全 文 ：ｈｔｔｐ：／／ＸＢＹＺ．ｃｂｐｔ．ｃｎｋｉ．ｎｅｔ
２．４．６　样品含量测定　分别取３批人参总皂苷提取
物适量，精密称定，按照２．２项下方法制备供试品溶
液，按照２．３项下色谱条件测定峰面积，计算含量，结
果见表４。
表４　３批人参总皂苷提取物中７种人参皂苷的含量（％）
Ｔａｂ．４　３ｂａｔｃｈｅｓ　ｏｆ　ｇｉｎｓｅｎｇ　ｔｏｔａｌ　ｓａｐｏｎｉｎｓ　ｏｆ　７ｋｉｎｄｓ　ｏｆ　ｇｉｎｓｅｎｇ　ｓａｐｏｎｉｎ　ｃｏｎｔｅｎｔ（％）ｉｎ　ｔｈｅ　ｅｘｔｒａｃｔ
人参皂苷提取物 人参皂苷Ｒｇ１ 人参皂苷Ｒｅ 人参皂苷Ｒｆ 人参皂苷Ｒｂ１ 人参皂苷Ｒｂ２ 人参皂苷Ｒｃ 人参皂苷Ｒｄ
１３０３０１　 ２０．４　 １１．７　 ４．２　 ２４．１　 ９．２　 ８．４　 ５．１
１３０３０２　 ２１．１　 １１．５　 ４．８　 ２４．６　 ９．０　 ８．５　 ５．４
１３０３０３　 ２０．３　 １１．３　 ４．５　 ２４．５　 ８．４　 ８．７　 ５．２
３　讨论
２０１５年版《中国药典》一部中人参皂苷含量测定
需要时间１００ｍｉｎ，本文建立超高效液相色谱法的色
谱条件可以在２０ｍｉｎ内使７种人参皂苷得到很好的
分离，方法灵敏、快速，为人参皂苷的质量控制提供了
准确、可靠的测定方法。
作者经过大量地液相梯度洗脱条件摸索，曾采用
甲醇－水、甲醇－５ｍＬ·Ｌ－１磷酸水、乙腈－水和乙腈－５
ｍＬ·Ｌ－１磷酸水等不同洗脱系统，在乙腈－水系统下，
７种人参皂苷类成分的分离度均大于１．５，且峰形较
好。因此采用乙腈－水为该实验的流动相。比较２５，
３０和３５℃等不同温度下色谱柱的分离效果，结果表
明，３０℃下柱压较低且分离效果最佳，因此确定柱温
为３０℃。
色谱柱的选择：作者比较了 Ｗａｔｅｒｓ　Ａｃｑｕｉｔｙ
ＢＥＨ　Ｃ１８（２．１ｍｍ×１００ｍｍ，１．７μｍ）色谱柱，Ｗａ－
ｔｅｒｓ　Ａｃｑｕｉｔｙ　ＣＳＨ　Ｃ１８（１００ｍｍ×２．１ｍｍ，１．７μｍ）
色谱柱和 Ｗａｔｅｒｓ　Ａｃｑｕｉｔｙ　ＨＳＳ　Ｔ３色谱柱，结果表
明，Ｗａｔｅｒｓ　Ａｃｑｕｉｔｙ　ＢＥＨ　Ｃ１８（１００ｍｍ×２．１ｍｍ，１．７
μｍ）色谱柱分离效果较好，该方法使各峰均能达到基
线分离，能精确地测定人参皂苷的含量。
研究结果表明，本文建立的 ＵＰＬＣ测定７种人
参皂苷含量的方法简便、准确、重复性好、稳定性高，
可以实现人参提取物的多指标质量控制，为测定人参
皂苷提供了可靠的分析方法。
参考文献：
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ｌｅ－ｂｌｉｎｄ，ｐｌａｃｅｂｏ－ｃｏｎｔｒｏｌｅｄ，ｍｕｌｔｉｃｅｎｔｅｒ　ｔｒｉａｌ［Ｊ］．Ｅｕｒ　Ｊ
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Ｓｔｅａｍｅｄ　Ｐａｎａｘ　ｑｕｉｎｑｕｅｆｏｌｉｕｓ　ａｎｄ　Ｉｔｓ　Ｇｉｎｓｅｎｏｓｉｄｅｓ
Ｔｒａｎｓｆｏｒｍａｔｉｏｎｓ　Ｉｎｄｕｃｅｄ　ｂｙ　Ｒｅｐｅｔｉｔｉｏｕｓ　Ｓｔｅａｍｉｎｇ［Ｊ］．
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（收稿日期：２０１６－０３－１６）
基金项目：国家自然科学基金项目（编号：８１２０２４９２）
青荚叶指纹图谱的研究
庞新莉１，郭欢迎２，李峰丽３（１．西安市儿童医院，西安　７１００８３；２．陕西省食品药品检验所，西安　７１００６５；３．北京康远制药有
限公司，北京　１０００７１）
