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不同杀菌剂对毛木耳菌丝体及油疤病病原菌的作用



全 文 :食用菌学报2013.20(2):64~68
收稿日期:2013-05-16原稿;2013-06-01修改稿
基金项目:国家现代农业产业技术体系建设项目(编号:CARS-24)资助
作者简介:张有根(1988-),男,在读硕士,主要从事食用菌病害研究。
*本文通讯作者 E-mail:bianyb.123@163.com
文章编号:1005-9873(2013)02-0064-05
不同杀菌剂对毛木耳菌丝体及油疤病病原菌的作用
张有根,边银丙*
(华中农业大学应用真菌研究所,湖北武汉430070)
摘 要:毛木耳油疤病是由木栖柱孢霉(Scytalidium lignicola)感染引起的菌丝体病害。在室内毒力筛选出
50%咪鲜胺锰盐(WP)和75%百菌清(WP)两种杀菌剂的基础上,采用药剂拌料或药剂涂抹病斑两种方法,观
察它们对供试毛木耳菌丝体及木栖柱孢霉菌的抑制作用。结果表明:将50%咪鲜胺锰盐按照200倍和1000
倍拌入培养料中,其病情指数与对照相比显著降低,分别为17.59%和54.63%,但对毛木耳菌丝生长和子实体
农艺性状有明显不利影响;将50%咪鲜胺锰盐按照250倍和500倍与干细土拌匀涂抹病斑,平均防效分别达
到93.4%和86.9%。
关键词:毛木耳;油疤病;杀菌剂;防治效果
  毛木耳(Auricularia polytricha)含有丰富
的木耳多糖和适量的粗纤维,具有重要食用和药
用价值,在我国福建、四川和河南等省大量栽培。
油疤病是严重危害毛木耳生产的传染性病害,
2012年孙婕等首次报道了该病,并将其病原菌鉴
定为木栖柱孢霉(Scytalidium lignicola)[1]。该
病原菌仅感染毛木耳菌丝体,而不危害毛木耳子
实体。笔者进行毛木耳油疤病室内防治药剂筛
选和田间药剂防治试验,旨在为制定防治措施奠
定基础。
1 材料与方法
1.1供试菌株和药剂
  木栖柱孢霉(S.lignicola)系华中农业大学
应用 真 菌 研 究 所 保 藏 菌 株,毛 木 耳 (A.
polytricha)栽培菌株黄耳10号引自四川省农业
科学院土壤肥料研究所。
1.2供试药剂
  我国登记用于食用菌病害防治的7种杀菌
剂:40%二氯异氰尿酸钠 WP(山西康派伟业生物
科技有限公司);50%咪鲜胺锰盐 WP(南通江山
农业化工公司);50%噻菌灵SC(安阳市红旗药业
有限公司);80%代森锌 WP(广东江门市新会田
园生物有限公司);90%三乙磷酸铝 WP(江苏省
金坛市兴达化工厂);70%甲基硫菌灵 WP(江苏
龙灯化学有限公司);75%百菌清 WP(云南田丰
农药有限公司)。
1.3杀菌剂室内毒力测定
  用无菌水将杀菌剂稀释后,按相应比例分别
加入到约50℃的CYM培养基,配方同文献[2],
配制成浓度分别为5、50、500μg/mL的培养基。
取直径为0.5 cm的木栖柱孢霉及黄耳10号菌
丝块分别接种于不同种类、不同浓度的杀菌剂平
板中(直径为9 cm),CMY平板为对照,每种处理
3次重复,25℃下避光培养。接种后每2 d测定
菌落直径,连续 3 次,计算菌丝生长速度抑
制率[4]。
根据药剂初筛结果,确定各供试药剂对病菌
菌丝生长抑制率在20%~80%范围内的药剂浓
度,再分别重新设定6个浓度梯度进行复筛,试
验方法同上。
SPSS 19.0软件回归分析各种杀菌剂的抑菌
百分率,计算出每种杀菌剂的EC50及选择系数值
(SD)[5]。
1.4田间药剂拌料防治试验
  试验在四川什邡市湔氐镇进行。根据室内
毒力筛选的结果,从供试药剂中选择出药剂选择
系数低于0.1的药剂,拌入到栽培料中,毛木耳
栽培料配方:10%棉籽壳、30%玉米芯、34%木
屑、20%米糠、2%玉米粉、2%石灰、1%石膏、1%
第2期 张有根,等:不同杀菌剂对毛木耳菌丝体及油疤病病原菌的作用
磷肥、含水量65%~70%[2];毛木耳接种、菌丝培
养和出菇栽培方法同文献[3]。在菌丝发菌期
间,分别测量各处理菌丝生长速度。待菌丝长满
菌袋后,随机摆放在耳架上、中、下三层,每个处
理每层各摆放12个菌袋,测量菌丝生长速度。
在前三潮采耳期间内,分别统计不同潮次不
同药剂处理的病情指数。参照方中达植物叶部
病害的分级标准[6],将毛木耳油疤病害分为7
级:其病斑面积分别约占菌袋表面积的0、1%~
10%、10% ~20%、20% ~30%、30% ~40%、
40%~50%、50%以上时,其相应的代表值为0、
1、2、3、4、5、6。
统计不同处理的第一潮耳的耳片总鲜重、单
朵耳片鲜重、单朵耳片数目、耳片径长、耳片径
宽、耳片厚度和色泽等农艺性状,并计算生物学
转化率[7]。
1.5田间药剂涂抹防治试验
  第一潮耳采收后,选取不同病级的毛木耳菌
袋,用75%酒精消毒处理的刀片挖除病斑及周围
约2cm左右的健康菌丝组织,分别用细土和石
灰两种介质与药剂混合后,均匀涂抹在挖除部
位,以不添加任何药剂的介质对照,每个处理36
个重复。将药剂涂抹防治的菌袋随机摆放到耳
棚床架上出耳,30d后分别统计各个处理的发病
率,并计算各处理的油疤病防效值[8],采用SPSS
19.0软件对数据进行处理分析。
防效值(%)= [(Ic-It)/Ic]×100%
