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22个毛木耳菌株生长速度分析



全 文 :文章编号:1001 - 4829(2013)05 - 2001 - 04
收稿日期:2012 - 11 - 19
基金项目:四川省财政育种工程项目(2011JYGC09-025);四川
省财政育种工程项目(2012QNJJ-018);四川省财政育种工程项
目 (2012LWJJ-003 );四 川 省 科 技 厅 国 际 合 作 项 目
(2011HH0025);四川省育种攻关(毛木耳育种新材料研究与应
用);国家食用菌产业技术体系栽培与设施研究室岗位(毛木耳
和药用菌栽培)、金针菇毛木耳育种与菌种繁育岗位、成都综合
试验站;四川食用菌产业技术体系创新团队
作者简介:贾定洪(1977 -),男,助理研究员,主要从事食用菌
分子生物学和遗传育种研究,* 为通讯作者。
22 个毛木耳菌株生长速度分析
贾定洪1,2,王 波1,彭卫红1,黄忠乾1,甘炳成1,谭 伟1,郑林用1,2*
(1.四川省农业科学院土壤肥料研究所,四川 成都 610066;2.四川大学生命科学学院生物资源与生态环境教育部重点实验室,四
川 成都 610064)
摘 要:以 22 个毛木耳菌株为研究材料,采用 2 种温度 2 种培养基的处理方式,应用 DPS生物统计软件,对菌株生长速度进行方
差分析。结果显示培养温度为 25 ℃、培养基为棉籽壳培养基和培养温度为 35 ℃、培养基为酵母培养基的菌丝生长速度一致,生
长速度最快的是紫木耳、Au2、琥珀木耳,生长速度最慢的是 Ap1192、黄耳 10 号、抗 1;上海 1 号、Ap117、781 菌株 3 个菌株在 25 ℃、
培养基为酵母培养基时生长速度最快,但在 35 ℃高温环境和 25 ℃棉籽壳培养基中生长速度中等,不具优势。
关键词:毛木耳;DPS;方差分析
中图分类号:S646. 6 文献标识码:A
Analysis on Hyphal Growth Rates of 22 Auricularia nigricans Strains
JIA Ding-hong1,2,WANG Bo1,PENG Wei-hong1,HUANG Zhong-qian1,GAN Bing-cheng1,TAN Wei1,ZHENG Lin-yong1,2*
(1. Soil and Fertilizer Institute,Sichuan Academy of Agricultural Sciences,Sichuan Chengdu 610066,China;2. Key Laboratory of Bio-re-
source and Bio-environment,College of Life Sciences,Sichuan University,Sichuan Chengdu 610064,China)
Abstract:With 4 treatments of permutation and combination of 2 culture temperatures and 2 media,22 Auricularia nigricans were studied on
their hyphal growth rates with DPS bio-software. Results showed the hyphal growth rates of 25 ℃ and cottonseed hull media were in accord-
ance with those of 35 ℃ and yeast media,in which (i)the growth rates of Strain Zimuer,Au2 and hupo were fast while Strain Ap1192,
huanger 10# and kang 1 were the lowest;(ii)Strain shanghai1#,Ap117 and 781 grew fast with 25 ℃ and yeast media,but middle with 35
℃ and yeast media,or with 25 ℃ and cottonseed hull media.
Key words:Auricularia nigricans;DPS;Variance analysis
毛木耳(Auricularia nigricans)又叫黄背木耳、大
木耳、粗木耳等。其耳片厚、质地较柔软,营养丰
富[1],性平、味甘,有滋润强生、清肺益气、补血活
血、镇痛止痛等功效,是我国大宗食用菌品种之一,
2010 年毛木耳全国产量超过 100 万吨,在我国栽培
食用菌中居第六位[2],已成为农民脱贫致富的一个
重要途径。但由于部分菌种制作者通过组织分离、
连续转管等方式粗放生产菌种,菌种又以相互引用
等方式逐步扩散,导致栽培品种混淆日益严重,品种
特性不明,甚至部分品种出现种性退化、产量下降、
病虫害滋生等问题[3 ~ 4],严重制约了毛木耳产业的
健康发展。因此,开展菌丝生长速度等品种特性研
究,建立栽培菌株品种特性档案,是确保毛木耳产业
发展的重要奠基工作内容之一。
本研究以自育及其它菌种资源保藏单位引进的
22 个毛木耳菌株为供试菌株,采用 2 种温度 2 种培
养基的处理方式,进行了菌株生长速度比较试验,开
展菌株生长速度方差分析,研究菌株的生长特性差
异,为进一步毛木耳品种选育提供依据。
1 材料与方法
1. 1 材料
1. 1. 1 供试菌株 试验菌株 22 个,各菌株信息见
表 1。
1002
2013 年 26 卷 5 期
Vol. 26 No. 5
西 南 农 业 学 报
Southwest China Journal of Agricultural Sciences
DOI:10.16213/j.cnki.scjas.2013.05.068
表 1 供试菌株及来源
Table 1 The strains used and their orgins
编号
No.
菌株
Strains
来源
Origins
编号
No.
