全 文 ：2013 年 3 月第 3 期 中国民族医药杂志
2012年 1月 30日收稿
图 4 槟榔十三味丸阴性（缺丁香）对照 HPLC 图谱
参考文献
[ 1 ]卫生部药典委员会 .中华人民共和国卫生部药品标
准·蒙药分册 [ S ] , 1998 , 196 .
[ 2 ]吕武清 .中成药中的药材薄层色谱鉴别 [M ] .人民卫生
出版社 , 1997 , 3 .
[ 3 ]中华人民共和国药典委员会 .中国药典 [ S ] . 2005 年版
一部 [ S ]，2005 , 3 .
[ 4 ]丁香酚质量控制方法的研究 [ J ] . 2006 , 07 , 1223 , 02 .
摘 要 :目的：建立反相高效液相色谱法测定绿原酸含量的方法。方法：选用Phenome C18柱 （4.6×250mm）及岛津 C18柱
（4.6×250mm），流动相：乙腈-0.4%磷酸溶液（7.5：92.5），检测波长为327nm，柱温30℃对绿原酸进行含量测定。结果：绿原
酸在86.68ng～1083.5 ng 范围内与峰面积积分值呈良好的线形关系。 r=0.9999（n=6），平均回收率为98.21%,RSD为1.2
(%)。结论：本法简便、可靠，可作为该药材的质量控制方法，也可为含毛莲菜类蒙成药制剂的定量作参考。
关键词：反相高效液相色谱法；绿原酸；含量测定；毛莲菜
反相HPLC法测定毛莲菜中绿原酸的含量
中图分类号：R291.2 文献标识码：A 文章编号：1006-6810（2013）03-0043-02
王彦东 1 韩塔娜 2
（1.巴彦淖尔市医院，内蒙古 临河 015000；
2.内蒙古食品药品检验所，内蒙古 呼和浩特 010020）
毛莲菜为菊科植物毛莲菜 Picris japonica Thunb.的干
燥地上部分。文献记载[1]毛莲菜地上部分含有黄酮类化
合物、生物碱。经预试验摸索含有绿原酸成分，因此对
毛连菜中的绿原酸进行了 HPLC 含量测定方法研究。经
方法学验证，表明此法专属性较强，得到了比较满意的
分析结果。
1 仪器与试药
1.1 仪 器 ; 岛 津 LC-20 泵 ， CBM-20A 型 控 制 器 ，
SPD-M20A 型检测器，LCsolution 色谱工作站。
1.2 试剂与试药及样品：试剂与试药：绿原酸对照品
(批号 110753-200212)中国药品生物制品检定所；毛莲菜
由乌兰浩特蒙药厂、通辽蒙药厂提供。甲醇、乙腈为色
谱纯，水为高纯水，其它试剂均为分析纯。
2 方法与结果
2.1 色谱条件
2.1.1 色谱柱：色谱柱填充剂为十八烷基硅烷键合硅
胶，本实验研究采用岛津 C18柱 （4.6×250mm） 及 Phe-
nome C18柱（4.6×250mm）；流动相 乙腈 -0.4%磷酸溶
液（7.5：92.5）；流速：1.0ml/min；检测波长：327nm；理论
板数按绿原酸峰计不得低于 3000。
2.1.2 供试品溶液的制备：取本品粉末（过二号筛）约
0.2g，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入 50%甲醇
25ml，密塞，称定重量，超声处理 (功率 80W，频率
400kHz)45 分钟，取出，放冷，再称定重量，用 50%甲醇补
足减失的重量，摇匀，滤过，取续滤液，即得。
2.1.3 对照品溶液的制备：精密称取绿原酸对照品适
量，加 50%甲醇制成每 1ml 含 40μg 的溶液，即得。见图
1、2。
2.1.4 线 性 关 系 考 察 ： 精 密 称 取 绿 原 酸 对 照 品
2.617mg，置 50ml 量瓶中，加 50%甲醇使溶解，并稀释至
刻度, 摇匀。（绿原酸 0.04334mg/ml）, 分别取 2、5、10、
15、20、25μl 进样，按上述色谱条件进行测定,以峰面积
对进样量进行回归分析，结果绿原酸在 86.68ng～
1083.5 ng 范围内分别呈良好的线性关系。回归方程分
别为绿原酸：Y=2905X-10946 R=0.999999
图 1 绿原酸对照品色谱图
图 2 供试品色谱图
2.1.5 稳定性试验：取同一份供试品溶液，分别于 0h、
2h、4h、8h、12h、24h、进样测定，结果表明绿原酸在 24 小
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DOI:10.16041/j.cnki.cn15-1175.2013.03.039
2013 年 3 月第 3 期中国民族医药杂志
文冠木叶为无患子科植物文冠木 Xanthoceras sorbifo－
lia Bunge 的干燥叶子。文冠木蒙药名“森登”，具有消肿
止痛，燥血，干黄水功效，可用于风湿性关节炎，风湿内
热，麻风病，其叶功效与文冠木一致[1]。目前已经发现文
冠木主要含有黄酮类、大黄素类、甾醇类化合物，叶子
含杨梅树皮苷类化合物。本文对文冠木叶新发现成分金