摘要：目的　 建立青荚叶的高效液相（ＨＰＬＣ）指纹图谱，为其制药、采收、利用及质量评价提供依据。方法　以木犀草素为对照
品，采用反相高效液相色谱法测定１０批不同商家的青荚叶，绘制色谱图，确立参照指纹图谱，并用中药指纹图谱相似度评价系
统，计算其相似度。色谱条件：色谱柱：ＯＤＳ　Ｃ１８（２５０ｍｍ×４．６ｍｍ，５μｍ）；流动相：甲醇－２ｍＬ·Ｌ
－１磷酸水溶液；柱温：２５℃；流
４４４ 西北药学杂志　２０１６年９月　第３１卷　第５期
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速：１．０ｍＬ·ｍｉｎ－１；检测波长：３５０ｎｍ；记录时间：３０ｍｉｎ。结果　共标示出青荚叶的５个特征指纹峰；各批样品相似度介于
０．８０～０．９９之间。表明不同批次的青荚叶组成相似，但含量稍有差异。结论　所建立的青荚叶 ＨＰＬＣ指纹图谱测定方法稳定
性及重复性较好，为青荚叶的应用及质量评价提供依据。
关键词：青荚叶；反相高效液相色谱法；指纹图谱
ｄｏｉ：１０．３９６９／ｊ．ｉｓｓｎ．１００４－２４０７．２０１６．０５．００２
中图分类号：Ｒ２８４　　　文献标志码：Ａ　　　文章编号：１００４－２４０７（２０１６）０５－０４４４－０５
ＨＰＬＣ　ｆｉｎｇｅｒｐｒｉｎｔ　ｏｆ　Ｈｅｌｗｉｎｇｉａ　ｊａｐｏｎｉｃａ
ＰＡＮＧ　Ｘｉｎｌｉ　１，ＧＵＯ　Ｈｕａｎｙｉｎｇ２，ＬＩ　Ｆｅｎｇｌｉ　３（１．Ｃｈｉｌｄｒｅｎ′ｓ　Ｈｏｓｐｉｔａｌ　ｏｆ　Ｘｉ′ａｎ，Ｘｉ′ａｎ　７１００８３，Ｃｈｉｎａ；２．Ｓｈａａｎｘｉ　Ｐｒｏｖｉｎｃｉａｌ　Ｉｎｓｔｉｔｕｔｅ　ｆｏｒ
Ｆｏｏｄ　ａｎｄ　Ｄｒｕｇ　Ｃｏｎｔｒｏｌ，Ｘｉ′ａｎ　７１００６５，Ｃｈｉｎａ；３．Ｂｅｉｊｉｎｇ　Ｋａｎｇｙｕａｎ　Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ　Ｌｉｍｉｔｅｄ　Ｃｏｍｐａｎｙ，Ｂｅｉｊｉｎｇ　１０００７１，Ｃｈｉｎａ）
Ａｂｓｔｒａｃｔ：Ｏｂｊｅｃｔｉｖｅ　Ｔｏ　ｅｓｔａｂｌｉｓｈ　ＨＰＬＣ　ｆｉｎｇｅｒｐｒｉｎｔ　ｏｆ　Ｈｅｌｗｉｎｇｉａ　ｊａｐｏｎｉｃａ　ａｎｄ　ｔｏ　ｐｒｏｖｉｄｅ　ａ　ｒｅｆｅｒｅｎｃｅ　ｆｏｒ　ｈａｒｖｅｓｔ，ａｐｐｌｉｃａｔｉｏｎ　ａｎｄ
ｑｕａｌｉｔｙ　ｅｖａｌｕａｔｉｏｎ　ｏｆ　Ｈｅｌｗｉｎｇｉａ　ｊａｐｏｎｉｃａ．Ｍｅｔｈｏｄｓ　ＲＰ－ＨＰＬＣ　ｍｅｔｈｏｄ　ｗａｓ　ｕｓｅｄ　ｔｏ　ｄｅｔｅｒｍｉｎｅ　ｔｈｅ　ｃｏｎｔｅｎｔ　ｏｆ　１０ｂａｔｃｈｅｓ　Ｈｅｌｗｉｎｇｉａ
ｊａｐｏｎｉｃａｆｒｏｍ　ｄｉｆｆｅｒｅｎｔ　ｈａｂｉｔａｔｓ　ｗｉｔｈ　ｒｕｔｉｎ　ａｎｄ　ｑｕｅｒｃｅｔｉｎ　ａｓ　ｃｏｎｔｒｏｌ．Ｔｈｅ　ｓｉｍｉｌａｒｉｔｙ　ｗａｓ　ｃａｌｃｕｌａｔｅｄ　ｕｓｉｎｇ　ｆｉｎｇｅｒｐｒｉｎｔ　ｓｉｍｉｌａｒｉｔｙ　ｅｖａｌ－
ｕａｔｉｏｎ　ｓｙｓｔｅｍ．Ｔｈｅ　ｓｅｐａｒａｔｉｏｎ　ｗａｓ　ｐｅｒｆｏｒｍｅｄ　ｏｎ　ａ　Ｈｙｐｅｒｓｉｌ　ＯＤＳ　Ｃ１８（２５０ｍｍ×４．６ｍｍ，５μｍ）ｃｏｌｕｍｎ　ｗｉｔｈ　ｍｏｂｉｌｅ　ｐｈａｓｅ　ｃｏｎｓｉｓ－
ｔｅｄ　ｏｆ　ｍｅｔｈａｎｏｌ－２ｍＬ·Ｌ－１ｐｈｏｓｐｈｏｒｉｃ　ａｃｉｄ　ｓｏｌｕｔｉｏｎ（ｇｒａｄｉｅｎｔ　ｅｌｕｔｉｏｎ）ａｔ　ａ　ｆｌｏｗ　ｒａｔｅ　ｏｆ　１．０ｍＬ·ｍｉｎ－１　ｌａｓｔｉｎｇ　ｆｏｒ　３０ｍｉｎ．Ｔｈｅ　ＵＶ
