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不同部位抱茎獐牙菜中当药醇苷的HPLC测定



全 文 :青海科技 2008年第 6期
QST
研究与开发
采样点 1 3 4 5 6
摇蚊幼虫 16 112 64 224 64
钩虾 96 224 32 32 0
合计 112 336 96 256 688
表15 青海湖2007年夏季底栖动物密度 /个·m-2
采样点 1 3 4 5 6
摇蚊幼虫 0.0672 0.4832 0.0672 0.1552 0.0592
钩虾 0.2016 0.5024 0.0352 0.0304 0
合计 0.2688 0.9856 0.1024 0.1856 1.2736
表16 青海湖2007年夏季底栖动物生物量 /g·m-2
底栖动物生物量为 0.1024~1.2736g·m-2,平均
0.5632g·m-2。见表16。
底栖动物的水平分布极不均匀,一方面许多样点
没有采到,另一方面河口附近的3、6号样点生物量
较高,而河口应该是裸鲤生殖洄游前集中活动的区
域,丰富的底栖动物正好可以为鱼体的性腺发育提供
充足的营养。
3 结论
从2006~2007年的调查结果看出:
(1) 青海湖浮游生物较少,浮游植物初级生产力
低,这与该湖地处高寒地区、冰封期长(半年)、全
年平均温度不高、水体为半咸水等因素有关,与上世
纪60年代的调查结果相比,浮游生物的生物量相差
不是很大,且布哈河河口至海心山区域生物量丰富,
也是鱼群聚集的地方,这有利于鱼类的生长。
(2) 从水化学资料来看,青海湖的盐度、pH、碱
度、硬度都不同程度有所增加 [4],40年来湖水水位下
降近2m,表明青海湖水体环境在进一步恶化,持久下
去,对生物的生长会造成不良的影响,青海湖水质条
件的变化对藻类和鱼类生存的影响是值得关注的。
参考文献:
[1]中国科学院兰州地质研究所,等.青海湖综合考察报告[R].北
京:科学出版社,1979.
[2]青海省生物研究所.青海湖地区的鱼类区系和青海湖裸鲤的
生物学[M].北京:科学出版社,1975.
[3]何志辉.湖泊的营养分类[J].水库渔业,1982,(4):46-51.
[4]杨建新,祁洪芳,史建全.青海湖水化学特征及水质分析[J].
淡水渔业,2005,(3):28-32.
抱茎獐牙菜(SwertiafranchetianaH.Smith) 为龙胆
科 (Gentianaceae) 獐牙菜属植物,分布于西藏、青
海、四川及甘肃等地。为藏族民间常用的一种草药,
被称为上品“藏茵陈”。本品性凉味苦,有清热解毒、
利胆退黄之功能,对黄疸性肝炎有显著疗效,民间药
用全草治疗肝胆系统疾病[1]。对抱茎獐牙菜的研究有
分离和鉴定其化学成分[2]、高效液相色谱法测定有效
成分的含量[3],但对抱茎獐牙菜中当药醇苷的含量分
析及其在不同部位的研究尚未见报道。本实验采用
HPLC法对抱茎獐牙菜的全草、根、茎、叶、花中当
药醇苷进行测定。
1 仪器与试药
LC—10ATVP二元泵(岛津公司);Rheodyne7725
进样器 (美国);SPD—M10AVP 二极管阵列检测器
(岛津公司);Class—VP液相色谱工作站(岛津公司)。
当药醇苷对照品为中国科学院西北高原生物研究
所植化室孙洪发教授所赠(经UV、IR、MS、NMR鉴
定与文献一致,HPLC 检测为单峰,纯度在 98%以
上)。甲醇(山东禹王试剂公司)为色谱纯,其他试剂均
为分析纯。实验用水为重蒸馏水。
不同部位抱茎獐牙菜中
当药醇苷的HPLC测定
马玉花 1,陈桂琛 2,纪兰菊 2,卢学峰 2
(1.青海民族学院化学系,青海 西宁 810007;2.中国科学院西北高原生物研究所,青海 西宁 810001)
摘 要:本研究采用反相高效液相色谱法对不同部位抱茎獐牙菜中当药醇苷的含量进行了测定。流动相为甲醇-0.02%
磷酸水溶液,梯度洗脱,洗脱条件为0min→40min,甲醇:20%→68 ;流速为1mL· in-1,检测波长为260nm。结果