Ic:对照处理的毛木耳菌袋发病率;It:各药
剂涂抹处理的毛木耳菌袋发病率。
2 结果与分析
2.1室内毒力测定结果
  室内毒力测定结果见表1。当药剂的选择系
数(SD)值低于0.1时,表明该药剂对寄主和病原
菌具有较好的选择毒力[7]。SD值为0.1左右的
两种药剂为75%百菌清(WP)和50%咪鲜胺锰
盐(WP);40%二氯异氰尿酸钠(WP)和90%三乙
磷酸铝(WP)对木栖柱孢霉菌丝生长无抑制
作用。
2.2药剂拌料对毛木耳油疤病病情指数的影响
  由表2可知,50%咪鲜胺锰盐和75%百菌清
两种药剂拌料处理后,在第三潮菇中,50%咪鲜
胺锰盐1000倍和200倍时油疤病病情指数显著
下降,防治效果显著,但随潮次增加防效降低。
75%百菌清100倍时能显著降低第二潮菇病情
指数。
2.3药剂拌料对毛木耳农艺性状的影响
  两种杀菌剂对毛木耳农艺性状的影响见表
3,两种药剂不同处理之间毛木耳单朵耳重和单
朵耳片数有差异,而对耳片径长、耳片径宽、耳片
厚度影响无显著影响(数据未列出)。使用50%
咪鲜胺锰盐和75%百菌清进行拌料处理,能显著
降低毛木耳生物学转化率和抑制毛木耳菌丝生
长速率。
表1 杀菌剂对供试菌株的毒力测定
Table 1 Toxicity of five fungicides to the mycelial growth of S.lignicolaand A.polytricha
杀菌剂
Fungicide
EC50(μg/mL)

木栖柱孢霉
S.lignicola
黄耳10号
A.polytricha HE10
选择系数
(SD)b
50%咪鲜胺锰盐
Prochloraz-manganese
0.33  4.03  0.08
75%百菌清
Chlorothalonil
0.31  2.59  0.12
70%甲基硫菌灵
Thiophanate methyl
0.60  1.54  0.39
50%噻菌灵
Thiabendazole
1.72  2.67  0.65
80%代森锌
Dipher
4.23  32.79  0.13
aEC50:相关系数 R2>0.95;b选择系数:SD= 杀菌剂对木栖柱孢霉的EC50值/相应杀菌剂对毛木耳菌株的EC50值
aEC50:Correlation coefficient R2>0.95
bSD=EC50value for S.lignicola/EC50value for A.polytricha
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食 用 菌 学 报 第20卷
表2 药剂拌料对毛木耳油疤病的防治效果
Table 2 Effect of combining fungicides with cultivation substrate*on the incidence of slippery scar disease in A.polytricha
杀菌剂
Fungicide
稀释倍数
Dilution factor
病情指数 Disease index(%)1)
第一潮
1stush
第二潮
2ndush
第三潮
3rdush
对照 Control --- 30.93±3.14a   77.78±5.06a  100.00±0a   
50%咪鲜胺锰盐(WP)
Prochloraz-Mn
5000  23.15±0.80a 52.78±2.00ab  78.70±4.56ab
1000  0.93±1.60b 12.96±2.16bc  54.63±3.80b
200  0b 0.93±1.60c 17.59±3.91c
75%百菌清(WP)
Chlorothalonil
2500  24.07±3.17a 62.04±5.67ab  100.00±0a   
500  22.22±2.42a 55.56±4.96ab  100.00±3.47a   
100  11.11±2.58ab  39.81±3.94b 99.07±1.60a
数据为试验平均值±SD,小写英文字母表示P <0.05的差异显著性
Values are the means(n=3)±SD,Different lower case letters indicate a significant difference at P0.05
*Substrate:10% cotton seed huls,30% corncobs,34%sawdust,20% rice bran,2% corn flour,2%lime,1% gypsum,1%
phosphorus fertilizer,water content 65%~70%
1)Disease index= ∑(No.of fruit bodies of disease grade×disease severity)/(total number of fruit bodies evaluated×highest level of
disease severity)×100
表3 两种杀菌剂对毛木耳的影响
Table 3 Effect of prochloraz-Mn and chlorothalonil on A.polytrichavegetative growth and fruit body yields
杀菌剂
Fungicide
稀释倍数
Dilution