ｄｅｔｅｃｔｉｏｎ　ｗａｖｅｌｅｎｇｔｈ　ｗａｓ　ｓｅｔ　ａｔ　３５０ｎｍ　ａｎｄ　ｃｏｌｕｍｎ　ｔｅｍｐｅｒａｔｕｒｅ　ｗａｓ　ａｔ　２５℃．Ｒｅｓｕｌｔｓ　Ｔｈｅ　ｒｅｓｕｌｔｓ　ｓｈｏｗｅｄ　ｔｈａｔ　５ｐｅａｋｓ　ｗｅｒｅ　ｒｅｃ－
ｏｇｎｉｚｅｄ　ａｓ　ｃｏｍｍｏｎ　ｐｅａｋｓ．Ｔｈｅ　ｓｉｍｉｌａｒｉｔｙ　ｉｎｄｅｘ　ｏｆ　１０ｂａｔｃｈｅｓ　Ｈｅｌｗｉｎｇｉａ　ｊａｐｏｎｉｃａ　ｓａｍｐｌｅｓ　ｗｅｒｅ　ｂｅｔｗｅｅｎ　０．８０～０．９９．Ｔｈｅ　ｒｅｓｕｌｔｓ
ｉｎｄｉｃａｔｅｄ　ｔｈｅ　ｃｈｅｍｉｃａｌ　ｃｏｍｐｏｎｅｎｔｓ　ｗｅｒｅ　ｓｉｍｉｌａｒ　ｂｕｔ　ｔｈｅ　ｃｏｎｔｅｎｔｓ　ｏｆ　ｔｈｅ　ｃｏｍｐｏｕｎｄｓ　ｗａｓ　ｄｉｆｆｅｒｅｎｔ．Ｃｏｎｃｌｕｓｉｏｎ　Ｔｈｅ　ｅｓｔａｂｌｉｓｈｅｄ
ＨＰＬＣ　ｆｉｎｇｅｒｐｒｉｎｔ　ｏｆ　Ｈｅｌｗｉｎｇｉａ　ｊａｐｏｎｉｃａｉｓ　ｓｔａｂｌｅ，ｒｅｌｉａｂｌｅ　ａｎｄ　ｒｅｐｒｏｄｕｃｉｂｌｅ，ｗｈｉｃｈ　ｉｓ　ｖａｌｕａｂｌｅ　ｆｏｒ　ｈａｒｖｅｓｔ，ａｐｐｌｉｃａｔｉｏｎ　ａｎｄ　ｑｕａｌｉｔｙ
ｅｖａｌｕａｔｉｏｎ　ｏｆ　Ｈｅｌｗｉｎｇｉａ　ｊａｐｏｎｉｃａ．
Ｋｅｙ　ｗｏｒｄｓ：Ｈｅｌｗｉｎｇｉａ　ｊａｐｏｎｉｃａ；ＲＰ－ＨＰＬＣ；ｆｉｎｇｅｒｐｒｉｎｔ
　　青荚叶 Ｈｅｌｗｉｎｇｉａ　ｊａｐｏｎｉｃａ（Ｔｈｕｎｂ）来源于山
茱萸科青荚叶属，又名叶上花、叶上果等，其茎、叶、根
都可入药［１］。青荚叶中含有表儿茶素、β－胡萝卜苷、
棕榈酸、甘油酯、桂皮酸、木犀草素和７－Ｏ－β－Ｄ－吡喃葡
萄糖苷等成分［２－３］。指纹图谱是一种顺应中药中组分
多、靶点多、从“全成分”的角度出发的现代中药质量
控制方法，能够全面评价中药的化学成分［４］，反映中
药材的质量，在中药材及制剂质量控制领域受到广泛
关注［５－６］。国内外现有文献中仅对青荚叶的含量测定
有报道，而对青荚叶指纹图谱研究的论文未见报道。
为了能更全面地控制青荚叶的质量，本文选择木犀草
素作为对照品，利用ＨＰＬＣ法建立了１０批青荚叶药材
的指纹图谱，以木犀草素为对照品特征峰，建立青荚叶
的指纹图谱测定方法，为青荚叶的质量控制提供依据。
１　仪器与试药
１．１　仪器　Ａｇｉｌｅｎｔ　１２２０高效液相色谱仪（安捷伦
科技公司），配置：Ｔｈｅｒｍｏ　Ｃ１８柱（２５０ｍｍ×４．６ｍｍ，
５μｍ），手动进样器，真空在线脱气，ＶＷＤ紫外检测
器，恒温柱温箱；ＳＥＮＣＯＲ系列旋转蒸发器（上海申
生科技有限公司）；ＳＸＫＷ 数显控温电热套（北京市
永光明医疗仪器厂）；ＳＨＺ－Ｄ（Ⅲ）循环水式真空泵（上
海予申仪器有限公司）；ＫＱ－３００Ｂ型超声波清洗器
（昆山市超声仪器有限公司）；ＳＱＰ１２４型电子天平
（赛多利斯科学仪器有限公司）。
１．２　试药　甲醇、乙醚、磷酸均为分析纯；甲醇为色
谱纯；娃哈哈纯净水；木犀草素对照品（上海金穗生物
科技有限公司，ＪＳ９０１０８－２０ｍｇ）；１０批青荚叶药材分
别在不同时间、不同商家购买于陕西省中药材批发市
场，经鉴定为山茱萸科青荚叶。
２　方法与结果
２．１　色谱条件　色谱柱：Ｔｈｅｒｍｏ　Ｃ１８柱（２５０ｍｍ×
４．６ｍｍ，５μｍ）；流动相是甲醇－２ｍＬ·Ｌ
－１磷酸溶液
（７５∶２５），等度洗脱；流速：１．０ｍＬ·ｍｉｎ－１；检测波
长：３５０ｎｍ；柱温：２５℃；进样量：２０μＬ。
２．２　制备对照品溶液　精密称取木犀草素对照品
８．５ｍｇ，置于２５ｍＬ量瓶中，用甲醇定容（１ｍＬ甲醇
溶液中含０．３４ｍｇ木犀草素），摇匀，用０．４５μｍ滤
