,成熟叶
Cultivation, old
leaves
8
广西上林县排岜村
Paiyi vilage,Shanglin
country,Guangxiprov灢
ince
2011.12.
22
野生,成熟叶
Wild,oldleaves 32
广东梅州大麻镇4
Dama vilage,Meizhou
country, Guangdong
province
2012.02.
10
栽培,成熟叶
Cultivation, old
leaves
9
广西上林县寨鹿村
Zailu vilage,Shanglin
country,Guangxiprov灢
ince
2011.12.
24
栽培,成熟叶
Cultivation, old
leaves
33
广东梅州大麻镇5
Dama vilage,Meizhou
country, Guangdong
province
2012.02.
10
栽培,成熟叶
Cultivation, old
leaves
2 GuangxiSciences,Vol灡22No灡6,December2015
No. 产地Locality
采 集 时 间
Time
备注
Remarks No.
产地
Locality
采集时间
Time
备注
Remarks
10
广西大新苦丁村1
Kuding vilage, Daxin
country,Guangxiprov灢
ince
2011.07.
13
栽培,嫩芽
Cultivation,bur灢
geon
34
广东梅州大麻镇
Dama vilage,Meizhou
country, Guangdong
province
2012.02.
10
商品,嫩芽
Merchandise,bur灢
geon
11
广西大新苦丁村2
Kuding vilage, Daxin
country,Guangxiprov灢
ince
2011.07.
13
栽培,成熟叶
Cultivation, old
leaves
35
广东梅州市银江镇
Yinjiangvilage,Meizhou
country, Guangdong
province
2012.02.
10
栽培,成熟叶
Cultivation, old
leaves
12
广西大新苦丁村3
Kuding vilage, Daxin
country,Guangxiprov灢
ince
2012.03.
29
栽培,成熟叶
Cultivation, old
leaves
36
广东清远市石谭镇1
Shitanvilage,Qingyuan
country, Guangdong
province
2012.02.
11
野生,成熟叶
Wild,oldleaves
13
广西大新苦丁村4
Kuding vilage, Daxin
country,Guangxiprov灢
ince
2011.12.
21
栽培,成熟叶
Cultivation, old
leaves
37
广东清远市石谭镇2
Shitanvilage,Qingyuan
country, Guangdong
province
2012.02.
11
野生,成熟叶
Wild,oldleaves
14
广西马山古零镇1
Guling vilage,Mashan
country,Guangxiprov灢
ince
2011.12.
22
野生,成熟叶
Wild,oldleaves 38
广东清远市石谭镇
Shitanvilage,Qingyuan
country, Guangdong
province
2012.02.
11
栽培,成熟叶
Cultivation, old
leaves
15
广西马山古零镇2
Guling vilage,Mashan
country,Guangxiprov灢
ince
2011.12.
22
栽培,成熟叶
Cultivation, old
leaves
39
海南五指山水满乡
Shuimanvilage,Wuzhis灢
han country, Hainan
province
2012.08.
26
栽培,成熟叶
Cultivation, old
leaves
16
广西马山古零镇
Guling vilage,Mashan
country,Guangxiprov灢
ince
2011.12.
22
商品,嫩芽
Merchandise,bur灢
geon
40
海南五指山畅好乡1
Shuimanvilage,Wuzhis灢
han country, Hainan
province
2012.08.
26
栽培,成熟叶
Cultivation, old
leaves
17
广西马山里民村
Limin vilage,Mashan
country,Guangxiprov灢
ince
2011.12.
23
野生,成熟叶
Wild,oldleaves 41
海南五指山畅好乡2
Shuimanvilage,Wuzhis灢
han country, Hainan
province
2012.08.
26
栽培,成熟叶
Cultivation, old
leaves
18
广西崇左龙州县1
Longzhouvilage,Chong灢
zuo country, Guangxi
province
2012.03.
13
栽培,成熟叶
Cultivation, old
leaves
42
海南保亭茶厂医院
Tea factory hospital,
Baotingcountry,Hainan
province
2012.08.
