全 文 ：!!!!摘!!要：采用滤纸片法测定了灰白毛莓的不同器官提取液对六种供试菌种的抑菌圈大小，采用二倍稀释法测定
了灰白毛莓的不同器官对 !种供试菌种的最低抑菌浓度 #$%& ’ 结果表明，灰白毛莓根、茎、叶提取液对金黄色葡
萄球菌、鸡沙门氏菌、铜绿假单胞菌均有抑制作用，根提取液对产气肠杆菌和大肠埃希氏菌均无抑制作用，叶提取
液对普通变形杆菌无抑制作用’ 茎提取液的抑菌范围最广，根提取液的抑菌范围最窄’
!!!!关键词：灰白毛莓；!!抑菌圈；!!#$%
!!!!中图分类号：()*+’,+!!! 文献标识码：-!!!!!文章编号：+!,+.),/*（0112）10.11!/.1*
收稿日期：011/.+0.+!
作者简介：付明（+)!!.），女，湖北荆门人，怀化学院高级讲师，主要研究药用植物的开发与利用’
（怀化学院!生物工程系，!湖南!怀化!!!#$$#）
灰白毛莓的抑菌作用研究
付!明，!刘胜贵3!!全妙华
!!!! 灰白毛莓的学名为 !#$! %&’()*+&$! ,-./&，属
于蔷薇科、悬钩子属植物，俗称乌泡% 在我国的湖
南、湖北、广东、广西、安徽、福建、台湾、贵州
等省均有分布，生长在海拨 &&$’((#$!) 的路旁、溪
边、灌木丛中和山间坡地等光线较强的地方 *+% 蔷薇
科悬钩子属是一类重要的小浆果果树资源，国外早
就培育出许多栽培品种，并已开始大面积栽培 *(+% 悬
钩子具有药用功能，可治疗阳萎早泄、遗精、肾虚
尿频，有活血散瘀、止血、清热解毒、祛风活血等
功效*&+% 灰白毛莓的种子入药为强壮剂；灰白毛莓的
根能够祛风除湿、活血调经，主治风湿疼痛、慢性
肝炎、月经不调、痢疾、跌打损伤；灰白毛莓的叶
止血解毒，主治外伤出血、痈疖疮疡 *!+%! 然而在湖
南、湘西的少数民族地区，民间不是用灰白毛莓的
根来治疗“拉肚子”（即痢疾），却常常用灰白毛
莓的叶片捣碎后，取汁服用治疗痢疾%
灰白毛莓是随处可见的、生命力较强的野生植
物，我国对灰白毛莓的研究还比较少，既然某些少
数民族用来治疗痢疾，肯定对某些细菌有一定的抑
制效果，但其治病机理目前尚不清楚 % 本文作者拟
从植株的不同器官的抑菌作用方面入手进行试验，
参照熊大胜等 *,+对鱼腥草抑菌作用的研究、史蕙等 *-+
对鱼腥草挥发油的抑菌作用研究，测定、比较各器
官的抑菌效果，为进一步应用这种植株造福于人类
作一些初步的工作%
!!! 材料与方法
%!! 材料
%%!! 实验仪器
!!!! 水平层流净化工作台、立式压力蒸汽灭菌器、
摇床、电冰箱、电热恒温培养箱、培养皿、涂布
棒、滤纸等%
%%(!! 生化试剂
!!!! 蛋白胨、酵母浸粉、琼脂粉、./01!、./23%
%%&!! 供试菌种
!!!! 金黄色葡萄球菌（0%-’(12*/*//$! -)&$）、鸡
沙门氏菌（0-23*.&22-! 4-225.-)3）、铜绿假单胞菌
（6$&+*3*.-$! -&)45.*$-）、产气肠杆菌（7.%&)8
*#-/%&)! -&)*4&.&$）、大肠埃希氏菌（7$/(&)5/(5-!!
/*25）、普通变形杆菌（6)*%&$! 924-)5$），以上菌种
均由怀化学院微生物学实验室提供%
%%!!! 实验样品
!!!! 灰白毛莓样品于 ($$! 年 - 月采自湖南省怀化
市%
%%,!! 培养基
!!!! 45（4678/95:7;/<8）液体培养基：蛋白胨 $!=，
./01!,!=，酵母粉 ,!=，用 !)>1!?!4! ./23 调 @3A%$，
重蒸水定容至 $$$!)1%
!!!! 45 固体培养基：45 液体培养基中加 %-B的琼
脂粉，煮沸溶化后定容%
!!!! 两种培养基用立式压力蒸汽灭菌器湿热灭菌
（(!C、($!)8<），并将固体培养基趁热倒成平板，
冷却，放置 (!!D无污染后方可使用%
%(!! 方法
%(%!! 中草药的煎制
!!!! 将灰白毛莓的根、茎、叶分别洗净切碎，于 -$!
