全 文 ：Studyonanti-hepatocarcinomaactivityofAiketeinjectioninvitroandvivo
MaXiuying, ZhaoYanyan, ZhouLiming＊
(DepartmentofPharmacology, WestChinaMedicalSchoolofPreclinicalandForensicMedicine, SichuanUniversity, Chengdu　610041)
　　 Objective:ToinvestigatetheinhibitoryefectofAiketeinjectiononhumanhepaticcancercellineSMMC-7721 andhepaticcancer
H22.Methods:MTTassayandgrowthcurveassaywereusedtoassesstheinhibitoryeffectofAiketeinjectiononproliferationofSMMC-
7721 celsaftertreatedfor48 hours.Hoechst33258 stainingwasusedtoobservecelapoptosis.HepaticcancerH22modelinmicewasper-
formedtostudyanti-hepatocarcinomaactivityofAiketeinjectioninvivo.Results:AftertreatedwithAiketeinjectionfor48hours, MTTassay
showedAiketeinjectioncaninhibittheproliferationofSMMC-7721 cellsandhaveobviousdose-efectrelationship.IC50 ofAiketeinjectionto
SMMC-7721cellswas2.325mg/L.Thedose-efectrelationshipandtime-effectrelationshipweredescribedingrowthcurve.Nuclearpyknosis
andchromatincondensationwhichwerethecharacteristicsofcellapoptosiswereobservedbyHoechst33258staining.Theexperimentinvivo
showedAiketeinjectionof0.5, 1, 2mg/kgiphadsignificantinhibitoryefectontumoranddose-relatedeffectinmicewithhepatocarcinoma.
Conclusions:AiketeinjectioncouldinhibitproliferationofSMMC-7721 cellsinvitroandthegrowthofhepaticcancerH22invivo.
　　 Keywords:Aiketeinjection;SMMC-7721;H22
竹节人参抗炎镇痛作用研究
吴　瑕 ,陈东辉 ,雷　玲 ,邓文龙
(四川省中药研究所 ,成都　610041)
　　摘　要　目的:研究竹节人参(Panaxjaponicus)的抗炎镇痛作用及其有效部位。方法:根据竹节人参中所含主要成分制备不
同试验样品 , 用醋酸扭体试验和热板法观察镇痛作用 , 用二甲苯致小鼠耳肿胀和醋酸致小鼠腹腔毛细血管通透性亢进试验观察抗
炎作用。结果:竹节人参能明显减少醋酸所致小鼠扭体次数 , 延长热板试验小鼠痛反应潜伏期 , 抑制二甲苯所致小鼠耳肿胀程度及