25
栽培,成熟叶
Cultivation, old
leaves
19
广西崇左龙州县2
Longzhouvilage,Chong灢
zuo country, Guangxi
province
2012.03.
13
栽培,成熟叶
Cultivation, old
leaves
43
海南保亭县番奋村1
Fanyu vilage,Baoting
country,Hainanprovince
2012.08.
25
栽培,成熟叶
Cultivation, old
leaves
20
广西崇左龙州县3
Longzhouvilage,Chong灢
zuo country, Guangxi
province
2012.03.
13
栽培,成熟叶
Cultivation, old
leaves
44
海南保亭县番奋村2
Fanyu vilage,Baoting
country,Hainanprovince
2012.08.
25
栽培,成熟叶
Cultivation, old
leaves
21
广西崇左龙州县4
Longzhouvilage,Chong灢
zuo country, Guangxi
province
2012.03.
13
栽培,成熟叶
Cultivation, old
leaves
45
海南海口阜龙乡
Bulong vilage,Haikou
country,Hainanprovince
2012.08.
27
野生,成熟叶
Wild,oldleaves
22
广西宾阳县平安村
Pingan vilage,Binyang
country,Guangxiprov灢
ince
2011.12.
23
野生,成熟叶
Wild,oldleaves 46
海南海口打安乡
Daan vilage, Haikou
country,Hainanprovince
2012.08.
27
野生,成熟叶
Wild,oldleaves
23
广西宾阳县贵龙村
Guilongvilage,Binyang
country,Guangxiprov灢
ince
2011.12.
24
野生,成熟叶
Wild,oldleaves 47
海南海口青松乡1
Qingshongvilage,Haik灢
oucountry,Hainanprov灢
ince
2012.08.
27
野生,成熟叶
Wild,oldleaves
24
广西宾阳县贵龙村2
Guilongvilage,Binyang
country,Guangxiprov灢
ince
2011.12.
24
野生,成熟叶
Wild,oldleaves 48
海南海口青松乡2
Qingshongvilage,Haik灢
oucountry,Hainanprov灢
ince
2012.08.
27
野生,成熟叶
Wild,oldleaves
49
海南海口青松乡3
Qingshongvilage,Haik灢
oucountry,Hainanprov灢
ince
2012.08.
27
野生,成熟叶
Wild,oldleaves
注:嫩芽为新长出的叶子,成熟叶为嫩叶之外的叶子。
Note:Bud暞snewleaf,OldleavesarealoftheBud.
3广西科学暋2015年12月暋第22卷第6期
1.2暋试剂
暋暋浓硫酸(廉江市爱廉化试剂有限公司),分析纯;
苯酚(天津市凯通化学试剂有限公司),分析纯;葡萄
糖(国药集团化学试剂有限公司),分析纯;超纯水(本
实验室自制);甲醇(Fisher公司),色谱纯;乙腈
(Fisher公司),色谱纯;MH琼脂培养基(广东环凯公
司);MH肉汤(广东环凯公司);营养肉汤(广东环凯
公司);磷酸(天津科密欧化学试剂),色谱纯。
1.3暋仪器
暋暋BS224S型电子天平(北京赛多利斯仪器系统有
限公司);戴安U3000高效液相仪(包括四元泵、自动
进样器、紫外可见检测器、柱温箱、变色龙工作站);
AgilentHC飊C18(5毺m,4.6mm暳250mm)柱;HH飊
8型数显恒温水浴锅(国华电器有限公司);TU飊1901
型双光束紫外可见分光光度计(北京普析通用仪器有
限责任公司);OKP飊S010型实验室超纯水仪(上海涞