factor
对毛木耳菌丝
生长抑制率
Inhibition of
A.polytricha
mycelial growth(%)
耳片每朵鲜重
Fresh weight of
fruit bodies(ears)
(g)
单朵耳片数目
Number of
fruit bodies(ears)
生物学转化率
Biological
eciency
(%)
对照Control
50%咪鲜胺锰盐(WP)
Prochloraz-Mn
75%百菌清(WP)
Chlorothalonil
--- --- 290.00±10.2a 7.67±0.9a 105.9±2.3a
5000  23.9±0.21d 231.67±16.1ab  6.17±1.4ab  55.3±1.0cd
1000  32.2±0.32c 236.25±22.0ab  5.50±1.3b 65.9±2.1c
200  67.6±0.12a 202.43±4.4b 3.43±0.3c 54.1±1.7cd
2500  3.2±0.19e 263.75±9.4ab  7.50±0.7a 88.2±1.4b
500  21.4±0.24d 213.33±23.1b 4.63±0.5b 45.9±0.6d
100  48.3±0.12b 119.54±12.6c 3.25±0.3c 27.1±0.4e
数据为试验平均值±SD,小写英文字母表示P <0.05的差异显著性
生物学转化率=采收毛木耳的鲜重/栽培料的干重×100%
Values shown are the means(n=3)±SD;Different lower case letters indicate a significant differences at P0.05
Biological eciency=fresh weight of harvested fruit bodies/dry weight of substrate×100%
2.4药剂涂抹对毛木耳油疤病的防治效果
  两种药剂涂抹对毛木耳油疤病的防治效果
见表4。在两种杀菌剂各种处理中,50%咪鲜胺
锰盐250倍防效达到93.4%;将两种介质相比
较,药剂在细土介质中的防效高于在石灰介质中
的防效。
3 小结
  供试药剂室内EC50值测定表明,木栖柱孢霉
对75%百菌清的敏感性高于50%咪鲜胺锰盐。
药剂拌料防治操作简便,但对毛木耳子实体产量
具有显著不利影响。涂抹法操作较繁琐,但由于
药剂的影响仅限于病斑及其周围2cm以内,因
而没有观察到药剂涂抹对毛木耳农艺性状产生
不利的影响。50%咪鲜胺锰盐是许多欧美国家
在食用菌上允许使用的杀菌剂,也是我国在双孢
蘑菇上登记使用的少数农药之一,毒性低,无残
留,对多种食用菌菌丝体副作用较小。笔者采集
66
第2期 张有根,等:不同杀菌剂对毛木耳菌丝体及油疤病病原菌的作用
表4 田间药剂涂抹对毛木耳油疤病的防治效果
Table 4 Protective effect of fungicides folowing application to slippery scar lesions on A.polytrichacultivation bags
杀菌剂
Fungicide
稀释倍数
Dilution factor
防效Protective effect(%)
细土介质
Fine soil application
石灰介质
Lime application
50%咪鲜胺锰盐(WP)
Prochloraz-Mn
250  93.44±3.1a 63.80±2.3a
500  86.88±2.1b 44.83±3.9b
1000  31.14±1.1c 39.66±0.9c
75%百菌清(WP)
Chlorothalonil
200  27.87±1.5d 17.25±1.4d
400  18.03±0.3e 10.35±3.0e
800  14.75±1.1f 3.45±1.8f
数据为试验平均值±标准误,小写英文字母表示P <0.05的差异显著性
防效值(%)= [(Ic-It)/Ic]×100%(Ic:对照处理的毛木耳菌袋发病率;It:各药剂涂抹处理的毛木耳菌袋发病率)
Values are the means(n=3)±SD,Different lower case letters indicate a significant difference at P0.05
Protective effect(%)= [(Ic-It)/Ic]×100%,where Ic=disease incidence among the control bags and It=disease incidence among
the cultivation bags treated with fungicides
Cultivation bags were selected and graded after the first flush based on the percentage of the total bag surface area affected by slippery
scar lesions(i.e.0、1%~10%、10%~20%、20%~30%、30%~40%、40%~50%、50% were graded 0、1、2、3、4、5、6,respectively).