醋酸所致依文思兰从毛细血管向腹腔的渗出 ,上述作用的主要有效部位为总皂苷。结论:竹节人参具有明显的抗炎镇痛作用 , 其所
含总皂苷为其抗炎镇痛作用的主要有效部位。
　　关键词　竹节人参;总皂苷;抗炎;镇痛
　　竹节人参为五加科人参属植物 Panaxjaponicus的地下部
分 , 又名竹根七 、竹节七 , 为著名草药 , 民间医将其用治跌打损
伤 、腰膝疼痛 ,也作为滋补强壮药物。本文对其抗炎镇痛作用进
行了研究。
1　材料与方法
1.1 　试验药物　竹根七样品专人收集 , 经鉴定为正品 , 原药
材为地下部分之根与根茎。药材粉碎为粗粉 , 按下述工艺制备
不同的提取物样品:称取粗粉 ,适量水煎 3次 , 合并 , 滤清 , 分取
适量浓缩至按投料生药计算 2g/ml浓度 ,为水煎液;水煎滤液经
大孔吸附树脂吸附 , 水洗 ,合并流洗液 ,浓缩至适当浓度 , 分取适
量浓缩至按投料生药计算 2g/ml,是为流洗液;流洗液浓缩加乙
醇至含醇量 70%, 冰箱过夜 , 滤取沉淀 , 再用 70%乙醇适量洗
涤 , 干燥得醇沉物 , 临用配为按投料生药计算 2g/ml;树脂柱吸
附物用 70%乙醇洗脱 , 回收乙醇 , 干燥 , 得树脂吸附物 , 临用配
为 2g(生药)/ml。另取药材粗粉适量 , 70%乙醇回流提取 ,每次
1.5h, 连续 3次 , 回收乙醇 , 得醇提取物 , 临用配为 2g(生药)/
ml。
1.2　动物　昆明种小鼠 , SPF级 ,雌雄各半 , 体重 18 ～ 22g, 试
验用动物及饲料均由四川省中药研究所实验动物室提供 ,合格
证号为川实动管 100。
1.3　试剂　阿斯匹林 ,地塞米松 , 吗啡;醋酸 、依文思兰 , 市售。
2　方法与结果
2.1　对醋酸所致小鼠扭体反应的影响　小鼠 70只 , 雌雄各
半 ,随机分为 7组 , 分别灌胃药物或等量水 , 药后 1h, 各鼠腹腔
注射 0.7%HAC生理盐水溶液 0.2ml, 观察注射 HAC后 20min
内小鼠扭体反应的次数 ,结果见表 1。
　　表 1　竹根七不同提取物对醋酸所致小鼠扭体反应的影响( x±s)
组别 剂量(g/kg) 鼠数(只) 扭体反应次数(次)
对　照　 10 41.6±6.2
水煎液　 40 10 22.4±6.5＊＊
流洗液　 40 10 43.2±11.5
醇沉物　 40 10 39.6±9.2
吸附物　 40 10 23.8±7.2＊＊
醇提物　 40 10 18.9±4.5＊＊
阿斯匹林 0.25 10 19.6±8.2＊＊
　　与对照相比 ＊P<0.05, ＊＊ P<0.01(下同)
43中药药理与临床 2007;23(1)
　　由表 1结果可见 , 在竹根七不同提取物中 , 水煎液 、大孔树
脂吸附物及醇提物具有显著镇痛作用 ,且三者作用相近。
　　另有小鼠 80只 ,雌雄各半 , 随机分 8组 ,分别灌胃药液或等
容量水 , 药后 1h, 同上法观察小鼠扭体次数 ,结果见表 2。
　　表 2　竹根七吸附物镇痛作用的量效关系( x±s)
组别 剂量(g/kg) 鼠数(只) 扭体反应次数(次)
对　照　 10 48.6±7.2
吸附物　 5 10 40.5±4.4
吸附物　 10 10 32.5±5.3＊
吸附物　 20 10 27.1±7.8＊＊
吸附物　 40 10 21.2±6.8＊＊
醇提物　 10 10 30.6±6.8＊
醇提物　 20 10 25.5±6.5＊＊
阿斯匹林 0.25 10 20.8±6.2＊＊
　　由表 2可见 , 竹根七大孔树脂吸附物镇痛作用具有一定量-
