全 文 ：第 30卷第 1期
Vol.30 No.1 南华大学学报·医学版Journal of Nanhua University(Medical Edition) 2002年 3月Mar.2002　
金粉蕨素对小白鼠实验性肝损伤脂质过氧化的保护作用
严奉祥1 ,朱炳阳1 ,郑　兴1 , 胡剑峰2 , 葛晓莉2 , 黄红林1 , 廖端芳1
(1.南华大学 药物药理研究所 ,湖南 衡阳 421001;2.96级学生科协成员)
摘　要:目的　探索金粉蕨素对脂质过氧化保护作用 。方法　取昆明种小白鼠 48只 ,随机分成 6
组 ,分别给予溶媒 、维生素 E和不同剂量的金粉蕨素 ,然后采用溴代苯所致实验性肝损伤 ,再用 TBA测
定肝匀浆的丙二醛(MDA)含量 。结果　不同剂量的金粉蕨素均可明显降低肝匀浆脂质过氧化产物MDA
的含量(P<0.01), 其中 ,低和中剂量组的MDA含量较高剂量组低 。结论　金粉蕨素具有较好的抗氧
化作用 ,对脂质过氧化损伤具有一定的保护作用。
关键词:金粉蕨素;　溴代苯;　肝损伤;　抗氧化;　丙二醛
中图分类号:R961　　　文献标识码:A　　　文章编号:1000-2510(2002)01-0004-03
Protective Effect of Onychin on Lipid Peroxidation in Experimental
Liver Damage of Mice
YAN Feng-xiang , ZHU Bing-yang , ZHENG Xing , et al
(Institute of Pharmacy and Pharmacology , Nanhua University , Hengyang , Hunan 421001 , China)
Abstract:Objective:To investigate the protective effect of Onychin on lipid peroxide in mice.Methods:48
mice were randomly divided into 6 groups.Vehicle , Vitamin E and different dose of Onychin were given respective-
ly , and then experimental injury of mice liver was induced to make use of bromobenzene and the content of MDA
was determined in liver homogenate.Results:Different dose of Onychin significantly decrease the content of lipid
peroxide MDA in liver homogenate (P<0.01).Among them , low and middle dose of Onychin showed a stronger
effect on lowing MDA than high dose of Onychin.Conclusion:Onychin possesses anti-oxidation and protective ef-
fect from liver damage induced by lipid peroxide.
Key words:Onychin;　bromobenzene;　liver damage;　 anti-oxidation;　MDA
基金项目:国家卫生部课题(98-1-345)和湖南省教委课题(98B10C)
　　金粉蕨素(Onychin)是从湖南永州采集到的
中国蕨科(Sinopterdaceae)金粉蕨属(Onychium ch-
ing)粟柄金蕨粉(Onychium Incidum)植物中提出的
二氢黄酮甙(flavanone glycoside),属于黄酮类化合
物。黄酮类化合物具有抗炎 、抗氧化 、抗癌等生理
及药理活性[ 1] 。我所初步研究发现金粉蕨素能促
进血管内皮细胞 (VEC)释放和合成一氧化氮
(NO), 且抑制血管平滑肌细胞(VSMC)增殖。最
近我所研究显示 ,金粉蕨素对溶血性磷脂酰胆碱
损伤血管内皮依赖的舒张功能具有保护作用 ,其
作用可被一氧化氮合酶(nitric oxide synthase ,NOS)
抑制剂N-硝基-L-精氨酸(N—L—A)和环氧
酶抑制剂吲哚美辛所阻断 ,提示金粉蕨素作用与
其保护血管内皮释放小分子物质 NO 和 PGI2 有
关[ 2] 。因为NO和PGI2是氧自由基和过氧化物的
清除剂 ,我们推测金粉蕨素应具有抗过氧化的作
4
用。本实验采用溴代苯致小鼠实验性肝损伤模
型 ,观察金粉蕨素对肝匀浆MDA 含量的影响 ,对
金粉蕨素的抗脂质过氧化作用进行初步探讨 。
1　材料和方法
1.1　药品　金粉蕨素为白色结晶粉末 ,由南华大
学药物药理研究所提取 、分离 、纯化 。临用时用二
甲亚砜 (dimethyl sulfoxide , DMSO)配制成所需浓
度。溴代苯 (bromobenzene), 上海试剂一厂产品;
三(羟甲基)氨基甲烷(Tris), Sangon Ltd Shanghai