菌株
Strains
来源
Origins
1 ZH 四川省资源所 12 川耳 7 号 四川省农科院土肥所
2 781 福建三明真菌研究所 13 红大木耳 上海农科院食用菌研究所
3 上海 3 号 四川省农科院土肥所 14 Ap1142 四川省农科院土肥所
4 951 四川省农科院土肥所 15 Ap1192 四川省农科院土肥所
5 243 福建轻工所 16 3039 台湾裕农
6 青优 四川省农科院土肥所 17 Ap117 四川省农科院土肥所
7 三优 四川省农科院土肥所 18 Apw82 四川省农科院土肥所
8 紫木耳 四川省农科院土肥所 19 抗 1 四川省农科院土肥所
9 琥珀木耳 四川省农科院土肥所 20 菊耳 2 号 四川省农科院土肥所
10 Au2 广东微生物研究所 21 上海 1 号 上海农科院食用菌研究所
11 苏毛 3 江苏农科院蔬菜所 22 黄耳 10 号 四川省农科院土肥所
1. 1. 2 培养基 酵母培养基:酵母粉 5 g,葡萄糖
20 g,琼脂糖 22 g,水 1000 mL。
棉籽壳培养基:棉籽壳 71 %,杂木屑 10 %,麸
皮 10 %,石膏 1 %,石灰 2 %,含水量 65 %。
表 2 酵母培养基 25 ℃菌丝生长速度新复极差测验
Table 2 The hyphal growth rates at 25 ℃ in yeast media by SSR method
编号
No.
5 次重复
平均速度(cm /d)
Average
growth rates
差异显著性
Difference significance
0. 05 0. 01
1 0. 571 i G
2 1. 114 abc AB
3 0. 993 bcde ABCD
4 0. 992 bcde ABCD
5 0. 894 efgh DEF
6 0. 804 gh EF
7 0. 768 h F
8 1. 062 abcd ABC
9 0. 888 efgh DEF
10 1. 087 abc AB
11 0. 946 def BCDE
12 0. 811 gh EF
13 1. 110 abc AB
14 0. 829 fgh DEF
15 0. 985 cde ABCD
16 0. 299 j H
17 1. 123 ab A
18 1. 112 abc AB
19 0. 908 efg CDEF
20 1. 089 abc AB
21 1. 154 a A
22 0. 477 i G
1. 2 方法
1. 2. 1 处理设置 处理 1:培养温度 25 ℃,培养基
为酵母培养基;处理 2:培养温度 25 ℃,培养基为棉
籽壳培养基;处理 3:培养温度 35 ℃,培养基为酵母
培养基;处理 4:培养温度 35 ℃,培养基为棉籽壳培
养基。
1. 2. 2 菌丝体生长速度测定 供试菌株接种在
PDA平板培养基上,25 ℃活化培养 7 d。用 6 mm直
径的打孔器在相同菌龄圆环位置打孔,分别将接种
块接到 2 种培养基,再将接种好的菌株(各 6 支)放
入 25 和 35 ℃的培养箱中培养,每 2 d 记录 1 次酵
母培养基数据,每 4 d记录 1 次棉籽壳培养基数据。
1. 2. 3 数据分析 应用 DPS 分析统计软件[5],采
用单项分组完全随机区组分析方法,对实验数据进
行方差分析和新复极差测验方差分析和显著性检
验。
2 结果与分析
2. 1 酵母培养基 25 ℃菌丝生长速度
从表 2 可以看出,在培养温度为 25 ℃,培养基
为酵母培养基时,生长速度排列前 3 位的分别是上
海 1 号、Ap117、781 菌株,其中上海 1 号菌株生长速
度最快,但这 3 个菌株生长速度差异未达到显著差
异水平。而生长速度末 3 位的是 ZH、黄耳 10 号、
3039,其中裕农 3039 菌株生长最慢,并且与 ZH、黄
耳 10 号菌株的生长速度差异达到了极显著水平。
2. 2 酵母培养基 35 ℃菌丝生长速度
从表 3 可以看出,在培养温度为 35 ℃,培养基
为酵母培养基时,生长速度排列前 3 位的分别是紫
木耳、Au2、琥珀木耳菌株,其中紫木耳菌株生长速
2002 西 南 农 业 学 报 26 卷
表 3 酵母培养基 35 ℃菌丝生长速度新复极差测验
Table 3 The hyphal growth rates at 35 ℃ in yeast media by SSR method
编号
No.