膜滤过，备用。
２．３　制备青荚叶样品溶液　取青荚叶，干燥粉碎后，
过２０目筛，精密称取３．０ｇ，加３０ｍＬ甲醇在８０℃
水浴中加热回流２次，每次２ｈ，过滤后合并滤液，采
用旋转蒸发仪蒸干，残渣加５０ｍＬ水溶解，用乙醚萃
取３次，每次乙醚的用量为３０ｍＬ。将３次乙醚萃取
液合并后水浴蒸干［７］，用甲醇溶解并定容于１００ｍＬ
量瓶中，即为供试品溶液。
２．４　方法学考察
２．４．１　线性关系考察　分别精密吸取２．２项下对照
品溶液１．０，５．０，１０．０，１５．０和２０．０μＬ，按照２．１项
５４４西北药学杂志　２０１６年９月　第３１卷　第５期
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下色谱条件进样测定，以峰面积值（Ｙ）对木犀草素进
样量 （Ｘ）进行线性回归，得回归方程Ｙ＝１　９７５．６　Ｘ
－２　２１１．６（ｒ＝０．９９９　８）。结果表明，木犀草素进样量
在０．３４～６．８μｇ范围内线性关系良好。
２．４．２　木犀草素含量测定　按照２．１项下色谱条件
对１０个批次的青荚叶样品进行含量测定，并根据回
归方程计算出木犀草素在青荚叶样品中的含量，结果
Ｓ１～Ｓ１０中木犀草素的含量分别为０．１５％，０．１２％，
０．１３％，０．１４％，０．１３％，０．１５％，０．１４％，０．１２％，
０．１４％和０．１４％。
２．４．３　精密度实验　称取青荚叶药材粉末（Ｓ１），按
照２．３项下方法制备青荚叶样品溶液，在同一天连续
进样５次，测出各共有峰的相对保留时间和保留峰面
积，计算出 ＲＳＤ值分别为１．０％～２．４％和０．８２％～
２．７％。ＲＳＤ值均小于５％，达到指纹图谱对色谱条件的
技术要求。
２．４．４　稳定性实验　称取青荚叶药材粉末（Ｓ１），按
照２．３项下方法制备青荚叶样品溶液，分别在０，４，
８，１２，１６，２０和２４ｈ进行取样检测，测出各共有峰的
相对保留时间和保留峰面积，计算出ＲＳＤ值分别为
１．１％～１．９％和１．３％～２．７％。ＲＳＤ 值均小于
５％，表明青荚叶样品溶液在２４ｈ内稳定，达到指纹
图谱对色谱条件的技术要求。
２．４．５　重复性实验　称取青荚叶药材粉末（Ｓ１），按
照２．３项下方法制备青荚叶样品溶液，进行取样检
测，测出各共有峰相对保留时间和保留峰面积的
ＲＳＤ值分别为０．８％～１．６％和１．３％～２．８％，表明
此方法重复性良好，符合指纹图谱对色谱条件的技术
要求。
２．４．６　加样回收率实验　称取已知含量的青荚叶粉
末６份（Ｓ１），加入１ｍＬ对照品溶液，按照２．３项下
方法制备青荚叶样品溶液后按照选定的色谱条件进行
测定。测出木犀草素的加样回收率范围为９９．８５％～
１００．５％，ＲＳＤ值为０．１０％，结果见表１。
表１　木犀草素加样回收率实验
Ｔａｂ．１Ｔｈｅ　ｒｅｓｕｌｔｓ　ｏｆ　ｌｕｔｅｏｌｉｎ　ｒｅｃｏｖｅｒｙ　ｔｅｓｔ
样品号 取样量／ｍＬ 供试品含量／μｇ 加入量／μｇ 测得总含量／μｇ 回收率／％ 平均回收率／％ ＲＳＤ／％
１　 ０．５　 １７．０４　 ３４０　 ３５７．２４　 １００．１０　 ９９．９５　 ０．１０
２　 ０．５　 １７．０４　 ３４０　 ３５７．１３　 １００．００
３　 ０．５　 １７．０４　 ３４０　 ３５７．００　 ９９．９９
４　 ０．５　 １７．０４　 ３４０　 ３５６．８７　 ９９．９５
５　 ０．５　 １７．０４　 ３４０　 ３５６．４５　 ９９．８３
６　 ０．５　 １７．０４　 ３４０　 ３５６．５６　 ９９．８５