科实业发展有限公司);RE飊52AA型旋转蒸发仪(上
海亚荣生化仪器厂);SHB飊B型循环水式真空泵(郑
州长城科工贸有限公司);
1.4暋方法
1.4.1暋苦丁茶水提物的提取
暋暋参考文献[9],称取苦丁茶粉末各5g,加入300
mL超纯水,在98曟下回流提取2.15h,重复提取3
次,趁热过滤,合并滤液浓缩,水定容至10mL容量
瓶中,4曟下保存备用。
1.4.2暋杯碟法体外抑菌研究
暋 参考文献[10],采用杯碟法测定苦丁茶水提物对
大肠杆菌、金黄色葡萄球菌及绿脓杆菌的抑菌活性,
每份平行3个牛津杯,得到其抑菌圈,结果取平均值。
1.4.3暋5种活性成分的测定
1.4.3.1暋HPLC法测定槲皮素、山萘酚含量
暋暋进样前处理:将甲醇飊苦丁茶水提物(0.6暶0.4,
V暶V)超声萃取1h,离心除去沉淀;加入0.25mL
25% HCl溶液后80曟水浴酸化1h,离心除去沉淀,
0.22毺m微孔滤膜过滤,备用。含量测定采用 Agi灢
lentHC飊C18,以甲醇飊0.03%磷酸水(70暶30,V暶V)
为流动相,检测波长370nm,流速0.6mL/min,柱温
35曟,进样量10毺L。
1.4.3.2暋HPLC法测定熊果酸、齐墩果酸含量
暋暋进样前处理:将甲醇飊苦丁茶水提物(0.7暶0.3,
V暶V)超声萃取1h,离心除去沉淀,0.22毺m微孔滤
膜过滤,备用。含量测定采用AgilentHC飊C18柱,以
甲醇-0.03%磷酸水(90暶10,V暶V)为流动相,检
测波长220nm,流速0.5mL/min,柱温35曟,进样
量10毺L。
1.4.3.3暋苯酚飊硫酸法测定多糖含量
暋暋采用参考文献[11]的方法,将苦丁茶水提物稀释
至一定的倍数,利用水提物中的多糖与硫酸、苯酚的
显色反应,采用双光束紫外可见分光光度计检测其吸
光度,代入葡萄糖标准曲线中,换算出多糖含量。
1.4.4暋线性考察
1.4.4.1暋槲皮素、山萘酚线性考察
暋暋精密称取槲皮素3.25mg,甲醇定容至100mL
容量瓶中;山萘酚4.7mg,甲醇定容至10mL容量
瓶中,分别吸取适量溶液,甲醇定容至10mL,得到浓
度依次为:(槲皮素)0.401毺g/mL、1.204毺g/mL、
3灡611毺g/mL、10.833毺g/mL、32.5毺g/mL;(山萘
酚)0.02937mg/mL、0.05875mg/mL、0.1175mg/
mL、0.235mg/mL、0.47mg/mL。0.22毺m滤膜过
滤后进样,得到相应的标准曲线,根据标准曲线算出
样品中槲皮素和山萘酚的浓度。
1.4.4.2暋熊果酸、齐墩果酸线性考察
暋暋精密称取熊果酸3.69mg、齐墩果酸4.5mg,甲
醇分别定容至100mL容量瓶中,分别吸取适量溶
液,甲醇定容至10mL,得到浓度依次为:(熊果酸)
0灡452毺g/mL、1.367毺g/mL、4.1毺g/mL、12.3毺g/
mL、36.9毺g/mL;(齐墩果酸)0.557毺g/mL、1.67
毺g/mL、5毺g/mL、15毺g/mL、45毺g/mL。0.22毺m
滤膜过滤后进样,得到相应的标准曲线,根据标准曲
线算出样品中熊果酸和齐墩果酸的浓度。
1.4.4.3暋多糖线性考察
暋暋精密称取无水葡萄糖20.03mg,蒸馏水定容至
100mL,再精密吸取10.00mL定容至50mL容量
瓶中,得到40.06毺g/mL的葡萄糖标准溶液。吸取
0.4mL,0.6mL,0.8mL,1.0mL,1.2mL,1.4
mL,1.6mL,1.8mL于试管中,并用水补足至2.0
mL,分别加入1mL6%苯酚溶液及5.0mL浓硫酸,
待各管加完后摇匀,室温静置30min,482nm 测吸
光度,再精密吸取2.0mL蒸馏水,同法操作,作空白
对照。以吸光度为纵坐标(y),葡萄糖浓度为横坐
标(x),绘制标准曲线,根据标准曲线换算出样品中
多糖的浓度。
1.4.5暋样品中槲皮素、山萘酚、熊果酸、齐墩果酸及
多糖含量计算
暋暋浓度换算公式如下:
暋暋C=C1暳NC2
,
式中,C:样品中各成分的含量,毺g/g;C1:已稀释样
品中各成分浓度,毺g/mL;N:样品稀释倍数;C2:样
品生药浓度,g/mL。
4 GuangxiSciences,Vol灡22No灡6,December2015