第 0/ 卷第 0 期
0!1!1!2 年 / 月
456’0/’75’(
!-89!’!3!0!1!1!2!#$%&’!(!)#&*)#&!#%*+,$-*./
怀化学院学报
DOI:10.16074/j.cnki.cn43-1394/z.2005.02.019
!干燥 #$%!& 后，用蒸馏水煎煮 ’ 次，每次 ()!
*+,- 合并滤液，于 %)))!. / *+,离心 0!*+,，取滤液
浓缩至每 *1 含生药 !2- 用立式压力蒸汽灭菌器湿
热灭菌后，放入冰箱中保存备用-
-’-’!! 菌液的制备
取 # 种供试菌种的新鲜营养琼脂斜面培养物适
量，接种于 34 液体培养基内于 (5!!、#)!. / *+,
下活化 #$%!&- 然后用生理盐水稀释成 )67制成含
)#!89: / *1的供试菌液备用-
-’-(!! 抑菌实验
-’-(-!! 滤纸片法测定抑菌效果：取直径为 #!**的
圆形滤纸片 ()) 片于 ’!!下湿热灭菌备用 - 将其
中的 ’5) 片分成三组，分别放入浓度为 )-0!2 / *1 的
灰白毛莓的根、茎、叶提取液中浸泡 (!*+,- 将 )67
供试菌液各取 )-!*1 涂布在固体培养基上，制成含
菌平板，然后取含浸出汁的滤纸片贴在平板上，每
皿贴 0 片，每菌做 ( 份平行- 另外，每个菌种用未
浸泡的滤纸片做一份空白对照 - )!*+, 后倒置于!!!!!
(5! 下培养 ’7!&，测定滤纸片的抑菌圈大小，比较
抑菌效果-
-’-(-’!! 最低抑菌浓度（;<=）的测定：在无菌条件下，
将灭菌试管分成三大组，每组 (# 支 - (# 支试管再
分成 # 小组，每组 # 支 - 第一支试管中加入 !*1
’倍浓度的 34液体培养基，第 ’$0支试管中各加入
!*1! 的 34 液体培养基，向第一支试管中加入 !*1
药液后按二倍稀释法，使各管药液浓度分别为 )-0、
)-’0、)-’0、)-)#’0、)-)(’0!2 / *1，第 # 支试管为
34液体培养基对照管，然后向各管中加入 )-!*1 的
)67供试菌液，于 (5! 培养 %$’)!&- 不同器官提取
液对每个菌种的抑制作用均做 ( 份平行- 将上述培
养物，分别取 )-!*1 涂布于固体培养基上，)!*+,
后倒置于 (5! 下培养 %$’)!&后观察-
!! !结果
’-! !灰白毛莓各器官提取液对供试菌种的抑制效果
滤纸片法测定抑菌作用的实验中，取每菌 ( 次
平行实验的结果，所得平均值见表 -
!!!! 从表 得知：灰白毛莓茎对六种供试菌种均有
抑制作用；叶对除了普通变形杆菌以外的五种供试
菌种有抑制作用；根的抑菌范围最窄，对产气肠杆
菌、大肠埃希氏菌均无抑制作用- 灰白毛莓叶对金黄
色葡萄球菌的抑菌圈直径最大，为 >-%!**- 灰白毛莓
根对金黄色葡萄球菌、鸡沙门氏菌、铜绿假单胞菌、
产气肠杆菌、大肠埃希氏菌、普通变形杆菌的抑菌圈
大小分别为 %-0!**、 %-(!**、 #-#!**、 #-)!**、!!
#-)!**、#-’!**，灰白毛莓茎对上述六种供试菌种
的抑菌圈大小分别为 %->!**、#-’!**、#-(!**、#-0!
**、!! #-(!**、#-5!**，灰白毛莓叶对上述六种供
试菌种的抑菌圈大小分别为 >-%!**、#->!**、5-)!
**、!! #->!**、#-7!**、#-)!**-
’-’!! 灰白毛莓各器官提取液对供试菌种的最低抑菌
浓度（;<=）
测定最低杀菌浓度的实验中，对每菌 ( 次平行
实验进行观察，所得结果见表 ’-
!!!! 从表 ’ 得知：灰白毛莓叶提取液对大肠埃希氏
菌的 ;<= 为 )-0!2!/!*1，对铜绿假单胞菌、产气肠杆
菌和鸡沙门氏菌的 ;<= 为 )-’0!2!/!*1，对金黄色葡
萄球菌的 ;<= 为 )-)(’0!2!/!*1，对普通变形杆菌无
抑制作用- 灰白毛莓茎对大肠埃希氏菌、铜绿假单
胞菌、普通变形杆菌、产气肠杆菌和鸡沙门氏菌的
;<= 均为 )-0!2! /!*1，对金黄色葡萄球菌的 ;<= 为!!