5 次重复
平均速度(cm /d)
Average
growth rates
差异显著性
Difference significance
0. 05 0. 01
1 1. 912 ghi GHI
2 3. 920 de CDE
3 1. 850 ghi GHIJ
4 2. 192 fgh FGH
5 3. 776 e DE
6 2. 214 fgh FGH
7 3. 590 e E
8 6. 414 a A
9 4. 722 bc BC
10 5. 214 b B
11 4. 630 bc BC
12 2. 276 fgh FG
13 3. 750 e DE
14 2. 470 fg FG
15 1. 394 ij HIJ
16 1. 758 hi GHIJ
17 3. 974 de CDE
18 4. 510 cd BCD
19 1. 020 j J
20 2. 622 f FG
21 2. 802 f F
22 1. 300 ij IJ
度最快,与 Au2、琥珀木耳菌株间生长速度差异达到
极显著差异水平。而生长速度末 3 位的是 Ap1192、
黄耳 10 号、抗 1,其中抗 1 菌株生长最慢,但与
Ap1192、黄耳 10 号菌株生长速度差异未达到显著
水平。
2. 3 2 种温度下棉籽壳培养基菌丝生长速度分析
在 25 ℃时,棉籽壳培养基培养基上的 22 个菌
株菌丝基本成活,但存在部分处理重复菌丝死亡,导
致 22 个实验菌株生长速度的重复数不一致,无法进
行单项分组完全随机区组分析计算,因此,只统计计
算了 22 个菌株的平均速度,得到了 22 个毛木耳菌
株菌丝生长速度折线图(图 1)。
从图 1 可以看出,在培养温度为 25 ℃,培养基
为棉籽壳培养基时,生长速度排列前 3 位的分别是
紫木耳、Au2、琥珀木耳菌株,分别是 6. 414、5. 214、
4. 722 cm /d,其中紫木耳菌株生长速度最快。而生
长速度末 3 位是 Ap1192、黄耳 10 号、抗 1 三个菌
株,分别是 1. 394、1. 300 、1. 020 cm /d,其中抗 1 菌
株生长速度最慢。
2. 4 3 种处理的菌丝平均生长速度分析
从图 2 可知,培养温度为 25 ℃、培养基为棉籽
壳培养基和培养温度为 35 ℃、培养基为酵母培养基
的生长速度最快和最慢的 3 个菌株都一致,说明紫
木耳、Au2、琥珀木耳 3 个菌株能够较好地适应 35
℃高温环境,并且在 25 ℃时吃料能力较强,较适合
高温气候栽培。而 Ap1192、黄耳 10 号、抗 1 在 35
℃酵母培养基和 25 ℃棉籽壳培养基上菌丝生长都
最慢,说明其高温环境适应性不强,且吃料力相对较
弱,其生产应用还有待于进一步研究。上海 1 号、
Ap117、781 菌株 3 个菌株尽管在 25 ℃、培养基为酵
母培养基时生长速度最快,但在 35 ℃高温环境和
25 ℃棉籽壳培养基中生长速度中等,实验测定中不
具优势。
3 讨论与结论
前期工作中,ISSR聚类分析结果显示四川广泛
栽培的主栽品种上海 1 号、琥珀木耳、781 聚在一个
类群,而黄耳 10 号聚在另一类群[6],说明黄耳 10 号
与上海 1 号、琥珀木耳、781 等菌株遗传距离较远。
在 ITS序列分析中发现结果黄耳 10 号与上海 1 号、
781 系统发育关系较近,共同聚在第一个分支,而琥
珀木耳与黄耳 10 号、上海 1 号、781 系统发育关系
图 1 22 个毛木耳菌株菌丝生长速度
Fig. 1 The hyphal growth rates within 22 Auricularia nigricans strains
30025 期 贾定洪等:22 个毛木耳菌株生长速度分析
图 2 3 种处理下菌丝生长速度
Fig. 2 The hyphal growth rates of 3 treatments within 22 Auricularia nigricans strains
较远,与三优一起聚在第二分支[7]。这种结果可能
与黄耳 10 号商品性状最好而琥珀木耳较次存在关
联,但其具体分子机理与表征关系还需要进一步深
入研究。
栽培生产中,黄耳 10 号商品性状最好,主用于
鲜销,其干品也比上海 1 号、781、琥珀木耳等品种高
1. 0 ~ 1. 5 元 /斤,但相对上海 1 号、781 等主栽品种
菌丝生长速度较慢、抗逆性不强,对栽培环境要求较
高,因此,主要分布在四川彭山及成都周边等环境较
好地区,而在四川什邡等毛木耳生产老区几乎没有
分布。而上海 1 号、781、琥珀木耳菌丝生长速度较
快,抗逆性较好,为四川什邡应用面积最广的品种。
这与本实验结果基本一致。因此,可以结合本实验
结果,以黄耳 10 号、上海 1 号、781、琥珀木耳为亲本
菌株,通过单孢杂交等育种手段集合亲本菌株各自
优势,育成商品性好、抗逆性强的毛木耳新品种,促
进毛木耳生产。
菌丝生产速度与其自身品种特性有关,其快慢
关系着是否能尽早在栽培料中定植并占据优势,抑
制其它杂菌病害滋生[8],对疣疤病等毛木耳重要病
害防治具有重要意义。本实验研究了不同处理毛木
耳的菌丝生长速度,发现菌株菌丝生长速度变化趋
势不尽一致,反映出了菌株对不同环境的适应能力,
也是菌株品种特性的体现,可为毛木耳育种、种性研
究等提供重要参考。
参考文献:
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(责任编辑 李 洁)
4002 西 南 农 业 学 报 26 卷