效关系 , 10g(生药)/kg为有效剂量 ,醇提物作用相近。
　　再有小鼠 90只 ,雌雄各半 , 随机分 9组 ,灌胃药物或等容量
水每日 1次 , 分别连续 5、 3、1次 , 末次药后 1h, 同法观察小鼠对
腹腔注射醋酸的扭体反应情况 ,吗啡和阿斯匹林于测定前 1h给
药 1次 , 结果见表 3。
　　表 3　给药次数对竹节七镇痛作用的影响( x±s)
组别 剂量(g/kg· d) 鼠数(只) 扭体反应次数(次)
对　照　 10 38.9±6.8
吸附物　 20×1 10 25.2±6.2＊
吸附物　 20×3 10 22.6±7.2＊＊
吸附物　 20×5 10 18.4±6.2＊＊
醇提物　 20×1 10 25.3±7.6＊
醇提物　 20×3 10 20.9±5.6＊＊
醇提物　 20×5 10 17.4±4.8＊＊
阿斯匹林 0.25 10 21.5±5.6＊＊
吗　啡　 0.01 10 1.2±1.1＊＊
　　由表 3结果可见 , 竹根七吸附物及醇提物镇痛作用随给药
次数增加 ,作用有增强的趋势 ,但即使每日 1次连续给药 5天 ,
镇痛作用的增强也有一定限度。
2.2　对热板法试验小鼠痛阈的影响　按赵一法 [ 1]进行试验。
雌性小鼠于 60±0.5℃热板测定小鼠舔后爪反应的潜伏期 , 选
取于热板仪内不跳跃 、于 5 ～ 15″内出现反应的小鼠 60只随机分
6组 , 灌胃药物或等容水 , 药后 30′、 60′、90′、 120′将小鼠置热板
测定痛阈一次 ,超过 60″不反应者立刻取出 ,反应时间按 60″计 ,
结果见表 4。
　　表 4　 竹根七对热板试验小鼠舔足反应时间的影响( x±s, n=10)
组别 剂量(g/kg)
痛阈(s)
0 30′　 60′　 90′　 120′　
对　照 11.2±2.5 11.6±3.2 10.5±2.6 13.6±2.6 15.5±2.6
吸附物 10 12.6±1.6 13.6±4.2 15.1±3.3 16.2±3.5 15.5±2.8
吸附物 20 12.2±1.8 15.3±6.5 14.5±4.4 17.9±6.2 16.6±5.8
吸附物 40 11.3±2.2 18.5±4.5＊ 25.6±7.2＊＊ 28.6±9.2＊ 27.6±9.6＊
醇提物 20 10.9±1.6 19.2±8.5 21.2±6.1＊ 18.2±5.6 18.8±4.2
吗　啡 0.01 11.4±1.8 56.6±11.5＊＊ 60±0＊＊ 60±0＊＊ 54.3±15.5＊＊
　　由表 4可见 , 对于热板法试验 ,竹根七提取物仅于很大剂量
呈现一定的镇痛作用 ,醇提物与吸附物作用差别不大。
2.3　对二甲苯致小鼠耳廓肿胀的影响　小鼠 70只 , 雌雄各半 ,
随机分 7组 , 灌服药物或等容水后 1h, 于小鼠右耳用微量注射
器滴二甲苯 0.02ml并令二甲苯浸满鼠耳两面 , 40min后小鼠拉
颈处死 , 沿鼠耳根部基线用眼科剪剪下两耳 , 称取左 、右耳片重
量 , 以右耳与左耳重量差的 mg数表示炎症反应强度 , 结果见表
5。
　　表 5　竹根七对二甲苯所致小鼠耳廓肿胀的影响( x±s)
组别 剂量(g/kg) 鼠数(只) 肿胀程度(■mg)
对　照　 10 22.1±4.3
水煎液　 40 10 12.2±3.6＊＊
流洗液　 40 10 26.3±6.8
醇沉物　 40 10 23.5±3.6
吸附物　 40 10 13.2±3.2＊＊
醇提物　 40 10 11.5±2.8＊＊
阿斯匹林 0.2 10 14.4±4.3＊
　　由表 5可见 , 在竹根七不同提取物中 ,水煎液 、吸附物 、醇提