2暋结果与分析
2.1暋不同产地体外抑菌结果
暋暋如表2所示,所研究地区的苦丁茶对金黄色葡萄
球菌作用最强,大肠杆菌最弱;广西产地中属大新县
样品抗菌效果最好,其次为马山、崇左;广东产地中,
清远市样品比其他采集点抗菌活性相对较强;海南产
地抗菌活性均很弱。可能原因是海南气温相对较高,
活性成分消耗过多,而广西、广东气候温和,适宜苦丁
茶合成有效成分。加工品与未加工品抗菌活性比较
中,同一来源的14号、15号、16号进行对比,16号的
加工品抗菌活性明显比未加工的药材高出一倍;来自
广东德州的34号商品与29、30号未加工品比较,加
工品抗菌活性较强。商品是采摘嫩芽并经过一定的
工艺加工而成的,抗菌结果表明,传统加工商品茶叶
抗菌活性最强,具有一定的传承意义。
表2暋不同产地苦丁茶水提物对3种菌的抑菌圈直径
Table2暋Thediameteroftheinhibitionzoneofsamples
NO.
抑菌圈直径Diameter(mm)
E.col S.aureus P.aeruginosa
NO.
抑菌圈直径Diameter(mm)
E.col S.aureus P.aeruginosa
1 13.23暲1.12 32.15暲1.70 11.41暲1.63 25 11.02暲1.80 28.99暲1.76 14.29暲1.22
2 12.62暲2.34 25.22暲2.35 7.2暲1.75 26 14.23暲1.66 31.16暲1.44 15.20暲2.54
3 19.30暲2.47 45.28暲1.75 31.03暲2.69 27 22.90暲2.10 38.21暲1.72 23.68暲1.46
4 14.69暲3.29 39.71暲1.01 23.71暲1.20 28 10.00暲1.78 21.12暲2.14 6.00暲1.49
5 14.46暲2.06 36.50暲1.19 22.32暲2.86 29 10.36暲3.72 29.41暲0.86 14.39暲1.24
6 13.85暲1.46 33.21暲2.08 19.91暲0.43 30 12.44暲2.23 30.46暲0.21 13.22暲2.30
7 12.32暲1.28 26.75暲3.04 7.38暲1.99 31 19.41暲2.75 32.71暲1.31 11.10暲2.47
8 13.70暲1.03 25.29暲1.14 13.73暲2.38 32 15.19暲1.35 32.5暲1.01 16.28暲1.80
9 17.22暲1.40 30.27暲1.26 11.4暲1.66 33 16.86暲2.03 27.87暲1.58 7.18暲1.46
10 23.80暲1.87 29.88暲2.97 16.73暲2.61 34 28.07暲2.07 45.90暲0.99 26.17暲1.55
11 22.62暲2.30 23.72暲1.46 12.95暲4.54 35 21.70暲3.68 33.79暲2.31 20.02暲1.72
12 24.27暲1.13 43.86暲1.41 25.95暲1.17 36 27.86暲1.41 42.50暲2.34 21.85暲2.62
13 8.01暲1.79 22.75暲2.16 0.00暲0.00 37 14.26暲2.83 34.53暲2.89 15.51暲1.77
14 13.23暲1.59 27.76暲1.37 16.02暲1.28 38 17.47暲2.10 36.12暲2.33 16.55暲1.43
15 17.06暲2.17 33.05暲0.52 16.67暲3.25 39 10.40暲1.80 32.62暲2.51 18.92暲1.35
16 25.16暲1.66 41.07暲2.04 24.81暲2.11 40 16.23暲1.87 34.80暲1.96 20.67暲1.30
17 22.24暲1.99 31.22暲2.83 11.76暲1.48 41 15.48暲1.75 28.57暲1.61 23.54暲1.88
18 11.58暲1.47 22.79暲2.00 8.01暲1.62 42 7.80暲2.44 32.39暲3.25 17.90暲1.49