２．５　青荚叶指纹图谱分析与评价
２．５．１　青荚叶指纹图谱分析方法的建立及共有峰的
标定　取青荚叶药材粉末，按照２．３项下方法制备青
荚叶样品溶液，将木犀草素对照品和１０个青荚叶样品
溶液按照选定的色谱条件分别进样测定分析，得到青
荚叶样品对照ＨＰＬＣ色谱图，见图１Ａ［８］。经木犀草素
对照品定性，鉴定出２号色谱峰为木犀草素，见图
１Ｂ。
２．５．２　木犀草素对照图谱　利用中药色谱指纹图谱
相似度评价系统 （２００４版Ａ）对不同的１０批青荚叶
药材中木犀草素 ＨＰＬＣ图谱进行处理，选择青荚叶
色谱图中的５个共有峰作为校正点，建立青荚叶药材
的对照指纹图谱，见图２。由图１Ｂ可知，木犀草素的
色谱峰出峰时无拖尾，分离度较好，峰面积值所占比
例较大且出峰保留时间相对稳定，因此选择木犀草素
色谱峰为参照峰，计算出各共有峰的相对保留时间和
相对峰面积值，结果见表２～３。
图１　ＨＰＬＣ图
Ａ．１０批青荚叶样品；Ｂ．木犀草素对照品；２．木犀草素
Ｆｉｇ．１ＨＰＬＣ　ｃｈｒｏｍａｔｏｇｒａｍｓ
Ａ．１０ｂａｔｃｈｅｓ　Ｈｅｌｗｉｎｇｉａ　ｊａｐｏｎｉｃａ　ｓａｍｐｌｅｓ；Ｂ．ｒｅｆｅｒｅｎｃｅ　ｓｕｂ－
ｓｔａｎｃｅｓ；２．ｌｕｔｅｏｌｉｎ
６４４ 西北药学杂志　２０１６年９月　第３１卷　第５期
ｈｔｔｐ：／／ＸＢＹＺ．ｃｂｐｔ．ｃｎｋｉ．ｎｅｔ
表２　１０批青荚叶药材指纹图谱共有峰的相对保留时间
Ｔａｂ．２Ｔｈｅ　１０ｂａｔｃｈｅｓ　ｏｆ　Ｈｅｌｗｉｎｇｉａ　ｊａｐｏｎｉｃａ　ｆｉｎｇｅｒｐｒｉｎｔ　ｏｆ
ｔｈｅ　ｒｅｌａｔｉｖｅ　ｒｅｔｅｎｔｉｏｎ　ｔｉｍｅ　ｏｆ　ｃｏｍｍｏｎ　ｐｅａｋｓ
编号 峰１ 峰２ 峰３ 峰４ 峰５
Ｓ１　 ０．８２　 ０．９９　 １．１２　 １．８９　 １．３５
Ｓ２　 ０．８０　 ０．９８　 １．１３　 １．９０　 １．３６
Ｓ３　 ０．８３　 ０．９７　 １．１０　 １．８７　 １．４０
Ｓ４　 ０．７８　 ０．１０　 １．１４　 １．９０　 １．３９
Ｓ５　 ０．７７　 ０．１２　 １．０９　 １．９１　 １．３１
Ｓ６　 ０．８２　 ０．９７　 １．１２　 １．８８　 １．３６
Ｓ７　 ０．８４　 ０．９６　 １．０８　 １．８６　 １．３２
Ｓ８　 ０．７９　 ０．９９　 １．１０　 １．９３　 １．４１
Ｓ９　 ０．８０　 ０．１３　 １．１３　 １．９０　 １．３８
Ｓ１０　 ０．７８　 ０．１１　 １．０９　 １．８７　 １．３４
图２　１０批青荚叶药材对照指纹图谱共有模式
Ｆｉｇ．２　１０ｂａｔｃｈｅｓ　Ｈｅｌｗｉｎｇｉａ　ｊａｐｏｎｉｃａ　ｈｅｒｂｓ　ｆｉｎｇｅｒｐｒｉｎｔｓ　ｏｆ
ｔｈｅ　ｃｏｎｔｒｏｌ　ｍｏｄｅｌ
２．５．３　１青荚叶指纹图谱相似度评价　采用中药色
谱指纹图谱相似度评价系统（２００４版Ａ），使用中位数
法对所得的１０批青荚叶药材的 ＨＰＬＣ指纹图谱全
谱进行相似度计算。结果显示，１０批青荚叶药材的
ＨＰＬＣ指纹图谱与对照指纹图谱相比，相似度分别
为：０．９２２，０．９４３，０．９９７，０．９７８，０．９５７，０．９６２，０．９４７，
０．９８２，０．９６３和０．９１９。充分证明，１０批青荚叶药材
与对照峰Ｒ的相似度较大，差异不显著，因此所选择
的５个共有峰可以作为青荚叶药材指纹图谱的特征
峰进行青荚叶药材的鉴别，相似度结果见表４。
表３　１０批青荚叶药材指纹图谱共有峰的相对峰面积
Ｔａｂ．３Ｔｈｅ　１０ｂａｔｃｈｅｓ　ｏｆ　Ｈｅｌｗｉｎｇｉａ　ｊａｐｏｎｉｃａ　ｆｉｎｇｅｒｐｒｉｎｔｓ　ｏｆ