物均具有显著的抗炎作用。
　　另有小鼠 80只 ,随机分 8组 , 同法进行试验 ,观察不同剂量
的试验样品对二甲苯所致小鼠耳肿胀的影响 ,结果见表 6。
　　由表 6可见 , 竹根七大孔树脂吸附物与醇提物对二甲苯所
致小鼠耳肿胀的抑制作用均有一定量-效关系 ,二者作用相近。
　　表 6　不同剂量竹根七对二甲苯所致小鼠耳肿胀的影响( x±s)
组别 剂量(g/kg) 鼠数(只) 肿胀程度(■mg)
对　照　 10 24.3±3.2
吸附物　 5 10 22.6±6.5
吸附物　 10 10 17.2±3.5＊
吸附物　 20 10 14.3±6.5＊＊
吸附物　 40 10 13.4±5.8＊＊
醇提物　 5 10 18.9±6.2
醇提物　 10 10 16.6±5.2＊
阿斯匹林 0.2 10 15.4±4.8＊＊
2.4　对醋酸所致小鼠腹腔毛细血管通透性亢进的影响　按
Whittle法略加改进 [ 2 , 3]进行试验。 小鼠 60只 , 雌雄各半 , 随机
分 6组 , 每日灌服药物或同容积水 1次 , 连续 3天 , 末次药后 1h,
小鼠尾静脉注射 0.5%依文思兰生理盐水溶液 0.1ml/10g体重 ,
同时每鼠腹腔注射 0.6%HAC的生理盐水溶液 0.2ml, 至 20min
将小鼠迅速拉颈处死 ,剪开腹腔 , 用 6ml生理盐水分数次冲洗腹
腔 ,用吸管小心吸出腹腔液 , 合并 , 定容至 10ml, 4000rpm离心
20min,取上清液于 590nm比色 ,测定 OD值 , 结果见表 7。
　　由表 7可见 , 对于 HAC所致小鼠腹腔毛细血管通透性亢进
竹根七也有一定抑制作用 ,大孔树脂吸附物与醇提物作用相近。
44 中药药理与临床 2007;23(1)
　　表 7　竹根七对 HAC所致小鼠腹腔毛细血管通透性亢进的影响( x
±s)
组别 剂量(g/kg) 鼠数(只) OD
对　照　 10 0.2652±0.0479
吸附物　 10 10 0.2244±0.0486
吸附物　 20 10 0.2025±0.0392
吸附物　 40 10 0.1525±0.0473＊＊
醇提物　 40 10 0.1614±0.0523＊＊
地塞米松 0.02 10 0.1312±0.0212＊＊
3　讨论
　　竹根七是著名的民间补益性跌打损伤药 , 本文首先从抗
炎 、镇痛作用方面研究了其药理活性 , 并试图初步探明抗炎镇
痛作用的有效部位。结果表明 , 竹根七确有明显的镇痛抗炎作
用 , 但比较醋酸扭体法与热板法试验结果 , 可见竹根七以对前
者作用为强;比较二甲苯致鼠耳肿胀与 HAC致小鼠腹腔毛细血
管通透性亢进试验结果也可见竹根七以对前者作用为强 , 上述
结果表明竹根七的镇痛作用更接近于非甾体抗炎药而非麻醉
性镇痛剂 , 其抗炎作用也更近于非甾体抗炎药而非糖皮质激素
类药物样作用 , 这种确定但较温和的抗炎镇痛作用可能有助于
其于临床应用中损伤性炎症及炎性疼痛疗效的发挥。
　　比较不同样品的作用可见竹根七水提物与醇提物作用相
近而后者似略强。在水提物中 , 水煎液与大孔树脂吸附物作用
相似 ,而流洗液 、醇沉物无任何作用。药学研究表明 , 与其它人
参属植物相似 ,竹根七主含皂苷 , 皂苷易溶于水 、醇 , 本试验样品
中大孔树脂吸附物实际上即为总皂苷 , 经测定该样品总皂苷含
量为 56.72%,提示竹根七抗炎镇痛的主要有效部位为总皂苷。
流洗液则主含多糖 ,其醇沉物即主要为多糖 , 经硫酸-蒽酮法测
得该多糖含量 89.8%, 流洗液与醇沉物在本文中未显示明显作
用表明他们不是竹根七的抗炎镇痛作用有效部位。
参考文献