19 17.06暲2.11 34.99暲1.17 17.55暲1.9 43 11.50暲2.14 39.25暲1.76 17.31暲1.41
20 13.39暲2.26 30.68暲3.55 13.60暲1.12 44 12.82暲2.72 31.04暲2.78 21.41暲1.91
21 20.08暲1.35 36.64暲3.03 24.65暲1.62 45 9.36暲2.25 16.87暲2.43 0.00暲0.00
22 14.06暲2.47 27.09暲2.26 15.82暲2.09 46 0.00暲0.00 33.68暲2.36 23.09暲1.76
23 17.10暲2.62 33.85暲1.31 14.70暲1.25 47 16.08暲2.26 32.13暲2.16 16.08暲1.47
24 11.31暲1.48 25.06暲2.42 14.31暲3.79 48 14.41暲1.20 32.23暲0.67 16.56暲1.38
49 14.19暲1.61 22.12暲2.74 6.00暲0.00
注:表中产地与表1产地相对应。
Note:Origincorrespondtotable1.
2.2暋活性成分的含量
暋暋 槲皮素和山萘酚的回归方程分别为:Y =
0灡4776X +1.410,R2 =0.9996;Y =0.9249X +
851灡9,R2=0.9992;熊果酸和齐墩果酸的回归方程
分别为:Y=0.0167X+0.071,R2=0.9994;Y=0.
0926X+0灡0585,R2=0.9995;多糖回归方程为:Y=
0灡01363X+0.01398,R2=0.9979,将所测得的含量
换算成质量分数,结果如表3。
表3暋不同产地五种活性成分的含量
Table3暋Thecontentoffiveactiveingredientsindifferentlocalities
No. 槲皮素Quertetin(毺g/g)
山萘酚
Kaempferol(毺g/g)
熊果酸
Ursolicacid(毺g/g)
齐墩果酸
Oleanolicacid(毺g/g)
多糖
Polysaccharides(mg/g)
1 456.56暲5.27 1637.19暲11.6 173.67暲5.21 1.50暲0.11 50.94暲6.78
2 191.88暲1.54 982.18暲9.89 188.33暲6.52 8.33暲0.69 61.33暲9.52
3 282.19暲0.52 563.75暲7.66 17.33暲2.54 0.081暲0.00 93.62暲3.41
4 528.44暲1.08 2117.18暲22.7 184.33暲8.92 2.43暲0.17 47.93暲5.23
5 51.25暲3.47 400.00暲20.63 84.67暲5.53 0.069暲0.00 61.55暲4.99
5广西科学暋2015年12月暋第22卷第6期
No. 槲皮素Quertetin(毺g/g)
山萘酚
Kaempferol(毺g/g)
熊果酸
Ursolicacid(毺g/g)
齐墩果酸
Oleanolicacid(毺g/g)
多糖
Polysaccharides(mg/g)
6 15.00暲1.08 162.81暲14.23 80.33暲7.39 0.050暲0.00 47.01暲5.53
7 65.31暲4.78 462.19暲15.62 163.0暲14.04 0.212暲0.01 45.02暲8.92
8 91.56暲2.73 248.13暲7.78 162.67暲10.18 0.18暲0.03 60.28暲7.78
9 37.81暲4.50 283.75暲1.92 386.0暲10.16 78.00暲8.49 54.61暲8.05
10 325.31暲5.12 520.63暲14.85 297.33暲9.82 57.67暲7.17 86.49暲1.84
11 115.00暲4.37 311.88暲4.47 468.0暲13.11 78.33暲5.96 99.60暲2.75
12 956.25暲10.3 2285.0暲10.89 287.0暲17.49 28.33暲1.41 79.22暲10.11
