全 文 ：HPLC法测定蜜柑草中柯里拉京的含量研究
龙梦林 ,曾振中
(娄底市中心医院 ,湖南　娄底　417000)
[摘要 ] 　目的:建立蜜柑草中柯里拉京的含量测定方法。方法:色谱柱为 kromasilC18柱;流动相为乙腈 -0.1%磷酸盐缓
冲液溶液(22：78);检测波长:220 nm;流速:1.0 ml· min-1。结果:柯里拉京线性范围为 0.025 ～ 0.15 mg· ml-1 , r=0.9996,
平均回收率为 99.01%, RSD%=1.27%。结论:本方法简便 、可靠 ,为蜜柑草的质量控制提供了快速 、准确的测定方法。
[关键词 ] 　蜜柑草;柯里拉京;含量测定;高效液相色谱法
[中图分类号 ] R927.2　[文献标识码 ] A　[文章编号 ] 1672-951X(2008)03-0075-02
DeterminationofCorilagininPhylanthusmatsumuraeHayataWithHPLC
LONGMeng-lin, ZENGZhen-zhong
LoudiCentralHospital, Loudi, Hunan, China, 417000
[ Abstract] 　Objective:ToestablishHPLCmethodforthedeterminationofcorilagininPhylanthusmatsumuraeHayata.Meth-
ods:HPLCmethodwasused, thechromatobarwaskromasilC
18
columnwithacetonitrile-0.l% phosphatebufer(22：78)asmobile
phaseat220 nmofdetectionwavelength.Theflowratewas1.0ml· min-1.Results:Thelinearrangeofcorilaginwas0.025 ～ 0.15
mg· ml-1 , r=0.9996, theaveragerecoverywas99.01% with1.27% ofRSD%.Conclusion:Themethodissimpleandreliable,
andcanprovidearapidandaccurateassaymethodforqualitycontrolofPhyllanthusmatsumuraeHayata.
[ Keywords] 　PhylanthusmatsumuraeHayata;Corilagin;Contentdetermination;HPLC
　　蜜柑草(PhyllanthusmatsumuraeHayata)为大戟科叶下
珠属植物 , 主要分布于我国长江以南各省 ,具有平肝清热 、利
水解毒之功效。 民间常用于治疗尿路感染 、肾炎水肿 、黄疸
肝炎 、肠炎等多种疾病。现代研究证明 , 蜜柑草具有一定的
抗癌疗效 , 且已证明抗癌活性成分主要是柯里拉京 [ 1 ～ 6] 。但
到目前为止 , 蜜柑草中柯里拉京的含量测定还未见有关报
道 , 本文采用 HPLC法测定蜜柑草中柯里拉京的含量 , 为该
药材的质量控制提供了快速 、准确的测定方法。
1　仪器与试药
1.1　仪器　日本岛津高效液相色谱仪。 (LC-10AT泵 ,
SPD-10A紫外检测器);N2000色谱工作站(浙江大学智能
信息研究);FA1104电子分析天平。
1.2　药品试剂　甲醇 、乙腈为色谱纯 ,其余试剂为分析纯。
样品采集于湖北 ,经湖南中医药大学周日宝教授鉴定为大戟
科植物蜜柑草(PhyllanthusmatsumuraeHayata)。柯里拉京
化学对照品(上海融禾医药科技发展有限公司 , 批号:2006 -
1303)
2　方法与结果
2.1　色谱条件 　色谱柱为 kromasilC18柱 (4.6 mm×
250mm, 5 μm);流动相:乙腈 -0.1 mol· L-1磷酸盐缓冲液
溶液(22：78);流速 1.0 ml· min-1;柱温:室温;检测波长
220nm;进样量 20 μl。 此条件下供试品中柯里拉京与其它
组分均能达到基线分离。 (见图 1、2)
75
第 14卷第 3期　　　　　　　　　　　　　　中　医　药　导　报　　　　　　　　　　2008年 3月
Vol.14　 No.3　　　　　　　　　　　　　　GuidingJournalofTCM　　　　　　　　　March.2008
DOI :10.13862/j.cnki.cn43-1446/r.2008.03.040
2.2　对照品溶液的制备　取柯里拉京对照品 2.5 mg, 精密
称定 , 置 10 ml量瓶中 , 加 50%甲醇溶解并稀释至刻度 ,制成
含柯里拉京 0.25mg· ml-1的对照品溶液。
2.3　供试品制备　将药材粉碎 , 过 20目筛 , 取生药粉末
1.5 g,精密称定 , 精密加入甲醇 50 ml, 称定重量 , 超声处理
30 min, 取出 ,放冷 , 再称定重量 ,用甲醇补足减失的重量 , 滤
过 , 滤液挥干 ,残渣加 0.05 mol· L-1氢氧化钠溶液 30 ml溶
解 , 用醋酸乙酯提取 2次 ,每次 30ml, 弃去醋酸乙酯液 , 氢氧
化钠溶液再以水饱和的正丁醇萃取 3次 , 每次 30 ml, 合并正
丁醇萃取液 , 再用正丁醇饱和的水液洗涤 2次 , 每次 20 ml,
弃去水液 , 正丁醇层蒸干 ,用甲醇溶解并稀释至 5 ml容量瓶