ｃｏｍｍｏｎ　ｐｅａｋｓ
编号 峰１ 峰２ 峰３ 峰４ 峰５
Ｓ１　 ０．１４　 １．００　 ０．０９０　 ０．１５　 ４．４７
Ｓ２　 ０．１６　 ０．９９　 ０．１００　 ０．１６　 ４．４８
Ｓ３　 ０．１３　 ０．９７　 ０．０９３　 ０．１４　 ４．４３
Ｓ４　 ０．１０　 １．０２　 ０．０９７　 ０．１８　 ４．４６
Ｓ５　 ０．１５　 １．０３　 ０．１１０　 ０．１５　 ４．４２
Ｓ６　 ０．１７　 ０．９５　 ０．０９６　 ０．１７　 ４．４８
Ｓ７　 ０．１４　 ０．９６　 ０．０９２　 ０．１３　 ４．４６
Ｓ８　 ０．１６　 ０．９７　 ０．０９１　 ０．１７　 ４．４９
Ｓ９　 ０．１７　 ０．９７　 ０．１００　 ０．１４　 ４．４８
Ｓ１０　 ０．１５　 ０．９８　 ０．０９５　 ０．１８　 ４．４３
３　结论与讨论
３．１　流动相的选择　本实验曾采用甲醇－２ｍＬ·Ｌ－１
磷酸水溶液，以比例５８∶４２，６０∶４０和６５∶３５作为流动
相，流速为１．０ｍＬ·ｍｉｎ－１，但由于样品未能很好地
分离且峰形有前沿现象。最后采用甲醇－２ｍＬ·Ｌ－１
磷酸水溶液（７５∶２５）为流动相，木犀草素出峰保留时
间适中（２０ｍｉｎ），峰形较为理想，分离度好。
表４　青荚叶药材相似度结果
Ｔａｂ．４Ｔｈｅ　ｓｉｍｉｌａｒｉｔｙ　ｒｅｓｕｌｔｓ　ｏｆ　Ｈｅｌｗｉｎｇｉａ　ｊａｐｏｎｉｃａ　ｈｅｒｂｓ
编号 Ｓ１ Ｓ２ Ｓ３ Ｓ４ Ｓ５ Ｓ６ Ｓ７ Ｓ８ Ｓ９ Ｓ１０
对照指
纹图谱
Ｓ１　 １．０００　 ０．９６４　 ０．９２１　 ０．８９７　 ０．８４６　 ０．９９３　 ０．８６２　 ０．９９７　 ０．７９９　 ０．８７９　 ０．９２２
Ｓ２　 ０．９６４　 １．０００　 ０．８７４　 ０．８６９　 ０．８５４　 ０．９７８　 ０．７９９　 ０．９８７　 ０．９７２　 ０．９９９　 ０．９４３
Ｓ３　 ０．９２１　 ０．８７４　 １．０００　 ０．９４８　 ０．９３４　 ０．８５７　 ０．８２２　 ０．８９９　 ０．８５１　 ０．８３４　 ０．９９７
Ｓ４　 ０．８９７　 ０．８６９　 ０．９４８　 １．０００　 ０．９７６　 ０．８２３　 ０．８６７　 ０．８８０　 ０．９００　 ０．８８９　 ０．９７８
Ｓ５　 ０．８４６　 ０．８５４　 ０．９３４　 ０．９７６　 １．０００　 ０．９５４　 ０．８９９　 ０．９０７　 ０．９５２　 ０．９６７　 ０．９５７
Ｓ６　 ０．９９３　 ０．９７８　 ０．８５７　 ０．８２３　 ０．９５４　 １．０００　 ０．９２３　 ０．９６９　 ０．８９９　 ０．８７９　 ０．９６２
Ｓ７　 ０．８６２　 ０．７９９　 ０．８２２　 ０．８６７　 ０．８９９　 ０．９２３　 １．０００　 ０．８５９　 ０．８８１　 ０．８７４　 ０．９４７
Ｓ８　 ０．９９７　 ０．９８７　 ０．８９９　 ０．８８０　 ０．９０７　 ０．９６９　 ０．８５９　 １．０００　 ０．９５１　 ０．９３４　 ０．９８２
Ｓ９　 ０．７９９　 ０．９７２　 ０．８５１　 ０．９００　 ０．９５２　 ０．８９９　 ０．８８１　 ０．９５１　 １．０００　 ０．９５９　 ０．９６３
Ｓ１０　 ０．８７９　 ０．９９９　 ０．９３４　 ０．８８９　 ０．９６７　 ０．８７９　 ０．８７４　 ０．９３４　 ０．９５９　 １．０００　 ０．９１９