产品;硫代巴比妥酸(Thiobarbituric acid , TBA), 上
海试剂二厂产品;三氯乙酸 (Trichloroacetic acid ,
TAA), 北京顺义李遂化工厂生产;维生素 E (Vi-
tamin E), 天津市中央制药二厂生产 ,Vitamin E 临
用时用 DMSO溶媒配制成所需浓度。其余药品均
为国产AR级 。
1.2　主要仪器　721型分光光度计 ,上海第三分
析仪器厂制造。
1.3　动物　昆明种小白鼠 ,体重 20±3g ,雌雄不
拘 ,由南华大学实验动物部提供。
1.4　方法
1.4.1　按文献方法[ 3 , 4] ,作适当改进 ,将小鼠随机
分为 6组:溶媒对照组 、损伤模型组 、维生素 E组 、
低剂量金粉蕨素组 、中剂量金粉蕨素组和高剂量
金粉蕨素组。小鼠饥饿过夜 ,溶媒对照组和损伤
模型组小鼠灌服 20%二甲亚砜溶液(为金粉蕨素
和维生素 E溶媒), 0.25 mL 只;维生素E组灌服
2.5 mmol L 维生素 E溶液 ,0.25 mL 只;低 、中和
高剂量金粉蕨素组分别灌服 2.5 mmol L 、5.0
mmol L 和 10.0 mmol L 金粉蕨素溶液 , 0.25 mL
只。30 min 后 ,溶媒对照组用 0.2 mL 熟花生油
(为溴代苯溶媒)灌胃 ,其它组用 0.2 mL 3 mmol L
溴代苯油溶液灌胃 。喂食 6 h后禁食 12 h , 然后
断头处死 , 取肝 , 用 10 mmol L 、pH 7.4 的 Tris-
HCl洗净 ,以 Tris-HCl溶液为匀浆介质 ,冰浴匀
浆制成1∶10(W∶V)的肝组织匀浆进行检测 。
1.4.2　肝组织匀浆 MDA 含量的测定应用硫代
巴比妥酸(TBA)比色法[ 4] ,以水为空白对照 ,摩尔
光系数为 1.56×105L (cm·mol).MDA 含量以
nmol g组织表示。
1.5　数据处理　所有数据以 x±s 表示 ,行方差
分析 ,采用 t 检验进行统计处理 。
2　结　　果
2.1　损伤模型组小鼠出现反应迟钝 ,而其它各组
均未出现明显的毒性反应 。
2.2　小鼠肝匀浆MDA含量见表 1。结果表明:损
伤模型组肝匀浆 MDA含量高(P <0 , 01),三种剂
量的金粉蕨素对溴代苯所致的肝匀浆 MDA含量
升高有明显的抑制作用 ,表明金粉蕨素具有较强
的抗脂质过氧化作用 。
表 1　金粉蕨素对小白鼠实验性肝损伤丙二醛含量的影响(x±s , n=8)
组　　别 预处理(mmol mouse)
处　理
(3mmol L)
丙二醛
(1×103nmol g组织)
溶媒对照组 等量溶媒 等量溶媒 32.3±7.8
损伤模型组 等量溶媒 0.2 mL溴代苯油 68.79±26.68##
维生素 E组 0.62 0.2 mL溴代苯油 32.7±4.2＊＊
低剂量金粉蕨素组 0.62 0.2 mL溴代苯油 32.9±5.6＊＊
中剂量金粉蕨素组 1.25 0.2 mL溴代苯油 32.7±4.0＊＊
高剂量金粉蕨素组 2.50 0.2 mL溴代苯油 44.01±14.17＊
　　　##:与溶媒对照组比较 , P< 0.01;＊＊:与损伤模型组比较 , P<0.01;＊:与损伤模型组比较 , P<0.05
3　讨　　论
氧自由基是正常组织的氧代谢产物 ,其生成
和消除处于动态平衡 ,但在病理状态下 ,机体对氧
自由基的清除能力下降 ,或氧自由基大量生成超
过机体清除能力 ,则过量的氧自由基作用于机体
组织 ,造成一系列损伤 ,从而与机体多种病理过程
如动脉粥样硬化 、癌症 、衰老 、自身免疫功能丧失
5
等的发生和发展密切相关 。本实验采用溴代苯致
小鼠实验性肝损伤模型 ,然后测定肝组织匀浆
MDA含量的改变。实验结果表明 ,金粉蕨素能显
著降低肝匀浆MDA含量。其中 ,低和中剂量组与
维生素 E组相当 ,说明金粉蕨素具有较强的抗氧
化能力;高剂量金粉蕨素组肝匀浆MDA含量测定
值较低 、中剂量金粉蕨素组高 ,可能系金粉蕨素影
响机体酶系统所致。金粉蕨素是一种天然黄酮类
化合物 ,而黄酮类化合物可影响多种酶活性[ 1] 。
故推测高剂量金粉蕨素组MDA 测定值偏高系由
其影响糖代谢系统 ,导致糖原(Gn)分解受到抑制
或合成增加 ,体内糖原蓄积 ,肝糖原大大增加;当
肝匀浆受热 ,肝糖原分解成葡萄糖(Gs),从而导致
MDA测定值偏高 ,具体机制有待进一步研究 。
金粉蕨素是一种易氧化的黄酮类化合物 ,是
一种很强的抗氧化剂 ,其作用主要是通过清除
O
2- ,抑制氧自由基形成而实现[ 5] 。金粉蕨素所表
现出来的抗氧化效应提示其对脂质过氧化损伤具
有一定的保护作用 ,并可能和其抗癌作用相关[ 6] 。
实验结果为金粉蕨素进一步研究奠定了基础 ,为
其开发利用提供实验和理论依据。
参考文献:
[ 1] 　彭　芳 ,陈植和.300黄酮类化合物的生物
活性[ J] .国外医学·植物药分册 , 1998 , 13
(5):207-209
[ 2] 　庹勤慧 , 黄红林 , 谢志忠 , 等.金粉蕨素对
溶血性磷脂酰胆碱损伤血管内皮依赖性舒
张功能的保护作用及机制[ J] .中国动脉硬
化杂志 , 2001 , 9(1):27-30
[ 3] 　吴建平.脂质过氧化降解产物的测定[ A] .