中 , 作为供试品溶液。
2.4　线性关系考察　将 0.25 mg· ml-1的对照品溶液稀释
成浓度为 0.025、 0.050、 0.075、 0.100、 0.125、 0.150 mg·
ml-1 , 进样 ,记录峰面积 , 以柯里拉京浓度为横坐标 , 色谱峰
面积为纵坐标 , 得回归方程为:Y=564421.75X-248513.47, r
=0.9996,说明柯里拉京在浓度为 0.025 ～ 0.150 mg· ml-1
之间呈良好的线性关系。
2.5　精密度试验　精密吸取柯里拉京对照品溶液 20 μl,按
上述色谱条件 , 平行测定 6次 , 记录峰面积。 结果 RSD%为
1.38%,说明其精密度良好。
2.6　重复性试验　同一批药材 , 取约 1.5 g, 共 6份 , 按上述
供试品制备法制备 , 分别按上述色谱条件测定 , 记录峰面积。
结果 RSD%为 1.23%, 说明其重现性良好。
2.7　稳定性试验　取同一供试品溶液 ,分别在 0, 1, 3, 5, 8 h
分别进样 20 μl, 按上述色谱条件测定 , 记录峰面积。 计算
RSD%为 1.42%。结果表明 ,供试品溶液在 8 h之内稳定。
2.8　加样回收率试验　取已知含量的蜜柑草药材粉碎 , 过
20目筛 , 精密称取 0.75 g, 分别加入一定量的柯里拉京对照
品 , 按上述供试品制备法制备成加样供试品溶液 , 再按上述
色谱条件测定。结果表明:本方法具有较好的回收率。 (见
表 1)
表 1　加样回收率试验结果　(n=3)
取样量
(g)
样品中的柯
里拉京含量
(mg)
加入柯里
拉京量
(mg)
测得柯里
拉京总量
(mg)
回收率
(%)
平均回收
率(%)
RSD
(%)
0.7514 0.1187 0.125 0.2415 98.24
0.7512 0.1187 0.125 0.2412 98.00
0.7436 0.1175 0.125 0.2455 102.40
99.01 1.27
0.7478 0.1182 0.125 0.2401 97.52
0.7512 0.1187 0.125 0.2414 98.16
0.7414 0.1171 0.125 0.2418 99.76
2.9　样品测定　取蜜柑草药材 , 按上述供试品制备法制备。
分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各 20 μl, 注入液相
色谱仪 , 按上述色谱条件测定 , 记录峰面积 , 以外标法计算样
品中柯里拉京的含量 。(见表 2)
3　讨　　论
本研究分别考察了几种不同提取方法:(1)水提取 -有
机溶剂提取法;(2)甲醇提取 -正丁醇提取法;(3)甲醇提
取 , 挥干后用氢氧化钠溶解 , 用醋酸乙酯提取去杂 , 再用正丁
醇提取。经比较 , 用方法(3)得到柯里拉京 , 其它成分干扰
小。
流动相比较了乙腈 -0.1%磷酸盐缓冲液溶液(12：
88), 乙腈 -0.l%磷酸盐缓冲液溶液(40：60), 乙腈 -0.1%
磷酸盐缓冲液溶液(22：78), 以乙腈 -0.1%磷酸盐缓冲液
溶液(22：78)系统对待测成分的分离效果较好。
表 2　样品含量测定结果　(n=5)
样品号 柯里拉京含量(%) RSD(%)
1 0.158 0.75
2 0.188 1.23
3 0.142 1.14
4 0.175 0.87
5 0.157 0.96
6 0.148 1.48
参考文献:
[ 1]陈玉武 , 任丽娟.蜜柑草抗癌有效成分研究Ⅰ .黄酮类成
分的分离与鉴定 [ J] .中草药 , 1997, 28(1):5-7
[ 2]陈玉武 , 任丽娟.蜜柑草抗癌有效成分研究Ⅱ.多酚类成
分的分离与鉴定 [ J] .中草药 , 1997, 28(4):198-202
[ 3]李华 , 孟岩.柯里拉京杀伤人喉癌 Hep-2细胞的体外实
验研究 [ J] .锦州医学院学报 , 2005, 26(4):22-24
[ 4]陆航 , 张志斌.柯里拉京对人胰腺癌 Bxpc-3细胞抑制作
用的初步研究 [ J] .2005, 26(3):25-27
[ 5]刘朝阳 , 王德昌.柯里拉京抗肿瘤和致突变作用实验研究
[ J] .2003, 10(5):469-472
[ 6]刘朝阳 , 陈玉武.柯里拉京抗肿瘤作用的研究 [ J] .2002,
29(5):356-358
(收稿日期:2007-10-25　编辑:朱民)
(上接第 64页)这也能在一定程度上减少静脉炎的发生
率。
参考文献:
[ 1]付春花 , 赵雁 , 于莹 , 等.静脉输入硫酸镁后预防诺维苯
所致静脉炎的研究 [ J] .中华护理杂志 , 2002, 37(11):816
-818
[ 2]傅春华.静脉输入硫酸镁预防诺维本所致静脉炎的研究
[ J] .中华护理杂志 , 2002, 37(11):816-818
[ 3]胡华莉 , 曹梅生.芦荟外敷预防化疗性静脉炎的临床研究
[ J] .护理学杂志 , 2006, 21(19):123
[ 4]李维礼.实用理疗学 [ M] .2版.北京:人民卫生出版社 ,
1991:114
(收稿日期:2007-10-17　编辑:朱民)
76
第 14卷第 3期　　　　　　　　　　　　　　中　医　药　导　报　　　　　　　　　　2008年 3月
Vol.14　 No.3　　　　　　　　　　　　　　GuidingJournalofTCM　　　　　　　　　March.2008