对照指纹图谱 ０．９２２　 ０．９４３　 ０．９９７　 ０．９７８　 ０．９５７　 ０．９６２　 ０．９４７　 ０．９８２　 ０．９６３　 ０．９１９　 １．０００
７４４西北药学杂志　２０１６年９月　第３１卷　第５期
ｈｔｔｐ：／／ＸＢＹＺ．ｃｂｐｔ．ｃｎｋｉ．ｎｅｔ
３．２　样品前处理优化　本实验供试品前处理方法采
用甲醇加热回流２次，合并滤液，最后定容至１００ｍＬ
量瓶中，作为储备液备用。但在进行 ＨＰＬＣ分析时，
发现供试品进样后出峰效果不好，分离度差，所需的
主峰有拖尾现象，最后采用乙醚对供试品精制萃取３
次后，发现供试品出峰效果好，分离度高，所需主峰峰
形完整。
３．３　青荚叶药材指纹图谱评价　本实验对１０批青
荚叶药材进行了 ＨＰＬＣ色谱分析，选择了稳定性较
好、紫外吸收较强的５个色谱峰作为共有峰。结果显
示，１０批青荚叶药材相似度数值均大于０．９１９，证明
这１０批药材的液相图谱差异不显著，因此所选择的
５个共有峰可以作为青荚叶药材指纹图谱的特征峰
进行青荚叶药材的鉴别。
参考文献：
［１］　李双妹．青荚叶多糖的提取及含量测定［Ｊ］．温州职业技
术学院学报，２０１０，１０（２）：４９－５２．
［２］　杨小录，王瀚．中国青荚叶属植物资源及其开发利用
［Ｊ］．甘肃高师学报，２０１０，１５（５）：２８－３０．
［３］　杨娟，娄方明，牛煜坤．中华青荚叶化学成分研究［Ｊ］．中
国中药杂志，２００７，３２（１４）：１４１６－１４１８．
［４］　崔誉文，杨黎彬，杨静，等．黄翘 ＨＰＬＣ指纹图谱研究
［Ｊ］．西北药学杂志，２０１４，２９（５）：４４６－４４９．
［５］　孔祥玲，张曜武，王超．中药色谱指纹图谱研究的回顾与
展望［Ｊ］．西北药学杂志，２０１０，２５（１）：７４－７６．
［６］　刘文，蒋世云．中药指纹图谱研究与应用进展［Ｊ］．中国
药房，２０１１，２２（１９）：１８１９－１８２２．
［７］　陈志红，徐美奕，龚先玲．紫荆花黄酮类化合物的 ＨＰＬＣ
指纹图谱研究［Ｊ］．中国药房，２０１０，２１（３１）：２９２７－２９２８．
［８］　朱婕，洪俊丽，秦民坚．紫花地丁 ＨＰＬＣ指纹图谱研究
［Ｊ］．中国野生植物资源，２０１１，３０（４）：４６－４９．
（收稿日期：２０１６－０３－１０）
平消胶囊（片）ＨＰＬＣ特征图谱研究
刘　越１，罗定强１＊，康　荣２，王国海１（１．陕西省食品药品检验所，西安　７１００６５；２．西安医学院，西安　７１００２１）
摘要：目的　 建立平消胶囊（片）的特征图谱，提高其质量控制水平。方法　以甲醇为溶剂，进行超声提取；色谱柱：Ｋｒｏｍａｓｉｌ　Ｃ１８
（２５０ｍｍ×４．６ｍｍ，５μｍ）；流动相：乙腈－５ｍＬ·Ｌ
－１磷酸水溶液，梯度洗脱；流速：１．０ｍＬ·ｍｉｎ－１；检测波长：２６３ｎｍ；柱温：３５
℃。结果　平消胶囊（片）各成分得到了较好的分离，以柚皮苷为参照物，确定了９个共有色谱峰，分别来源于马钱子、枳壳和五
灵脂。结论　该方法准确、重复性好，可同时分离平消制剂中的多种成分，尤其是对现有标准方法中枳壳主要成分柚皮苷薄层鉴
别项易出现假阳性结果的现象进行补充。
关键词：平消胶囊（片）；特征图谱；枳壳；质量控制
ｄｏｉ：１０．３９６９／ｊ．ｉｓｓｎ．１００４－２４０７．２０１６．０５．００３
中图分类号：Ｒ２８４　　　文献标志码：Ａ　　　文章编号：１００４－２４０７（２０１６）０５－０４４８－０４
ＨＰＬＣ　ｓｐｅｃｉｆｉｃ　ｃｈｒｏｍａｔｏｇｒａｍｓ　ｏｆ　Ｐｉｎｇｘｉａｏ　Ｃａｐｓｕｌｅｓ（Ｔａｂｌｅｔｓ）