显示该方法具有很好的线性关系和回收率。本方法简单、准确、快速、实用性强。抱茎獐牙菜中当药醇苷在花的部位含
量最高,具有深度开发的前景。
关键词:反相高效液相色谱法;抱茎獐牙菜;当药醇苷
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研究与开发
抱茎獐牙菜药材来自于青海西宁北山,由中国科
学院西北高原生物研究所卢学峰研究员鉴定。
2 方法与结果
2.1 色谱条件及系统适用性
色谱柱:Kromasil C18(250 mm×4.60 mm,5μm);
流动相:甲醇 -0.02%磷酸水溶液,梯度洗脱,洗脱
条件为0min→40min,甲醇:20%→68 ;体积流量:
1mL·min-1;检测波长:260 nm;柱温为室温;按上
述色谱条件测定,理论板数以当药醇苷峰计算,不低
于4730,色谱图见图1。
t/min
2.2 供试品溶液的制备
分别将样品置超微粉碎机中粉碎20min,精密称
取0.5g,置100mL锥形瓶中,加甲醇20mL,置80℃
水浴锅上回流1h,滤过,置25mL量瓶中,加甲醇稀
释至刻度,摇匀,即得。
2.3 对照品溶液的制备
精密称取当药醇苷对照品 2.0mg,置于 10mL 容
量瓶中,用甲醇定容至刻度,摇匀,即得。
2.4 线性关系考察
精密吸取 0.2016 mg·mL-1当药醇苷对照品溶液
4,8,12,16,20μL,分别进样测定。以当药醇苷
进样量为横坐标,峰面积积分值为纵坐标,计算,所
得的回归方程为: Y=151671.8+595704.9X r=
0.9992。当药醇苷在0.88~4.40μg与峰面积呈良好的
线性关系。
2.5 精密度试验
精密吸取上述对照品溶液 (0.2016mg·mL-1)
20μL,注入高效液相色谱仪,按上述色谱条件进行
分析,测定5次,峰面积的RSD为1.85%。
2.6 重现性试验
精密称取野生的抱茎獐牙菜全草样品,按供试品
溶液制备方法分别制备5份供试品溶液,分别进样分
析,测定当药醇苷峰面积积分值,计算得 RSD 为
1.37%。
2.7 稳定性试验
精密吸取同一份供试品溶液20μL,每隔2h进样
1 次,测定当药醇苷峰面积积分值,计算得 RSD 为
1.71%。结果表明,供试品溶液在8h内基本稳定。
2. 回收率试验
精密称取抱茎獐牙菜全草样品,每份0.5g,其中
一份测定当药醇苷,另外加入 3.0mg 当药醇苷对照
品,制备供试品溶液,测定其中的当药醇苷,计算回
收率,结果平均加样回收率为101.0%,RSD为1.65%
(n=5)。
2.9 样品测定
抱茎獐牙菜不同部位当药醇苷的测定,精密称取
抱茎獐牙菜的全草、根、茎、叶、花(均为粗粉) 各
0.5g,制成供试品溶液,按上述色谱条件进样20μL,
测定峰面积值,外标两点法计算当药醇苷质量分数,
结果见表1。
3 结论与讨论
试验结果显示,不同部位抱茎獐牙菜中当药醇苷
的量差异较大。抱茎獐牙菜花中当药醇苷的含量明显
高于其他部位,说明当药醇苷主要集中于抱茎獐牙菜
花的部位,并且其含量随根、茎、叶、花依次升高。
图1 对照品(A) 与样品(B) 色谱图
表1 抱茎獐牙菜不同部位中当药醇苷的测定结果(n=5)
部位 当药醇苷/% RSD/%
全草 1.229 0.59
根 0.057 1.24
茎 0.279 0.97
叶 0.539 1.03
花 1.377 0.68
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研究与开发
本实验采用反相高效液相色谱法测定抱茎獐牙菜
中不同部位当药醇苷的含量,分离良好,精密度高。
参考文献:
[1]中国科学院西北高原生物研究所.藏药志[M].青海:青海人
民出版社,1991:110.
[2]丁经业,樊淑芬,胡伯林,等.抱茎獐牙菜口山酮成分分离与
鉴定[J].高原生物学集刊,1982,(1) 267.
[3]宋娅莉,胡凤祖,林鹏程,等.川西獐牙菜与抱茎獐牙菜中
口山酮的高效液相色谱分析[J].色谱,2004,22(1):51.