13 16.88暲2.68 169.69暲4.00 272.33暲9.75 27.67暲2.34 63.79暲8.45
14 35.31暲1.35 72.81暲4.32 139.0暲8.86 71.33暲4.55 53.65暲12.11
15 91.88暲0.49 361.25暲6.27 174.0暲13.35 0.27暲0.06 57.66暲4.98
16 1366.25暲5.17 250.63暲6.08 291.67暲11.74 58.00暲9.36 132.80暲2.94
17 54.69暲0.9 174.69暲10.24 213.33暲21.42 18.33暲1.98 53.70暲4.54
18 25.94暲2.57 328.13暲5.56 150.0暲6.03 5.00暲0.37 53.94暲10.01
19 13.75暲1.73 177.50暲4.24 35.67暲5.19 0.061暲0.00 45.67暲5.68
20 6.56暲0.19 75.31暲1.39 201.0暲18.19 4.33暲0.19 49.46暲3.95
21 8.75暲2.01 253.13暲5.17 53.00暲8.24 0.12暲0.00 54.27暲4.49
22 30暲3.00 113.75暲5.96 111.67暲11.89 0.16暲0.001 68.13暲8.64
23 18.44暲1.18 183.13暲2.12 125.0暲7.93 0.18暲0.003 51.58暲9.42
24 37.19暲3.23 268.44暲1.80 451.67暲12.73 74.67暲7.88 75.81暲6.23
25 408.44暲5.15 1683.44暲12.4 105.33暲13.73 0.112暲0.001 55.44暲7.13
26 134.38暲2.27 745.31暲1.71 215.33暲16.78 2.53暲0.09 39.23暲6.10
27 1103.75暲4.06 3931.87暲7.11 178.67暲12.52 0.23暲0.02 63.12暲5.22
28 78.75暲7.39 206.88暲5.65 121.67暲6.45 0.26暲0.06 55.78暲10.64
29 164.69暲4.19 709.69暲5.42 606.33暲20.16 92.33暲10.03 59.73暲8.93
30 70.94暲2.60 258.44暲10.95 606.0暲18.82 113.67暲9.52 38.35暲2.78
31 28.44暲1.54 705.94暲8.66 396.33暲16.31 42.67暲4.50 48.67暲5.66
32 126.88暲13.07 713.75暲21.67 263.33暲3.99 13.33暲2.76 61.62暲10.34
33 130.93暲4.01 780.63暲11.98 457.67暲10.95 55.67暲6.66 22.30暲11.04
34 959.06暲4.33 313.13暲7.14 1363.67暲15.64 444.33暲13.21 110.91暲3.22
35 483.13暲6.59 1276.56暲5.34 246.33暲9.37 23.67暲2.24 44.99暲8.43
36 575.94暲13.89 3200.63暲15.8 420.0暲14.22 36.33暲3.42 68.49暲8.53
37 2.50暲0.11 84.69暲1.55 112.33暲5.74 0.15暲0.01 50.53暲4.69
38 48.13暲1.02 294.06暲2.04 226.0暲10.04 8.67暲1.09 52.27暲13.04
39 94.06暲1.12 490.0暲9.90 191.33暲6.39 5.67暲0.75 45.26暲8.05
40 31.56暲2.52 143.44暲9.32 334.67暲10.29 27.00暲2.67 49.36暲6.94
41 6.56暲0.55 93.43暲7.37 328.0暲14.23 32.33暲6.87 44.78暲8.85