汪　谦.现代医学实验方法[M] .北京:人
民卫生出版社 , 1997.833-838
[ 4] 　曹恩华 , 张　健.药物体内抗氧化研究[A]
.张纪田.现代药理实验方法[ M] .北京:
北京医科大学 、中国协和医科大学联合出版
社 , 1998.1231-1232
[ 5] 　White HL , Scates PW , Cooper BR.Extracts of
gmkgo biloba leaves inhibit monoamine oxidase
[ J] .Life Sci , 1996 , 58(16):1315-1317
[ 6] 　张　健 , 曹恩华 , 秦静芬 , 等.抗氧化剂对
DNA损伤的保护作用机制的研究[ J] .生物
物理学报 , 1997 , 13:123-127
(收稿时间:2001-11-19)
(上接第 3页)
苦瓜抗病毒作用 ,目前研究得不多 ,对苦瓜提
取物抗引起病毒性心肌炎的主要病原—CVB3病
毒的研究更少 ,对其抗病毒的机理目前知道得很
少 ,李双杰[ 8]发现它可以诱导体内干扰素的形成 ,
有人从苦瓜籽中提取的MAP30[ 9] 蛋白具有核糖体
失活活性 , 可以直接终止病毒蛋白质的合成 ,
MAP30还具有核酸内切酶活性 ,直接分解病毒中
的核酸成分而起到抑制病毒的作用 ,MAP30还可
以刺激免疫系统 ,参与对病毒的抑制作用 。苦瓜
是医食同源的植物 ,对人体基本无毒副作用 ,有多
种药用功效 ,且易栽培 ,来源广泛 ,价格低廉 ,是一
种具有广阔临床应用前景的药物宝库。
参考文献:
[ 1] 　江苏新医学院.中药大辞典.上册[ M] .上海:上海科
学技术出版社 , 1986.1281
[ 2] 　Huber SA , Gauntt CT , Sakkinen P.Enteroviruses and myo-
carditis:Viral Pathogenesis through replication , cytokine
induction , and immunopathogenicity[ J] .Adv Virus Res ,
1998 , 51:35-80
[ 3] 　Kawai C.From myocarditis to cardiomypathy:mechanisms
of inflammation and cell death[ J] .Circulatio , 1999 , 99
(8):1091-1100
[ 4] 　Seko Y , Pagita H , Koumura K , et al.Expression of vas-
cular cell adhesion molecule-Ⅰ in murine hearts with
acute myocarditis caused by coxsackievirus B3[ J] .J
Pathol , 1996 , 180:450
[ 5] 　Seko Y , Takahashi N , Yagita H , et al.Expression of cy-
tokine mRNAs in murine hearts with acute myocarditis
caused by coxsackievirus B3[ J] .J Pathol , 1997 , 183:105
[ 6] 　Hiraoka Y , kishimoto C , Takada H , et al.Nitric oxide
and murine coxsackievirus B3 myocarditis:aggravation of
myocarditis by inhibition of nitric oxide synthase[ J] .J Am
Coll Cardiol , 1996 , 28:1610-1615
[ 7] 　Colston J T , Chandrasekar B , Freeman GL.Expression of
apoptosis-related proteins in experimental coxsckievirus
myocarditis[ J] .Cardiovascular Research , 1998 , 38:158-
168
[ 8] 　李双杰 ,张宝林 , 邓　晖 ,等.苦瓜蛋白体外抗柯萨奇
B3病毒感染的实验研究[ J] .湖南医科大学学报 ,
1999 , 24(6):583
(收稿时间:2001-12-26)
6