以农作物秸秆和炉渣等工农业废弃物为基质主要
原料的有机生态型无土栽培技术,因其基质成本低、
来源广泛、操作管理简单及产品品质优良等特点,成
为我国无土栽培中推广面积最大的实用新技术。为了
资源化利用青海省现有作物秸秆和有机肥,我们对不
同原料配方的基质进行了比较筛选试验,以期获得适
宜我省的基质配方和相关的配套栽培技术,为有机生
态无土栽培技术在我省的推广应用提供依据。
1 材料与方法
1.1 试验材料
供试番茄品种为上海903大红番茄。基质材料选
用当地取材容易、价格低廉的无机基质炉渣和有机基
质麦秸、油菜秸以及菇渣。固态有机肥为腐熟羊粪。
1.2 试验方法
试验于2007年在青海省农科院园艺所实验园日
光温室内进行。3月6日育苗,5月9日定植,定植
株距 40cm,双行定植,小区面积为 5.6m2。11 月 10
日拉秧。试验调查不同基质处理对番茄发育生长状
况、产量和发病率的影响。
先将麦秸、油菜秸粉碎至长度为 2~5cm,连同
菇渣分别堆置于温室中进行腐熟处理,方法是每立方
米基质中加入0.5kg尿素,浇透水,盖上塑料进行高
温发酵,发酵期间翻堆2次,50d后腐熟,将其与过
筛炉渣按试验设计进行配制。将配好的15种配方基
质随机排列填入栽培槽中,重复3次。栽培槽按南北
走向用红砖码成,内径 48cm,外径 72cm,长 6cm,
高20cm。槽底铺一层塑料旧棚膜与土壤隔离,防止
土传病害。槽底中部挖一条深5cm、宽8cm的排水沟
以防积水沤根,并设置土壤栽培对照区。槽内安装滴
灌设施。有机固态肥选用发酵腐熟的羊粪,每立方米
基质中加15kg,作为基肥定植后30d不用施肥,以后
每30d追施一次固态肥腐熟羊粪,每立方米15kg。定
植前基质浇透水,定植后每天每株1L水。保持基质
湿度80%。
1.3 试验设计
试验共设15个基质配方处理,分别为:1.炉渣∶
麦秆=4∶6;2.炉渣∶麦秆=5∶5;3.炉渣∶麦秆=
3∶7;4.炉渣∶油菜秆=3∶7;5.炉渣∶油菜秆=4∶
6;6.炉渣∶油菜秆=5∶5;7.炉渣∶麦秆∶油菜秆=
4∶3∶3;8.炉渣∶麦秆∶油菜秆=2∶4∶4;9.炉
渣∶麦秆∶油菜秆=3∶3∶4;10.炉渣∶菇渣=5∶5;
11.炉渣∶菇渣=4∶6;12.炉渣∶菇渣=3∶7;13.炉
渣∶油菜秆∶菇渣=4∶3∶3;14.炉渣∶麦秆∶菇
渣=4∶3∶3;15.炉渣∶麦秆∶油菜秆∶菇渣=4∶
2∶2∶2;16.对照(CK):土壤栽培。各基质比例为
体积比。试验采用完全随机区组设计,3次重复。
2 结果与分析
2.1不同配比基质对番茄生长的影响
表1为不同基质组合对番茄生长的影响。从表1
可看出,株高除处理11略低于对照外,其余有机基
质栽培番茄株高均高于对照,以处理3的株高最高,
以下依次为处理13和处理4,其他处理亦与对照间差
异达显著水平。茎粗以处理13最大,以下依次为处
理6和处理9,除处理7、8小于对照外,其余处理均
大于对照,但处理间无显著差异。叶片数以处理 14
为最多,以下依次为处理3和处理4,表明基质栽培
不同基质配方的筛选试验
张广楠,杜中平
(青海省农林科学院园艺所,青海 西宁 810016)
摘 要:本试验采用工业废弃物无机基质炉渣与农业废弃物有机基质麦秸、油菜秸、菇渣,以不同比例配制的15
个基质与普通土壤对照栽培番茄进行了比较,结果表明大多数基质栽培下的株高和茎粗较土壤栽培有较大的增幅,最终
表现为产量的提高,且各配方比对照表现出明显的抗叶霉病特性。
关键词:无机基质;有机基质;无土栽培;配比筛选
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