丝桃苷建立了 HPLC 含量测定方法。
1 仪器与试剂
1.1 1100 型 高 效 液 相 色 谱 仪 ( 美 国 安 捷 伦 公 司 )，
NC-2000 型色谱工作站 （大连中北科学技术公司），
IN-180 型柱温箱（上海英泰科技研究所），SH6150D 超生
波清洗器（上海昆山），电子天平（梅特勒）。
1.2 试剂与药材：金丝桃苷对照品（111521-200303）由中国
药品生物制品检定所提供；甲醇为色谱纯；其他均为分析纯
试剂；水为纯化水；文冠木叶自采（巴盟河套地区）。
2 实验方法与结果
2.1 色谱条件：KromasiTM-C1柱(20mm×4.6,5μm)；流动相：
甲醇 - 水 - 磷酸 - 三乙胺溶液（25：30：0.1：0.15）；流速：
1mL·min-1；温度：30℃；检测波长：350nm nm；进样量10μL。
2.2 对照品溶液的制备：精密称取金丝桃苷对照品适
样品
号
取样
量
(g)
供试品
含量
(mg)
对照品
加入量
(mg)
测得总
含量
(mg)
回收
率
(%)
平均回
收率
(%)
RSD
（%）
1
2
3
4
5
6
0.1005
0.1023
0.1002
0.1023
0.1031
0.1062
0.4016
0.4088
0.4004
0.4088
0.4120
0.4244
0.3901
0.3901
0.3901
0.3901
0.3901
0.3901
0.7906
0.7953
0.7841
0.7854
0.7970
0.8031
99.69
99.05
98.33
96.51
98.66
97.05
98.21 1.2
产地（来源）（水分）
含量
（mg/g）
平均含（%）
（按干燥品计）
取样量（g）
测得峰
面积值
巴林右旗蒙医医院
(6.49%)
通辽
（6.51%）
乌兰浩特
（6.24%）
4.05
4.05
4.91
4.95
6.56
6.59
0.405
0.493
0.658
0.2255
0.2152
0.2167
0.2153
0.2018
0.2009
981899
936470
1146648
1147705
1430842
1429697
2013年 1月 29日收稿
时内的面积积分值基本稳定不变。RSD 为 0.26(%)。
2.1.6 重复性试验：取同一批号（乌兰浩特蒙药厂）供试
品 6 份，各取约 0.2g，分别按含量测定项下方法操作，测定
每份含量，结果平均含量为 3.997mg/g, RSD 为 0.48（%）。
2.1.7 加样回收试验：取供试品 (乌兰浩特蒙药厂，含
量 3.997mg/g) 6 份，各约 0.1g，精密称定，置具塞锥形瓶
中 ， 分 别 精 密 加 入 对 照 品 溶 液 1ml （ 浓 度 为
0.3901mg/ml），精密加 50%甲醇（采用滴定管）24ml，按上
述方法测定，测定每份含量,计算回收率，结果见表 1。
表 1 绿原酸加样回收试验结果
2.1.8 样品含量测定：取本品按供试品处理项下的方法
处理并测定，3 批样品的测定结果见表 2。
表 2 3 批样品含量测定结果
3 讨 论
3.1 检测波长的选择：采用 UV-2550 紫外可见分光光度
计检测器，在 190～700nm 波长范围扫描。结果绿原酸在
325nm 处有最大吸收。结合《中国药典》2005 年版一部
“金银花”项下含量测定方法，选择 327nm 作为检测波
长。
3.2 研究表明，采用此方法操作简便，重现性好，可作
为该品种的质量控制内在指标。
参考文献
[ 1 ]朱亚民 .内蒙古植物药志·第三卷 [M ] .内蒙古人民出
版社 , 1989 , 12 .
[ 2 ]参照中国药典 [ S ] . 2005 年版一部 .金银花项 .
HPLC法测定民族药材文冠木叶中金丝桃苷的含量
郭凤芝 1 周雪梅 2 杨宏昕 3*
（1.内蒙古呼和浩特市第一医院，内蒙古 呼和浩特 010020；
2.内蒙古食品药品检验所，内蒙古 呼和浩特 010070；
3.内蒙古人民医院，内蒙古 呼和浩特 010020）
中图分类号：R291.2 文献标识码：A 文章编号：1006-6810（2013）03-0044-02
摘 要：目的：建立民族药材文冠木叶中金丝桃苷的HPLC测定方法。方法：HPLC法，C18柱，流动相为甲醇-水-磷酸-三乙
胺溶液（25：30：0.1：0.15），流速1.0mL·min-1，检测波长为350nm，柱温为30℃。结果：金丝桃苷在0.007～0.464μg范围内呈良
好的线性关系，r=0.9999；平均回收率=100.03%，RSD=1.21%（n=6）。结论：药材中金丝桃苷含量高，成分稳定，测定方法简
便、可靠，重现性好。
关键词：HPLC法；文冠木叶；金丝桃苷
* 通讯作者：邮箱 nmgrmyyyhx@sina . com
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