42 83.75暲1.64 348.12暲12.35 365.0暲9.84 35.00暲1.05 66.17暲9.51
43 28.75暲0.61 108.13暲3.88 474.0暲13.36 100.0暲11.51 46.62暲10.65
44 20.00暲1.21 170.0暲2.08 521.33暲15.71 92.33暲7.42 60.52暲12.07
45 0.281暲0.08 158.75暲2.73 86.00暲8.17 0.67暲0.05 28.64暲9.07
46 0.281暲0.08 11.25暲0.21 62.33暲7.39 0.119暲0.02 25.87暲4.52
47 15.31暲2.91 57.81暲0.75 445.33暲13.55 62.00暲5.83 53.94暲8.63
48 5.94暲3.12 36.56暲1.10 87.33暲7.68 0.132暲0.001 51.51暲6.99
49 5.63暲1.19 88.75暲1.63 199.0暲8.59 0.247暲0.01 21.29暲5.75
暋暋从表3中看出,不同的采摘时间,其成分含量均
不相同,以广西天等为例,3月份样品中多糖和槲皮
素的含量较高,而7月份样品中熊果酸与齐墩果酸的
含量较高。从整体地域来分类,广西样品的多糖含量
大于广东产地与海南产地;其他成分含量则是广东样
品较高。同一产地的不同采集点也不相同,在广西产
地中,大新采集点的多糖、槲皮素、熊果酸和齐墩果酸
的含量均比其他采集点高。不同部位中,商品的多
糖、槲皮素、熊果酸的含量远远大于未加工的嫩叶及
成熟叶,说明加工后的嫩芽商品具有更高的药用
价值。
2.3暋相关性
暋暋采用SPSS17.0软件将不同产地苦丁茶样品对3
种细菌的抗菌活性与多糖、槲皮素、山萘酚、熊果酸及
齐墩果酸进行双变量相关分析,结果如表4。
6 GuangxiSciences,Vol灡22No灡6,December2015
表4暋不同产地苦丁茶活性成分含量与其抑菌作用的相关性
Table4暋Thecorrelationbetweenthecontentoffiveactivein灢
gredientandbacteriostaticeffectindifferentlocalities
相关系数
Correlation
大肠杆菌
抑菌圈直径
E.col/
diameter
(mm)
金黄色葡萄球
菌抑菌圈直径
S.aureus
/diameter
(mm)
绿脓杆菌
抑菌圈直径
P.aeruginosa
/diameter
(mm)
多糖(Polysaccharides) 0.857++ 0.688++ 0.847++
槲皮素(Quertetin) 0.653++ 0.897++ 0.633++
山萘酚(Kaempferol) 0.089 0.324 0.075
熊果酸(Ursolicacid) 0.899++ 0.967++ 0.858++
齐墩果酸(Oleanolicacid)0.664++ 0.922++ 0.629++
注:+,在0.05水平上显著相关;++,在0.01水平上显著相关。
Note:+,Significantatthe0.05level;++,Significantatthe0.01
level.
暋暋结果显示,多糖、槲皮素、熊果酸和齐墩果酸对大
肠杆菌、金黄色葡萄球菌、绿脓杆菌均呈显著性相关,
山萘酚抗菌活性不显著。其中,对大肠杆菌的抑菌活
性强弱顺序为:熊果酸>多糖>齐墩果酸>槲皮素;
对金黄色葡萄球菌抑菌强弱为:熊果酸>齐墩果酸>
槲皮素>多糖>山萘酚;对绿脓杆菌抑菌强弱为:熊
果酸>多糖>槲皮素>齐墩果酸。
3暋结论
暋暋槲皮素、苦丁茶多糖、熊果酸和齐墩果酸是苦丁
茶的活性成分,并对革兰氏阳性菌、革兰氏阴性菌具
有一定的抑菌作用,与文献中[12~14]单个成分抑菌结
果相一致。由于气候、地域、采摘时间、采摘部位、是
否加工等等原因,不同苦丁茶样品的抗菌药效与活性
成分含量均有一定的差异。
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(责任编辑:米慧芝)暋暋
8 GuangxiSciences,Vol灡22No灡6,December2015