1　赵一 ,竺心影.用热板法测定镇痛药对小鼠痛阈的影响—一个简单实
验方法的介绍.药学学报 , 1956;4(2)∶97～ 104
2　WhitleBA.Theuseofchangesincapilarypermeabilityinmicetodis-
tinguishbetweennarcoticandnonmarcoticanalgesics.BritJPharmacol,
1964;22∶246～ 253
3　邓文龙 ,刘家玉 ,聂仁吉.脱水穿心莲内酯琥珀酸半酯的药理作用研
究Ⅰ .抗炎作用.药学学报 , 1980;15(10)∶590～ 597
党参 、绿茶及二者合用对苯基异丙腺苷所致小鼠学习记忆障碍的影响
王丽娟 , 李晓蓉 ,胡小敏 ,刘干中 1 , 李宇航
(首都医科大学化学生物学与药学院药理学系 ,北京 100054;1中日友好医院临床医学研究所 ,北京 100029)
　　摘　要　目的:观察党参加绿茶对苯基异丙腺苷(phenylisopropyl-adenosine, PIA)所致小鼠学习记忆障碍的影响。方法 :用
苯基异丙腺苷导致小鼠学习记忆障碍。测试前连续 5d灌胃给予不同剂量的党参 、绿茶及党参加绿茶 , 末次给药后 1h, 皮下注射苯
基异丙腺苷 , 15分钟后将小鼠放入跳台仪进行训练 , 24h后测试 , 记录潜伏期及错误次数。结果 :小剂量的党参加绿茶与大剂量的
党参 、绿茶作用相当。结论 :党参 、绿茶及二者合用有对抗 PIA所致小鼠学习记忆障碍的作用 , 二者合用可能有协同作用。
　　关键词 　苯基异丙腺苷;党参;绿茶;学习记忆
　　脑内腺苷水平随年龄增长而增高 , 因而被认为可能是老年
痴呆的一个原因。苯基异丙腺苷的一个稳定的衍生物 , 已被用
为腺苷的实验代用品 [ 1.2] 。党参和人参一样有促进记忆的作
用 [ 3] , 绿茶也被认为能促进大脑功能 [ 4] 。为此 , 本实验对党参
和绿茶是否能改善 PIA所致小鼠学习记忆障碍进行了观察。
1　材料与方法
1.1　 试验药物　 党参提取物(DSG)由原北京第四制药厂提
供。绿茶产自福建 , 购自美廉美超市 , 用水煎成 100%煎剂
(GTE)备用。
1.2　动物 　雄性昆明种小鼠 ,体重 18 ～ 22g,购自中国科学院
遗传研究所实验动物中心 , 许可证号:京动许字(1999)第 036
号。
1.3 　试剂 　 PIA购自美国 Sigma公司 , 批号 78H1110。
1.4 　仪器 　跳台仪购自中国医学科学院药物所。
1.5 　方法
1.5.1 　 GTE对 PIA所致小鼠学习记忆障碍的影响　小鼠随
机分 5组 , 连续 5天灌胃给予不同量的药物或等量生理盐水 , 每
天一次。末次给药后 1小时 , 皮下注射 PIA1mg/kg[ 5] , 15分钟
后将小鼠放入跳台仪进行训练 , 24小时后测试:将小鼠放置跳
台仪小室内适应环境 3分钟 , 随后加 40伏交流电 , 训练时间为
5分钟。 24小时后 ,将小鼠放置橡皮塞上并通电 ,进行 3分钟测
试 ,记录潜伏期(小鼠停留在橡皮塞上到第一次跳下的时间)及
错误(小鼠在橡皮塞上用两前足向下触铜条或从橡皮塞跳下铜
条)次数。
1.5.2　 DSG和 GTE单用 、合用对 PIA所致小鼠学习记忆障碍
的影响 　小鼠随机分成 9组 ,连续 5天灌胃给予不同量的药物
或等量生理盐水 ,每天一次。末次给药后 1小时 , 皮下注射 PIA
1mg/kg, 15分钟后将小鼠放入跳台仪进行训练 , 24小时后测试 。
2　结果
2.1　 GTE对 PIA所致小鼠学习记忆障碍的影响　结果表明 ,
45中药药理与临床 2007;23(1)