)-’0!2!/!*1- 灰白毛莓根对普通变形杆菌的 ;<= 为!!
)-0!2!/!*1，对铜绿假单胞菌的 ;<= 为 )-’0!2!/!*1，对
金黄色葡萄球菌、鸡沙门氏菌的 ;<= 为 )-’0!2!/!*1，
对大肠埃希氏菌、产气肠杆菌均无抑制作用-
! !讨!! 论
(-!! 本次试验结果表明：灰白毛莓全株对金黄色葡
萄球菌的抑制效果最强，对鸡沙门氏菌、铜绿假单
胞菌的抑制效果次之，对产气肠杆菌、大肠埃希氏
菌、普通变形杆菌的抑制效果较差-
(-’!! 灰白毛莓茎的抑菌范围最广，对六种供试菌种
均有抑制作用；灰白毛莓叶的抑菌范围次之，它对
表 !! 灰白毛莓提取液对供试菌种的抑制效果
抑菌圈大小（直径：**）
!! 供试菌种 ! 根!!!!!!!!! 茎!!!!!!!! 叶
金黄色葡萄球菌!!!!!!!!!!! %-0!!!!!!!! %->!!!!!!! >-%
鸡沙门氏菌!!!!!!!!!!!!!!! %-(!!!!!!!! #-’!!!!!!! #->
铜绿假单胞菌 !!!!!!!!!!!!! #-#!!!!!!!! #-(!!!!!!! 5-)
产气肠杆菌 !!!!!!!!!!!!! #-)!!!!!!!! #-0!!!!!!! #->
大肠埃希氏菌 !!!!!!!!!!!! !#-)!!!!!!!! #-(!!!!!!! #-7
普通变形杆菌 !!!!!!!!!!!!! #-’!!!!!!!! #-5!!!!!!! #-)
表 ’!! 灰白毛莓提取液对供试菌种的最低抑菌浓度
最低抑菌浓度 ;<=（2 / *1）
!!! 供试菌种 !!!! 根!!!!!!!!! 茎!!!!!!!!!!! 叶
!金黄色葡萄球菌!!!!! )-’0!!!!!!! )-’0!!!!!!! )-)(’0
!鸡沙门氏菌 !!!!!!! )-’0!!!!!!!! )-0!!!!!!!!! )-’0
!铜绿假单胞菌!!!!!!!! )-’0!!!!!!!! )-0!!!!!!!!! )-’0
!产气肠杆菌!!!!!!!! 无抑制!!!!!!!! )-0!!!!!!!!! )-’0
!大肠埃希氏菌!!!!!! 无抑制!!!!!!!! )-0!!!!!!!!! )-0
!普通变形杆菌!!!!!!!! )-0!!!!!!!!! )-0!!!!!!!! 无抑制
付!明，刘胜贵!全妙华：灰白毛莓的抑菌作用研究 ·!!!!!·第 #$ 卷第 # 期
普通变形杆菌无抑制作用；灰白毛莓根的抑菌范围
最窄，它对产气肠杆菌和大肠埃希氏菌均无抑制作
用!
!!! 灰白毛莓根、茎、叶都对金黄色葡萄球菌的抑
制作用最强，#$% 分别为 &!’()!*!+!,-、&!’()!*!+!,-、
&!&’()!*!+!,-；另外灰白毛莓根对鸡沙门氏菌的抑
制作用也很强，#$%为 &!’()!*!+!,-!
!.!! 实验所用的抑菌物质是煎煮的中草药制剂，颜
色较深 ! 若采用试管法会因为它的颜色深 /! 与细菌
共培养后不易用肉眼观察，而导致观察不准确0! 若
采用纸片法、打洞法等则会因为中草药扩散慢、抑
菌弱 /! 也无法得到准确的抑菌浓度 0! 本试验采用涂
平板的方法，它具有显示稳定的优点/! 比较适合测
定中草药的抑菌浓度/! 而且测得的结果实际上并非
最低抑制细菌生长的浓度（#$%），而是最低杀死细
菌的浓度（#1%）! !
!!!! 本次试验结果表明，灰白毛莓的抑菌作用较强!
另据报道，灰白毛莓鲜果中色素（总花色苷）含量
比同属色素植物中的色素含量最高者还要高，而且
该色素耐热性强，是一种高含量的色素资源植物，
具有很好的开发应用前景 234，今后笔者拟进一步做有
关灰白毛莓的研究工作!
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!!#$%!&%’%()*$!+,! ’’!-(*#%).+’#(’.’
NW!!#87*，X$W!!GV=7*R*O8，FWL>!!#86;RVO6
（!#$%&’(&!)*!+,)(-,(%,(-.!/0$,10$!2(,3%4,&5.!/0$,10$.!/0($(.!.’U&&U）
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