ＬＩＵ　Ｙｕｅ１，ＬＵＯ　Ｄｉｎｇｑｉａｎｇ１＊，ＫＡＮＧ　Ｒｏｎｇ２，ＷＡＮＧ　Ｇｕｏｈａｉ　１（１．Ｓｈａａｎｘｉ　Ｉｎｓｔｉｔｕｔｅ　ｆｏｒ　Ｆｏｏｄ　ａｎｄ　Ｄｒｕｇ　Ｃｏｎｔｒｏｌ，Ｘｉ′ａｎ　７１００６５，Ｃｈｉ－
ｎａ；２．Ｘｉ′ａｎ　Ｍｅｄｉｃａｌ　Ｃｏｌｅｇｅ，Ｘｉ′ａｎ　７１００２１，Ｃｈｉｎａ）
Ａｂｓｔｒａｃｔ：Ｏｂｊｅｃｔｉｖｅ　Ｔｏ　ｅｓｔａｂｌｉｓｈ　ｔｈｅ　ｓｐｅｃｉｆｉｃ　ｃｈｒｏｍａｔｏｇｒａｍ　ｏｆ　Ｐｉｎｇｘｉａｏ　Ｃａｐｓｕｌｅｓ（Ｔａｂｌｅｔｓ）ｂｙ　ＨＰＬＣ，ａｎｄ　ｔｏ　ｉｍｐｒｏｖｅ　ｔｈｅ　ｑｕａｌｉｔｙ
ｃｏｎｔｒｏｌ．Ｍｅｔｈｏｄｓ　Ｓａｍｐｌｅｓ　ｗｅｒｅ　ｐｒｅｐａｒｅｄ　ｂｙ　ｕｌｔｒａｓｏｎｉｃ　ｅｘｔｒａｃｔｉｏｎ　ｗｉｔｈ　ｍｅｔｈａｎｏｌ；ｔｈｅ　Ｋｒｏｍａｓｉｌ　Ｃ１８（２５０ｍｍ×４．６ｍｍ，５μｍ）ｃｈｒｏ－
ｍａｔｏｇｒａｐｈｉｃ　ｃｏｌｕｍｎ　ａｎｄ　ｔｈｅ　ｍｏｂｉｌｅ　ｐｈａｓｅ　ｏｆ　ａｃｅｔｏｎｉｔｒｉｌｅ－５ｍＬ·Ｌ－１ａｑｕｅｏｕｓ　ｐｈｏｓｐｈｏｒｉｃ　ａｃｉｄ　ｗｅｒｅ　ｕｓｅｄ　ｆｏｒ　ｇｒａｄｉｅｎｔ　ｅｌｕｔｉｏｎ　ｗｉｔｈ
ｔｈｅ　ｆｌｏｗ　ｒａｔｅ　ａｔ　１．０ｍＬ·ｍｉｎ－１　ａｎｄ　ｔｈｅ　ｄｅｔｅｃｔｉｏｎ　ｗａｖｅｌｅｎｇｔｈ　ａｔ　２６３ｎｍ．Ｔｈｅ　ｃｏｌｕｍｎ　ｏｖｅｎ　ｔｅｍｐｅｒａｔｕｒｅ　ｗａｓ　ｋｅｐｔ　ａｔ　３５℃．Ｒｅｓｕｌｔｓ
Ｔｈｅ　ｃｏｎｓｔｉｔｕｅｎｔｓ　ｏｆ　Ｐｉｎｇｘｉａｏ　Ｃａｐｓｕｌｅｓ（Ｔａｂｌｅｔｓ）ｓｈｏｗｅｄ　ａ　ｇｏｏｄ　ｓｅｐａｒａｔｉｏｎ　ａｎｄ　ｎｉｎｅ　ｃｏｍｍｏｎ　ｐｅａｋｓ　ｗｅｒｅ　ｉｄｅｎｔｉｆｉｅｄ　ｗｉｔｈ　ｎａｒｉｎｇｉｎ　ａｓ
ａ　ｒｅｆｅｒｅｎｃｅ，ｗｈｉｃｈ　ｗｅｒｅ　ｄｅｒｉｖｅｄ　ｆｒｏｍ　Ｓｔｒｙｃｈｎｉ　ｓｅｍｅｎ，Ｆｒｕｃｔｕｓ　ａｕｒａｎｔｉｉ　ａｎｄ　Ｆａｅｃｅｓ　ｔｒｏｇｏｐｔｅｒｏｒｉ，ｒｅｓｐｅｃｔｉｖｅｌｙ．Ｃｏｎｃｌｕｓｉｏｎｓ　Ｔｈｅ
ｍｅｔｈｏｄ　ｈａｓ　ａｄｖａｎｔａｇｅｓ　ｏｆ　ｇｏｏｄ　ａｃｃｕｒａｃｙ　ａｓ　ｗｅｌ　ａｓ　ｒｅｐｒｏｄｕｃｉｂｉｌｉｔｙ　ａｎｄ　ｃａｎ　ｓｉｍｕｌｔａｎｅｏｕｓｌｙ　ｓｅｐａｒａｔｅ　ｔｈｅ　ｍｕｌｔｉｐｌｅ　ｃｏｍｐｏｎｅｎｔｓ　ｏｆ
Ｐｉｎｇｘｉａｏ　Ｃａｐｓｕｌｅｓ（Ｔａｂｌｅｔｓ），ｗｈｉｃｈ　ｉｓ　ａｌｓｏ　ａ　ｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｔ　ｓｕｐｐｌｅｍｅｎｔ　ｏｆ　ｆｒｅｑｕｅｎｔｌｙ　ｆａｌｓｅ－ｐｏｓｉｔｉｖｅ　ｒｅｓｕｌｔｓ　ｉｎ　ｃｕｒｒｅｎｔ　ｓｔａｎｄａｒｄ　ＴＬＣ　ｉ－
ｄｅｎｔｉｆｉｃａｔｉｏｎ　ｆｏｒ　ｎａｒｉｎｇｉｎ．
Ｋｅｙ　ｗｏｒｄｓ：Ｐｉｎｇｘｉａｏ　Ｃａｐｓｕｌｅｓ（Ｔａｂｌｅｔｓ）；ｓｐｅｃｉｆｉｃ　ｃｈｒｏｍａｔｏｇｒａｍ；Ｆｒｕｃｔｕｓ　ａｕｒａｎｔｉｉ；ｑｕａｌｉｔｙ　ｃｏｎｔｒｏｌ
基金项目：国家食品药品监督管理总局上市药品质量分析
专项项目
作者简介：刘越，男，博士，主管药师
＊通信作者：罗定强，男，副主任药师
　　平消胶囊（片）为２０１３年国家药品计划抽验品
种，现行质量标准收载于《中国药典》２０１５年版一部，
主要由郁金、仙鹤草、五灵脂、白矾、硝石、干漆（制）、
枳壳（麸炒）和马钱子粉８味中药组成［１］；具有活血化
瘀、散结消肿和解毒止痛的功效；对毒瘀内结所致的
８４４ 西北药学杂志　２０１６年９月　第３１卷　第５期