Diseased areas,together with 2cm of the surrounding substrate,were removed with a sterile scalpel blade and either fine soil or lime
mixed with different concentrations of the two fungicides was applied to the affected area.Fine soil or lime applications without
fungicide served as controls.Each treatment was repeated 36times and the replicates divided into three data sets for
calculation purposes
不同处理的毛木耳子实体,委托农业部食品质量
监督检验测试中心(武汉)进行咪鲜胺锰盐残留
量分析,均没有检出咪鲜胺锰盐,表明该药剂在
毛木耳油疤病防治中残留量低,不存在食品质量
安全风险。
参考文献
[1]SUN J,BIAN YB.Slippery scar:a new mushroom
disease in Auricularia polytricha[J].Mycobiology,
2012,40(2):129-133.
[2]吕作舟.食用菌栽培学[M].北京:高等教育出版社,
2006:416.
[3]黄年来,林志彬,陈国良,等.中国食药用菌学[M].上
海:上海科学技术文献出版社,2010:1025-1042.
[4]GEA FJ,TELLO JC,NAVARRO MJ.Efcacy and
effects on yield of different fungicides for control of
wet bubble disease of mushroom caused by the
mycoparasite Mycogone perniciosa [J]. Crop
Protection,2010,29:1021-1025.
[5]POTOˇCNIK I,VUKOJEVIC'CJ,STAJI'CM,et al.
Toxicity of biofungicide Timorex 66 EC to
Cladobotryum dendroides and Agaricus bisporus[J].
Crop Protection,2010,29:290-294.
[6]方中达.植病研究方法[M].3版.北京:中国农业出
版社,2007:10-11.
[7]CHRYSAYI-TOKOUSBALIDES M,KASTANIAS
MA, PHILIPPOUSSIS A, et al. Selective
fungitoxicity of famoxadone,tebuconazole and
trifoxystrobin between Verticilium fungicola and
Agaricus bisporus[J].Crop Protection,2007,26:
469-475.
[8] ABBOTT WS. A method of computing the
effectiveness of an insecticide[J].J Econ Entomol,
1925,18:265-267.
致谢:本研究得到四川省农业科学院土壤与肥料研究所郑
林用、甘炳成、王波、苗人云等老师的支持,特此致谢。
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食 用 菌 学 报 第20卷
Relative Toxic Effects of Prochloraz-Mn and
Chlorothalonil on the Vegetative Growth of
A.polytricha and Scytalidium lignicola
ZHANG Yougen,BIAN Yinbing*
(Institute of Applied Mycology,Huazhong Agricultural University,Wuhan,Hubei 430070,China)
Abstract:Slippery scar is a serious disease affecting Auricularia polytricha mycelium caused by Scytalidium
lignicola.Laboratory tests revealed that 50%prochloraz-Mn(wettable powder,WP)and 75%chlorothalonil
(WP)were effective fungicides when mixed with the mushroom cultivation substrate or applied directly to the
diseased area.Prochloraz-Mn mixed with cultivation substrate at ratios 1∶200and 1∶1000lowered disease
index values to 17.59%and 54.63%respectively,but also decreased biological efficiency.When mixed with
fine soil at ratios of 1∶250and 1∶500,and applied to the diseased area,prochloraz-Mn inhibited reappearance
of the diseased area in 93.4%and 86.9%of cases,respectively.
Key words:Auricularia polytricha;slippery scar disease;fungicide;protective effect
[本文编辑] 王瑞霞
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